…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年華東師大版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、我國科研人員利用大鼠；小鼠兩個遠親物種創(chuàng)造出世界首例異種雜合二倍體胚胎干細胞（AdESCs）；過程如下圖所示。該細胞可分化成各種雜種體細胞，為研究不同物種性狀差異的分子機制提供了模型。相關(guān)敘述不正確的是（）

A.單倍體囊胚1最可能由小鼠的卵細胞經(jīng)體外誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得B.體外培養(yǎng)AdESCs需向培養(yǎng)液中添加動物血清等天然成分C.該項技術(shù)突破生殖隔離獲得了哺乳動物遠親物種的雜種細胞D.AdESCs的染色體組數(shù)與大鼠-小鼠體細胞融合的雜種細胞相同2、高等哺乳動物受精后不久；受精卵開始進行細胞分裂。經(jīng)桑椹胚；囊胚、原腸胚和組織器官的分化，最后發(fā)育成一個完整的幼體，完成胚胎發(fā)育的全過程，如圖為該過程中的某一時期示意圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.圖中①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細胞團B.高等哺乳動物胚胎發(fā)育中的細胞分化開始于圖示時期，終止于生命結(jié)束C.胚胎從①中伸展出來的過程叫做孵化D.進行胚胎分割時，應(yīng)選擇圖示時期之后的胚胎進行3、乳酸菌是乳酸的傳統(tǒng)生產(chǎn)菌，但耐酸能力較差，影響產(chǎn)量。釀酒酵母耐酸能力較強，但不產(chǎn)生乳酸。研究者將乳酸菌內(nèi)催化乳酸生成的乳酸脫氫酶基因（LDH）導(dǎo)入釀酒酵母，獲得能產(chǎn)生乳酸的酵母工程菌株。下圖為通過雙酶切構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程。GTG為原核生物偏好的編碼起始密碼子的序列，ATG為真核生物偏好的編碼起始密碼子的序列。相關(guān)敘述不正確的是（）

A.引物1的5′端序列應(yīng)包含BamHⅠ的識別序列B.引物1的5′端序列應(yīng)考慮將GTG改為ATGC.重組質(zhì)粒以不能合成尿嘧啶的酵母菌株為受體D.酵母工程菌培育成功的標志是產(chǎn)生乳酸脫氫酶4、常見的輔助生殖技術(shù)有兩種：一種叫做人工授精，即通過人工的方法，把精液或者精子送到雌性的生殖道，達到增加懷孕幾率的目的；第二種輔助生殖技術(shù)就是試管動物，主要涉及體外受精、胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。下列敘述錯誤的是是（）A.人工授精后形成的早期胚胎立即與母體子宮建立聯(lián)系B.輔助生殖技術(shù)不一定會用到胚胎移植C.與克隆動物不同，試管動物的培育屬于有性生殖D.人工授精和試管動物技術(shù)都要注意受體的生殖周期5、單克隆抗體在多種疾病的診斷和治療中發(fā)揮重要的作用，下圖為利用小鼠制備單克隆抗體的過程，相關(guān)敘述正確的是（）

A.從未經(jīng)處理的普通小鼠脾臟中獲取B淋巴細胞B.細胞融合不需要無菌環(huán)境，需放在有CO2的環(huán)境中C.細胞篩選需要使用顯微鏡辨識獲得雜交瘤細胞D.單抗檢測時取培養(yǎng)液滴加相應(yīng)抗原出現(xiàn)反應(yīng)為目標細胞6、綿羊尾部脂肪的差異與plin基因有關(guān)。對寧夏某養(yǎng)殖合作社的三個綿羊群體中plin基因的PCR產(chǎn)物進行檢測后發(fā)現(xiàn)，plin基因在該綿羊群體中存在3種基因型，其基因型頻率如下表。下列有關(guān)該綿羊群體的敘述正確的是（）。綿羊基因型頻率/%TT型CT型CC型CC型灘羊34057小尾寒羊75736灘湖羊38314

A.灘羊、小尾寒羊和灘湖羊中T基因的頻率相同B.用3對不同的引物進行擴增并對PCR產(chǎn)物測序C.灘羊和小尾寒羊雜交后代將繼承全部優(yōu)良品質(zhì)D.人工選擇使等位基因T的頻率發(fā)生定向改變7、動物生物反應(yīng)器和研究開發(fā)重點是動物乳腺反應(yīng)器和動物血液反應(yīng)器；即把人體相關(guān)基因整合到動物胚胎里，使生出的轉(zhuǎn)基因動物血液中或長大后產(chǎn)生的乳汁中含有人類所需要的不同蛋白質(zhì)。培育作為“生物反應(yīng)器”的動物涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有。

①基因工程

②體外受精

③胚胎移植

④動物細胞培養(yǎng)A.①②③B.②③④C.①③④D.①②③④8、下列有關(guān)發(fā)酵工程和細胞工程的敘述，正確的是（）A.利用顯微鏡直接計數(shù)時，一般用血細胞計數(shù)板統(tǒng)計醋酸菌的數(shù)目B.可用無機鹽、瓊脂和石油配置的選擇培養(yǎng)基從被石油污染的土壤中篩選出一種石油降解菌C.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)提高單個細胞中次生代謝物的含量可實現(xiàn)細胞產(chǎn)物工廠化生產(chǎn)D.通過花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株體現(xiàn)了植物體細胞具有全能性評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)9、下列有關(guān)生物技術(shù)引起的安全性和倫理問題的敘述，不正確的是（）A.基因編輯制造嬰兒的行為是不符合倫理道德的B.設(shè)計試管嬰兒是為了治療疾病，不會出現(xiàn)負面影響C.我國禁止生殖性克隆人和有關(guān)人胚胎干細胞的研究D.世界各國都應(yīng)該禁止在任何情況下生產(chǎn)、儲存和發(fā)展生物武器10、運用細胞工程技術(shù)獲得單克隆抗體時，必要的操作是（）A.對小動物注射特定抗原B.融合并篩選雜交瘤細胞C.原代培養(yǎng)效應(yīng)B細胞D.將胰蛋白酶注入小動物腹腔11、PCR可以特異性地快速擴增目的基因，成功的擴增應(yīng)該產(chǎn)生與目的基因大小一致的擴增產(chǎn)物，不嚴謹?shù)牟僮鲿?dǎo)致無擴增產(chǎn)物或出現(xiàn)非目的基因擴增產(chǎn)物。下列說法正確的是（）A.若PCR反應(yīng)緩沖溶液中未加入Mg2+，則結(jié)果可能不會出現(xiàn)擴增產(chǎn)物B.若模板DNA中含有抑制耐高溫的DNA聚合酶活性的雜蛋白，則結(jié)果可能不會出現(xiàn)擴增產(chǎn)物C.若引物與非目的序列發(fā)生堿基互補配對，則結(jié)果可能會出現(xiàn)非目的序列擴增產(chǎn)物D.若引物間發(fā)生堿基互補配對，則結(jié)果可能會出現(xiàn)非目的序列擴增產(chǎn)物12、下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同B.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C.動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株D.煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細胞培養(yǎng)能得到細胞代謝產(chǎn)物13、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述，正確的是（）A.重組的微生物在降解污染物的過程中可能產(chǎn)生二次污染B.種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量，對環(huán)境沒有任何負面影響C.如果轉(zhuǎn)基因花粉中有毒蛋白或過敏蛋白，可能會通過食物鏈傳遞到人體內(nèi)D.轉(zhuǎn)基因生物所帶來的安全性問題是可以解決的14、小鼠胚胎干細胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細胞、制備流程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

A.為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進雄鼠產(chǎn)生更多的精子B.細胞a和細胞b內(nèi)含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶將細胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細胞D.胚胎干細胞和誘導(dǎo)出的各種細胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)15、RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后再進行PCR擴增的技術(shù)稱為RT－PCR，過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.過程①需要RN逆轉(zhuǎn)錄酶、引物、核糖核苷酸等條件B.真核細胞的mRNA經(jīng)過程①②獲得的DNA無內(nèi)含子片段C.過程③PCR擴增時引物中的CG含量會影響退火溫度D.RT－PCR技術(shù)可應(yīng)用于新冠病毒（RNA病毒）的核酸檢測評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)16、下圖表示哺乳動物精子和卵細胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應(yīng)和__________反應(yīng)。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細胞進行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。17、統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目_____________。這是因為______________________。因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來表示。除了上述的活菌計數(shù)法外，______________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。18、醋酸菌的最適生長溫度為____________________℃。19、酵母菌是______________微生物。酵母菌進行有氧呼吸的反應(yīng)式如下：______________________；酵母菌進行無氧呼吸的反應(yīng)式如下：_________________。20、生態(tài)工程的設(shè)計所依據(jù)的是______和______原理21、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就______，稱為______。細胞數(shù)目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面______時，細胞就會_____，這種現(xiàn)象稱為______。22、應(yīng)用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。23、在我國市場上究竟有多少種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品呢？一位同學(xué)帶著這樣的問題，進行了調(diào)查并將結(jié)果歸納成下圖?

對該同學(xué)的調(diào)查和歸納結(jié)果，有人表示認同，有人提出質(zhì)疑?質(zhì)疑者認為：目前我國市場上根本沒有大豆?玉米或甜菜的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?我們的觀點是什么_____？24、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認，如何通過蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請教或通過互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____評卷人得分四、判斷題(共1題，共6分)25、培養(yǎng)動物細胞一般使用液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基通常需要加入血清等一些天然成分。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共1題，共6分)26、科研人員以病毒表面S蛋白作為主要的病毒抗原；利用基因工程研制疫苗用于接種預(yù)防，簡要過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)新冠病毒是一種RNA病毒，一般先通過_____________________得到cDNA，再經(jīng)PCR技術(shù)獲取大量S蛋白基因，PCR的中文全稱是_____________________。

(2)PCR技術(shù)還需用到_____________________酶，該酶能夠使脫氧核苷酸從引物的_____________________端開始連接，據(jù)下圖分析，可選擇的引物是_____________________。

(3)為了驗證表達的S蛋白與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性；請設(shè)計簡單的檢測方案并預(yù)期檢測結(jié)果。

方案:_________________________________。

結(jié)果:_________________________________。評卷人得分六、綜合題(共4題，共40分)27、分解尿素的細菌廣泛存在于農(nóng)田等土壤中；某生物實驗小組嘗試對分解尿素的細菌進行分離與計數(shù)，請回答下列問題：

（1）分解尿素的細菌含有的分解尿素的酶是_____________，為篩選出能分解尿素的細菌，配制培養(yǎng)基時應(yīng)以_____作為唯一氮源，這種允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱為______培養(yǎng)基。

（2）本實驗用來統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)目的接種微生物的方法是_________。此種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目_________。這是因為_____________。此外，分離純化菌種常用的另外一種接種方法是_____________。

（3）該小組對分解尿素的細菌進行計數(shù)時，在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時間，這樣做的目的是______________。將1mL樣液稀釋104倍，在3個平板上分別涂布0．1mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，統(tǒng)計活菌數(shù)目，每隔一個“時間間隔”統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，最后選取_________作為結(jié)果。如果3個平板的菌落數(shù)分別為48、52和53，據(jù)此可得出每毫升樣液中活菌數(shù)為_____。28、多位科學(xué)家對生物科技發(fā)展做出了重要貢獻。請回答下列向題：

（1）20世紀60年代，我國生物學(xué)家童第周將黑斑蛙紅細胞的核轉(zhuǎn)移到同種生物的去核卵細胞中得到了正常發(fā)育的蝌蚪。此蝌蚪的培育主要運用的技術(shù)有________________（寫出兩點即可），此蝌蚪的成功培育證明了________________。

（2）1973年博耶和科恩選用僅含單一EcoRI酶切位點的載體質(zhì)粒pSC101，使之與非洲爪蟾核糖體蛋白基因的DNA片段重組，重組DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌中并轉(zhuǎn)錄出mRNA。上述過程用EcoRI酶同時切割載體質(zhì)粒pSC101和非洲爪蟾核糖體蛋白基因的目的是________。將重組DNA導(dǎo)入受體細胞時需用___________處理大腸桿菌將其轉(zhuǎn)化成感受態(tài)細胞。博耶和科恩的上述實驗可證明_______________________（寫出兩點即可）。

（3）1975年英國科學(xué)家米爾斯坦和科勒發(fā)明了單克隆抗體技術(shù)。此項技術(shù)運用細胞融合技術(shù)將________融合成雜交瘤細胞并生產(chǎn)單克隆抗體_______________________。

（4）近年來基因工程興起，轉(zhuǎn)基因生物安全性備受關(guān)注。請指出引發(fā)人們對轉(zhuǎn)基因生物安全性爭論的根源_________________________________（寫出一點即可）。29、乙烯具有促進果實成熟的作用；ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細胞內(nèi)合成乙烯的兩個關(guān)鍵酶。利用反義DNA技術(shù)(原理如圖1)，可以抑制這兩個基因的表達，從而使番茄具有耐儲存；宜運輸?shù)膬?yōu)點。圖2為融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反義基因表達載體的結(jié)構(gòu)示意圖。回答下列問題：

（1）從番茄細胞中提取RNA，利用RT-PCR技術(shù)獲取ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，即利用RNA和PCR獲取目的基因。該技術(shù)獲取目的基因所需要的酶主要有___________。

（2）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ的酶切位點；ACC合成酶基因兩端含KpnⅠ和Sau3AⅠ的酶切位點，這四種限制酶及其識別序列和切割位點如下圖：

。限制性核酸內(nèi)切酶識別序列和切割位點限制性核酸內(nèi)切酶識別序列和切割位點BamHⅠG↓GATCCKpnⅠGGTAC↓CEcoRⅠG↓AATTCSau3AⅠ↓GATC先用限制酶___________分別對ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因進行切割后，再將它們拼接成融合基因，相應(yīng)的Ti質(zhì)粒和融合基因均使用限制酶___________進行切割，以確保融合基因能夠插入載體中。載體上卡那霉素抗性基因的作用是_________。

（3）為了獲得耐運儲存、宜儲存的番茄，應(yīng)將融合基因___________(填“正向”或“反向”)插入啟動子2A11的下游，原因是___________。

（4）在檢測番茄細胞中是否存在反義融合基因時，_________(填“能”或“不能”)用放射性物質(zhì)標記的ACC氧化(合成)酶基因片段作探針進行檢測，理由是__________。30、繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后；膀胱生物反應(yīng)器的研究也取得了一定進展。科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中，下圖為將基因表達載體導(dǎo)入小鼠細胞后的檢測示意圖，結(jié)合圖示回答以下問題：

（1）可選用_______________方法將生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細胞。

（2）要檢測轉(zhuǎn)基因小鼠是否培育成功，需要檢測的內(nèi)容是①采用_______________技術(shù)檢測小鼠染色體DNA上是否插入了目的基因。具體的做法是用_______________作為探針，使探針與基因組DNA雜交，結(jié)果顯示有_______________，則說明目的基因已經(jīng)插入染色體DNA中。上圖________（填“M”或“N”）中含有目的基因。②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA。③_______________。

（3）從分離蛋白質(zhì)的角度分析，乳腺和膀胱哪一個作為轉(zhuǎn)基因動物的生物反應(yīng)器更好？__________，原因是_____________________________________________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、D【分析】【分析】

分析題圖：小鼠的卵細胞體外培養(yǎng)到囊胚時期；取內(nèi)細胞團細胞培養(yǎng)成孤雌單倍體胚胎干細胞，取大鼠的精子體外培養(yǎng)到囊胚時期，取內(nèi)細胞團細胞培養(yǎng)成孤雄單倍體胚胎干細胞，兩種胚胎融合成異種雜合二倍體胚胎干細胞（AdESCs）。

【詳解】

A；單倍體囊胚1能發(fā)育成孤雌單倍體胚胎干細胞；因此單倍體囊胚1最可能是由小鼠的卵子（卵細胞）發(fā)育而來，所采用的技術(shù)應(yīng)為早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)，A正確；

B；動物細胞培養(yǎng)過程中；使用的培養(yǎng)液除含有一些無機鹽和有機鹽外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分以及動物血清等天然成分，B正確；

C；由于物種間存在生殖隔離；因此自然情況下哺乳動物遠親物種間的配子往往無法完成受精作用，或者即便能完成也不能發(fā)育，該項技術(shù)突破生殖隔離獲得了哺乳動物遠親物種的雜種細胞，C正確；

D；結(jié)合分析可知；該AdESCs是“雜合二倍體胚胎干細胞”，故體內(nèi)有2個染色體組，但小鼠-大鼠雜交細胞，是由體細胞融合產(chǎn)生，因此雜交細胞中通常含有4個染色體組，兩者染色體組數(shù)不同，D錯誤。

故選D。2、D【分析】【分析】

分析題圖；圖示為胚胎發(fā)育過程某一時期示意圖，該時期為囊胚期，其中①為透明帶；②為滋養(yǎng)層，將來發(fā)育成胎盤或胎膜；③為內(nèi)細胞團，將來發(fā)育成胎兒的各種組織。

【詳解】

A；如圖是囊胚期示意圖；①②③依次稱之為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細胞團，A正確；

B；細胞分化貫穿于整個生命歷程；在胚胎時期達到最大限度，高等哺乳動物胚胎發(fā)育中的細胞分化開始于囊胚期，終止于生命結(jié)束，B正確；

C；胚胎從①中伸展出來的過程叫做孵化；C正確；

D；進行胚胎分割時；應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，圖示細胞所處時期可以進行，D錯誤。

故選D。3、D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

AB；設(shè)計引物1的5'端序列；應(yīng)考慮將編碼起始密碼子的序列由原核生物偏好的GTG轉(zhuǎn)變?yōu)檎婧松锲玫腁TG，以便目的基因在酵母細胞中更好的表達；同時能通過雙酶切以正確方向插入質(zhì)粒，需要包含BamHI的識別序列，AB正確；

C；結(jié)合題意可知；本過程中重組質(zhì)粒以不能合成尿嘧啶的酵母菌株為受體，然后在缺乏尿嘧啶的選擇培養(yǎng)基上，不能合成尿嘧啶的釀酒酵母菌株不能生存，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的釀酒酵母菌株因為獲得了尿嘧啶合成酶基因而可以正常生存，從而起到篩選作用，C正確；

D；結(jié)合題意可知；酵母工程菌培育成功的標志是產(chǎn)生乳酸，D錯誤。

故選D。4、A【分析】【分析】

胚胎工程技術(shù)包含的內(nèi)容很豐富；目前在醫(yī)學(xué)和生產(chǎn)上應(yīng)用較多的是體外受精；胚胎移植和胚胎分割等，借助這些技術(shù)，可以進一步挖掘動物的繁殖潛力。哺乳動物的體外受精技術(shù)主要包括卵母細胞的采集、精子的獲取和受精等步驟。采集到的卵母細胞和精子，要分別在體外進行成熟培養(yǎng)和獲能處理，然后才能用于體外受精。

【詳解】

A；人工授精后形成的早期胚胎在一定時間內(nèi)并未與母體子宮建立組織上的聯(lián)系；A錯誤：

B；如果是人工授精的方式進行輔助生殖技術(shù)；就不需要胚胎移植，B正確；

C；克隆技術(shù)屬于無性繁殖；試管動物的培育涉及精卵結(jié)合，屬于有性生殖，C正確；

D；受體的生殖周期將影響人工授精和試管動物技術(shù)的成功率；D正確。

故選A。5、D【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；應(yīng)從經(jīng)過抗原注射后的免疫小鼠脾臟中獲取B淋巴細胞；A錯誤；

B；細胞融合需要無菌的環(huán)境；B錯誤；

C；細胞篩選時獲得雜交瘤細胞需要在選擇培養(yǎng)基上篩選；C錯誤；

D；單抗檢測時可用抗原-抗體實驗鑒定：取培養(yǎng)液滴加相應(yīng)抗原；出現(xiàn)陽性反應(yīng)為目標細胞，D正確。

故選D。6、D【分析】【分析】

基因頻率：指在一個種群基因庫中；某個基因占全部等位基因數(shù)的比率；

突變和重組為進化提供原材料；但是是不定向的，自然選擇是定向的，為進化提供了方向。

【詳解】

A；灘羊中T的基因頻率=（3×2+40）/100×2=0.23；小尾寒羊T的基因頻率=（7×2+57）/100×2=0.355，灘湖羊T的基因頻率=（3×2+83）/100×2=0.455，三者不等，A錯誤；

B；C和T屬于等位基因；只有部分堿基序列不同，用1對不同的引物即可進行擴增，B錯誤；

C；灘羊和小尾寒羊雜交；原理是基因重組，后代可能會繼承部分優(yōu)良品種，C錯誤；

D；人工選擇是定向的；所以會使等位基因C、T的頻率發(fā)生定向改變，D正確。

故選D。7、D【分析】依題意可知：利用“生物反應(yīng)器”獲得人類所需要的不同蛋白質(zhì)，需要根據(jù)人們的意愿定向改造生物的性狀，因而需要用到基因工程技術(shù)，①正確；在基因工程技術(shù)中，獲得的重組DNA需要用顯微注射技術(shù)導(dǎo)入受精卵，而受精卵的獲得離不開體外受精，②正確；含有目的基因的受精卵，需用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)（或早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)）進行培養(yǎng)，使之發(fā)育為早期胚胎，④正確；當胚胎發(fā)育到一定階段，需進行胚胎移植才能獲得具有“生物反應(yīng)器”的動物，③正確。綜上分析，A、B、C均錯誤，D正確。8、B【分析】【分析】

1；在微生物學(xué)中；將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源(提供碳元素的物質(zhì)).氮源(提供氮元素的物質(zhì))和無機鹽。2、測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法。稀釋涂布平板法是通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)。

【詳解】

A；醋酸菌屬于細菌；因此利用顯微鏡直接計數(shù)時，一般用特定的細菌計數(shù)板統(tǒng)計醋酸菌的數(shù)目，一般用血細胞計數(shù)板來統(tǒng)計酵母菌的數(shù)目，A錯誤；

B；由于只有分解石油的微生物才能利用石油作為碳源；而不能分解石油的微生物在以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基上因缺少碳源而不能生存，因此可用無機鹽、瓊脂和石油配置的選擇培養(yǎng)基從被石油污染的土壤中篩選出一種石油降解菌，B正確；

C；利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以實現(xiàn)細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)；但不能提高單個細胞中次生代謝物的含量，C錯誤；

D；通過花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株體現(xiàn)了植物配子具有全能性；D錯誤。

故選B。二、多選題(共7題，共14分)9、B:C【分析】【分析】

人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人﹔設(shè)計試管嬰兒是為了治療疾??；但有可能被濫用，如用于設(shè)計嬰兒性別等，可能會出現(xiàn)負面影響﹔進行基因檢測時，可通過基因進行檢測，也可通過測定基因的表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)來進行;對于基因歧視現(xiàn)象，可通過正確的科學(xué)知識傳播；倫理道德教育和立法得以解決。

【詳解】

A；基因編輯制造嬰兒的行為不符合倫理道德；A正確；

B；設(shè)計試管嬰兒如專門用來設(shè)計嬰兒性別是不符合倫理道德的；可能會存在負面影響，B錯誤；

C；我國禁止生殖性克隆人；但允許人胚胎干細胞的研究在有關(guān)規(guī)定下進行，C錯誤；

D；生物武器危害巨大；世界各國都應(yīng)禁止生物武器，D正確。

故選BC。10、A:B【分析】【分析】

在制備單克隆抗體的過程中；需要先對小鼠進行特定抗原免疫，使機體產(chǎn)生相應(yīng)的漿細胞；在誘導(dǎo)細胞融合時，除了異種細胞融合外，還有同種細胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞；效應(yīng)B細胞不能分裂；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細胞時，可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體。

【詳解】

A；在制備單克隆抗體的過程中；需要先對小鼠進行特定抗原免疫，使機體產(chǎn)生相應(yīng)的漿細胞，A正確；

B；在誘導(dǎo)細胞融合時；除了異種細胞融合外，還有同種細胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞，B正確；

C；效應(yīng)B細胞不能分裂；C錯誤；

D；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細胞時；可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體，而不需要將胰蛋白酶注入小動物腹腔，D錯誤。

故選AB。11、A:B:C【分析】【分析】

PCR技術(shù)擴增目的基因。

（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制。

（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃；引物結(jié)合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。

【詳解】

A、Mg2+離子濃度對PCR擴增效率影響很大；濃度過高可降低PCR擴增的特異性，濃度過低則影響PCR擴增產(chǎn)量甚至使PCR擴增失敗而不出擴增條帶，A正確；

B；若模板DNA中含有抑制耐高溫的DNA聚合酶活性的雜蛋白；則可能會抑制PCR反應(yīng)中的延伸步驟，導(dǎo)致結(jié)果不會出現(xiàn)擴增產(chǎn)物，B正確；

C；若引物與非目的序列發(fā)生堿基互補配對；則會使引物與模板結(jié)合位置錯誤，導(dǎo)致擴增片段錯誤出現(xiàn)非目的序列擴增產(chǎn)物，C正確；

D；若引物間發(fā)生堿基互補配對；則結(jié)果可能不出現(xiàn)擴增產(chǎn)物或產(chǎn)物減少，D錯誤。

故選ABC。12、A:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較。比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理細胞的全能性細胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分營養(yǎng)物質(zhì)（蔗糖）、植物激素等營養(yǎng)物質(zhì)（葡萄糖）、動物血清等培養(yǎng)結(jié)果植物體細胞株、細胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無毒苗等獲得細胞或細胞產(chǎn)物分散處理無有脫分化有無

【詳解】

A；動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同；如動物細胞培養(yǎng)需要加血清，植物細胞培養(yǎng)不需要添加血清，A正確；

B；植物組織培養(yǎng)不需要胰蛋白酶；B錯誤；

C；動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)；莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株，C正確；

D；煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體；小鼠雜交瘤細胞培養(yǎng)能得到細胞代謝產(chǎn)物，D正確。

故選ACD。13、A:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因植物可能會對生物多樣性構(gòu)成潛在的風險和威脅理由：①轉(zhuǎn)基因植物擴散到種植區(qū)外變成野生種或雜草；②轉(zhuǎn)基因植物競爭能力強，可能成為“入侵的外來物種”，③轉(zhuǎn)基因植物的外源基因與細菌或病毒雜交，重組出有害的病原體，④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級雜草”。

【詳解】

A；重組的微生物在降解污染物的過程中可能產(chǎn)生二次污染；造成環(huán)境安全問題，A正確；

B；種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量；保護環(huán)境，但轉(zhuǎn)基因植物可能會與野生植物雜交，造成基因污染，可能會對生物多樣性構(gòu)成潛在的風險和威脅，B錯誤；

C；轉(zhuǎn)基因花粉中若有毒蛋白或過敏蛋白；可能會通過食物鏈傳遞到人體內(nèi)，轉(zhuǎn)基因作物可通過花粉散落到它的近親作物上，從而污染生物基因庫，C正確；

D；對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)；應(yīng)趨利避害，可以避免轉(zhuǎn)基因生物引發(fā)的安全性問題，轉(zhuǎn)基因生物所帶來的環(huán)境安全問題在今后有可能得到解決，D正確。

故選ACD。14、A:B:C【分析】【分析】

1；胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細胞團）。

2；ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中；能夠維持不分化的狀態(tài)．在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學(xué)物質(zhì)時，就可以誘導(dǎo)ES細胞向不同類型的組織細胞分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段。

【詳解】

A；為了獲得更多的囊胚；可以采用激素促進成熟雌性個體超數(shù)排卵，然后將卵細胞從母體內(nèi)取出，在試管內(nèi)與人工采集的精子進行體外受精，培育成胚胎，A錯誤；

B、細胞a和細胞b是由同一個受精卵經(jīng)過有絲分裂形成的；故核基因相同，B錯誤；

C；運用細胞培養(yǎng)技術(shù)可以從哺乳動物的早期胚胎中獲得胚胎干細胞；首先必須用胰蛋白酶處理內(nèi)細胞團，分解細胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個細胞，C錯誤；

D、動物細胞培養(yǎng)時需要在5%CO2的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；以維持培養(yǎng)液的pH，D正確。

故選ABC。15、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；過程①是由mRNA形成單鏈DNA的過程；表示逆轉(zhuǎn)錄，需要RNA、逆轉(zhuǎn)錄酶、引物、脫氧核苷酸等條件，A錯誤；

B；真核細胞中DNA的外顯子部分轉(zhuǎn)錄的RNA拼接形成mRNA；因此真核細胞的mRNA經(jīng)過程①②逆轉(zhuǎn)錄過程獲得的DNA無內(nèi)含子片段，B正確；

C；CG含量越高；氫鍵越多，結(jié)構(gòu)越穩(wěn)定，因此過程③PCR擴增時引物中的CG含量會影響退火溫度，C正確；

D；新冠病毒遺傳物質(zhì)是RNA；RT-PCR技術(shù)可應(yīng)用于新冠病毒的核酸檢測，D正確。

故選BCD。

【點睛】三、填空題(共9題，共18分)16、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復(fù)制；②是減數(shù)分裂，③是精細胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機能衰退；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產(chǎn)生的時期是初情期；雌性動物卵泡細胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細胞進行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點睛】

本題考查卵細胞的形成過程和受精作用等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生識記相關(guān)細節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應(yīng)卵細胞膜反應(yīng)初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落菌落數(shù)18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】30～3519、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO220、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】生態(tài)學(xué)工程學(xué)21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】貼附在瓶壁上細胞貼壁相互抑制停止分裂增殖細胞的接觸抑制。22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）23、略

【分析】【詳解】

目前我國市場上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜，故我國市場上有大豆等的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?！窘馕觥磕壳拔覈袌錾系霓D(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜。24、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥四、判斷題(共1題，共6分)25、A【分析】【分析】

液體培養(yǎng)基主要是模擬動物體內(nèi)環(huán)境；動物體細胞是生活在組織液當中，而且細胞要直接從組織液里獲得營養(yǎng)和排出廢物。所以液體培養(yǎng)基相當于組織液的液體環(huán)境。

【詳解】

為了保證細胞培養(yǎng)時營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子的供給，培養(yǎng)基中需添加一定量的動物血清等天然成分，可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，故該表述正確。五、實驗題(共1題，共6分)26、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）利用RNA得到相應(yīng)DNA的方法為逆轉(zhuǎn)錄；起作用的酶為逆轉(zhuǎn)錄酶。在體外將DNA擴增的技術(shù)是PCR，中文名稱為多聚酶鏈式反應(yīng)。

（2）PCR技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；該過程需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)能夠使脫氧核苷酸從引物的3'端開始連接，使子代DNA從5'向3'延伸；進行擴增時，還應(yīng)選擇一對方向相反的引物，且與模板的3'端結(jié)合，據(jù)圖可知，應(yīng)選擇Ⅱ；Ⅲ。

（3）細胞內(nèi)是否合成了由目的基因控制的蛋白質(zhì)，使用抗原-抗體雜交法檢測，為了檢驗表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進行抗原-抗體雜交實驗來進行檢測，本實驗是驗證性實驗，實驗結(jié)果是唯一的，因此本實驗結(jié)果是出現(xiàn)雜交帶?！窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈式反應(yīng)。

(2)熱穩(wěn)定DNA聚合酶##Taq酶3'II；Ⅲ

(3)用表達的S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進行抗原-抗體雜交實驗出現(xiàn)雜交帶六、綜合題(共4題，共40分)27、略

【分析】【分析】

分解尿素的細菌的分離原理：在培養(yǎng)基中以尿素作為唯一的氮源；只有能分解尿素的微生物（能產(chǎn)生脲酶的微生物）才能利用其氮源，在其上生長。其他微生物不能分解尿素，不能利用氮源無法生長。由于細菌分解在尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會使培養(yǎng)基堿性增強，PH升高，所以可以用檢測pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產(chǎn)生氨，PH升高，指示劑變紅。

【詳解】

（1）分解尿素的微生物含有脲酶；培養(yǎng)基的成分一般包括水；無機鹽、碳源、氮源；篩選出能分解尿素的細菌，在培養(yǎng)基中以尿素作為唯一的氮源，只有能分解尿素的微生物（能產(chǎn)生脲酶的微生物）才能利用其氮源，在其上生長，其他微生物不能分解尿素，不能利用氮源被抑制生長，這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。

（2）接種微生物的方法有兩種：平板劃線法和稀釋涂布平板法?？梢杂脕碛脕斫y(tǒng)計樣品中活菌數(shù)目的是稀釋涂布平板法；統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

（3）該小組在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時間，用于檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；每隔一個“時間間隔”統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，最后選菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，根據(jù)題干提供數(shù)據(jù)，可得出毎毫升樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)=（48+52+53）÷3÷0.1×10000=5.1×106個。

【點睛】

本題考查了微生物的分離和培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生掌握利用培養(yǎng)基對微生物進行選擇的方法和原理，能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題?！窘馕觥侩迕改蛩剡x擇稀釋涂布平板法低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落平板劃線法檢驗平板滅菌是否徹底菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄5.1×106個28、略

【分析】【分析】

1；動物細胞工程常用的技術(shù)手段有動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、動物細胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等；其中動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。

2；（1）基因工程的工具：限制酶、DNA連接酶、運載體；常用的運載體有：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒。

（2）基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲??；基因表達載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細胞，目的基因的檢測與鑒定。

3；單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細胞，將效應(yīng)B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

（1）將黑斑蛙紅細胞的核轉(zhuǎn)移到同種生物的去核卵細胞中得到正常發(fā)育的蝌蚪。此蝌蚪的培育過程需要運用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)相關(guān)細胞；運用動物細胞核移植技術(shù)將紅細胞的核移植到去核卵細胞中，此過程還需要運用動物細胞融合技術(shù)。蛙紅細胞已高度分化，通過核移植培育蝌蚪的成功，證明了高度分化的動物細胞核仍具有發(fā)育成完整個體的潛能。

（2）用同種限制酶同時切割載體質(zhì)粒pSC101和非洲爪蟾核糖體蛋白基因的目的是為了使載體質(zhì)粒和目的基因產(chǎn)生相同的黏性末端，便于形成重組DNA分子。實驗過程中將重組DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，受體細胞是細菌時，為了增大導(dǎo)入的成功率，常用Ca2+處理；得到感受態(tài)細胞，此時細胞壁和細胞膜的通透性增大，容易吸收重組質(zhì)粒。上述實驗可證明質(zhì)?？梢宰鳛榛蚬こ痰妮d體，重組DNA可以進入受體細胞，外源基因可以在原核細胞中成功表達并實現(xiàn)物種間基因交流。

（3）單克隆抗體技術(shù)運用細胞融合技術(shù)將骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合成雜交瘤細胞；生產(chǎn)單克隆抗體。單克隆抗體在臨床上可應(yīng)用于作為診斷試劑；治療疾病和運載藥物等。

（4）目前科學(xué)家們對基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用以及基因間的調(diào)控機制了解有限；轉(zhuǎn)移的基因雖功能已知；但不少卻是異種生物基因；外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的，有時會出現(xiàn)意想不到的后果等等。

【點睛】

本題通過相關(guān)科學(xué)家的實驗，考查了動物細胞工程涉及的技術(shù)與操作，基因工程的步驟及工具、操作流程等知識點。解題的關(guān)鍵是利用題目信息，結(jié)合相關(guān)知識作答?！窘馕觥縿游锛毎囵B(yǎng)、核移植（克隆技術(shù)）、動物細胞融合高度分化的動物細胞核仍具有發(fā)育成完整個體的潛能產(chǎn)生相同的黏性末端便于形成重組DNA分子Ca2+（或CaC12）質(zhì)?？梢宰鳛榛蚬こ痰妮d體、重組DNA可以進入受體細胞、外源基因可以在原核細胞中成功表達并實現(xiàn)物種間基