專(zhuān)題一微生物利用及生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用考點(diǎn)一微生物的培育與應(yīng)用再悟高考1．推斷正誤(1)某爭(zhēng)辯小組從有機(jī)廢水中分別微生物用于廢水處理。接種后的培育皿須放在光照培育箱中培育。(2021·江蘇卷，T18C) (×) (2)在培育基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)。(2011·重慶卷，T2B) (×)(3)純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常接受的接種方法有兩種，即平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2011·新課標(biāo)全國(guó)卷，T39(2)) (√)(4)在瓊脂固體培育基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌。(2011·重慶卷，T2A) (×)(5)檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)試驗(yàn)操作中，確定對(duì)比組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的試驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。(2009·安徽卷，T6D) (×)2．(2022·四川卷，10)有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。爭(zhēng)辯發(fā)覺(jué)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分別降解苯磺隆的菌株和探究其降解機(jī)制的試驗(yàn)過(guò)程如圖甲、乙所示。(1)微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要養(yǎng)分物質(zhì)有碳源、水、___________四類(lèi)，該試驗(yàn)所用的選擇培育基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其緣由是___________。(2)與微生物培育基相比，植物組織培育的培育基常需添加生長(zhǎng)素和_____________，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成________保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是________。劃線的某個(gè)平板培育后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，其次劃線區(qū)域所劃的第一條線上無(wú)菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有________________________________________________________________________。(4)為探究苯磺隆的降解機(jī)制，將該菌種的培育液過(guò)濾離心，取上清液做圖乙所示試驗(yàn)。該試驗(yàn)的假設(shè)是________________________，該試驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？為什么？__________________________________。解析(1)微生物生長(zhǎng)所需要的主要養(yǎng)分物質(zhì)包括：碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽。使用選擇培育基是由于它能允許特定的微生物生長(zhǎng)和增殖，同時(shí)又能抑制或阻擋其他微生物的生長(zhǎng)和增殖，該試驗(yàn)所用培育基只有能利用苯磺隆的微生物才能正常生長(zhǎng)和增殖。(2)植物組織培育常需要添加的植物激素有生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，調(diào)整二者的比例可以誘導(dǎo)脫分化和再分化。MS培育基的成分一般先分別配制成母液備用。(3)平板劃線法接種時(shí)常使用接種環(huán)劃線。其次區(qū)域只有第一條線無(wú)菌落，而其他的劃線卻有菌落，很可能是由于接種環(huán)在灼燒后未冷卻，第一次劃線時(shí)將菌種燙死，而后接種環(huán)冷卻，能正常劃線，也可能是第一次劃線時(shí)劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)頭，使接種環(huán)上無(wú)菌種。(4)題中試驗(yàn)為取得菌種培育液過(guò)濾后離心，上清液加入蛋白酶處理后，測(cè)得其對(duì)苯磺隆的降解率，意為假設(shè)菌種能產(chǎn)生降解苯磺隆的蛋白質(zhì)類(lèi)酶，若用蛋白酶處理后，可使該酶分解，苯磺隆降解率下降，則假設(shè)成立。但由于缺乏空白對(duì)比，不能比較蛋白酶處理是否降低苯磺隆降解率，該試驗(yàn)不能得出相應(yīng)結(jié)論。答案(1)氮源和無(wú)機(jī)鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖(2)細(xì)胞分裂素母液(3)接種環(huán)①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)頭(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理，缺少空白對(duì)比3．(2022·全國(guó)課標(biāo)Ⅰ，39)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉?wèn)題。(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。(2)在含纖維素的培育基中加入剛果紅(CR)時(shí)，CR可與纖維素形成________色復(fù)合物。用含有CR的該種培育基培育纖維素分解菌時(shí)，培育基上會(huì)消滅以該菌的菌落為中心的________。(3)為從富含纖維素的土壤中分別獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培育基(成分見(jiàn)下表)：酵母膏無(wú)機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培育基甲＋＋＋＋－＋＋培育基乙＋＋＋－＋＋＋注：“＋”表示有，“－”表示無(wú)。據(jù)表推斷，培育基甲________(填“能”或“不能”)用于分別和鑒別纖維素分解菌，緣由是____________________；培育基乙________(填“能”或“不能”)用于分別和鑒別纖維素分解菌，緣由是________________________。解析(1)纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是含量最豐富的多糖類(lèi)物質(zhì)。纖維素能被土壤中某些微生物分解利用，如下圖：纖維素eq\o(→,\s\up15(C1酶),\s\do15(Cx酶))纖維二糖eq\o(→,\s\up15(葡萄糖苷酶))葡萄糖(2)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無(wú)法形成，消滅以纖維素分解菌為中心的透亮?????圈，我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透亮?????圈來(lái)篩選纖維素分解菌。(3)分別和鑒別纖維素分解菌的培育基為固體培育基，且需以纖維素為唯一碳源。答案(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透亮?????圈(3)不能液體培育基不能用于分別單菌落不能培育基中沒(méi)有纖維素，不會(huì)形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使消滅單菌落也不能確定其為纖維素分解菌4.(2022·全國(guó)課標(biāo)Ⅱ，39)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某爭(zhēng)辯小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分別等工作。回答下列問(wèn)題：(1)該小組接受稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培育了一段時(shí)間，這樣做的目的是___________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培育后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_(kāi)_______________。(2)該小組接受平板劃線法分別水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)________滅菌。在其次次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)頭劃線。這樣做的目的是______________________________________________________________________________________________________________________。(3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培育后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培育基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培育，另一部分進(jìn)行振蕩培育。結(jié)果發(fā)覺(jué)：振蕩培育的細(xì)菌比靜置培育的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其緣由是：振蕩培育能提高培育液中________的含量，同時(shí)可使菌體與培育液充分接觸，提高_(dá)_______的利用率。解析(1)稀釋涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培育一段時(shí)間，檢測(cè)培育基平板滅菌是否合格；每升水樣中的活菌數(shù)為：(39＋38＋37)/3＝38，再除以0.1乘以100，得到1毫升中的菌數(shù)，再乘以1000就是1升中的菌數(shù)，故為3.8×107。(2)用平板劃線法先將接種環(huán)灼燒滅菌再劃線。其次次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)頭劃線，達(dá)到稀釋的目的，使得最終能夠得到單個(gè)菌落。(3)依據(jù)圖示可知，B為稀釋涂布平板法接種后培育得到的菌落。(4)振蕩的作用相當(dāng)于攪拌，可使培育基中各養(yǎng)分安排的均勻和溶氧量大，既能供應(yīng)充分的氧氣又能充分利用養(yǎng)分物質(zhì)。答案(1)檢測(cè)培育基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)B(4)溶解氧 養(yǎng)分物質(zhì)創(chuàng)新猜測(cè)5．中國(guó)家電爭(zhēng)辯院的洗衣機(jī)專(zhuān)家指出，洗衣機(jī)內(nèi)部的環(huán)境格外潮濕，洗衣機(jī)使用時(shí)間越長(zhǎng)，內(nèi)部滋生微生物的機(jī)會(huì)就越大。看似潔凈的洗衣機(jī)，其內(nèi)部隱蔽著一個(gè)健康的隱形殺手。某生物愛(ài)好小組的同學(xué)，利用內(nèi)桶背面的污垢進(jìn)行了相關(guān)試驗(yàn)室試驗(yàn)。(1)培育洗衣機(jī)內(nèi)部微生物的培育基中一般含有________________________。(2)鑒定洗衣機(jī)污垢中是否有菌落時(shí)要制備固體培育基，在制備完畢后要進(jìn)行倒平板操作，將平板倒置。這樣做的目的是_________________________。(3)有三種材料或用具需要消毒或滅菌：①培育細(xì)菌用的培育基與培育皿；②玻棒、試管、燒瓶和吸管；③試驗(yàn)操作者的雙手。其中需要消毒的是____，需要滅菌的是____。(4)檢驗(yàn)污垢中是否含微生物時(shí)，要將污垢制成水樣稀釋?zhuān)缓髮⑾♂屗畼佑猛坎计鞣謩e涂布到瓊脂固體培育基的表面進(jìn)行培育，這種方法稱(chēng)為_(kāi)_________。下圖所示的四種菌落分布狀況中，不行能由該方法得到的是________。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要對(duì)比組？______。為什么？________。(5)推斷污垢中微生物的種類(lèi)可以依據(jù)菌落的外形、大小等菌落特征進(jìn)行初步的________。試驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培育基應(yīng)當(dāng)進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，此目的是________________________。解析(1)微生物培育基中一般需含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源等成分。(2)倒置平板的目的是防止皿蓋上分散的水珠落入培育皿造成污染，同時(shí)還可使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā)。(3)試驗(yàn)者的雙手需要進(jìn)行消毒處理，培育皿、培育基及其他試驗(yàn)器材等需要進(jìn)行滅菌處理。(4)本題中將污垢水樣接種在培育基上的方法為稀釋涂布平板法。D屬于利用平板劃線法得到的菌落分布。利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置對(duì)比組，將一個(gè)未接種污垢水樣的培育基放在相同條件下培育，以此推斷培育基是否被雜菌污染。(5)污垢中的微生物種類(lèi)可以依據(jù)菌落的外形、大小等進(jìn)行初步分類(lèi)。試驗(yàn)結(jié)束后，為防止污染環(huán)境，應(yīng)對(duì)用過(guò)的培育基進(jìn)行滅菌處理后再倒掉。答案(1)水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽(2)防止皿蓋上分散的水珠落入培育皿造成污染，還可使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā)(3)③①②(4)稀釋涂布平板法D需要由于需要推斷培育基是否被雜菌污染(培育基滅菌是否合格)(5)鑒定(或分類(lèi))防止造成環(huán)境污染(1)分別微生物所用的選擇培育基肯