…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2024年人教版（2024）選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷519考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程應(yīng)用的敘述，不正確的是（）A.通過(guò)蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)更符合人類(lèi)需要的產(chǎn)品B.通過(guò)蛋白質(zhì)工程可以改變蛋白質(zhì)的活性C.通過(guò)蛋白質(zhì)工程制成體積小、耗電少、效率高的電子元件D.利用蛋白質(zhì)工程可以在大腸桿菌細(xì)胞中得到人干擾素2、一般來(lái)說(shuō)；動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件（）

①無(wú)毒的環(huán)境②無(wú)菌的環(huán)境③合成培養(yǎng)基需加血清④溫度與動(dòng)物體溫相近⑤一定需要O2，不需要CO2⑥CO2能調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pHA.①②③④⑤⑥B.①②③④C.①③④⑤⑥D(zhuǎn).①②③④⑥3、在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，甲同學(xué)從對(duì)應(yīng)10-6培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。下列有關(guān)敘述，出現(xiàn)科學(xué)性錯(cuò)誤的是A.甲同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是由于土樣不同，也可能是操作過(guò)程出了問(wèn)題B.將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基再接種菌種培養(yǎng)作為空白對(duì)照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染C.讓其他同學(xué)用與甲同學(xué)相同土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與甲同學(xué)一致，則可以證明甲同學(xué)無(wú)誤D.可以將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對(duì)照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染4、甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物。某研究小組擬采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育同時(shí)含有甲、乙藥用成分的新型藥用植物。下列有關(guān)分析錯(cuò)誤的是（）A.需用纖維素酶和果膠酶除去甲、乙葉肉細(xì)胞的細(xì)胞壁B.雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志是融合后再生出新的細(xì)胞壁C.雜種細(xì)胞經(jīng)再分化培養(yǎng)可形成雜種植株D.形成的雜種植株屬于異源四倍體5、杜泊羊以其生長(zhǎng)速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)，深受廣“大消費(fèi)者的歡迎?？蒲泄ぷ髡邽闈M足市場(chǎng)需求，通過(guò)胚胎工程相關(guān)技術(shù)快速、大量繁殖杜泊羊。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.對(duì)受體杜泊羊進(jìn)行超數(shù)排卵處理可獲得較多的卵母細(xì)胞B.采集到的卵母細(xì)胞需在獲能培養(yǎng)液中進(jìn)行獲能培養(yǎng)C.人工授精后，以觀察到兩個(gè)極體或雌、雄原核作為受精的標(biāo)志D.收集到的胚胎進(jìn)行胚胎分割后獲得的二分胚的基因型不同6、下列與高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)相關(guān)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.鑒定還原性糖的斐林試劑和鑒定DNA的二苯胺試劑都需要現(xiàn)配現(xiàn)用B.觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂時(shí)，視野中可觀察到一個(gè)細(xì)胞內(nèi)核的周期性變化C.向H2O2溶液中分別滴加等量的Fe3+和新鮮肝臟研磨液，對(duì)比說(shuō)明酶具有高效性D.色素提取和分離實(shí)驗(yàn)中，濾紙條的一端減去兩角有利于層析出比較直的色素帶7、研究人員將大麥細(xì)胞的LTP1基因?qū)虢湍钢?，讓酵母產(chǎn)生LTP1蛋白。下圖為該實(shí)驗(yàn)過(guò)程的部分流程。下列說(shuō)法正確的是（）

A.運(yùn)用PCR擴(kuò)增LTP1基因時(shí)，應(yīng)選擇左圖的A和D作為引物B.為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒，可在引物5’端添加限制酶的識(shí)別序列C.如圖中為了篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的啤酒酵母，只需配制含青霉素的培養(yǎng)基D.為了讓大麥的基因在酵母中表達(dá)，需要在目的基因兩側(cè)添加大麥的啟動(dòng)子和終止子8、科研小組欲分離和培養(yǎng)若干種微生物用于對(duì)濕垃圾（包括剩菜剩飯、骨頭、菜根菜葉、果皮等食品類(lèi)廢物）的處理。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需要對(duì)培養(yǎng)基和操作者的雙手進(jìn)行滅菌B.衛(wèi)生紙類(lèi)垃圾可采用焚燒的方式處理，能有效減少對(duì)環(huán)境的污染C.若從生活垃圾中分離分解尿素的微生物，可在培養(yǎng)基中加入酚酞指示劑，如果有尿素分解菌存在，則培養(yǎng)基中該菌落的周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)透明圈D.培養(yǎng)過(guò)程需要向培養(yǎng)基通入無(wú)菌空氣并進(jìn)行攪拌，目的是使菌體充分接觸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和溶解氧，促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖評(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)9、下列防止生物武器的措施，正確的是（）A.通過(guò)立法，禁止生物武器的生產(chǎn)和擴(kuò)散B.捕殺敵人投放的帶菌的小動(dòng)物C.大力發(fā)展生物武器，以牙還牙D.根據(jù)生物武器的類(lèi)型采取相應(yīng)措施10、有一個(gè)嬰兒在出生后保留了臍帶血，在以后他生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中如果出現(xiàn)了某種難治療的疾病，就可以通過(guò)血液中的干細(xì)胞來(lái)為其治病。關(guān)于這個(gè)實(shí)例說(shuō)法不正確的是（）A.用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來(lái)移植治病，需要激發(fā)細(xì)胞的所有全能性B.用臍帶血中的干細(xì)胞能夠治療這個(gè)孩子所有的疾病C.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，需要用到細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)D.如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，應(yīng)該長(zhǎng)期給他使用免疫抑制藥物11、下列關(guān)于發(fā)酵工程的應(yīng)用，敘述正確的是（）A.檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑，可以通過(guò)黑曲霉發(fā)酵制得B.可以將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌通過(guò)發(fā)酵工程制備乙型肝炎疫苗C.利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的白僵菌特異性強(qiáng)，只能用來(lái)防治一種農(nóng)林害蟲(chóng)D.一種真菌通過(guò)發(fā)酵工程產(chǎn)生的井岡霉素可以用來(lái)防治水稻枯紋病12、生長(zhǎng)圖形法是一種測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的簡(jiǎn)便方法。為探究某嗜熱菌所需生長(zhǎng)因子的種類(lèi)，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長(zhǎng)因子但含有其他必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示，下列說(shuō)法正確的是（）

A.倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無(wú)污染B.倒成平板后需要進(jìn)行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌需要生長(zhǎng)因子乙和丙D.生長(zhǎng)圖形法還可用于某些菌種的篩選13、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計(jì)品種乙組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種甲的最佳激素配比（見(jiàn)下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。為確定品種乙的II階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，其中細(xì)胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素/（μmol·L-1）生長(zhǎng)素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是II和Ⅲ階段B.實(shí)驗(yàn)中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細(xì)胞分裂素濃度的實(shí)驗(yàn)中，M為α2+2μmol·L-1D.生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素14、為了獲得抗蚜蟲(chóng)棉花新品種，研究人員將雪花蓮凝集素基因（GNA）和尾穗莧凝集素基因（ACA）與載體（pBI121）結(jié)合，然后導(dǎo)入棉花細(xì)胞（如下圖所示）。下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康南喾氖牵ǎ?/p>

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA連接酶處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ兩種酶處理融合基因和載體可保證基因轉(zhuǎn)錄方向正確C.將棉花細(xì)胞接種在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上可篩選出轉(zhuǎn)基因細(xì)胞D.用PCR技術(shù)可檢測(cè)GNA和ACA基因是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞中評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)15、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。16、纖維素酶是一種__________，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即__________、___________和_______________，前兩種酶使纖維素分解成___________，第三種酶將纖維二糖分解成_____________。正是在這三種酶的協(xié)同作用下，纖維素最終被__________成葡萄糖，為微生物的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)，同樣，也可以為人類(lèi)所利用。17、回答下列問(wèn)題。

（1）果酒的制作離不開(kāi)酵母菌，溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細(xì)菌，它的最適生長(zhǎng)溫度為_(kāi)______________，乳酸菌是________細(xì)菌，在無(wú)氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目___________，這是因?yàn)開(kāi)_____________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過(guò)濾膜法來(lái)測(cè)定，將濾膜放在____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)___________；從而計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括化學(xué)結(jié)合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細(xì)胞多采用___________固定化。18、來(lái)源：主要是從______中分離純化出來(lái)的。19、請(qǐng)回答有關(guān)植物細(xì)胞工程的問(wèn)題：

（1）在植物中，一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)________的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。20、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識(shí)提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共4分)21、蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯(cuò)誤22、如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因源于自然界，則不會(huì)存在安全性問(wèn)題。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共21分)23、最新調(diào)查顯示手機(jī)每平方厘米就駐扎了12萬(wàn)個(gè)細(xì)菌；這個(gè)數(shù)字足以令馬桶坐墊上的細(xì)菌隊(duì)伍汗顏。某生物興趣小組的同學(xué)，利用手機(jī)表面的細(xì)菌進(jìn)行了相關(guān)的培養(yǎng)研究。

（1）為研究手機(jī)表面微生物的種類(lèi)；用稀釋涂布平板法進(jìn)行細(xì)菌的純化和分離。下面的四種菌落分布情況中，哪些選項(xiàng)是通過(guò)稀釋涂布平板法得到的_____

（2）研究小組用瓊脂擴(kuò)散法測(cè)定玫瑰精油對(duì)手機(jī)表面細(xì)菌的抑制情況。該方法的操作步驟如下：首先制備牛肉膏蛋白胨平板，用涂布器將5種細(xì)菌分別接種到5個(gè)平板上，得到細(xì)菌平板。然后制備直徑為5mm的濾紙圓片，采用_____滅菌法處理，將滅菌的濾紙片部分放入適宜濃度的玫瑰精油中，對(duì)照組放入_____中，浸泡10min，后將濾紙片放在5個(gè)細(xì)菌平板表面。最后將平板放入恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48小時(shí)。通過(guò)測(cè)量_____來(lái)檢測(cè)玫瑰精油對(duì)5種細(xì)菌的抑制效果。24、某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)（能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。

若要制備雜交瘤細(xì)胞；需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞（染色體數(shù)目為40條），并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞（染色體數(shù)目為60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。

回答下列問(wèn)題：

（1）制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)___________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交廇細(xì)胞外，可能還有________，體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是________________。

（3）雜交瘤細(xì)胞中有______個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是_________條。

（4）未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_____________________。25、苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì),自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株,篩選的主要步驟如圖所示,①為土壤樣品。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)②中培養(yǎng)目的菌株的培養(yǎng)基中應(yīng)加入________作為碳源,②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基____（A.影響;B.不影響)細(xì)菌的數(shù)量,如果要測(cè)定②中活細(xì)菌數(shù)量,常采用_____法.

(2)④為對(duì)照,微生物在④中不生長(zhǎng),在⑤中生長(zhǎng),④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于_______;使用________法可以在⑥上獲得單菌落;采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)?___________________。

(3)如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小?____________________________。

(4)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如何防止其他微生物的污染?____________________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共16分)26、黃曲霉毒素是黃曲霉等菌株產(chǎn)生的一類(lèi)劇毒的含碳有機(jī)物，常見(jiàn)于發(fā)霉糧食及糧食制品中，其中以黃曲霉毒素B1（AFB1）毒性最強(qiáng)。為保障食品安全，科研人員嘗試開(kāi)發(fā)能有效降解AFB1的生物菌劑。

（1）欲篩選AFB1降解菌，科研人員需配制_________的選擇培養(yǎng)基；對(duì)牦牛糞中的微生物進(jìn)行培養(yǎng)。

（2）經(jīng)連續(xù)選擇培養(yǎng)后，初步分離得到能降解AFB1的菌株，用_________法接種于固體培養(yǎng)基上獲得_________，通過(guò)觀察_________，初步鑒定菌種類(lèi)別，進(jìn)而篩選得到分泌AFB1降解酶的菌株A。

（3）用菌株A進(jìn)行AFB1降解實(shí)驗(yàn)；72h內(nèi)定時(shí)取樣檢測(cè)，結(jié)果如下圖所示：

①0~60h內(nèi)，發(fā)酵裝置中菌株A的種群接近于_______形增長(zhǎng)，60h后菌株A密度下降，從發(fā)酵條件分析，其原因是__________。

②發(fā)酵66~72h內(nèi)，AFB1降解率幾乎不再增加，請(qǐng)從分子水平對(duì)這一結(jié)果作出合理解釋_______。

（4）將菌株A制成用于保障食品安全的生物菌劑時(shí)，還需要解決什么問(wèn)題？_______。27、用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如下圖所示。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）①過(guò)程所需的酶是____________。在構(gòu)建基因表達(dá)載體過(guò)程中，構(gòu)建的重組質(zhì)粒上啟動(dòng)子的本質(zhì)是__________，作用是_________________________。

（2）實(shí)現(xiàn)②過(guò)程常用PCR技術(shù)，該技術(shù)中需用到的酶是__________，該技術(shù)的前提是要有____________________________；以便合成引物。

（3）過(guò)程③將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌時(shí)，首先用________處理大腸桿菌，目的是_____________________。28、異養(yǎng)反硝化細(xì)菌能在無(wú)氧環(huán)境中將硝酸鹽轉(zhuǎn)化為氮（2NO3-+10e-+12H+→→N20-N2）；該細(xì)菌在處理工業(yè)污水；治理水體富營(yíng)養(yǎng)化中具有重要作用。為了篩選出耐高溫（42℃）的反硝化細(xì)菌菌株，用于提升較高溫度的工業(yè)污水的脫氨效率，研究人員按照下圖的中實(shí)驗(yàn)流程進(jìn)行種的篩選研究。回答下列問(wèn)題：

注：BTB培養(yǎng)基初始pH=6.8；BTB是酸堿指示劑；酸性條件下為黃色，中性條件下為綠色，堿性條件下為藍(lán)色。

(1)梯度稀釋的目的是__________。

(2)制備BTB培養(yǎng)基時(shí)，以__________為唯一氮源。稀釋后的污泥樣品可用__________（填方法）接種到BTB培養(yǎng)基上，放在__________環(huán)境中培養(yǎng)2～3天后，挑選顯藍(lán)色的單菌落在固體培養(yǎng)基上劃線分離，獲得純菌株。29、不同動(dòng)物細(xì)胞膜表面的分子標(biāo)簽（MHC；主要組織相容性抗原）具有特異性，使得即使在相同抗原的刺激下，與人類(lèi)相比，所產(chǎn)生的免疫反應(yīng)也有很大的差異性，為此，構(gòu)建人MHC轉(zhuǎn)基因小鼠模型并應(yīng)用于疫苗研發(fā)，具有重要的價(jià)值。如圖是人MHC轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建過(guò)程。

(1)過(guò)程①用__________處理可以獲取更多的卵（母）細(xì)胞，過(guò)程③所用的技術(shù)是___________。將早期胚胎植入代孕母鼠前，需對(duì)受體進(jìn)行______________。

(2)圖中X表示__________過(guò)程。從基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢(xún)?nèi)薓HC的mRNA的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成_________用于PCR擴(kuò)增，PCR擴(kuò)增過(guò)程第一輪循環(huán)的模板是______________。

(3)通過(guò)上述途徑和雜交選育雖然可獲得含有人源MHC基因的純合子代小鼠，但該模型小鼠還不是理想的模型動(dòng)物，理由是____________________，表達(dá)的產(chǎn)物會(huì)干擾疫苗的篩選或評(píng)價(jià)。欲獲得理想的模型動(dòng)物，后續(xù)的實(shí)驗(yàn)設(shè)想是______________________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需要。蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程。

【詳解】

A；根據(jù)蛋白質(zhì)工程的概念可知；通過(guò)蛋白質(zhì)工程可生產(chǎn)更符合人類(lèi)需要的產(chǎn)品，A正確；

B；通過(guò)蛋白質(zhì)工程可以改變蛋白質(zhì)的活性；B正確；

C；利用蛋白質(zhì)工程可制成體積小、耗電少、效率高的電子元件；C正確；

D；利用基因工程可以在大腸桿菌細(xì)胞中得到人干擾素；D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】2、D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；（3）溫度和PH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

【詳解】

①②為避免污染；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)毒；無(wú)菌環(huán)境，①②正確；

③用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的合成培養(yǎng)基需加入糖；氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)，③正確；

④動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要適宜的溫度和pH；其中溫度要與動(dòng)物體溫相近，④正確；

⑤動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，95%空氣和5%的CO2；⑤錯(cuò)誤；

⑥5%的CO2能調(diào)節(jié)（維持）培養(yǎng)液pH；⑥正確。

綜上所述；動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件是①②③④⑥，D符合題意。

故選D。3、B【分析】【分析】

【詳解】

A；甲同學(xué)獲得的菌落遠(yuǎn)大于其他同學(xué)；可能是由于所取的土樣不同，也可能操作過(guò)程被污染，A正確；

BD；污染可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底；或操作過(guò)程沒(méi)有保證無(wú)菌操作，將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對(duì)照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染，B錯(cuò)誤，D正確；

C；若是土樣不同造成的；讓其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如果結(jié)果與甲同學(xué)一致，則可以證明甲同學(xué)操作正確，C正確。

故選B

【點(diǎn)睛】4、C【分析】【分析】

1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。

2、過(guò)程：（1）誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等?；瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑。（2）細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。（3）植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。

3；意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。

【詳解】

A、需用纖維素酶和果膠酶除去甲、乙葉肉細(xì)胞的細(xì)胞壁，A正確；

B、雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志是融合后再生出新的細(xì)胞壁，B正確；

C、雜種細(xì)胞經(jīng)脫分化和再分化培養(yǎng)可形成雜種植株，C錯(cuò)誤；

D、形成的雜種植株屬于異源四倍體，D正確。

故選C。5、C【分析】【分析】

胚胎工程指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；如體外受精；胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞等技術(shù)。胚胎移植時(shí)，供受體需要處于相同的生理狀態(tài)；胚胎分割產(chǎn)生的胚胎基因型相同。

【詳解】

A；用促性腺激素對(duì)供體羊進(jìn)行超數(shù)排卵處理；可以獲得較多的卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；采集到的精子需要在獲能溶液中進(jìn)行獲能培養(yǎng)；B錯(cuò)誤；

C；人工受精后；若觀察到兩個(gè)極體或雌雄原核，說(shuō)明卵子已經(jīng)完成了受精，C正確；

D；胚胎分割后獲得的胚胎基因型相同；D錯(cuò)誤。

故選C。6、B【分析】【分析】

生物組織中化合物的鑒定：（1）斐林試劑可用于鑒定還原糖；在水浴加熱的條件下，溶液的顏色變化為磚紅色（沉淀）。斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖（如葡萄糖；麥芽糖、果糖）存在與否，而不能鑒定非還原性糖（如淀粉）。（2）蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)．（3）脂肪可用蘇丹Ⅲ染液（或蘇丹Ⅳ染液）鑒定，呈橘黃色（或紅色）。（4）淀粉遇碘液變藍(lán)．（5）甲基綠能使DNA呈綠色，吡羅紅能使RNA呈紅色。（5）DNA加入二苯胺試劑后水浴加熱，可觀察到溶液變藍(lán)色。

【詳解】

A；鑒定還原性糖的斐林試劑和鑒定DNA的二苯胺試劑都需要現(xiàn)配現(xiàn)用；且需要水浴加熱，A正確；

B；觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂時(shí)；視野中不可觀察到一個(gè)細(xì)胞內(nèi)核的周期性變化，因?yàn)榧?xì)胞在解離的時(shí)候已經(jīng)死亡，B錯(cuò)誤；

C、向H2O2溶液中分別滴加等量的Fe3+和新鮮肝臟研磨液；自變量是催化劑的種類(lèi)，對(duì)比說(shuō)明酶具有高效性，C正確；

D；色素提取和分離實(shí)驗(yàn)中；濾紙條的一端減去兩角有利于層析液同步在濾紙條上擴(kuò)散，從而層析出比較直的色素帶，D正確。

故選B。7、B【分析】【分析】

圖示表示將使啤酒產(chǎn)生豐富泡沫的LTPI基因植入啤酒酵母菌中；使其產(chǎn)生LTP1蛋白，酸出泡沫豐富的啤酒的過(guò)程，圖中A為獲取目的基因的過(guò)程，B為質(zhì)粒，C為基因表達(dá)體。

【詳解】

A；結(jié)合題意可知；DNA復(fù)制只能從5’到3’，而DNA聚合酶只能從引物的3’端延伸DNA鏈，因此構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應(yīng)選取B和C作為引物，A錯(cuò)誤；

B；為構(gòu)建重組質(zhì)粒(即將目的基因和質(zhì)粒整合到一起)；在引物5’端需要適當(dāng)增加限制酶識(shí)別序列B正確；

C；由圖可知；構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，四環(huán)素抗性基因被破壞，而青霉素抗性基因沒(méi)有被破壞，因此將導(dǎo)入C的酵母菌分別在含有青霉素和四壞素的兩種選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，則在含有青霉素的培養(yǎng)基上能存活，但在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能存活，才能篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的啤酒酵母，C錯(cuò)誤；

D；為了讓大麥的基因在酵母中表達(dá)；需要在目的基因兩側(cè)添加酵母的啟動(dòng)子和終止子，D錯(cuò)誤。

故選B。8、D【分析】【分析】

無(wú)菌技術(shù)包括滅菌和消毒；滅菌使用強(qiáng)烈的物理；化學(xué)手段殺滅物理表面和內(nèi)部的一切微生物及其芽孢，消毒是用較溫和的手段消滅物體表面絕大多數(shù)的微生物。

【詳解】

A；在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中；對(duì)操作者的雙手應(yīng)進(jìn)行酒精消毒，A錯(cuò)誤；

B；衛(wèi)生紙類(lèi)垃圾采用焚燒的方式處理；其中塑料類(lèi)物質(zhì)燃燒會(huì)增加大氣污染物，B錯(cuò)誤；

C；從生活垃圾中分離分解尿素的微生物；在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑；如果有尿素分解菌存在，則培養(yǎng)基中該菌落的周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)紅色，C錯(cuò)誤；

D；培養(yǎng)過(guò)程向培養(yǎng)基通入無(wú)菌空氣并進(jìn)行攪拌；可使菌體充分接觸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和溶解氧，促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖，D正確；

故選D。二、多選題(共6題，共12分)9、A:B:D【分析】【分析】

生物武器種類(lèi)：包括致病菌、病毒、生化毒劑，以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過(guò)食物、生活必需品等散布到敵方，可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

生物武器的特點(diǎn)：1、單位面積效應(yīng)大；2、有特定的傷害對(duì)象；3、具有傳染性；4、危害時(shí)間久；5、不易被發(fā)現(xiàn)和鑒定；6、使用者本身易受傷害；7、生物武器造價(jià)低，技術(shù)難度不大，隱秘性強(qiáng)，可以在任何地方研制和生產(chǎn)。

生物武器的局限性：1；生物武器主要指病原微生物；所以它們的生存、繁殖、死亡易受環(huán)境條件（如溫度）的影響。2、還受地形、風(fēng)向等多種條件影響。3、生物武器使用時(shí)不易控制，使用不當(dāng)可危害本方安全。

【詳解】

生物武器是多種多樣的；對(duì)于不同的生物武器應(yīng)用不同的防治方法，但總的原則是禁止生物武器的生產(chǎn)和擴(kuò)散，因此ABD正確，C錯(cuò)誤。

故選ABD。10、A:B:D【分析】【分析】

臍帶血中的干細(xì)胞分化程度低；全能性較高，能分裂分化形成多種組織，因此可以用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來(lái)移植治病，如果是自體器官移植不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，所以自體移植后不需要用免疫抑制藥物，但用臍帶血中的干細(xì)胞不能治療所有疾病。

【詳解】

A；用干細(xì)胞培育出人體需要的器官用來(lái)移植治?。徊恍枰ぐl(fā)細(xì)胞的所有全能性，因?yàn)榕囵B(yǎng)的目標(biāo)是特定的器官，A錯(cuò)誤；

B；用臍帶血中的干細(xì)胞不能治療這個(gè)孩子所有的疾病；如傳染性疾病等，B錯(cuò)誤；

C；如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官；需要用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，然后發(fā)育成器官用于移植，C正確；

D；自體器官移植不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此，如果要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，不需要給他使用免疫抑制藥物，D錯(cuò)誤。

故選ABD。

【點(diǎn)睛】11、A:B【分析】【分析】

發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段；利用微生物的某些特定功能，為人類(lèi)生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育；培養(yǎng)基的配制、滅菌、種子擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過(guò)程和產(chǎn)品的分離提純（生物分離工程）等方面。

【詳解】

A；檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑；可以通過(guò)黑曲霉發(fā)酵制得，A正確；

B；可以將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌通過(guò)發(fā)酵工程制備乙型肝炎疫苗；B正確；

C；利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的白僵菌可以用來(lái)防治80多種農(nóng)林害蟲(chóng)；C錯(cuò)誤；

D；一種放線菌通過(guò)發(fā)酵工程產(chǎn)生的井岡霉素可以用來(lái)防治水稻枯紋??；D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】12、A:C:D【分析】【分析】

本題考查微生物的培養(yǎng)及鑒定。據(jù)圖分析；菌落主要分布于添加了乙和丙的區(qū)域的交界處，說(shuō)明該嗜熱菌所需的生長(zhǎng)因子是乙和丙。

【詳解】

A；倒平板后不接種任何菌種直接進(jìn)行培養(yǎng)觀察有無(wú)菌落的出現(xiàn)；可以判斷培養(yǎng)基有無(wú)污染，A正確；

B；在制作培養(yǎng)基的過(guò)程中；需要先進(jìn)行滅菌再倒平板，B錯(cuò)誤；

C；分析題圖可知；嗜熱菌在添加了乙、丙生長(zhǎng)因子的區(qū)域生長(zhǎng)，故該菌需要的生長(zhǎng)因子是乙和丙，C正確；

D；不同的菌種所需的生長(zhǎng)因子不同；利用生長(zhǎng)圖形法可用于某些菌種的篩選，某菌種只會(huì)在提供其需要的生長(zhǎng)因子區(qū)域生長(zhǎng)，D正確。

故選：ACD。13、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素；同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí)；兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會(huì)發(fā)生基因的選擇性表達(dá)，A錯(cuò)誤；

B；實(shí)驗(yàn)至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，則細(xì)胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見(jiàn)細(xì)胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯(cuò)誤；

D；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。14、A:D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是Ca2+處理法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；兩個(gè)基因中都有限制酶BsaBⅠ的一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)；用該限制酶切割后再用DNA連接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正確；

B；GNA-ACA融合基因的兩端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn)；而質(zhì)粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn)，但方向不一致，用兩酶切割，正好是反向連接目的基因和運(yùn)載體，B錯(cuò)誤；

C；運(yùn)載體上帶有卡那霉素的抗性基因；沒(méi)有氨芐青霉素的抗性基因，轉(zhuǎn)基因細(xì)胞在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能存活，C錯(cuò)誤；

D；用PCR技術(shù)擴(kuò)增GNA和ACA基因后；再通過(guò)分子雜交或電泳的方式，可檢測(cè)是否導(dǎo)入棉花細(xì)胞中，D正確。

故選AD。三、填空題(共6題，共12分)15、略

【解析】①.接種②.平板劃線法③.稀釋涂布平板法16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】復(fù)合酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖水解17、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來(lái)源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無(wú)氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發(fā)酵過(guò)程中充入無(wú)菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，它的最適生長(zhǎng)溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無(wú)氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過(guò)濾膜法來(lái)測(cè)定；將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，從而計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化技術(shù)一般包括化學(xué)結(jié)合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化；而細(xì)胞多采用包埋法固定化。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，屬識(shí)記內(nèi)容。【解析】18－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落伊紅美藍(lán)黑色包埋法化學(xué)結(jié)合法物理吸附法包埋法18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物19、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等）；②一定的營(yíng)養(yǎng)（無(wú)機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類(lèi)和比例；特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要，被稱(chēng)為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)激素的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中；由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。

【點(diǎn)睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確分析，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查?！窘馕觥竣?激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽20、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共2題，共4分)21、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。

故正確。22、B【分析】【詳解】

來(lái)源于自然界的目的基因?qū)胫参矬w后，可能破壞原有的基因結(jié)構(gòu)，具有不確定性，外源基因也可能通過(guò)花粉傳播，使其他植物成為“超級(jí)植物"等，所以如果轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來(lái)源于自然界，也可能存在安全性問(wèn)題。本說(shuō)法錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共21分)23、略

【分析】【分析】

1；微生物常見(jiàn)的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)溶化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板、劃線接種、在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分；微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)適量稀釋后，均勻涂布在固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2；常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

【詳解】

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般含有水；碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽；在除上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

（2）制備固體培養(yǎng)基的基本步驟有：計(jì)算→稱(chēng)量→溶化→滅菌→倒平板。等平板冷卻凝固后；應(yīng)將平板倒置，這樣做的目的是，防止培養(yǎng)基冷卻過(guò)程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面對(duì)培養(yǎng)基造成污染，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快的揮發(fā)。

（3）由圖和分析可知；A；B、C為通過(guò)稀釋涂布平板法得到的菌落（菌落分布較均勻），D為通過(guò)平板劃線法得到的菌落（菌落分布在線條上）。

故選ABC。

（4）為保持濾紙的干燥；滅菌時(shí)應(yīng)用干熱滅菌法，不宜采用高壓蒸汽滅菌法。將滅菌的濾紙片分別放入適宜濃度的玫瑰精油和無(wú)菌水中（對(duì)照）浸泡10min，再將濾紙片放在5個(gè)細(xì)菌平板表面，最后將平板放入恒溫箱中倒置培養(yǎng)48h。通過(guò)測(cè)量透明圈直徑(抑菌圈直徑)可判斷玫瑰精油對(duì)5種供試細(xì)菌的抑制效果，抑菌圈越大，說(shuō)明抑制作用越強(qiáng)。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的培養(yǎng)、篩選、瓊脂擴(kuò)散法測(cè)定玫瑰精油的抑菌情況等知識(shí)，要求識(shí)記培養(yǎng)基的成分、篩選方法，熟練掌握實(shí)驗(yàn)步驟。【解析】ABC干熱無(wú)菌水透明圈的直徑（大?。?4、略

【分析】【詳解】

本題以雜交瘤細(xì)胞為背景；考查了動(dòng)物細(xì)胞融合；細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗體效價(jià)大于16000，所以最少需要經(jīng)過(guò)四次免疫.由圖可知，血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上時(shí)，Y的效價(jià)最大，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。

（2）B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在一起融合時(shí)；可能發(fā)生B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B細(xì)胞之間的融合，骨髓瘤細(xì)胞之間的融合和B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。由于細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類(lèi)型的細(xì)胞。

（3）由于核膜也具有流動(dòng)性；故小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)雜交的細(xì)胞核。B細(xì)胞有40條染色體，骨髓瘤細(xì)胞有60條染色體，融合后的雜交瘤細(xì)胞有100條染色體。

（4）未融合的B淋巴細(xì)胞是已分化的細(xì)胞；不能無(wú)限增殖，所以多次培養(yǎng)后不能存活。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程，意在考查考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn)，并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力?！窘馕觥?YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%1100不能無(wú)限增殖25、略

【分析】【詳解】

（1）②中的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源；②中不同濃度的碳源A影響細(xì)菌數(shù)量，稀釋涂布平板法來(lái)測(cè)定②中活菌數(shù)目。

（2）④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于④的培養(yǎng)基沒(méi)有加入苯酚作為碳源；⑤培養(yǎng)基的中加入苯酚作為碳源。使用釋涂布平板法或平板劃線法可以在（6）上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng)，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。

（3）5支潔凈培養(yǎng)瓶→分別加入相同培養(yǎng)基（加等量的苯酚；用pH試紙檢測(cè)這5支瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基的pH值，用苯酚調(diào)試使之相等，苯酚是唯一的碳源）→分別接種5種等量的來(lái)自不同菌株的菌種→在相同的適宜條件下培養(yǎng)相同時(shí)間→再用pH試紙檢測(cè)這5支瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基的pH.苯酚顯酸性，不同菌株的菌種降解苯酚的能力不同，5支瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基中的苯酚被分解的量不同，所以pH值不同。用pH試紙檢測(cè)這5支瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基的pH值，從而比較不同菌株降解苯酚能力的大小。

（4）從制備培養(yǎng)基到接種與培養(yǎng)等全部實(shí)驗(yàn)過(guò)程要無(wú)菌操作，通過(guò)培養(yǎng)基滅菌、接種環(huán)境滅菌、接種過(guò)程無(wú)菌操作等都可以防止其他微生物的污染?！窘馕觥竣?苯酚②.A③.稀釋涂布平板④.①含除苯酚外的其他碳源；②以苯酚作為唯一碳源⑤.稀釋涂布平板法或平板劃線⑥.避免培養(yǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的水分影響微生物的生長(zhǎng)⑦.用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株,一定時(shí)間后,測(cè)定培養(yǎng)液中苯酚的含量⑧.培養(yǎng)基滅菌、接種環(huán)境滅菌、接種過(guò)程無(wú)菌操作六、綜合題(共4題，共16分)26、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基一般含有水；碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等。

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）要篩選AFB1降解菌，應(yīng)該以AFB1為唯一碳源，對(duì)牦牛糞中的微生物進(jìn)行培養(yǎng)，能夠存活下來(lái)的即為能分解AFB1的微生物。

（2）獲得能降解AFB1的菌株后；可以用稀釋涂布平板法或平板劃線法將其接種在固體培養(yǎng)基上獲得單菌落，觀察菌落的特征來(lái)判斷其類(lèi)別。

（3）①由曲線圖可知，菌株A在0-60h內(nèi)呈S形增長(zhǎng)；60h后，可能由于AFB1被降解；菌株A的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足；菌株A的代謝導(dǎo)致裝置中溶解氧；pH等發(fā)酵條件改變，不利于菌體生長(zhǎng)繁殖，故菌株A的密度下降。

②發(fā)酵66~72h內(nèi)，可能由于裝置內(nèi)的AFB1降解酶活性下降，導(dǎo)致AFB1降解率幾乎不再增加。

（4）將菌株A制成用于保障食品安全的生物菌劑時(shí)，菌株A可以降解AFB1，還需要檢驗(yàn)菌株降解AFB1后生成的產(chǎn)物是否安全無(wú)毒。

【點(diǎn)睛】

本題需要考生掌握培養(yǎng)基的成分、類(lèi)型及微生物的接種方法，并能夠根據(jù)圖中曲線圖進(jìn)行相關(guān)的分析和判斷。【解析】以AFB1為唯一碳源稀釋涂布平板（或平板劃線）單菌落菌落特征SAFB1被降解，菌株A的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足；菌株A的代謝導(dǎo)致裝置中溶解氧、pH等發(fā)酵條件改變，不利于菌體生長(zhǎng)繁殖裝置內(nèi)的AFB1降解酶活性下降需檢驗(yàn)菌株A降解AFB1后生成的產(chǎn)物是否安全無(wú)毒27、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：

①目的基因的獲取：包含基因文庫(kù)和部分基因文庫(kù)；其中部分基因文庫(kù)常用的是cDNA文庫(kù)，當(dāng)使用cDNA作為目的基因來(lái)源時(shí)，因cDNA不包含啟動(dòng)子和終止子，常常需要將目的基因插入在質(zhì)粒載體的啟動(dòng)子與終止子之間。

②基因表達(dá)