…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年滬科版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是（）

A.用移液管吸取菌液進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，可用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻B.對(duì)4號(hào)試管中的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)必然為5號(hào)試管的10倍C.5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1．7×109D.該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要低2、為研究治療性克隆技術(shù)能否用于帕金森病的治療；科研人員利用人帕金森病模型鼠進(jìn)行如圖實(shí)驗(yàn)，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.過(guò)程①中通常選擇MⅡ期的卵母細(xì)胞去除細(xì)胞核B.過(guò)程②的關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)C.過(guò)程③對(duì)受體小鼠需注射免疫抑制劑以抑制其細(xì)胞免疫功能D.克隆特定疾病模型的動(dòng)物，可以為該疾病的致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助3、生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題是社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒性別B.基因篩檢可能幫助人類盡早預(yù)防全部遺傳性疾病，但也會(huì)引發(fā)基因歧視問(wèn)題C.我國(guó)對(duì)待生物武器的態(tài)度明確而堅(jiān)定，應(yīng)嚴(yán)禁使用生物武器D.人們對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)議集中在食物安全、生物安全和環(huán)境安全等方面4、鈣果又名歐李，果實(shí)中含有多種對(duì)人體有益的礦物質(zhì)元素，其鈣元素的含量比一般的水果都高。鈣果用途廣泛，葉可做茶，花、仁、根能制作中藥，果實(shí)可加工成果汁、果酒、果醋等產(chǎn)品。下列說(shuō)法正確的是（）A.利用酵母菌進(jìn)行鈣果果醋發(fā)酵過(guò)程中溫度應(yīng)控制在18～30℃B.在鈣果果酒發(fā)酵期間，為保持無(wú)氧條件，不能擰松發(fā)酵瓶的蓋子C.制作鈣果果酒、果醋時(shí)，應(yīng)將原料鈣果果汁進(jìn)行高壓蒸汽滅菌D.鈣果果酒的顏色是鈣果果皮和果肉中的色素進(jìn)入發(fā)酵液形成的5、如圖表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良的過(guò)程，據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是（）

A.①過(guò)程需用纖維素酶和果膠酶的混合物處理B.②過(guò)程能定向誘導(dǎo)原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變C.③過(guò)程中葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能D.④過(guò)程需用適宜配比的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素處理6、有3種限制酶對(duì)DNA分子的識(shí)別序列和剪切位點(diǎn)（圖中箭頭所示）依次為：限制酶1：﹣﹣↓GATC﹣﹣；限制酶2：﹣﹣CCGC↓GG﹣﹣；限制酶3：﹣﹣G↓GATCC﹣﹣。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.不同的限制酶有不同的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)B.限制酶2和限制酶3識(shí)別的序列都包含6個(gè)堿基對(duì)C.限制酶1和限制酶3剪出的黏性末端相同D.能夠識(shí)別和切割RNA分子的酶只有限制酶27、下列有關(guān)限制酶和DNA連接酶的敘述正確的是（）A.限制酶將DNA雙鏈切割成兩條單鏈B.同種限制酶既可以切割含目的基因的DNA片段又可以切割質(zhì)粒，因此不具有專一性C.序列—CTAG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端相同D.E．coliDNA連接酶能催化平末端和黏性末端的連接8、PCR作為一個(gè)體外酶促反應(yīng)，其效率和特異性取決于兩個(gè)方面，一是引物與模板的特異性結(jié)合，二是多聚酶對(duì)引物的延伸。引物設(shè)計(jì)的總原則是提高擴(kuò)增的效率和特異性。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.引物長(zhǎng)度過(guò)短，特異性降低B.兩種引物之間不能發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)C.引物的G—C含量越高，越利于目標(biāo)DNA的擴(kuò)增D.可在引物的5'端添加特定限制酶的識(shí)別序列評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)9、下圖1表示的是某DNA分子上的一些限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)。用XhoI和SalI兩種限制酶分別處理該DNA分子；經(jīng)電泳分離結(jié)果如圖2。以下敘述正確的是（）

A.所用兩種限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的核苷酸序列可能相同B.限制酶通過(guò)作用于磷酸二酯鍵和氫鍵得到相應(yīng)產(chǎn)物C.根據(jù)泳道②電泳示意圖可知使用的限制性內(nèi)切酶為XhoID.用兩種限制酶同時(shí)處理后進(jìn)行電泳，條帶可多于6條10、農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán)；并以此環(huán)為模板，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說(shuō)法正確的是（）

A.進(jìn)行PCR擴(kuò)增的依據(jù)是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理B.進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要的酶有解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶C.利用圖中的引物②、③組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列D.通過(guò)與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì)，可確定T-DNA的插入位置11、下列關(guān)于土壤中纖維素分解菌的分離與計(jì)數(shù)，敘述正確的是（）A.可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌B.培養(yǎng)基中應(yīng)含大量的葡萄糖或蔗糖提供生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)C.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌D.菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基12、格瓦斯是一種廣泛流傳于東歐的低度酒精飲料。制作過(guò)程：①將發(fā)酵面包制成的面包液、糖化液裝入發(fā)酵罐，加入保加利亞乳酸菌、酵母菌進(jìn)行發(fā)酵；②發(fā)酵液經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的過(guò)濾；③過(guò)濾液經(jīng)5～8s迅速升溫到127℃進(jìn)行高溫殺菌，冷卻后即可飲用。酵母菌產(chǎn)生酒精的能力差異較大，其產(chǎn)酒精能力與其耐受酒精的能力有關(guān)。下列說(shuō)法正確的是（）A.保加利亞乳酸菌和酵母菌都能同時(shí)進(jìn)行有氧呼吸和無(wú)氧呼吸B.面包液、糖化液可為微生物的生長(zhǎng)提供碳源、氮源以及水和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)C.若想得到產(chǎn)酒精能力比較強(qiáng)的酵母菌，可向培養(yǎng)基中添加較高濃度的酒精進(jìn)行篩選D.過(guò)程③中瞬時(shí)高溫滅菌可使微生物蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)迅速破壞，從而達(dá)到滅菌效果13、我國(guó)首例綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬的培育過(guò)程如圖所示，其中字母代表結(jié)構(gòu)或生物，數(shù)字代表過(guò)程，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.為了①和②的順利完成，需要用滅活的病毒對(duì)細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)B.將C的細(xì)胞核去掉，實(shí)質(zhì)上是去除紡錘體—染色體復(fù)合物C.為避免將E植入F時(shí)產(chǎn)生排斥反應(yīng)，移植前應(yīng)給F注射免疫抑制劑D.移入F的桑葚胚要經(jīng)歷囊胚、原腸胚等階段才能形成豬的幼體14、長(zhǎng)春花是野生花卉，其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。研究人員利用已免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞通過(guò)雜交技術(shù)生產(chǎn)出能夠同時(shí)特異性識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體，制備過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.①過(guò)程要多次注射抗原，其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的抗體B.經(jīng)③過(guò)程獲得的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生抗癌胚抗原的特異性抗體C.圖中“?”處只能使用PEG融合法和電融合法來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞融合D.制備雙特異性抗體的目的是使長(zhǎng)春堿能定向地作用于癌細(xì)胞15、野生型大腸桿菌能夠在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌則不能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，需要在培養(yǎng)基中添加某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。研究人員用影印培養(yǎng)法對(duì)誘變產(chǎn)生的營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變體進(jìn)行篩選，方法如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.母板培養(yǎng)基與基本培養(yǎng)基的成分相同B.用稀釋涂布平板法將菌液接種在母板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)C.作為接種工具的“印章”需經(jīng)過(guò)滅菌后才能印在長(zhǎng)有菌落的母板上粘取菌種D.母板培養(yǎng)基上的菌落4、5、6為營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌繁殖而來(lái)16、研究人員用無(wú)機(jī)鹽、瓊脂和石油配制的培養(yǎng)基從被石油污染的土壤中篩選出了一種石油降解菌，下列相關(guān)表述正確的是（）A.培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)微生物的生長(zhǎng)越有利B.這種培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基C.利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤D.相對(duì)于未被污染的土壤，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌17、下圖為科學(xué)家培育克隆猴的基本步驟，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性B.對(duì)A猴卵母細(xì)胞去核是為了保證克隆猴的核遺傳物質(zhì)都來(lái)自B猴C.必須將重組細(xì)胞培育到一定程度后才能植入代孕動(dòng)物體內(nèi)D.A猴的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)B猴體細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)18、哺乳動(dòng)物核移植可以分為_(kāi)_____核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。19、在課題1中，我們學(xué)習(xí)了稀釋涂布平板法。這一方法常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中_________________的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，____________________。20、第一步：______21、為了避免外源DNA等因素污染，PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行_____________。而使用的緩沖液并在__________℃存儲(chǔ)。22、在____________的溫度范圍內(nèi)，DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)解體，雙鏈分開(kāi)，這過(guò)程成為_(kāi)_________。23、PCR技術(shù)的DNA體外復(fù)制環(huán)境有DNA解旋酶、耐熱DNA聚合酶、DNA母鏈、4種脫氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能夠從引物的________端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物長(zhǎng)度通常為_(kāi)___個(gè)核苷酸。24、隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的飛速發(fā)展；轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物相繼問(wèn)世，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物培育過(guò)程中都要用到的生物技術(shù)包括______。

（2）核移植是動(dòng)物克隆的第一步，包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植，其中后者更易成功，原因是______。核移植常用處于______（填時(shí)期）的______為受體細(xì)胞。

（3）在“試管動(dòng)物”的培育過(guò)程中，常采用______（填激素名稱）處理可使雌性個(gè)體一次排出多枚卵母細(xì)胞。從雄性個(gè)體采集的精子需______后才能進(jìn)行受精作用；防止多精入卵的兩道屏障依次為_(kāi)_____；卵細(xì)胞膜反應(yīng)。

（4）若考慮環(huán)境承載力，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物不宜放置到自然環(huán)境中，這遵循了生態(tài)工程的______原理。25、生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲(chóng)等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對(duì)植物無(wú)害。（選擇性必修3P111）()評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共8分)26、轉(zhuǎn)基因生物可能會(huì)破壞生態(tài)平衡（______）A.正確B.錯(cuò)誤27、蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，主要是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級(jí)結(jié)構(gòu)，而這種高級(jí)結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜。（選擇性必修3P95）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)28、鼠傷寒沙門(mén)氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培養(yǎng)基（含微量組氨酸）上生長(zhǎng)形成菌落，而突變型的組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株（his-）不能合成組氨酸；無(wú)法在基本培養(yǎng)基上形成菌落。利用his菌株可檢測(cè)環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑（誘發(fā)his-菌株突變）?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1).基本培養(yǎng)基的成分主要包括_____。制備基本固體培養(yǎng)基的操作：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。倒平板時(shí)應(yīng)注意：_____。

(2).檢測(cè)是否存在化學(xué)致癌劑時(shí)，用_____法將his-菌株接種于基本培養(yǎng)基上，使其密集均勻分布在平板上，將浸泡過(guò)待測(cè)化合物的濾紙片貼于平板中央。若培養(yǎng)基滅菌合格，則可能影響該檢測(cè)結(jié)果的兩個(gè)重要因素是_____。若圖A為對(duì)照組，B為實(shí)驗(yàn)組，則A組濾紙片的處理方法是_____。經(jīng)正確檢驗(yàn)后，結(jié)果如B所示，則實(shí)驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論為_(kāi)____。

(3).使用過(guò)的培養(yǎng)基在丟棄之前應(yīng)做的處理及目的是_____。29、金黃色葡萄球菌是一種常見(jiàn)的病原菌；具有高度耐鹽化的特性，在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周?chē)募t細(xì)胞，使其褪色。某研究小組進(jìn)行了測(cè)定某處土壤中金黃色葡萄球菌數(shù)量的實(shí)驗(yàn)?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)實(shí)驗(yàn)小組選用含7．5%NaCl的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作步驟是_________（用文字和箭頭表示）。培養(yǎng)基中加入7．5%NaCl有利于金黃色葡萄球菌的篩選，原因是_________。

(2)在制作血平板時(shí)需要等平板冷卻后，方可加入血液，以防止_________。在血平板上，金黃色葡萄球菌菌落的周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)_________。

(3)土壤是微生物天然的培養(yǎng)基，測(cè)定土壤中金黃色葡萄球菌的數(shù)量時(shí)，一般采用_________法。為了保證獲得菌落數(shù)在_________之間適于計(jì)數(shù)的平板，需要選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)。測(cè)定土壤中金黃色葡萄球菌、放線菌和真菌的數(shù)量時(shí)，稀釋倍數(shù)較低的是_________。實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，其原因是_________。30、三氯生是一種抑菌物質(zhì)，具有優(yōu)異的貯存穩(wěn)定性，可以替代抗生素用于基因工程中篩選含目的基因的受體細(xì)胞。已知fabV（從霍亂弧菌中發(fā)現(xiàn)的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生。

(1)通過(guò)PCR方法擴(kuò)增fabV基因時(shí)，先要根據(jù)_____設(shè)計(jì)兩種特異性引物序列，以確保Taq酶從引物的3′端延伸DNA鏈，至少需要經(jīng)過(guò)_____次擴(kuò)增才能獲得8個(gè)雙鏈等長(zhǎng)的目的基因。

(2)基因工程的核心步驟是_____；某科研團(tuán)隊(duì)將可以受溫度調(diào)控的基因插入上述選出的重組質(zhì)粒中，構(gòu)建了溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒（如圖2）。其中C基因在低溫下會(huì)抑制P2，R基因在高溫下會(huì)抑制P1，如果將lacZ基因和GFP（綠色熒蛋白）基因插入圖2質(zhì)粒中，使得最后表現(xiàn)為低溫下只表達(dá)GFP蛋白，而高溫下只表達(dá)lacZ蛋白。則lacZ基因插在_____之間，GFP基因的插入位置及注意點(diǎn)是_____。

(3)若以大腸桿菌為受體細(xì)胞，篩選上述插入了GFP基因的受體細(xì)胞的依據(jù)是：大腸桿菌能在含_____的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，且_____。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共12分)31、莠去津是一種含氮農(nóng)藥；在土壤中不易降解，為修復(fù)被其污染的土壤，可按下面程序選育能降解莠去津的細(xì)菌（目的菌）。請(qǐng)據(jù)圖回答：（已知莠去津在水中溶解度低，含過(guò)量莠去津的固體培養(yǎng)基不透明）

（1）由圖推斷，從A瓶到C瓶液體培養(yǎng)的過(guò)程稱為_(kāi)____________________。圖中固體培養(yǎng)基比培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基多添加了________作為凝固劑，從功能上講，這兩種培養(yǎng)基都屬于________培養(yǎng)基。

（2）在將C瓶菌種接種到固體培養(yǎng)基之前通常要進(jìn)行____________。圖中將菌種接種到固體培養(yǎng)基的方法是____________，對(duì)所用接種工具常采用的滅菌方法是________。

（3）一段時(shí)間后，培養(yǎng)基出現(xiàn)無(wú)透明帶和有透明帶兩種菌落，我們篩選的目的菌是____________（填“有透明帶”或“無(wú)透明帶”）菌落中的細(xì)菌，該菌落生長(zhǎng)所需的氮元素主要來(lái)源于____________。32、科學(xué)家從黑麥草植株中獲取抗草甘膦基因；通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了抗除草劑草甘膦的玉米新品種。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）科研人員在噴灑過(guò)草甘膦溶液環(huán)境中選擇能夠生長(zhǎng)的黑麥草，從黑麥草細(xì)胞質(zhì)中提取__________，構(gòu)建_________（填“基因組文庫(kù)”或“cDNA文庫(kù)”），從中選取抗草甘膦基因。該方法獲得的目的基因直接導(dǎo)入玉米細(xì)胞中不能正常表達(dá)，其原因是______________。

（2）經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)該種玉米新品種抗草甘膦的能力較低，可通過(guò)______________修飾抗草甘膦的基因。

（3）種植該轉(zhuǎn)基因玉米作為食物會(huì)引發(fā)公眾在食物安全方面的擔(dān)憂，主要是擔(dān)心轉(zhuǎn)基因生物____________（列出兩點(diǎn)即可）。

（4）與傳統(tǒng)的焚燒玉米秸稈相比，將玉米秸稈發(fā)展為以沼氣工程為核心的農(nóng)村生態(tài)工程建設(shè)主要遵循生態(tài)工程__________________的基本原理。33、果蠅有多對(duì)易于區(qū)分的相對(duì)性狀；且染色體少，是常見(jiàn)的遺傳學(xué)研究材料。果蠅在點(diǎn)狀染色體（第Ⅳ號(hào)染色體）多一條或少一條的情況下均可以存活并能夠繁殖，利用這一特點(diǎn)可以用于基因定位。把傳統(tǒng)雜交實(shí)驗(yàn)與分子遺傳學(xué)相結(jié)合，利用分子標(biāo)記和性狀共同驗(yàn)證遺傳基本規(guī)律，能大幅提高科研效率。果蠅的長(zhǎng)翅和殘翅是由一對(duì)等位基因Vg/vg控制，科研人員利用軟件設(shè)計(jì)PCR引物，在距vg基因兩側(cè)各10cm左右共設(shè)計(jì)出30對(duì)特異引物，從中篩選合適的長(zhǎng)翅果蠅與殘翅果蠅DNA片段，部分結(jié)果如圖所示。回答下列問(wèn)題：

注：“+”表示長(zhǎng)翅，vg表示殘翅，R11~R20表示不同PCR引物對(duì)。

(1)據(jù)圖可知，可選用引物R15擴(kuò)增出的片段作為顯性標(biāo)記，判斷的依據(jù)是________________。

(2)用長(zhǎng)翅與殘翅雜交，F(xiàn)1全部為長(zhǎng)翅，自交后獲得186只F2個(gè)體，粗提法提取F2個(gè)體的基因組DNA進(jìn)行R15PCR擴(kuò)增，獲得F2個(gè)體的PCR數(shù)據(jù)，對(duì)F2代Vg/vg、R15/r15組合，得到下表數(shù)據(jù)。表現(xiàn)型基因型類型個(gè)體數(shù)有帶長(zhǎng)翅R15Vg/-親型115有帶殘翅R15vg/-vg重組型17無(wú)帶長(zhǎng)翅r15Vg/r15-重組型15無(wú)帶殘翅r15vg/r15vg親型39

分析F2代數(shù)據(jù)，R15/r15和Vg/vg的分離________（填“符合”或“不符合”）分離規(guī)律。F2代Vg/vg和R15/r15________（填“符合”或“不符合”）自由組合規(guī)律，理由是_________________________________。出現(xiàn)重組型的原因是________________________________。

(3)已知長(zhǎng)翅和殘翅這對(duì)等位基因位于常染色體上，為進(jìn)一步確定長(zhǎng)翅和殘翅這對(duì)等位基因是否在第Ⅳ號(hào)染色體上，現(xiàn)提供染色體正常與第Ⅳ號(hào)染色體單體的純合雌、雄個(gè)體。請(qǐng)寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論。34、米酒；舊時(shí)叫“醴”，其釀制工藝簡(jiǎn)單，口味香甜醇美。下圖表示發(fā)酵過(guò)程中的代謝途徑?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)制作時(shí)用糯米釀制，需要等煮熟的糯米溫度降低后再拌上酒曲（酵母菌）進(jìn)行發(fā)酵，這是為了防止________________________________。在家中用陶土罐釀制米酒時(shí)，不需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理，這是因?yàn)開(kāi)________________________________。

(2)陶土罐中要預(yù)留部分空間，一方面通過(guò)①②過(guò)程可以___________________________，另一方面是為了避免_____________________________。

(3)制作成功的米酒若暴露在空氣中，酒味會(huì)逐漸消失而出現(xiàn)醋酸味，此時(shí)發(fā)揮作用的微生物是________。此現(xiàn)象在_________（填“冬季”或“夏季”）更易發(fā)生，其原因是_________________________________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、B【分析】【分析】

從土壤中分離尿素分解菌的一般步驟是：土壤取樣；選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。圖中5支試管為梯度稀釋；最后經(jīng)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。

【詳解】

A；用移液管稀釋菌液時(shí)；吹吸三次的目的是使菌液與水充分混勻，防止對(duì)后續(xù)的稀釋過(guò)程造成影響，A正確；

B；4號(hào)中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)；稀釋倍數(shù)比5號(hào)的低10倍，如果稀釋倍數(shù)適當(dāng)，得到的菌落平均數(shù)可能是5號(hào)的10倍，B錯(cuò)誤；

C、分析圖解可知，菌液一共稀釋106倍，每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3÷0.1×106≈1.7×109個(gè)；C正確；

D；稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞長(zhǎng)成一個(gè)菌落；使該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要低，D正確。

故選B。2、C【分析】【分析】

分析題圖：圖中①為核移植過(guò)程；②是誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化形成神經(jīng)元的過(guò)程，③是器官移植過(guò)程。

【詳解】

A；細(xì)胞核移植中選取MⅡ中期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞；常采用顯微操作去核法去除細(xì)胞核，A正確；

B；過(guò)程②的關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)；使之分化形成神經(jīng)元，B正確；

C；該過(guò)程屬于自體移植；不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，因此過(guò)程③對(duì)受體小鼠無(wú)需注射免疫抑制劑以抑制其細(xì)胞免疫功能，C錯(cuò)誤；

D；克隆特定疾病動(dòng)物模型；可以為該疾病的致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)的藥物提供強(qiáng)有力的證據(jù)，為疾病治療提供幫助，D正確。

故選C。3、B【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

【詳解】

A；為了防止有人濫用設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒性別；我國(guó)反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒，A正確；

B；基因篩檢可能幫助人類及早預(yù)防基因控制的遺傳性疾??；但基因篩檢不能預(yù)防染色體異常遺傳病，B錯(cuò)誤；

C；我國(guó)對(duì)于生物武器采取的態(tài)度是不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器、并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散；C正確；

D；人類對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)議集中在食物安全、生物安全和環(huán)境安全方面；D正確。

故選B。4、D【分析】【分析】

1；果酒制作菌種是酵母菌；代謝類型是兼性厭氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是18～25℃、前期需氧，后期不需氧。

2；果醋制作的菌種是醋酸菌；代謝類型是需氧型細(xì)菌，屬于原核細(xì)胞，條件是30～35℃、一直需氧。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；果醋發(fā)酵利用的菌種是醋酸菌；果酒發(fā)酵的菌種才是酵母菌，A錯(cuò)誤；

B；酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳；在發(fā)酵過(guò)程中密閉，但需要根據(jù)發(fā)酵進(jìn)程適時(shí)擰松瓶蓋放氣，B錯(cuò)誤；

C；制作果酒時(shí)；原料鈣果果汁不需要進(jìn)行滅菌，否則會(huì)殺死附著在果皮上的野生型酵母菌，C錯(cuò)誤；

D；鈣果果酒的顏色是鈣果果皮和果肉中的色素進(jìn)入發(fā)酵液形成的；D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】5、B【分析】【分析】

題圖分析：圖示表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良的過(guò)程；其中①表示采用酶解法去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體的過(guò)程；②表示人工誘變過(guò)程；③表示脫分化形成愈傷組織的過(guò)程；④表示再分化過(guò)程；③④表示植物組織培養(yǎng)過(guò)程，其原理是植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】

A；①表示去壁過(guò)程；因?yàn)橹参锛?xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，因此，需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理，A正確；

B；②表示人工誘變過(guò)程；但基因突變是不定向的，B錯(cuò)誤；

C；③是脫分化形成愈傷組織的過(guò)程；該過(guò)程中葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能，變成了可以發(fā)生連續(xù)分裂的細(xì)胞，C正確；

D；④表示再分化過(guò)程；決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例影響了愈傷組織分化的方向，因此這兩種激素的比例非常重要，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】6、D【分析】【分析】

關(guān)于限制酶；考生可以從以下幾方面把握：

（1）來(lái)源：主要從原核生物中分離純化出來(lái)。

（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；酶具有專一性；不同的限制酶有不同的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，A正確；

B；限制酶2和3識(shí)別的序列分別是CCGCGG和GGATCC；均為6個(gè)堿基對(duì)，B正確；

C；限制酶1和3剪出的黏性末端相同；均為-GATC，C正確；

D；限制酶只能識(shí)別和切割DNA分子內(nèi)一小段核苷酸序列；D錯(cuò)誤。

故選D。7、C【分析】【分析】

限制性核酸內(nèi)切酶是可以識(shí)別并附著特定的核苷酸序列；并對(duì)每條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割的一類酶，簡(jiǎn)稱限制酶。

【詳解】

A；DNA雙鏈之間為氫鍵相連；而限制酶破壞的是磷酸二酯鍵，因此將DNA雙鏈切割成兩段，A錯(cuò)誤；

B；同種限制酶既可以切割含目的基因的DNA片段又可以切割質(zhì)粒；是由于目的基因和質(zhì)粒都具有相同的酶切位點(diǎn)，因此具有專一性，B錯(cuò)誤；

C；序列—CTAG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端相同；均為GATC—，C正確；

D；E．coliDNA連接酶能催化黏性末端的連接；不能催化平末端連接，D錯(cuò)誤。

故選C。8、C【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

A；引物與模板結(jié)合依賴于堿基的互補(bǔ)配對(duì)；引物長(zhǎng)度過(guò)短，特異性降低，A正確；

B；兩種引物之間不能發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)；以防止引物之間結(jié)合形成雙鏈，以免影響引物與DNA模板鏈的結(jié)合，B正確；

C；引物的G—C含量越高；結(jié)合特異性越強(qiáng)，但G—C過(guò)高，不利于復(fù)性，從而阻礙目標(biāo)DNA的擴(kuò)增，C錯(cuò)誤；

D；DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈；即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的，根據(jù)需要可在引物的5’端添加限制酶識(shí)別序列，以便更加準(zhǔn)確地獲得目的基因，D正確。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)9、C:D【分析】【分析】

題圖分析：限制酶SalⅠ有三處切割位點(diǎn)；切割后產(chǎn)生4個(gè)DNA片段，泳道①中是用SalⅠ處理得到的酶切產(chǎn)物；限制酶XhoⅠ有2處切割位點(diǎn)，切割后產(chǎn)生3個(gè)DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ處理得到的酶切產(chǎn)物。

【詳解】

A；酶具有專一性；不同的限制酶識(shí)別并切割不同的核苷酸序列，A錯(cuò)誤；

B；限制酶通過(guò)作用于磷酸二酯鍵得到相應(yīng)產(chǎn)物；B錯(cuò)誤；

C；分析圖1；限制酶XhoⅠ有2處切割位點(diǎn)，切割后產(chǎn)生3個(gè)DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ處理得到的酶切產(chǎn)物，C正確；

D；用兩種限制酶同時(shí)處理后進(jìn)行電泳；若某些位點(diǎn)未被切割，則條帶可多于6條，D正確。

故選CD。10、A:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR擴(kuò)增依據(jù)的是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理；A正確；

B；進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B錯(cuò)誤；

C；DNA的兩條鏈反向平行；子鏈從引物的3′端開(kāi)始延伸，則利用圖中的引物①、④組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列，C錯(cuò)誤；

D；通過(guò)與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì)；即可確定T-DNA的插入位置，D正確。

故選AD。

【點(diǎn)睛】11、A:D【分析】【分析】

纖維素分解菌能合成和分泌纖維素酶，纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可以篩選出纖維素分解菌。

【詳解】

A；木材、秸稈中富含纖維素；故可以從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌，A正確；

B；應(yīng)該用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌；只有纖維素分解菌能夠存活，B錯(cuò)誤；

C；接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理；接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理，培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法處理，C錯(cuò)誤；

D；菌落只能在固體培養(yǎng)基中形成；菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基，D正確。

故選AD。12、B:C:D【分析】1；酵母菌的新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無(wú)菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型；在無(wú)氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑵咸烟欠纸鉃槿樗帷?/p>

【詳解】

A；乳酸菌為嚴(yán)格厭氧菌；只能進(jìn)行無(wú)氧呼吸，A錯(cuò)誤；

B；面包液、糖化液主要成分為糖類；也含有其他物質(zhì)，可為微生物的生長(zhǎng)提供碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，B正確；

C；酵母菌產(chǎn)酒精能力與其耐受酒精的能力有關(guān)；利用選擇培養(yǎng)基，向培養(yǎng)基中添加較高濃度的酒精篩選出產(chǎn)酒精能力比較強(qiáng)的酵母菌，C正確；

D；過(guò)程③中瞬時(shí)高溫會(huì)破壞微生物的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)；進(jìn)而將微生物殺死達(dá)到滅菌效果，D正確。

故選BCD。13、A:C【分析】【分析】

分析圖解，可以看出綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬涉及了多項(xiàng)生物工程技術(shù)。圖中B表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；然后將目的基因?qū)胴i胎兒的成纖維細(xì)胞，經(jīng)過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，然后該細(xì)胞的細(xì)胞核與豬的卵細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植獲得重組細(xì)胞。重組細(xì)胞經(jīng)過(guò)早期胚胎培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚期，最后經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成轉(zhuǎn)基因克隆豬。由此可見(jiàn)，該過(guò)程中利用基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

A；①是將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞；直接采用顯微注射法，無(wú)需對(duì)受體細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)，②過(guò)程通常是將細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞中，然后利用電融合法使D構(gòu)建成功，A錯(cuò)誤；

B；C是處于MⅡ期的卵母細(xì)胞；這個(gè)時(shí)期的“核”實(shí)際上是紡錘體—染色體復(fù)合物，B正確；

C；受體對(duì)移入的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此無(wú)需給F注射免疫抑制劑，C錯(cuò)誤；

D；移入F的通常是桑葚胚；它要經(jīng)歷囊胚、原腸胚階段的發(fā)育才能成為豬的幼體，D正確。

故選AC。14、A:B:C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融臺(tái)，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基坮養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；①過(guò)程要多次注射抗原；其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的已免疫的B淋巴細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；③為選擇培養(yǎng)基；經(jīng)選擇培養(yǎng)基獲得的雜交瘤細(xì)胞不一定能產(chǎn)生所需抗體，要產(chǎn)生所需抗體還要進(jìn)行抗體檢測(cè)陽(yáng)性和克隆化培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；

C；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合可以使用PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等；C錯(cuò)誤；

D；雙特異性抗體中的癌胚抗原抗體能將藥物定向引導(dǎo)至和癌細(xì)胞結(jié)合；從而避免對(duì)其他細(xì)胞的破壞，D正確。

故選ABC。15、B:C:D【分析】【分析】

影印培養(yǎng)法；是指確保在一系列平板培養(yǎng)基的相同位置上接種并培養(yǎng)出相同菌落的一種微生物培養(yǎng)方法。主要操作方法是:用滅菌的絲絨覆蓋在一塊與培養(yǎng)皿同樣大小(或略小)的木制圓柱體上，輕輕地在母種培養(yǎng)皿的菌苔上印一下，把細(xì)菌菌落全部轉(zhuǎn)移到絲絨面上，然后將這一絲絨面再印在另外的選擇性培養(yǎng)基平板上，獲得與原始平板完全相同的接種平板。待培養(yǎng)后，比對(duì)各培養(yǎng)皿在相同位置出現(xiàn)相同的菌落，從而篩選出適當(dāng)?shù)木辍?/p>

【詳解】

A；母板培養(yǎng)基上有發(fā)生突變的營(yíng)養(yǎng)缺陷型和野生型大腸桿菌的菌落；而基本培養(yǎng)基上只有野生型大腸桿菌的菌落，由此可知母板培養(yǎng)基與基本培養(yǎng)基的成分不同，A錯(cuò)誤；

B；分析題圖可知；用了稀釋涂布平板法將菌液接種在母板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，B正確；

C；作為接種工具的“印章"需經(jīng)過(guò)滅菌處理才能印在長(zhǎng)有菌落的母板上；以防止雜菌污染，C正確；

D；根據(jù)基本培養(yǎng)基上的菌落分布和添加不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的補(bǔ)充培養(yǎng)基上的菌落分布對(duì)應(yīng)位置可知；4、5、6為營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，理由是這三個(gè)菌落在基本培養(yǎng)基上都沒(méi)有，而分別在添加了不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的補(bǔ)充培養(yǎng)基上形成，D正確。

故選BCD。16、B:C:D【分析】【分析】

在微生物學(xué)中；將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無(wú)機(jī)鹽。

【詳解】

A；培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水；將出現(xiàn)失水過(guò)多而死亡的現(xiàn)象，對(duì)生長(zhǎng)不利，A錯(cuò)誤；

B；這種培養(yǎng)基以石油為唯一碳源；只有石油降解菌可在該培養(yǎng)基上正常存活，因此是一種選擇培養(yǎng)基，B正確；

C；被石油污染的土壤通氣性極差；利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤，C正確；

D；根據(jù)生物與其生存環(huán)境相適應(yīng)的特點(diǎn)；未被污染的土壤中幾乎不含石油分解菌，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌，D正確。

故選BCD。17、B:C:D【分析】【分析】

動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎。這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物，克隆動(dòng)物的核基因完全來(lái)自供體動(dòng)物，而細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自受體細(xì)胞。核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植，其中體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，因?yàn)轶w細(xì)胞的全能性低于胚胎細(xì)胞。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)；不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，而是體現(xiàn)動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，A錯(cuò)誤；

B；去除A猴卵母細(xì)胞的細(xì)胞核；目的是排除A猴核遺傳物質(zhì)的干擾，保證克隆猴的核遺傳物質(zhì)都來(lái)自B猴，B正確；

C；必須將重組細(xì)胞培育到桑椹胚或囊胚階段后才能植入代孕動(dòng)物體內(nèi)；才可正常繼續(xù)發(fā)育，C正確；

D；卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)；故體細(xì)胞的細(xì)胞核需移植到去核卵母細(xì)胞后才能表現(xiàn)出全能性，D正確。

故選BCD。三、填空題(共8題，共16分)18、略

【解析】①.胚胎細(xì)胞②.體細(xì)胞19、略

【解析】①.活菌②.培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】高壓滅菌—2022、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】80—100℃變性23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2種引物DNA或RNA20—3024、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物核移植的概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體，核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物；

2；早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分；除無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，并需添加動(dòng)物血清等天然成分。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物；試管動(dòng)物和克隆動(dòng)物分別在體外得到早期胚胎后；都要通過(guò)胚胎移植獲得新個(gè)體。

（2）核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植；其中后者更易成功，原因是胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易，而體細(xì)胞分化程度高，全能性不易表達(dá)；核移植常用的減數(shù)第二次分裂中期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，其中去核的目的是避免原細(xì)胞核中遺傳物質(zhì)對(duì)克隆動(dòng)物的影響，保證克隆動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)來(lái)自供體細(xì)胞。

（3）促性腺激素處理可促使雌性個(gè)體超數(shù)排卵；即使良種母牛一次排出多枚卵母細(xì)胞。精子需要經(jīng)過(guò)獲能處理才能受精；防止多精入卵的兩道屏障依次為透明帶反應(yīng)；卵細(xì)胞膜反應(yīng)。

（4）要考慮環(huán)境承載力；處理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡，這體現(xiàn)了生態(tài)工程的協(xié)調(diào)與平衡原理。

【點(diǎn)睛】

本題考查細(xì)胞工程、胚胎工程和生態(tài)工程的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解能力、獲取信息的能力和綜合運(yùn)用能力?！窘馕觥颗咛ヒ浦玻ɑ蚺咛サ脑缙谂囵B(yǎng)和胚胎移植）胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易MⅡ中期去核卵母細(xì)胞促性腺激素獲能透明帶反應(yīng)協(xié)調(diào)與平衡25、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲(chóng)等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時(shí)可毀壞植物，該說(shuō)法錯(cuò)誤?！窘馕觥垮e(cuò)誤四、判斷題(共2題，共8分)26、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物可能會(huì)破壞生態(tài)平衡，特別是對(duì)生物多樣性的影響。大自然經(jīng)過(guò)億萬(wàn)年的演化，各種生物相對(duì)處于一種和諧的生態(tài)平衡狀態(tài)。但是，如果我們用轉(zhuǎn)基因技術(shù)把某種生物人為地變得更加“強(qiáng)悍”，那其他物種就會(huì)衰敗以至滅絕，故本題正確。27、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，主要是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級(jí)結(jié)構(gòu)，而這種高級(jí)結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜，并且蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)具有多樣性，這也在一定程度上增加了蛋白質(zhì)工程的難度，故說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共24分)28、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基的制作流程一般為：計(jì)算→稱量→溶化（包括瓊脂）→調(diào)節(jié)pH→分裝→滅菌→倒平板→（冷卻后）倒置平板。微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分離純化。具體來(lái)說(shuō)，就是在無(wú)菌條件下，用接種環(huán)或接種針等專用工具，從一個(gè)培養(yǎng)皿（上面可能存在各種雜菌落）挑取所需的微生物，轉(zhuǎn)接到另一個(gè)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的方法?！拘?wèn)1】

培養(yǎng)基的組成成分包括碳源；氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等。倒平板時(shí)；應(yīng)待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板，平板冷凝后要將平板倒置，倒平板過(guò)程中應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以防止雜菌污染?！拘?wèn)2】

題干中表明菌體密集均勻分布在平板上；所以是稀釋涂布平板法接種。培養(yǎng)基滅菌合格，影響因素應(yīng)為除培養(yǎng)基滅菌以外可能的影響因素，因此，可能操作過(guò)程中是否無(wú)菌操作，以及使用的濾紙條是否滅菌合格等。A為對(duì)照組，應(yīng)除自變量以外，其他條件都相同，因此，處理方法為浸泡在無(wú)菌水中處理后貼于平板中央；實(shí)驗(yàn)中能觀察到出現(xiàn)野生型菌株菌落，說(shuō)明環(huán)境中存在化學(xué)致癌劑導(dǎo)致突變型菌株突變成野生型菌株?！拘?wèn)3】

使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)滅菌后再丟棄；以防止培養(yǎng)基中的有害物質(zhì)污染環(huán)境或感染實(shí)驗(yàn)操作者。

【點(diǎn)睛】

本題考查培養(yǎng)基的成分、制備過(guò)程以及微生物的接種方法等相關(guān)知識(shí)，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。【解析】【小題1】①.碳源；氮源、水和無(wú)機(jī)鹽②.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)；在酒精燈火焰旁附近倒平板。

【小題2】①.稀釋涂布平板②.濾紙片是否滅菌徹底和待測(cè)化合物是否含有雜菌③.（濾紙片）用無(wú)菌水浸泡④.his-菌株在培養(yǎng)基上突變?yōu)閔is+菌株；說(shuō)明待測(cè)化合物中存在致癌劑（或待測(cè)化合物中存在化學(xué)誘變劑，這些化學(xué)物質(zhì)具有致癌性，敘述合理即可）

【小題3】滅菌，避免對(duì)環(huán)境造成污染29、略

【分析】【分析】

制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基；其基本過(guò)程為計(jì)算；稱量、溶化、滅菌、倒平板。培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，培養(yǎng)、分離出特定的微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽）。

(1)

制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的基本操作步驟是計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。金黃色葡萄球菌具有高度耐鹽化的特性；培養(yǎng)基中加入7.5%NaC1不影響金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)的同時(shí)會(huì)抑制其他雜菌生長(zhǎng)，起到了選擇的目的。

(2)

在制作血平板時(shí)需要等平板冷卻后；方可加入血液，以防止高溫破壞血細(xì)胞。在血平板上，由于金黃色葡萄球菌可破壞紅細(xì)胞而使其褪色，因此菌落的周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)褪色圈。

(3)

測(cè)定土壤中金黃色葡萄球菌的數(shù)量時(shí)，一般采用稀釋涂布平板法。為了保證獲得菌落數(shù)在30～300之間適于計(jì)數(shù)的平板，需要選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)。測(cè)定土壤中金黃色葡萄球菌的數(shù)量，一般選用104、105和106倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)；測(cè)定放線菌的數(shù)量，一般選用103、104、105倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)；測(cè)定真菌的數(shù)量，一般選用102、103、104倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)。因此稀釋倍數(shù)較低的是真菌。由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)；平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查微生物的培養(yǎng)與分離，考查學(xué)生的實(shí)驗(yàn)與探究能力。【解析】(1)計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板7．5%NaC1不影響金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)的同時(shí)會(huì)抑制其他雜菌生長(zhǎng)。

(2)高溫破壞血細(xì)胞褪色圈（或溶血圈）

(3)稀釋涂布平板30～300真菌當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落30、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：

①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術(shù)；

②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；

③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原一抗體雜交技術(shù)。

④個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2；圖1中①-④依次為目的基因的獲取、表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)。

（1）

PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，需要Taq酶，但Taq酶不能從頭開(kāi)始合成DNA，前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物，因此需要根據(jù)目的基因fabV基因的兩端按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則設(shè)計(jì)引物。至少需要經(jīng)過(guò)4次擴(kuò)增才能獲的8個(gè)雙鏈等長(zhǎng)的目的基因。

（2）

基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，題干信息顯示C基因在低溫下會(huì)抑制P2，R基因在高溫下會(huì)抑制P1，說(shuō)明P2啟動(dòng)子在高溫下可以啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄；P1啟動(dòng)子在低溫下可以啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。題目顯示高溫下只表達(dá)lacz蛋白，則lacZ基因要插在“高溫下不被抑制”的啟動(dòng)子的后面，即P2→T2之間；GFP基因要低溫下表達(dá)，則插入位置要在P1→T1之間；且不破壞C基因和R基因。

（3）

因?yàn)閒abV（從霍亂弧菌中發(fā)現(xiàn)的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生；大腸桿菌能在含三氯生的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，說(shuō)明大腸桿菌插入重組質(zhì)粒，且依據(jù)是低溫下有綠色熒光高溫下無(wú)綠色熒光。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，要求學(xué)生熟練掌握基因工程的原理、步驟及相關(guān)的目的，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)，結(jié)合題目要求解決相關(guān)問(wèn)題。【解析】(1)目的基因（fabV基因）兩端堿基序列4

(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建P2→T2插在P1→T1之間；且不破壞C基因和R基因。

(3)三氯生低溫下有綠色熒光，高溫下無(wú)綠色熒光六、綜合題(共4題，共12分)31、略

【分析】【分析】

從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣；選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株；其中選擇培養(yǎng)的目的是初步選擇能生長(zhǎng)目的菌，并提高其密度，在利用平板計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)之前需要進(jìn)行梯度稀釋。

（1）

通過(guò)圖解可以看出A瓶到C瓶中的培養(yǎng)液中除莠去津外沒(méi)有其他氮源；而本實(shí)驗(yàn)的目的是選擇分解莠去津的細(xì)菌，所以該過(guò)程是通過(guò)選擇培養(yǎng)基選擇能夠分解莠去津的細(xì)菌。通常情況下，固體培養(yǎng)基比液體培養(yǎng)基中多加入的凝固劑是瓊脂。從功能上講，這兩種培養(yǎng)基目的都是篩選出能降解莠去津的細(xì)菌，都屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）

從培養(yǎng)液中選取細(xì)菌進(jìn)行涂布培養(yǎng)；如果直接進(jìn)行接種，培養(yǎng)基中的菌落將會(huì)很密，無(wú)法進(jìn)行純化，通過(guò)梯度稀釋后再接種，培養(yǎng)基中菌落將會(huì)分開(kāi)，這時(shí)就可以進(jìn)行純化和分離了。通過(guò)培養(yǎng)基上的菌落分布特征可以判斷接種方式為稀釋涂布平板法。涂布平板操作所用的接種工具是涂布器，常用灼燒滅菌法對(duì)涂布器進(jìn)行滅菌。

（3）

莠去津在水中溶解度低；含過(guò)量莠去津的固體培養(yǎng)基不透明的，能夠分解培養(yǎng)基中的莠去津的菌落周?chē)鷷?huì)形成透明帶，所以選擇的目的菌是有透明帶菌落中的細(xì)菌，即該菌落生長(zhǎng)所需的氮元素主要來(lái)源于莠去津。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查微生物的篩選分離過(guò)程，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)微生物的分離過(guò)程的認(rèn)識(shí)和實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程的要求?！窘馕觥浚?）選擇培養(yǎng)瓊脂選擇。

（2）梯度稀釋稀釋涂布平板法灼燒滅菌。

（3）有透明帶莠去津32、略

【分析】【分析】

1；基因文庫(kù)的構(gòu)建。

①基因組文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程。

②cDNA文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程。

【詳解】

（1未知目的基因的情況下；若從細(xì)胞質(zhì)中選取抗草甘膦基因，由于細(xì)胞質(zhì)中沒(méi)有和