…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教新起點選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、胚胎工程技術挖掘了動物的繁殖潛力，為優(yōu)良牲畜的大量繁殖提供了有效方法。下列有關胚胎工程的敘述，不正確的是（）A.胚胎工程可用于稀有動物的種族延續(xù)和培育生物制藥的反應器B.人工受精需要對精子進行獲能處理但不需要對卵母細胞進行培養(yǎng)C.早期胚胎培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中都需要加入血清或血漿D.只有受體和供體生理狀態(tài)相同被移植的胚胎才能繼續(xù)正常發(fā)育2、下列關于單克隆抗體制備和應用的敘述，正確的是（）A.用特定的抗原飼喂小鼠，再從小鼠脾臟中分離B淋巴細胞B.獲得的融合細胞都含有漿細胞與癌細胞的所有遺傳物質C.經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細胞即可生產(chǎn)單克隆抗體D.最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，具有準確、快速等優(yōu)點3、下列有關蛋白質和DNA提取和分離實驗的敘述，錯誤的是（）A.可用蒸餾水漲破細胞的方法從豬紅細胞中提取蛋白質B.透析法分離蛋白質的依據(jù)是蛋白質不能通過半透膜C.可以用雞血作為血紅蛋白和DNA提取的良好材料D.調節(jié)NaC1溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除血紅蛋白中的部分雜質4、從紅豆杉屬植物中提取分離出的紫杉醇是一種有效的抗癌藥物；自然狀態(tài)下紅豆杉生長慢，紫杉醇含量低，通過植物細胞懸浮培養(yǎng)技術可獲得大量紫杉醇。植物細胞懸浮培養(yǎng)是指將游離的單細胞或細胞團按照一定的細胞密度懸浮在液體培養(yǎng)基中，用搖床或轉床進行大規(guī)模培養(yǎng)的方法。通過不斷的繼代培養(yǎng)篩選出疏松性均勻一致；分散性良好、大小大致相同的細胞和細胞團，建立懸浮培養(yǎng)細胞系。據(jù)圖敘述正確的是（）

A.離體的紅豆杉組織細胞通過果膠酶分散處理后直接進行懸浮培養(yǎng)B.懸浮培養(yǎng)液中大多數(shù)細胞在形態(tài)上呈等徑形，核-質比率大，胞質濃厚，液泡化程度高C.植物細胞懸浮培養(yǎng)培養(yǎng)液中一般細胞分裂素與生長素含量比值大于1D.植物細胞懸浮培養(yǎng)中細胞生長沒有接觸抑制，因此只要空間足夠大，就可以擴大培養(yǎng)5、下列關于相關實驗失敗的原因分析，錯誤的是（）A.制作果酒時，未對發(fā)酵裝置進行消毒處理，造成發(fā)酵失敗B.制作果醋時，通入氧氣不足或溫度過低，造成發(fā)酵失敗C.制作腐乳時，裝瓶后未將瓶口密封，造成豆腐腐敗變質D.制作泡菜時，放鹽的比例過大，造成泡菜腐爛發(fā)霉6、如圖表示通過植物細胞工程相關技術，利用甲（2n）、乙（2n）兩種植物（各含有一種不同的優(yōu)良性狀）培育高產(chǎn)耐鹽植株的過程，其中序號代表過程或結構。請分析下列說法正確的是（）

A.①過程常用胰蛋白酶作為化學誘導劑B.②不是甲和乙融合的雜種細胞C.由愈傷組織到④需經(jīng)過脫分化和再分化的過程D.可通過配制選擇培養(yǎng)基對目的植株進行選擇7、蛋白質工程的基本流程正確的是（）

①蛋白質分子結構設計②DNA合成③預期蛋白質功能④根據(jù)氨基酸序列推出脫氧核苷酸序列A.①②③④B.④②①③C.③①④②D.③④①②8、為了示蹤衰老細胞在機體中的分布，科研人員綜合利用基因工程和細胞工程的技術手段，將綠色熒光蛋白基因gf插入到了小鼠p16基因的下游，使兩個基因“融合”。轉基因小鼠的衰老細胞中，p16和gfp會特異性表達，從而使其在紫外光下呈綠色。下列分析錯誤的是（）A.可用PCR技術特異性地快速擴增綠色熒光蛋白基因gfpB.轉基因小鼠的p16基因和gfp基因具有各自獨立的啟動子C.常用顯微注射法將改造好的融合基因注入小鼠的受精卵中D.可選擇發(fā)育到桑葚胚期的轉基因小鼠胚胎移植到受體母鼠子宮內評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)9、下圖為雜交瘤細胞制備示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶（HGPRT-）；在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述正確的是（）

A.可用滅活病毒誘導細胞融合B.未融合的細胞和融合的同種核細胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長C.雜交瘤細胞需進一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細胞膜的選擇透過性是細胞融合的基礎10、我國科學家提出的異種克隆大熊貓實驗技術路線如下圖。相關敘述錯誤的是（）

A.科學家通過對母兔注射孕激素，進行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細胞B.異種重構囊胚在體外培養(yǎng)時，為保證無毒無菌環(huán)境，往往需要在培養(yǎng)液中加入維生素C.囊胚由滋養(yǎng)層細胞和內細胞團構成，后者將來可發(fā)育成胎兒的各種組織D.兔子宮提供的生理環(huán)境與大熊貓差異大，異種重構囊胚可能不能正常發(fā)育出大熊貓幼仔11、農桿菌Ti質粒上的T-DNA可以轉移并隨機插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán)；并以此環(huán)為模板，利用PCR技術擴增出T-DNA插入位置兩側的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說法正確的是（）

A.進行PCR擴增的依據(jù)是DNA分子雙鏈復制的原理B.進行PCR擴增需要的酶有解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶C.利用圖中的引物②、③組合可擴增出兩側的未知序列D.通過與受體細胞的基因組序列比對，可確定T-DNA的插入位置12、白地霉侵染是導致柑橘酸腐病的主要原因，實驗證明桔梅奇酵母通過分泌普切明酸對白地霉具有生物防治能力。已知鐵是真菌生長的必需元素，是胞內重要酶活性中心的組成部分。普切明酸是桔梅奇酵母產(chǎn)生的一種水溶性鐵螯合劑，能快速在培養(yǎng)基中擴散并與其中的Fe3+形成穩(wěn)定紅色復合物。研究配制的含有不同濃度FeCl3的培養(yǎng)基如下表所示。實驗結果為隨FeCl3濃度增大，抑菌圈紅色加深但變窄，如下圖所示。相關敘述正確的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水瓊脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素，瓊脂不是營養(yǎng)物質B.白地霉采用了平板劃線法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.結果表明，F(xiàn)eCl3濃度增大，普切明酸與Fe3+結合的數(shù)量減少D.結果表明，F(xiàn)eCl3能降低桔梅奇酵母對白地霉的防治效果13、在動物細胞培養(yǎng)的過程中，貼壁的細胞不一定都能增殖并形成克隆（單個細胞繁殖形成的細胞群體），而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞，這一特點可用于測定動物細胞的增殖能力。大致流程如下圖，相關敘述不正確的是（）

A.出現(xiàn)接觸抑制后，細胞克隆停止增殖B.克隆細胞與接種的細胞的遺傳信息不一定相同C.胰蛋白酶可使細胞分散成單個利于計數(shù)D.需采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)才能形成細胞克隆14、勤洗手是預防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠狀病毒期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果；研究人員檢測了用凝膠洗手前后手部細菌的含量。凝膠洗手前的檢測流程見下圖。下列敘述錯誤的是（）

A.統(tǒng)計洗手前手部細菌的數(shù)量，選擇的接種方法是平板劃線法B.除圖中操作外，還需要設置一組未接種的空白培養(yǎng)基進行培養(yǎng)C.培養(yǎng)基上的一個菌落只可能來源于樣品稀釋液中的一個活菌D.初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，需要用顯微鏡觀察菌體的形狀15、抗體的結構分為V區(qū)（識別并結合抗原的區(qū)域）和C區(qū)（抗體的支架），鼠源抗體具有外源性，會被人體免疫系統(tǒng)當作抗原而清除。用人抗體的C區(qū)替換鼠源抗體的C區(qū)，保留鼠單抗的V區(qū)，可構建人一鼠嵌合抗體，操作流程如圖所示。下列相關說法錯誤的是（）

A.與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞為能分泌抗體的漿細胞B.用選擇性培養(yǎng)基可篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞C.為獲得結構正確的嵌合抗體，受體細胞應選用大腸桿菌D.人一鼠嵌合抗體在保留抗體特異性的同時外源性下降16、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設計品種乙組織培養(yǎng)實驗時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進行預實驗。為確定品種乙的II階段的最適細胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設計5個濃度水平的實驗，其中細胞分裂素最高濃度設為M。下列有關敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導形成愈傷組織α1b1II誘導形成幼芽α2b2Ⅲ誘導生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達的是II和Ⅲ階段B.實驗中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細胞分裂素濃度的實驗中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素17、DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)，不同相對分子質量DNA進行瓊脂糖凝膠電泳時可分開成不同條帶，相同分子量的為一條帶。用某種限制性核酸內切酶完全酶切質粒后，電泳后出現(xiàn)3條帶。下列敘述正確的是（）A.該質粒上只有3個酶切位點B.瓊脂糖凝膠電泳可以用來分離DNAC.外加電場時，DNA向正極泳動D.瓊脂糖帶負電荷，有利于DNA的泳動評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)18、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________19、雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物質)、_________________(提供氮元素的物質)和__________________。20、動物細胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。21、回答下列問題。

（1）果酒的制作離不開酵母菌，溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細菌，它的最適生長溫度為_______________，乳酸菌是________細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目___________，這是因為______________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定，將濾膜放在____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)___________；從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化酶和固定化細胞技術是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內的技術，包括化學結合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細胞多采用___________固定化。22、_______mol/L濃度下，DNA溶解度最大。23、沙門氏菌是一種常見的食源性致病菌；被感染了沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染的食品，會使人發(fā)生食物中毒。沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對熱抵抗力不強，在60℃的條件下15min就能被殺死。肉桂精油是從肉桂樹中提煉獲得的，具有不溶于水；易溶于有機溶劑且易揮發(fā)的特性，能抑制沙門氏菌的繁殖?；卮鹣铝袉栴}：

（1）培養(yǎng)沙門氏菌時要進行無菌操作，常用的滅菌方法有________（答出兩種）。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時一般需要將平板________（填“倒置”或“正置”）。單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是________。

（2）從雞糞便取樣，經(jīng)選擇培養(yǎng)后需要經(jīng)過一系列________才能將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上。對獲得的沙門氏菌常采用________的方法長期保存。

（3）根據(jù)題干信息，為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中儲存、加工食品的方法是________。

（4）根據(jù)肉桂精油的化學特性，可采用________法來提取，提取過程中影響精油品質的因素有________。24、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()25、隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，有些新的致病微生物被發(fā)現(xiàn)，它們的危害可能更大。通過互聯(lián)網(wǎng)或圖書館搜集近年發(fā)現(xiàn)的致病微生物的相關資料，分析和歸納這些資料__________。評卷人得分四、實驗題(共4題，共12分)26、尿素是一種重要的農業(yè)氮肥；但尿素并不能直接被農作物吸收，只有當土壤中的細菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細菌并進行計數(shù)的過程如圖1所示，圖2是乙中的培養(yǎng)基配方。請回答下列問題：

（1）為了獲得尿素分解菌；可在__________取樣；經(jīng)系列處理后如圖2所示培養(yǎng)基，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是___________；__________。

（2）甲中培養(yǎng)基與乙中培養(yǎng)基的成分相比；唯一的區(qū)別是___________。

（3）在涂平板前需要對甲中的菌液進行稀釋；稀釋涂布后能得到菌落數(shù)目在___________________的平板，則說明稀釋操作比較成功。

（4）對分離得到的尿素分解菌作進一步鑒定時；可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅的原因是尿素分解菌_____________________，再結合菌落的特征等進行確定。

（5）統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目_________，除了上述的活菌計數(shù)法外，______________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。27、如圖為果酒與果醋發(fā)酵裝置示意圖；請據(jù)圖回答：

（1）釀造葡萄酒時；在葡萄榨汁前，葡萄要先進行________再除去枝梗，可以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。

（2）將發(fā)酵裝置放在18～25℃環(huán)境中，每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量________。裝置中d處設計成彎曲形狀的目的是____________________________________________。

（3）10天之后；利用酸性條件下的________對從出料口c取樣的物質進行檢驗，若樣液變?yōu)開_______色，說明產(chǎn)生了酒精。

（4）產(chǎn)生酒精后，若在發(fā)酵液中加入醋酸菌，然后將裝置放在________環(huán)境中，適時打開______向發(fā)酵液中充氣，原因是______________________________________________。28、玉米是重要的糧食作物；其葉片細胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長發(fā)育過程中對水分的吸收具有重要的調節(jié)功能。科研人員成功培育出超量表達P蛋白轉基因玉米，所用DNA片段和Ti質粒的酶切位點如圖所示，請回答下列問題：

(1)強啟動子是一段有特殊結構的DNA片段，能被_______識別并結合，驅動基因的持續(xù)轉錄，如將強啟動子插入到玉米葉綠體某基因內部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達，應優(yōu)先選用_______酶組合，將Ti質粒切開后構建重組表達載體。T-DNA在該實驗中的作用是_______。

(2)將農桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_______進行篩選，此物質屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對沒有分化的_______團，經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)叮以分散成胚性細胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細胞可以發(fā)育成_______；再繼續(xù)發(fā)育成轉基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及_______等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。29、番茄果實在成熟的過程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細胞壁破損，從而使果實變紅變軟，但不利于保鮮?？茖W家利用基因工程得到轉基因番茄，大大延長果實保質期。操作流程如下，回答下列問題：

（1）利用RT—PCR技術即逆轉錄—多聚酶鏈式反應制備PG基因，最好從番茄的_____細胞中提取mRNA，此技術所需要的酶主要有_____。

（2）據(jù)圖可知，轉基因番茄主要通過抑制PG基因的_____過程；使PG合成量減少，從而延長果實保質期。

（3）圖中的農桿菌。能夠在含_____的培養(yǎng)基中生存，而在含_____的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉化的所需農桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因導入番茄細胞的方法稱為_____。要檢測感染農桿菌后的番茄細胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標記的PG基因的單鏈作為探針進行檢測，理由是_____。

（5）在將轉化的番茄細胞通過植物組織培養(yǎng)技術形成番茄幼苗過程中，培養(yǎng)基_____（填“要”或“不要”）添加有機營養(yǎng)物質，原因是_____。評卷人得分五、綜合題(共2題，共16分)30、閱讀下列材料；回答問題。

獲得2020年諾貝爾化學獎的CRISPR-Cas系統(tǒng)是一種高效的基因編輯技術。其中CRISPR-Cas9體系在作物遺傳育種研究中應用較為廣泛（原理如圖）。

CRISPR-Cas9體系是由靶基因的向導RNA和Cas9蛋白構成的復合體。向導RNA約為20個堿基；在基因組中負責尋找靶基因并與其結合；Cas9蛋白在向導RNA的引導下切割靶基因，使DNA雙鏈斷裂產(chǎn)生平末端。在隨后DNA自我修復的過程中，容易隨機引起一些堿基對的插入或缺失，導致基因功能改變。

近年來；人們對長粒香型稻米的需求量越來越大，研究者利用CRISPR-Cas9體系，改造東北廣泛種植的“龍粳”稻米，使其在保留了原來抗倒伏；耐寒性強等特點的同時，具備了長粒、香味濃厚的特點。通過研究，科學家已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多與粒長相關的基因，例如GS9基因，以及與稻米香味相關的Badh2基因。當破壞GS9基因的正常表達時，稻米表現(xiàn)出粒長增加的特性；當破壞Badh2基因的正常表達時，稻米產(chǎn)生更多的香味。因此，科學家利用CRISPR-Cas9技術在“龍粳”稻中沉默GS9和Badh2基因獲得了更長更香的稻米。

但是CRISPR-Cas的功能不僅限于切割靶基因。一些研究者進行如下設計：使Cas蛋白的剪切域失活；將新的蛋白與該蛋白融合，這樣Cas9可被用于將這些蛋白運輸至特定的DNA序列。舉例來說，Cas與轉錄激活因子融合，將RNA聚合酶帶到目標位置，以啟動基因的轉錄。Cas與脫氨酶融合，能使特定的DNA堿基變異——使胸腺嘧啶（T）取代胞嘧啶（C），這種精準基因編輯意味著我們能將致病突變轉變?yōu)橐粋€健康版本的基因，或將終止密碼子引入特定部位。涌現(xiàn)出來的這些新想法表明，目前取得的成果可能只是CRISPR-Cas應用潛力的冰山一角，無論接下來取得什么進展，CRISPR-Cas掀起的革命遠沒有結束。

（1）科學家利用CRISPR-Cas9體系構建了T0代水稻，水稻中同時含有GS9基因的向導RNA和Cas9蛋白復合體及_________復合體，其中，2個向導RNA依據(jù)_________原則尋找相應的靶基因，靶基因在Cas9蛋白的作用下被剪切，Cas9蛋白在這個過程中發(fā)揮了基因工程工具中_________酶的功能。

（2）由文中信息可知，為獲得粒更長、香味更濃厚的水稻，可通過將T0代植株__________的方法，獲得純合的T1代水稻突變體植株。提取T1代突變體植株大DNA進行測序；挑選出GS9基因和Badh2基因突變的純合子，如下圖：

Cas9蛋白在向導RNA的引導下切割GS9基因和Badh2基因，在隨后DNA自我修復的過程中，GS9基因和Badh2基因中_____________________；導致GS9和Badh2基因沉默。

（3）閱讀材料可知，CRISPR-Cas9的功能有__________________________。31、下圖是基因工程方法培育抗蟲棉的過程。請回答相關問題：

(1)從蘇云金芽孢桿菌的DNA上獲取抗蟲基因，需要用到的工具是_______，此工具主要是從______生物中分離純化出來的，它能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個脫氧梭苷酸之間的______鍵斷開。

(2)構建重組質粒時，常用Ti質粒作為載體，是因為Ti質粒上具有______它能把目的基因整合到受體細胞______。

(3)E過程是利用______技術完成的，要確定抗蟲基因導入棉花細胞后，是否賦予了棉花抗蟲特性，在個體水平上還需要做______實驗。

(4)將目的基因導入植物細胞，除采用上圖中的方法外，還可采用_____法和_____法。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、B【分析】【分析】

胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術。包括體外受精；胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術。胚胎工程的許多技術；實際是在體外條件下，對動物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進行的模擬操作。

【詳解】

A；稀有動物可以通過胚胎工程中的體外受精；胚胎移植繁殖數(shù)量更多的后代，完成種族的延續(xù)。把藥物基因與動物的乳腺細胞中的調控元件組合導入動物受精卵中，就可以作為生物制藥反應器，A正確；

B；人工受精不需要對精子進行獲能處理；B錯誤；

C；早期胚胎培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中都需要加入血清或血漿；C正確；

D；經(jīng)過同情發(fā)情處理；使得受體與供體的生理狀態(tài)基本相同，則被移植胚胎繼續(xù)正常發(fā)育，D正確。

故選B。2、D【分析】【詳解】

先利用特定的抗原注射小鼠；再從小鼠脾臟中分離B淋巴細胞，抗原主要成分是蛋白質，蛋白質飼喂小鼠，水解失去活性，A錯誤；

雜交瘤細胞具有漿細胞與癌細胞的所有遺傳物質；獲得的融合細胞包括雜交瘤細胞；漿細胞自身融合型、癌細胞自身融合型，B錯誤；

選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細胞還需通過抗體檢測后才能通過體外或體內培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體；C錯誤；

單克隆抗體制備最廣泛的用途是用作體外診斷試劑，具有準確、快速等優(yōu)點，D正確。3、D【分析】【分析】

DNA的粗提取的步驟主要有：實驗材料的選??；破碎細胞、獲得含DNA的濾液、去除濾液中的雜質、DNA的析出與鑒定。

【詳解】

A；豬紅細胞沒有細胞壁；可用蒸餾水漲破細胞的方法從豬紅細胞中提取蛋白質，A正確；

B；透析法分離蛋白質的依據(jù)是蛋白質不能通過半透膜；小分子雜質可以通過，B正確；

C；雞血細胞中含有豐富的DNA和血紅蛋白；可以用雞血作為血紅蛋白和DNA提取的良好材料，C正確；

D；加入木瓜蛋白酶會將蛋白質水解；D錯誤。

故選D。4、B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞的全能性；其過程是：離體的植物組織；器官或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發(fā)育植株（新植體）。

【詳解】

A；離體的紅豆杉組織細胞通過纖維素酶和果膠酶分散處理后直接進行懸浮培養(yǎng)；A錯誤；

B；懸浮培養(yǎng)液中細胞脫分化形成愈傷組織；大多數(shù)細胞在形態(tài)上大小相差不大，細胞的核-質比率大，胞質濃厚，液泡化程度高，B正確；

C；脫分化過程一般細胞分裂素與生長素含量比值小于1；C錯誤；

D；植物細胞懸浮培養(yǎng)中植物細胞生長沒有接觸抑制；但是受營養(yǎng)物質的影響，不可能無限擴大培養(yǎng)，D錯誤。

故選B。5、D【分析】【分析】

傳統(tǒng)發(fā)酵技術是指直接利用原材料中天然存在的微生物；或利用前一次發(fā)酵保存下來的面團；鹵汁等發(fā)酵物中微生物進行發(fā)酵、制作食品的技術。

【詳解】

A；制作果酒時；未對發(fā)酵裝置進行消毒處理，可能會有雜菌污染，造成發(fā)酵失敗，A正確；

B；制作果醋時；利用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是需氧微生物，培養(yǎng)的條件為30-35℃，所以通入氧氣不足或溫度過低，造成發(fā)酵失敗，B正確；

C；制作腐乳時；裝瓶后未將瓶口密封，造成雜菌污染，造成豆腐腐敗變質，C正確；

D；制作泡菜時；鹽具有抑制微生物生長的作用，放鹽的比例過小，會造成泡菜腐爛發(fā)霉，D錯誤。

故選D。6、B【分析】【分析】

該圖是植物原生質體融合以及植物細胞培養(yǎng)過程圖；①表示利用化學或物理方法融合細胞，②表示正在融合的細胞，③表示雜種細胞，④表示雜種植株。植物組織培養(yǎng)：在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官；組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。

【詳解】

A；在培育高產(chǎn)耐鹽植株時；若使用化學方法誘導甲、乙原生質體融合，則①過程可選用聚乙二醇作為誘導劑，A錯誤；

B；甲、乙原生質體經(jīng)誘導融合后可能形成甲和甲融合、乙和乙融合及甲和乙融合的細胞；且②為尚未再生出細胞壁的原生質體，不是細胞，B正確；

C；愈傷組織到④只需經(jīng)過再分化的過程；C錯誤；

D；對目的植株進行篩選應從植物性狀水平篩選；而運用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)屬于細胞水平，故應當用高鹽環(huán)境對目的植株進行篩選，D錯誤。

故選B。7、C【分析】【分析】

蛋白質工程指以蛋白質的結構規(guī)律及其與生物功能的關系作為基礎；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質進行基因改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。

【詳解】

蛋白質工程的基本流程是：③預期蛋白質功能→①預期蛋白質分子結構組成→④根據(jù)氨基酸序列推出脫氧核苷酸序列→②合成DNA。綜上所述；C正確，ABD錯誤。

故選C。8、B【分析】【分析】

基因工程的操作步驟：(1)目的基因的獲取；方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成；(2)基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟。基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；(3)將目的基因導入受體細胞；根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣，將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法；(4)目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技術②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA-分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質：抗原-抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；綠色熒光蛋白基因gfp為DNA片段；可用PCR技術特異性地快速擴增，A正確；

B；將綠色熒光蛋白基因gfp插入到了小鼠p16基因的下游；使兩個基因“融合”，因此p16基因和gfp基因共用了一個啟動子，它們之間關聯(lián)表達，B錯誤；

C；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；C正確；

D；胚胎移植時；應選擇處于桑葚胚或囊胚期的胚胎，D正確。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)9、A:C【分析】【分析】

（1）動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性；細胞的增殖；誘導手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結果產(chǎn)生雜交細胞，主要用于制備單克隆抗體。

（2）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫理：B淋巴細胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細胞融合原理：利用病毒對宿主細胞的穿透性使B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合；③動物細胞培養(yǎng)技術：對雜交瘤細胞進行體內；體外培養(yǎng)。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細胞：①免疫B細胞（漿細胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無限增殖；②骨髓瘤細胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

【詳解】

A；誘導動物細胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒（如滅活的仙臺病毒）等；A正確；

B；兩兩融合的細胞包括免疫B細胞與免疫B細胞融合的具有同種核的細胞、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合的具有同種核的細胞、免疫B細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交瘤細胞；骨髓瘤細胞雖然能無限增殖，但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶，免疫B細胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶，但不具有無限增殖的本領，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的具有同種核的細胞都無法生長，只有雜交瘤細胞才能生長，B錯誤；

C；因每個免疫B細胞只分泌一種特異性抗體；因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細胞所分泌的抗體，不一定都是人類所需要的，還需要進一步通過專一抗體陽性檢測，把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細胞篩選出來，C正確；

D；動物細胞融合是以細胞膜的流動性為基礎的；D錯誤。

故選AC。

【點睛】10、A:B【分析】【分析】

分析圖解：異種克隆大熊貓的培育首先通過核移植技術獲得重組細胞；然后經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)獲得異種重構囊胚，再利用胚胎移植技術將重構囊胚移植如代孕兔體內。

【詳解】

A；科學家通過對母兔注射促性腺激素；進行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細胞，A錯誤；

B；異種重構囊胚在體外培養(yǎng)時；往往需要在培養(yǎng)液中加入抗生素，從而保證無毒無菌環(huán)境，B錯誤；

C；囊胚由滋養(yǎng)層細胞和內細胞團構成；其中滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育為胎盤和胎膜，內細胞團將來發(fā)育成胚胎的各種組織，C正確；

D；目前；異種重構囊胚在代孕兔的子宮內能正常著床，但是不能正常發(fā)育生產(chǎn)出大熊貓幼仔，很可能是代孕兔提供的營養(yǎng)物質不能讓異種重構囊胚正常發(fā)育，D正確。

故選AB。

【點睛】11、A:D【分析】【分析】

PCR技術：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

2；原理：DNA復制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR擴增依據(jù)的是DNA分子雙鏈復制的原理；A正確；

B；進行PCR擴增需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B錯誤；

C；DNA的兩條鏈反向平行；子鏈從引物的3′端開始延伸，則利用圖中的引物①、④組合可擴增出兩側的未知序列，C錯誤；

D；通過與受體細胞的基因組序列比對；即可確定T-DNA的插入位置，D正確。

故選AD。

【點睛】12、A:D【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質；根據(jù)物理性質分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質和氧氣的要求。

2；微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素；瓊脂是凝固劑的一種，并不是營養(yǎng)物質，在培養(yǎng)液中加入瓊脂可以使液體培養(yǎng)基成為瓊脂固體培養(yǎng)基，A正確；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接種都采用了涂布平板法；B錯誤；

C、隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，普切明酸與Fe3+的結合增強；抑菌圈的紅色加深，C錯誤；

D、普切明酸與Fe3+形成紅色復合物，但隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，抑菌圈變窄，說明FeCl3能降低桔梅奇酵母對白地霉的防治效果；D正確。

故選AD。13、D【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞；制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

【詳解】

A；在動物細胞培養(yǎng)的過程中；當出現(xiàn)接觸抑制后，細胞克隆停止增殖，A正確；

B；在細胞分裂的過程中；可能會發(fā)生基因突變，因此，克隆細胞與接種的細胞的遺傳信息不一定相同，B正確；

C；胰蛋白酶可使細胞分散成單個；從而利于計數(shù)，C正確；

D；需采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)才能形成細胞克??；D錯誤。

故選D。14、A:C:D【分析】微生物常見的接種方法（稀釋涂布平板法可用于微生物的計數(shù)）：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；平板劃線無法得知稀釋倍數(shù)；不能用于活菌計數(shù)，故統(tǒng)計洗手前手部細菌的數(shù)量，選擇的接種方法是稀釋涂布平板法，A錯誤；

B；除圖中操作外；還需要設置一組未接種的空白培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，以驗證培養(yǎng)基是否被雜菌污染，B正確；

C；由于當兩個或多個細胞連在一起時；平板上顯示的只是一個菌落，故培養(yǎng)基上的一個菌落可能來源于樣品稀釋液中的一個、甚至幾個活菌，C錯誤；

D；由于菌落肉眼可見；故初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，可用肉眼觀察菌體的形態(tài)特征，D錯誤。

故選ACD。15、A:B:C【分析】【分析】

1；骨髓瘤細胞為無限增殖的細胞；分裂能力強，制備單克隆抗體的過程中還需該雜交細胞具備分泌特異性抗體的功能，而漿細胞為能夠分泌抗體的細胞，故與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞為能分泌抗體的漿細胞。

2；骨髓瘤細胞與B淋巴細胞在融合的過程中可能會出現(xiàn)多種融合結果；如骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合，B淋巴細胞與B淋巴細胞融合，而實驗需要的是骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合的細胞，需要用選擇性培養(yǎng)基進行篩選，但只能篩選出能雜交瘤細胞，而要篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞則需要進行專一性抗體檢測。

【詳解】

A；與骨髓瘤細胞融合的B淋巴細胞取自脾臟；不一定是能分泌抗體的漿細胞，A錯誤；

B；骨髓瘤細胞與B淋巴細胞在融合的過程中可能會出現(xiàn)多種融合結果；如骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合，B淋巴細胞與B淋巴細胞融合，而實驗需要的是骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合的細胞，需要用選擇性培養(yǎng)基進行篩選，但是只能篩選出能雜交瘤細胞，而要篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞則需要進行專一性抗體檢測，B錯誤；

C；抗體為分泌蛋白；需要內質網(wǎng)和高爾基體對其進行加工，大腸桿菌為原核生物，無高爾基體和內質網(wǎng)，為獲得結構正確的嵌合抗體，受體細胞不應該選用大腸桿菌，C錯誤；

D；結合題干“鼠源抗體具有外源性；會被人體免疫系統(tǒng)當作抗原而清除。用人抗體的C區(qū)替換鼠源抗體的C區(qū)，保留鼠單抗的V區(qū)，可構建人一鼠嵌合抗體”可知，該抗體不是原本的鼠源抗體，保留了其V區(qū)，但是其中還有一部分來自于人本身，使得人一鼠嵌合抗體在保留抗體特異性的同時外源性下降，D正確。

故選ABC。16、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發(fā)生基因的選擇性表達，A錯誤；

B；實驗至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設計5個濃度水平的實驗，則細胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細胞分裂素的最高濃度M應設為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素；D正確。

故選ABD。17、B:C:D【分析】【分析】

分析題干：質粒上的DNA分子為環(huán)狀；某種限制性內切酶完全酶切環(huán)狀質粒后，出現(xiàn)3條帶（相同分子量的為一條帶），即3種不同分子量DNA（至少被切割成3條DNA片段），因此環(huán)狀質粒上至少有3個酶切位點。

【詳解】

A；由分析可知；該質粒上至少含有3個酶切位點，A錯誤；

B；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)；帶負電，DNA在一定的電場力作用下，在凝膠中向正極泳動，DNA分子越大，泳動越慢，因此瓊脂糖凝膠電泳可以用來分離DNA，B正確；

C；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)；帶負電，因此外加電場時，DNA向正極泳動，C正確；

D；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團呈離子狀態(tài)；帶負電，若瓊脂糖帶負電荷，使得電場力增強，有利于DNA向正極泳動，D正確。

故選BCD。三、填空題(共8題，共16分)18、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)19、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.無機鹽20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠緣雜交的不親和性細胞遺傳細胞免疫、21、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發(fā)酵過程中充入無菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細菌，它的最適生長溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定；將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化技術一般包括化學結合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學結合法和物理吸附法固定化；而細胞多采用包埋法固定化。

【點睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學生理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡結構，屬識記內容。【解析】18－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落伊紅美藍黑色包埋法化學結合法物理吸附法包埋法22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】0．1423、略

【分析】【分析】

微生物實驗中常用的滅菌方法有干熱滅菌；高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌；其中對于培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌，對于接種環(huán)一般用灼燒滅菌，對于培養(yǎng)皿等可以用干熱滅菌。培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中需要倒置培養(yǎng)，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法，即將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)，當菌落長成后將試管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6個月都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉移到新鮮的培養(yǎng)基上；對于需要長期保存的菌種可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中裝入1mL甘油后滅菌，將1mL培養(yǎng)的菌液轉移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后放在-20℃的冷凍箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸餾法、壓榨法和萃取法，如玫瑰精油的化學性質穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機溶劑，能隨水蒸氣一同蒸餾，常采用蒸餾法提??；對于如橘皮精油，其主要儲存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，又會產(chǎn)生原料焦糊問題，所以一般采用壓榨法提取。

【詳解】

（1）微生物培養(yǎng)中常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌法；灼燒滅菌法、干熱滅菌法等。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時一般需要將平板倒置；可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，因此單個細菌在平板上會形成菌落，通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物。

（2）從雞糞便取樣；經(jīng)選擇培養(yǎng)后，如果要將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上，需要經(jīng)過一系列梯度稀釋。對獲得的沙門氏菌進行長期保存常采用甘油管藏法。

（3）根據(jù)題干信息；沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對熱抵抗力不強，在60℃的條件下15min就能被殺死，因此為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中可采取低溫儲存；高溫加工方法進行處理。

（4）根據(jù)題意；肉桂精油不溶于水；易溶于有機溶劑且易揮發(fā)，故可采用水蒸氣蒸餾法進行提取，提取過程中蒸餾的溫度、時間都會影響精油品質。

【點睛】

本題主要考查現(xiàn)代生物科技的原理和運用，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結構的能力，能運用所學知識，準確判斷問題的能力?！窘馕觥孔茻郎缇?、高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌法倒置在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征梯度稀釋甘油管藏低溫儲存、高溫加工水蒸氣蒸餾蒸餾的溫度、時間24、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規(guī)模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤?！窘馕觥垮e誤25、略

【分析】【詳解】

致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，從一個宿主轉移到另一個宿主，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。同時近年來由于溫室效應加劇，也會使致病微生物的繁殖周期變短，可能會使危害性更大，因此我們需要積極開展科學研究，掌握防范的措施和防范，實現(xiàn)最好的防護，目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用。四、實驗題(共4題，共12分)26、略

【分析】【分析】

自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求；到相應的環(huán)境中去尋找，要分離尿素細菌應該使用只含有尿素為唯一氮源培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)基其他細菌不能生存，存活下來的細菌則是可以分解尿素。

【詳解】

（1）自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求；到相應的環(huán)境中去尋找，要獲得分解尿素的細菌，應到含尿素較多的土壤中去取樣，圖2中培養(yǎng)基為微生物提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的是尿素；

（2）甲為液體培養(yǎng)基；乙為固體培養(yǎng)基，唯一的區(qū)別在于甲培養(yǎng)基內無瓊脂；

（3）為了保證結果的準確性；一般應選擇菌落數(shù)在30-300的平板進行計數(shù)，在30-300范圍內的菌落數(shù)說明稀釋比較成功；

（4）酚紅遇堿變紅；合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強；

（5）該小組采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計土壤溶液中活菌的數(shù)目時；統(tǒng)計的菌落數(shù)比活菌的實際數(shù)目低，是因為當兩個或多個菌落連在一起時，只能統(tǒng)計一個菌落，細菌還可以使用顯微鏡直接計數(shù)。

【點睛】

熟記并理解微生物的實驗室培養(yǎng)、微生物的分離與計數(shù)等相關基礎知識、形成清晰的知識網(wǎng)絡，在此基礎上從題意中提取信息并進行作答。【解析】含尿素較多的土壤中葡萄糖尿素甲中培養(yǎng)基無瓊脂30~300的平板（則說明稀釋操作比較成功）合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強低顯微鏡直接計數(shù)27、略

【分析】【分析】

1；果酒制作過程中的相關實驗操作：

（1）材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄；榨汁前先將葡萄進行沖洗，除去枝梗。

（2）滅菌：①榨汁機要清洗干凈；并晾干；②發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機榨取葡萄汁。

（4）發(fā)酵：①將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶；要留要大約1/3的空間，并封閉充氣口；②制葡萄酒的過程中，將溫度嚴格控制在18℃～25℃，時間控制在10～12d左右，可通過出料口對發(fā)酵的情況進行，及時的監(jiān)測。③制葡萄醋的過程中，將溫度嚴格控制在30℃～35℃，時間控制在前7～8d左右，并注意適時通過充氣口充氣。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）釀造葡萄酒時；在葡萄榨汁前，葡萄要先進行進行沖洗，然后再除去枝梗，可以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。

（2）榨汁機要清洗干凈，并晾干，發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒，再裝入葡萄汁，將發(fā)酵裝置放在18～23℃環(huán)境中，發(fā)酵過程中由于酵母菌呼吸作用會產(chǎn)生二氧化碳，因此每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量二氧化碳。裝置中d處設計成彎曲形狀利用了巴斯德的鵝頸瓶的原理，即為了防止排氣時空氣中微生物的污染。

（3）酵母菌發(fā)酵的產(chǎn)物中會產(chǎn)生酒精；利用橙色的重鉻酸鉀可以檢測酒精的存在，酒精遇到橙色的重鉻酸鉀會變?yōu)榛揖G色，從而鑒定酒精的存在。

（4）溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件；20℃左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為30℃～35℃，因此要將溫度控制在30℃～35℃。醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r需要氧的參與，因此要適時向發(fā)酵裝置中充氣，需要打開a閥通入空氣。

【點睛】

本題考查果酒和果醋的制作過程的知識點，要求學生掌握果酒的制作的原理、過程以及發(fā)酵過程中的注意事項是該題的重點，識記果酒的制作過程是解決重點的關鍵。理解并識記果醋的發(fā)酵過程和原理是解決第（4）問的關鍵?！窘馕觥繘_洗CO2防止排氣時空氣中微生物的污染重鉻酸鉀灰綠30～35℃氣閥a醋酸菌是好氧細菌，酒精轉變?yōu)榇姿嵝枰鯕獠拍苓M行28、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質——抗原—抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動子是RNA聚合酶識別并結合的位點；能驅動基因的轉錄；如將強啟動子插入到玉米葉綠體某基因內部，則會破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達，則需要強啟動子和P基因不被破壞，因此應優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質粒切開后構建重組表達載體。農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實驗中的作用是將強啟動子和P基因帶入玉米細胞并整合到玉米細胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細胞染色體DNA上，因此將農桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入G418進行篩選，此物質屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質在葉綠體和線粒體中合成，其中葉綠體是光合作用的場所，線粒體是細胞有氧呼吸的主要場所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代謝）受到干擾，從而引起植物細胞死亡。

（3）愈傷組織是一種相對沒有分化的薄壁細胞團；經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以分散成胚性單細胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細胞可以發(fā)育成胚狀體，再繼續(xù)發(fā)育成轉基因玉米株系。

（4）影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及玉米的基因型等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是防止雜菌污染?！窘馕觥?1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶將強啟動子和P基因帶入玉米細胞并整合到玉米細胞的染色體DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代謝

(3)薄壁細胞胚狀體。

(4)玉米的基因型防止雜菌污染29、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒