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DB23黑 龍 江 省 地 方 標 準DB23/T3896—2024玉米穗腐病抗源鑒定及評價技術規(guī)程2024-12-30發(fā)布 2025-01-29實施黑龍江省市場監(jiān)督管理局 發(fā)布DB23/T3896—2024DB23/T3896—2024前 言本文件按照GB/T1請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由黑龍江省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。物科學研究所。新、胡少新、王志國。DB23/T3896—2024DB23/T3896—2024PAGEPAGE3玉米穗腐病抗源鑒定及評價技術規(guī)程范圍病情調查和抗病性評價等要求。本文件適用于玉米種質資源對玉米鐮孢穗腐病的田間抗性鑒定和評價。規(guī)范性引用文件（所有的修改單）適用于本文件。GB4404.1糧食作物種子第1部分：禾谷類NY/T1248.8玉米抗病蟲性鑒定技術規(guī)范第8部分：鐮孢穗腐病DB23/T2154玉米機械化籽粒收獲栽培技術規(guī)程術語和定義下列術語和定義適用于本文件。玉米穗腐病抗源鑒定identificationofresistancesourcetomaizeearrot（Fusariumgraminearum）（Fverticillioides）subglutinans）、層出鐮孢（F.proliferatum）穗腐病混合菌進行人工接種，鑒定挖掘抗穗腐病種質資源。接種體制備鐮孢病原菌分離與致病力測定病原菌分離75%2s～31.5%的3min～53PDA25～273d菌至試管中保存。致病力測定的致病能力。鐮孢病原菌鑒定NY/T1248.8的規(guī)定執(zhí)行。病原菌的配制培養(yǎng)基的制備（12520250mL三角瓶中，121℃45min，完成高粱粒培養(yǎng)基的制備。按照NY/T1248.8提供的方法制備馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（Potatodextroseagarmedium，PDA）。禾谷鐮孢孢子懸浮液的配制將禾谷鐮孢轉移至PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，挑取3個～5個擴繁的禾谷鐮孢的菌碟轉移到0.9%～1.5%的無菌鹽水中，每100mL三角瓶裝液量為15ml，28℃～30℃、可見光150lx～200lx（150rpm～18096h～1202×106孢子/mL，4℃96h。擬輪枝鐮孢孢子懸浮液的配制PDA7d526℃5層紗布過濾后用血球計數(shù)法調整孢子懸浮液濃度為2×106孢子/mL，4℃條件下可保存96h。亞粘團鐮孢孢子懸浮液的配制PDA7d526℃52×106孢子℃96h層出鐮孢孢子懸浮液的配制PDA7d526℃52×106孢子/mL，4℃96h。混合孢子懸浮液配制4:2:1:0.5懸浮液混合，448h?？共⌒澡b定圃設置鑒定圃設計鑒定圃應具有良好的自然發(fā)病環(huán)境，可根據(jù)需要進行排灌。鑒定種質資源按照晚熟、中熟、早熟3個熟期分區(qū)種植，各熟期內種質資源采取隨機排列，每隔30行鑒定材料設置1組已知同熟期抗病、感病對照。對照見附錄表A.1。鑒定材料采用單行區(qū)種植，3次重復，隨機排列，小區(qū)行長5m，行距0.65m，植株密度為75000株/hm2。鑒定材料播種DB23/T2154規(guī)定執(zhí)行。鑒定材料種子不應進行包衣處理，播種方式采用人工點播，每穴點播種子2粒，出苗后每穴保留1株健康的植株。種子符合GB4404.1標準。田間管理田間管理及蟲草害防治與大田生產(chǎn)相同，田間管理過程中不應使用殺菌劑。接種接種時期應在玉米雌穗吐絲后3d～5d或花絲長度達5cm～10cm時進行。接種部位及方法接種采用花絲通道法，每株選擇上部第1個果穗，利用可定量的連續(xù)注射器，在果穗花絲通道側邊插入至通道中空部位，每穗注射接種2mL孢子懸浮液。接種后常規(guī)田間管理，適度保持田間大氣濕度。病情調查調查時間在鑒定材料進入完熟期時進行調查。調查方法應按附錄表A.2執(zhí)行。記錄每份鑒定材料的總株數(shù)和各發(fā)病級別株數(shù)?？共⌒栽u價抗病性評價方法見式1。式中：

??????????=（Σ??????）??1

…………（式1）ERSA——穗腐病平均病情級別（Earrotscoreonaverage）；ERSi——第i個接種果穗的病情級別（Earrotscore）；i——接種果穗的順序編碼；n——每份鑒定材料的接種果穗總數(shù)；計算保留1位小數(shù)，鑒定材料的抗性評價方法按附錄表A.3執(zhí)行。有效性判別當感病對照材料抗性鑒定為“感”時，該批次鑒定結果視為有效。重復鑒定當鑒定材料初次鑒定結果表現(xiàn)為“抗”和“高抗”，應在第二年進行重復鑒定?？共⌒越Y果判定按附錄表A.3的標準進行抗性評價，將調查和評價結果錄入附錄表A.4。鑒定檔案接種時間、調查時間、接種總株數(shù)、各病情級別發(fā)病株數(shù)和抗病性評價。DB23/T3896—2024DB23/T3896—2024附錄A（資料性）A.1不同熟期對照表A.1表A.1不同熟期對照熟期抗病對照感病對照晚熟區(qū)X178B73中熟區(qū)OH43W6199Z早熟區(qū)H3A18200HRH078A.2玉米穗腐病鑒定田間病情分級表A.2表A.2玉米穗腐病鑒定田間病情分級病情分級描 述1發(fā)病面積占果穗總面積0%～1%3發(fā)病面積占果穗總面積2%～10%5發(fā)病面積占果穗總面積11%～25%7發(fā)病面積占果穗總面積26%～50%9發(fā)病面積占果穗總面積51%～100%A3 玉米對穗腐病抗性的評價標準表A.3表A.3玉米對穗腐病抗性的評價標準平均病情級別抗性≤1.5高抗Highlyresistant（HR）1.6～3.5抗 Resistant（R）3.6～5.5中抗Moderatelyresistant（MR）5.6～7.5感 Susceptible（S）7.6～9.0高感Highlysusceptible（HS）A4 玉米抗鐮孢穗腐