血液檢測血液檢測是現(xiàn)代醫(yī)學診斷的重要基石，通過對血液樣本的全面分析，醫(yī)生能夠了解患者的健康狀況，診斷疾病，監(jiān)測治療效果。本課程將系統(tǒng)介紹血液檢測的基本原理、方法、技術和臨床應用，幫助學習者掌握血液檢測的理論知識和實際操作技能。我們將從血液的基本組成開始，逐步深入到各種檢測技術，包括細胞學、生化學、免疫學、分子生物學等方面的內容，并討論檢測結果的臨床意義與解釋。課程目標和學習內容1掌握基礎理論理解血液的基本組成及各組分的生理功能，掌握血液檢測的基本原理和技術方法，建立血液檢測的理論框架。2熟悉檢測技術學習各種血液檢測方法的操作流程、質量控制和結果分析，包括血細胞分析、生化檢測、凝血功能、免疫學檢測等。3應用臨床實踐了解血液檢測結果與臨床疾病的關系，培養(yǎng)臨床思維能力，能夠正確解釋檢測結果并應用于疾病診斷和治療監(jiān)測。4探索新技術介紹血液檢測領域的新技術、新方法和未來發(fā)展趨勢，拓展學習視野，激發(fā)創(chuàng)新思維。血液的組成和功能血漿（55%）血漿是血液的液體部分，主要由水和多種蛋白質組成，包括白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原。血漿還含有電解質、激素、營養(yǎng)物質和代謝廢物，負責運輸和調節(jié)體內平衡。紅細胞（45%）紅細胞是血液中數(shù)量最多的細胞，主要功能是運輸氧氣和二氧化碳。成熟紅細胞沒有細胞核，呈雙凹圓盤狀，含有大量血紅蛋白，使血液呈紅色。白細胞（<1%）白細胞是人體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，負責抵抗感染和清除異物。包括中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞五種類型。血小板（<1%）血小板是從巨核細胞脫落的細胞碎片，沒有細胞核，形狀不規(guī)則。主要功能是參與凝血過程，防止出血，并促進傷口愈合。血液樣本采集方法靜脈采血最常用的采血方式，通常從肘部靜脈獲取，適用于大多數(shù)常規(guī)檢測。使用真空采血管系統(tǒng)，根據(jù)不同檢測項目選擇添加不同抗凝劑的采血管。抽取血液前需要正確識別患者，并遵循無菌操作原則。毛細血管采血適用于新生兒、兒童或靜脈采血困難的患者，通常從指尖、耳垂或足跟采集少量血液。操作簡單，但樣本量有限，主要用于血糖、血氣分析等特定檢測。動脈采血主要用于血氣分析，評估呼吸功能和酸堿平衡。通常從橈動脈、肱動脈或股動脈采集，操作難度大，需要經(jīng)過專門培訓的醫(yī)護人員進行，并做好局部止血。骨髓穿刺用于獲取骨髓樣本，常在髂骨或胸骨進行。是診斷血液系統(tǒng)疾病的重要手段，尤其是白血病、淋巴瘤等。屬于有創(chuàng)檢查，需要患者簽署知情同意書。血液樣本處理和保存1采集后立即處理采集血液后應輕輕混勻但不可劇烈震蕩，避免溶血。根據(jù)不同檢測項目要求，選擇合適的抗凝劑和添加劑。靜脈血采集后應在2小時內送檢并完成檢測，避免樣本變質。2分離血清或血漿對于需要分離血清的樣本，應放置30分鐘讓血液自然凝固后離心。血漿樣本則直接進行離心分離。離心條件通常為3000轉/分，持續(xù)10-15分鐘，以確保充分分離。3短期保存大多數(shù)常規(guī)血液學檢測應在樣本采集后4小時內完成。如需短期保存，全血樣本應在2-8℃冷藏，但不超過24小時。血清或血漿可在2-8℃保存2-3天。4長期保存如需長期保存血清或血漿樣本，應將其分裝到密封管中，在-20℃或-80℃冰箱中冷凍保存。避免反復凍融，每次凍融會導致某些生化指標下降10%-20%。血細胞計數(shù)原理稀釋血液樣本使用特定稀釋液處理全血樣本，以適當稀釋血細胞濃度，并根據(jù)測定目標添加溶血劑（測白細胞時）或保護劑（測紅細胞和血小板時）。不同類型的細胞計數(shù)需要不同的稀釋比例。電阻抗法基于庫爾特原理，血細胞通過帶電極的微小孔隙時，會引起電阻變化，產(chǎn)生電脈沖。脈沖幅度與細胞體積成正比，脈沖數(shù)量對應細胞數(shù)量。這是自動血細胞分析儀最常用的計數(shù)原理。光散射法血細胞通過激光束時產(chǎn)生散射光，散射角度和強度反映細胞大小、內部結構和顆粒度。前向散射反映細胞體積，側向散射反映細胞內部復雜度，被廣泛應用于白細胞分類計數(shù)。流式細胞術結合光散射和熒光檢測，使細胞單個通過檢測區(qū)域，同時獲取多項參數(shù)。通過特異性熒光染料或抗體標記，可以精確區(qū)分不同類型的血細胞，實現(xiàn)高精度計數(shù)和分類。紅細胞檢測-概述檢測意義紅細胞檢測是血液學基本檢查項目，對貧血、紅細胞增多癥及其他血液系統(tǒng)疾病的診斷有重要價值。通過紅細胞相關參數(shù)可評估氧攜帶能力、血液粘稠度以及紅細胞生成和破壞平衡狀態(tài)。主要檢測項目包括紅細胞計數(shù)(RBC)、血紅蛋白濃度(Hb)、紅細胞比容(HCT)、紅細胞指數(shù)(MCV、MCH、MCHC)、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)、紅細胞沉降率(ESR)等。這些參數(shù)共同反映紅細胞的數(shù)量和質量特征。異常結果分析紅細胞計數(shù)升高可見于紅細胞增多癥、脫水等；降低見于各類貧血、骨髓抑制、急性出血等。通過分析紅細胞形態(tài)學和各項指標的變化，可進一步明確貧血的類型和原因。檢測方法演進從傳統(tǒng)的手工計數(shù)法發(fā)展到現(xiàn)代自動化分析儀，提高了檢測準確性和效率。高端血細胞分析儀還可提供紅細胞形態(tài)學參數(shù)，如紅細胞分布寬度(RDW)和網(wǎng)織紅細胞參數(shù)等。紅細胞計數(shù)（RBC）檢測原理通過電阻抗法或光散射法計數(shù)單位體積血液中的紅細胞數(shù)量。血液經(jīng)特定稀釋液稀釋后，紅細胞通過計數(shù)孔時產(chǎn)生電信號或光信號，由儀器自動記錄并計算得出結果。參考范圍成年男性：(4.5-5.5)×1012/L；成年女性：(3.8-5.1)×1012/L；兒童和老年人有所不同。紅細胞計數(shù)偏高或偏低都提示可能存在疾病狀態(tài)，需結合其他指標綜合分析。臨床意義紅細胞計數(shù)增高見于：真性紅細胞增多癥、繼發(fā)性紅細胞增多癥、脫水等狀態(tài)；紅細胞計數(shù)減少見于：各種類型的貧血、骨髓功能衰竭、急性出血、血液稀釋等情況。影響因素生理因素：年齡、性別、海拔高度、身體活動等；病理因素：貧血、紅細胞生成障礙、紅細胞破壞增加等；技術因素：溶血、標本凝固、稀釋誤差等均可影響檢測結果的準確性。血紅蛋白測定（Hb）檢測原理通過氰化高鐵血紅蛋白法，將血液中各種形式的血紅蛋白轉化為穩(wěn)定的氰化高鐵血紅蛋白，再用分光光度計在540nm波長處測定其吸光度，根據(jù)比爾-朗伯定律計算濃度。1參考范圍成年男性：130-175g/L；成年女性：115-150g/L；兒童根據(jù)年齡段有不同標準。血紅蛋白是診斷貧血最重要的指標之一。2臨床意義血紅蛋白降低見于各種類型貧血、白血病、慢性消耗性疾病等；升高見于真性紅細胞增多癥、嚴重脫水、高原居民等。3影響因素生理因素如年齡、性別、海拔高度；病理因素如失血、溶血、造血功能障礙；技術因素如溶血樣本會導致假性升高。4紅細胞比容（HCT）40-50%男性正常值成年男性紅細胞比容的正常參考范圍，反映男性體內血細胞成分與血漿的比例關系。37-45%女性正常值成年女性紅細胞比容的正常參考范圍，通常低于男性，與雌激素影響和月經(jīng)失血有關。45-65%新生兒正常值新生兒紅細胞比容通常高于成人，隨著年齡增長逐漸降至成人水平。50-70%真性紅細胞增多癥該疾病患者紅細胞比容明顯升高，血液粘稠度增加，可引起血栓形成等并發(fā)癥。紅細胞比容（HCT）是指紅細胞在全血中所占的百分比，又稱血細胞壓積。它反映血液中紅細胞與血漿的比例關系，是評估貧血程度的重要指標之一。臨床上常用微量離心法（毛細管法）和自動血細胞分析儀兩種方法測定。HCT降低見于各種貧血、白血病、妊娠晚期等；升高見于紅細胞增多癥、嚴重脫水、高海拔地區(qū)居民等。HCT與血液粘稠度密切相關，過高可增加血栓風險，需要及時干預。紅細胞指數(shù)（MCV,MCH,MCHC）指數(shù)名稱計算公式參考范圍臨床意義平均紅細胞體積（MCV）HCT÷RBC×1080-100fL反映紅細胞大小，>100為巨細胞，<80為小細胞平均紅細胞血紅蛋白含量（MCH）Hb÷RBC×1027-34pg反映單個紅細胞含Hb量，<27為低色素平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）Hb÷HCT×100320-360g/L反映紅細胞Hb濃度，<320為低色素紅細胞指數(shù)是評估紅細胞大小和血紅蛋白含量的重要參數(shù)，對貧血分類具有重要指導意義。根據(jù)MCV和MCHC的變化，可將貧血分為小細胞低色素性貧血（如缺鐵性貧血）、正細胞正色素性貧血（如急性失血、溶血性貧血）和大細胞正色素性貧血（如巨幼細胞貧血）。自動血細胞分析儀通常直接測量MCV，然后計算出MCH和MCHC。這些參數(shù)變化可反映不同類型貧血的病理特點，為臨床診斷提供有價值的參考信息。網(wǎng)織紅細胞計數(shù)網(wǎng)織紅細胞形態(tài)特征網(wǎng)織紅細胞是未完全成熟的紅細胞，含有胞質內殘留的核糖核酸（RNA）。使用新美藍等堿性染料染色后，RNA呈現(xiàn)藍色網(wǎng)狀結構，在顯微鏡下可與成熟紅細胞區(qū)分。流式細胞術計數(shù)現(xiàn)代流式細胞儀使用熒光染料如硫氰酸噻唑橙（TO）特異性標記RNA，通過熒光強度區(qū)分網(wǎng)織紅細胞和成熟紅細胞，比傳統(tǒng)方法更客觀、準確，并能提供網(wǎng)織紅細胞成熟度指數(shù)等參數(shù)。臨床應用網(wǎng)織紅細胞計數(shù)是評估骨髓造血功能的重要指標。計數(shù)增加（>1.5%）提示骨髓代償性增生，見于溶血性貧血、急性失血后恢復期；計數(shù)減少（<0.5%）提示骨髓造血功能抑制，見于再生障礙性貧血。網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的參考范圍為成人0.5%-1.5%，絕對值為24-84×10?/L。網(wǎng)織紅細胞生成指數(shù)（RPI）是校正網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的重要參數(shù)，考慮了貧血程度和網(wǎng)織紅細胞在外周血中滯留時間的延長，更準確反映骨髓的紅細胞生成活性。紅細胞沉降率（ESR）1檢測原理利用紅細胞在靜止狀態(tài)下因重力作用而下沉的特性2檢測方法Westergren法是國際推薦的標準方法3影響因素血漿蛋白改變、紅細胞數(shù)量和形態(tài)、溫度等4臨床應用非特異性炎癥標志物，用于疾病活動性監(jiān)測紅細胞沉降率（ESR）是反映紅細胞在靜止血漿中沉降速度的指標，正常參考范圍為男性0-15mm/h，女性0-20mm/h。影響ESR的主要因素是血漿蛋白成分的變化，尤其是纖維蛋白原、球蛋白等急性期蛋白增加會促使紅細胞形成"錢串狀"排列，加速沉降。ESR升高見于多種炎癥性疾病，如感染、自身免疫性疾病、惡性腫瘤等。巨細胞動脈炎和類風濕性關節(jié)炎患者ESR顯著升高，是監(jiān)測疾病活動性的重要指標。雖然ESR缺乏特異性，但作為傳統(tǒng)炎癥標志物，仍廣泛應用于臨床篩查和疾病活動性評估。白細胞檢測-概述12345白細胞是人體免疫系統(tǒng)的核心細胞，正常人外周血白細胞總數(shù)為(4-10)×10?/L。白細胞的數(shù)量和分類比例變化可反映機體的免疫狀態(tài)和疾病特征，是臨床常用的感染和炎癥指標。白細胞檢測主要包括白細胞計數(shù)和白細胞分類計數(shù)兩部分，是血常規(guī)檢查的重要組成。中性粒細胞占白細胞總數(shù)的50%-70%，是抵抗細菌感染的主要細胞，具有趨化性、吞噬和殺菌作用。核分葉，胞質內含特異性顆粒，染色呈淡紫色。淋巴細胞占白細胞總數(shù)的20%-40%，是特異性免疫應答的主要執(zhí)行者，分為T淋巴細胞、B淋巴細胞和NK細胞。核圓形，胞質少，染色深藍。單核細胞占白細胞總數(shù)的3%-8%，是體內最大的白細胞，具有強大的吞噬能力和抗原呈遞功能。核形多變，常為腎形，胞質豐富。嗜酸性粒細胞占白細胞總數(shù)的1%-4%，參與過敏反應和寄生蟲感染防御。特征是胞質內含大量橘紅色顆粒。嗜堿性粒細胞占白細胞總數(shù)的0%-1%，是數(shù)量最少的白細胞，參與過敏反應和組胺釋放。胞質內含深藍色顆粒。白細胞計數(shù)（WBC）檢測方法常規(guī)采用自動血細胞分析儀電阻抗法或光散射法測定。血液經(jīng)稀釋液處理，溶解紅細胞，保留白細胞，通過計數(shù)孔時產(chǎn)生電信號或光信號，由儀器計數(shù)并計算得出結果。緊急情況下也可采用手工計數(shù)法，使用白細胞計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)。參考范圍成人白細胞正常參考范圍為(4-10)×10?/L。新生兒和嬰幼兒的正常值較高，可達(9-30)×10?/L，隨著年齡增長逐漸下降至成人水平。由于個體差異，應結合臨床情況綜合判斷白細胞計數(shù)的意義。白細胞增多癥白細胞計數(shù)>10×10?/L稱為白細胞增多癥。常見于：①各種感染，尤其是細菌感染；②炎癥反應；③組織壞死（心肌梗死、創(chuàng)傷等）；④惡性腫瘤（白血病、淋巴瘤等）；⑤應激狀態(tài)（劇烈運動、情緒激動等）；⑥藥物影響（糖皮質激素等）。白細胞減少癥白細胞計數(shù)<4×10?/L稱為白細胞減少癥。常見于：①病毒感染（流感、肝炎等）；②某些細菌感染（傷寒、敗血癥等）；③骨髓抑制（放化療、藥物毒性等）；④自身免疫性疾?。ㄏ到y(tǒng)性紅斑狼瘡等）；⑤脾功能亢進；⑥先天性白細胞減少癥。白細胞分類計數(shù)中性粒細胞淋巴細胞單核細胞嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞其他白細胞分類計數(shù)是指測定各類白細胞在白細胞總數(shù)中的百分比和絕對數(shù)量。傳統(tǒng)方法為顯微鏡下人工分類計數(shù)，需染色血涂片，計數(shù)100個白細胞，統(tǒng)計各類比例。現(xiàn)代自動血細胞分析儀采用電阻抗多參數(shù)聯(lián)合分析或流式細胞術，能快速提供五分類結果。中性粒細胞增多見于細菌感染、組織壞死和炎癥反應；淋巴細胞增多常見于病毒感染、百日咳和某些慢性感染；嗜酸性粒細胞增多提示過敏反應、寄生蟲感染或某些皮膚?。粏魏思毎龆嘁娪谀承┞愿腥救缃Y核和傷寒；嗜堿性粒細胞增多罕見，可能提示慢性粒細胞白血病和某些過敏反應。血小板檢測-概述1生理特性血小板是無核細胞碎片，由骨髓巨核細胞產(chǎn)生，正常壽命為7-10天。主要功能是參與凝血過程，形成血小板栓，防止出血，并釋放多種生物活性物質促進凝血和傷口愈合。血小板表面有豐富的糖蛋白受體，可介導血小板的黏附、聚集和活化。2檢測項目常規(guī)血小板檢測項目包括血小板計數(shù)(PLT)、平均血小板體積(MPV)、血小板分布寬度(PDW)和血小板壓積(PCT)。這些參數(shù)可反映血小板的數(shù)量、大小、異質性和總體積。高級血液分析儀還可提供網(wǎng)織血小板、血小板聚集等功能性參數(shù)。3臨床意義血小板數(shù)量異常常見于多種疾病，血小板減少可導致出血傾向，常見于骨髓疾病、免疫性疾病、感染和藥物相關等；血小板增多可增加血栓風險，見于原發(fā)性血小板增多癥、繼發(fā)性反應性增多等。血小板形態(tài)和功能異常也是多種疾病的重要指標。4檢測方法血小板計數(shù)方法包括手工計數(shù)法（顯微鏡下直接計數(shù)）、間接法（通過血涂片估算）和自動化方法（電阻抗法、光散射法、免疫法等）?，F(xiàn)代血液分析儀能同時提供血小板數(shù)量和體積參數(shù)，流式血小板儀可進一步評估血小板功能。血小板計數(shù)（PLT）檢測原理自動血細胞分析儀通常采用電阻抗法或光散射法計數(shù)血小板。電阻抗法根據(jù)血小板通過計數(shù)孔時產(chǎn)生的電阻變化記錄脈沖；光散射法則利用血小板散射激光產(chǎn)生的信號進行計數(shù)。對于血小板數(shù)量異常的樣本，有時需結合血涂片顯微鏡檢查進行校正。參考范圍正常成人血小板計數(shù)為(100-300)×10?/L。新生兒的參考范圍略低，為(150-400)×10?/L。由于檢測方法不同，不同實驗室可能存在輕微差異，每個實驗室應建立自己的參考區(qū)間。血小板減少癥當PLT<100×10?/L時稱為血小板減少癥。輕度減少(50-100)×10?/L通常無明顯癥狀；中度減少(20-50)×10?/L可出現(xiàn)輕微出血傾向；重度減少<20×10?/L時有明顯出血風險，可出現(xiàn)皮膚紫癜、黏膜出血等。常見于:①免疫性血小板減少癥；②骨髓疾??；③感染；④DIC；⑤藥物相關等。血小板增多癥當PLT>300×10?/L時稱為血小板增多癥。可分為原發(fā)性血小板增多癥（骨髓增殖性疾?。┖屠^發(fā)性血小板增多癥（反應性增多）。原發(fā)性血小板增多癥中血小板可達(600-1000)×10?/L以上，有血栓和出血風險。繼發(fā)性增多常見于炎癥、感染、手術后、惡性腫瘤、脾切除、缺鐵等狀態(tài)。平均血小板體積（MPV）平均血小板體積（MPV）是反映血小板大小的參數(shù)，正常參考范圍為7-11fL。MPV與血小板功能和骨髓造血狀態(tài)密切相關。一般來說，新生血小板體積較大，功能更強；老化血小板體積較小，功能相對減弱。MPV增大提示骨髓中巨核細胞加速產(chǎn)生血小板，常見于免疫性血小板減少癥（ITP）、Bernard-Soulier綜合征、May-Hegglin異常等；MPV減小常見于再生障礙性貧血、骨髓纖維化等骨髓造血功能低下的疾病。MPV還是心血管疾病的預后指標，大血小板與心血管事件風險增加相關。血小板分布寬度（PDW）定義與原理血小板分布寬度（PDW）是反映血小板大小異質性的參數(shù)，類似于紅細胞分布寬度（RDW）概念。它表示血小板體積分布曲線的離散程度，通常以變異系數(shù)表示，計算公式為PDW=(SD/MPV)×100%。1參考范圍PDW的正常參考范圍為9%-17%，不同實驗室可能有差異。PDW增大表示血小板大小異質性增加，血液中同時存在大、小血小板；PDW正常表示血小板大小較為均一。2臨床意義PDW增大常見于骨髓增殖性疾病、免疫性血小板減少癥、DIC等；PDW正常或降低見于再生障礙性貧血、骨髓抑制等。PDW與MPV結合分析可幫助鑒別血小板減少的原因。3注意事項PDW的測定受多種因素影響，包括檢測方法、抗凝劑類型、樣本保存時間等。EDTA抗凝劑可導致血小板輕度腫脹，影響PDW測定。不同血液分析儀測定PDW的方法不同，結果可能存在差異。4自動血細胞分析儀原理1流式細胞術結合光散射和熒光檢測2光學測量基于激光散射和吸收原理3電阻抗測量基于庫爾特原理4液體處理系統(tǒng)樣本稀釋和運送5數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)信號采集和結果計算現(xiàn)代自動血細胞分析儀通常集成多種技術原理，以實現(xiàn)血細胞的精確計數(shù)和分類。電阻抗法（庫爾特原理）是最早應用的技術，基于細胞通過微孔時產(chǎn)生的電阻變化；光學法利用血細胞散射光的特性，前向散射反映細胞體積，側向散射反映細胞內部結構；流式細胞術結合特異性熒光染料，可實現(xiàn)更精確的細胞分類。自動血細胞分析儀通常包括取樣系統(tǒng)、液體系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。先進的分析儀能同時提供多達30余項參數(shù)，包括紅細胞、白細胞、血小板的數(shù)量和形態(tài)學特征，以及網(wǎng)織紅細胞、未成熟粒細胞等參數(shù)，極大提高了血液檢測的效率和準確性。血細胞形態(tài)學檢查血涂片制備取一滴抗凝全血于玻片一端，用推片以30-45°角勻速推開，形成一個有"頭"、"體"、"尾"的血涂片。干燥后用瑞氏染色或Wright染色。好的血涂片應厚薄適中，紅細胞間有少量空隙，無重疊，便于形態(tài)觀察。鏡檢方法低倍鏡下先觀察血涂片質量和白細胞分布，然后在血涂片"體"部分用油鏡（100×）進行細胞形態(tài)學觀察。通常需觀察紅細胞大小、形狀、染色性、包涵體；白細胞數(shù)量、分類和形態(tài)特點；血小板數(shù)量和大小。異常形態(tài)紅細胞異常包括大小不等、形狀異常（靶形、鐮狀等）、染色異常（中央淡染區(qū)改變）、包涵體（Howell-Jolly小體等）；白細胞異常包括核形改變、細胞毒性顆粒、異常顆粒、空泡等；血小板異常包括大小異常、顆粒異常等。血細胞形態(tài)學檢查是血液學檢查的基礎技術，對血液系統(tǒng)疾病的診斷具有重要價值。它可提供自動血細胞分析儀無法獲取的細胞質量特征，是診斷貧血類型、白血病分類、感染性疾病及評估治療反應的重要手段。新技術如數(shù)字形態(tài)學分析系統(tǒng)能自動掃描血涂片，提供標準化的形態(tài)學分析結果。骨髓檢查-適應癥和方法檢查適應癥原因不明的血細胞減少或增多；疑似白血病、骨髓增殖性疾病或骨髓dysplasia綜合征；不明原因發(fā)熱、貧血或出血傾向；某些感染性疾病（如利什曼病、結核）診斷；評估腫瘤骨髓浸潤；干細胞移植前后評估；某些代謝性疾病的診斷（如高雪氏病）等。骨髓穿刺是最常用的骨髓取樣方法，通常在髂后上棘、胸骨或脛骨（嬰幼兒）進行。使用專用骨髓穿刺針通過皮膚、皮下組織和骨皮質進入骨髓腔，抽取少量骨髓液（約0.5ml）用于涂片檢查。整個過程需局部麻醉，疼痛輕微，并發(fā)癥少，主要有出血和感染。骨髓活檢在骨髓穿刺不滿意或需要評估骨髓組織結構時進行。使用特殊活檢針在髂骨取一小段骨髓組織（長1-2cm，直徑2mm左右），固定后做組織學檢查?；顧z可評估骨髓增生程度、結構改變和纖維化程度，對診斷骨髓纖維化和轉移性腫瘤更有價值。特殊檢查骨髓樣本還可用于流式細胞術、細胞遺傳學檢查（染色體核型分析）、FISH、分子生物學檢測（PCR檢測基因突變）、免疫組化等特殊檢查，對白血病分型、預后評估和靶向治療選擇具有重要價值。骨髓細胞學檢查正常骨髓細胞學正常骨髓有豐富的造血細胞，主要包括紅系、粒系、巨核系三大系列細胞。各階段造血細胞呈島狀分布，粒紅比約為2-4:1。粒系細胞從原始粒細胞到成熟中性粒細胞，紅系從原紅細胞到正染性紅細胞，各個階段的細胞比例相對穩(wěn)定。白血病骨髓特征急性白血病骨髓中原始細胞顯著增多（>20%），正常造血受抑制。細胞形態(tài)異常，可見Auer小體、異常顆粒等特殊結構。不同類型白血病骨髓表現(xiàn)不同，AML原始粒細胞增多，ALL原始淋巴細胞增多。慢性白血病則表現(xiàn)為相應系列成熟細胞的增多。骨髓增生異常骨髓增生異常綜合征（MDS）骨髓通常呈現(xiàn)增生活躍或正常，但細胞發(fā)育異常，表現(xiàn)為環(huán)形鐵粒幼紅細胞、小巨核細胞、核分葉異常粒細胞等。不同亞型有不同特點，如環(huán)形鐵粒幼紅細胞增多見于MDS-RS型。骨髓細胞學檢查是診斷血液系統(tǒng)疾病的金標準。檢查前應檢測血常規(guī)、凝血功能，排除檢查禁忌癥。骨髓穿刺后立即制作涂片，包括骨髓涂片和壓片，分別用瑞氏染色和組織學染色。骨髓檢查報告應包括骨髓增生程度、各系細胞比例、形態(tài)特點和病理性細胞描述等內容，有助于血液系統(tǒng)疾病的診斷和分型。特殊血液染色技術1過氧化物酶染色（MPO）用于鑒別粒系和單核系細胞。正常粒系細胞胞質內含過氧化物酶，呈陽性（棕色顆粒）；單核細胞弱陽性；紅系、淋巴系、巨核系陰性。在急性白血病分型中，MPO陽性率>3%支持AML診斷。2蘇丹黑B染色（SBB）染色特性與MPO相似，但更敏感，可檢測早期粒系細胞中的脂質體。某些MPO陰性的早期粒系細胞可能SBB陽性。在急性白血病鑒別診斷中與MPO互補使用。3非特異性酯酶染色（NSE）包括α-萘酯酯酶（ANAE）和萘酯醋酸酯酶（NASDA）。單核系細胞強陽性（彌漫性紅棕色）；粒系細胞弱陽性（顆粒狀）；氟化鈉抑制試驗可區(qū)分兩者。用于鑒別單核系白血?。ㄈ鏏ML-M5）。4特異性酯酶染色（SE）包括萘酯氯醋酯酶（CAE）。粒系細胞強陽性，呈現(xiàn)紅色顆粒；單核細胞、淋巴細胞、紅系細胞陰性。主要用于鑒別粒系細胞，尤其是早期粒系細胞的識別。5堿性磷酸酶染色（ALP）中性粒細胞內含堿性磷酸酶，染色后呈現(xiàn)藍色顆粒。正常ALP評分為40-100分。CML患者ALP評分明顯降低（0-20分），而感染、妊娠、多發(fā)性骨髓瘤時升高。用于鑒別CML和白細胞反應性增多。6鐵染色（Prussian藍染色）用于檢測骨髓內鐵含量和環(huán)形鐵粒幼紅細胞。正常骨髓鐵染色1-2級；缺鐵性貧血為0級；鐵粒貧血和MDS-RS中可見環(huán)形鐵粒幼紅細胞（>15%）。血液生化檢查-概述糖代謝主要包括血糖、糖化血紅蛋白、胰島素、C肽等指標，用于糖尿病的診斷、分型和治療監(jiān)測。這些指標可反映機體對糖的調節(jié)能力和長期血糖控制情況。肝功能包括轉氨酶（ALT、AST）、膽紅素、白蛋白、球蛋白、堿性磷酸酶等，用于評估肝臟的代謝功能、合成功能、排泄功能和細胞完整性。肝功能異常見于各種肝臟疾病。腎功能包括尿素氮、肌酐、尿酸、胱抑素C等，反映腎臟的濾過功能和代謝能力。這些指標對慢性腎臟病的早期診斷、分期和監(jiān)測具有重要價值。心肌酶譜包括肌酸激酶（CK）、肌鈣蛋白（cTnI、cTnT）、肌紅蛋白等，是心肌損傷的特異性標志物，廣泛應用于心肌梗死的診斷和風險評估。血液生化檢查是通過分析血液中各種生化成分，評估人體各器官功能和代謝狀態(tài)的重要方法。與血液學檢查相比，生化檢查更側重于反映器官功能和代謝變化。現(xiàn)代自動生化分析儀能同時檢測數(shù)十項生化指標，大大提高了檢測效率。血液生化檢查在疾病診斷、病情監(jiān)測和預后評估中具有廣泛應用。檢查前應注意空腹采血（特定項目），避免劇烈運動和飲酒，某些藥物可能影響檢測結果。結果解釋需結合臨床，單一指標異常往往不足以確診，多項指標的聯(lián)合分析更有診斷價值。血糖測定檢測方法主要有葡萄糖氧化酶法（GOD-POD）和己糖激酶法（HK）。葡萄糖氧化酶法是經(jīng)典方法，原理是葡萄糖被氧化生成葡萄糖酸和過氧化氫，后者在過氧化物酶作用下與顯色劑反應。己糖激酶法是參考方法，特異性更高，但成本較高。樣本要求常規(guī)檢測采用8小時空腹靜脈血，用含氟化鈉或草酸鉀的抗凝管，以抑制糖酵解。血漿比全血葡萄糖濃度高約15%。POCT血糖儀通常使用指尖毛細血，但精確度不如實驗室方法，主要用于自我監(jiān)測和急診。參考范圍正常成人空腹血糖為3.9-6.1mmol/L（靜脈血漿）。診斷標準：空腹血糖≥7.0mmol/L；或OGTT2小時血糖≥11.1mmol/L；或隨機血糖≥11.1mmol/L伴典型癥狀；或HbA1c≥6.5%。空腹血糖6.1-6.9mmol/L為空腹血糖受損（IFG）。臨床應用血糖測定是糖尿病診斷的基礎，也用于低血糖評估。糖尿病患者需定期監(jiān)測血糖，評估血糖控制情況和治療效果。血糖波動大的患者可能需要連續(xù)血糖監(jiān)測（CGM）系統(tǒng)，以全面了解24小時血糖變化規(guī)律。血脂檢查檢測項目參考范圍臨床意義異常時相關疾病總膽固醇（TC）3.1-5.2mmol/L反映血脂水平和冠心病風險高血脂、冠心病、膽道梗阻、腎病綜合征甘油三酯（TG）0.56-1.7mmol/L反映脂肪代謝狀態(tài)高脂血癥、糖尿病、酒精性肝病、胰腺炎高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）0.9-1.8mmol/L"好膽固醇"，具有抗動脈粥樣硬化作用降低見于冠心病、糖尿??；升高為保護因素低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）2.07-3.1mmol/L"壞膽固醇"，與動脈粥樣硬化相關升高見于冠心病、腦卒中、糖尿病等血脂檢查是評估血漿脂質代謝和心血管疾病風險的重要手段。檢查前應空腹12小時，避免飲酒和高脂飲食，某些藥物如他汀類可影響結果。采血后應及時分離血清，避免溶血。現(xiàn)代自動生化分析儀采用酶法測定各項血脂指標。血脂異常是動脈粥樣硬化性心血管疾病的主要危險因素。高TC、高LDL-C和低HDL-C與冠心病風險密切相關。治療目標應個體化，高危患者LDL-C目標值更低。除基礎血脂譜外，還可檢測載脂蛋白A、B和脂蛋白(a)等，進一步評估風險。肝功能檢查肝功能檢查包括肝細胞損傷指標、膽汁排泄功能指標和合成代謝功能指標。肝細胞損傷指標主要有ALT（丙氨酸轉氨酶）、AST（天冬氨酸轉氨酶）和乳酸脫氫酶（LDH）；膽汁排泄功能指標包括總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）、堿性磷酸酶（ALP）和γ-谷氨酰轉肽酶（GGT）；合成代謝功能指標有白蛋白（ALB）、凝血酶原時間（PT）等。不同類型肝病有不同的肝功能表現(xiàn)模式：急性肝炎以轉氨酶顯著升高為特點；膽汁淤積性疾病以膽紅素、ALP和GGT升高為主；慢性肝病晚期以白蛋白降低和PT延長為特征。肝功能指標變化還需結合肝炎病毒學指標、自身抗體、影像學等綜合判斷，以明確病因和評估嚴重程度。腎功能檢查肌酐（Cr）肌酐是肌肉代謝產(chǎn)物，主要經(jīng)腎臟排泄，血清肌酐水平與腎小球濾過率成反比。參考范圍：男性53-106μmol/L，女性44-97μmol/L。腎功能下降50%時Cr才開始升高，早期不敏感。肌酐受肌肉量影響，老年人和肌肉萎縮患者即使Cr正常也可能存在腎功能不全。尿素氮（BUN）尿素是蛋白質代謝的終產(chǎn)物，主要由腎臟排泄。參考范圍：2.9-8.2mmol/L。BUN不僅受腎功能影響，還受蛋白質攝入量、組織分解、消化道出血等因素影響。BUN/Cr比值對鑒別腎前性和腎性氮質血癥有幫助，前者比值常>20，后者通常正常（10-20）。胱抑素C（CysC）胱抑素C是一種低分子量蛋白，由所有有核細胞產(chǎn)生，經(jīng)腎小球完全濾過。參考范圍：0.51-1.09mg/L。其優(yōu)點是不受肌肉量、性別、年齡等影響，比肌酐更敏感，可早期發(fā)現(xiàn)腎功能異常。尤其適用于老年人、兒童、肌肉萎縮和營養(yǎng)不良患者的腎功能評估。估算腎小球濾過率（eGFR）根據(jù)血清肌酐和/或胱抑素C，結合年齡、性別、種族等因素計算eGFR，正常值>90ml/min/1.73m2。常用公式有MDRD公式和CKD-EPI公式，后者更準確。eGFR是慢性腎臟病分期的重要指標，也是調整腎排泄藥物劑量的依據(jù)。電解質檢查1鈉（Na?）人體主要細胞外陽離子，參考范圍135-145mmol/L。維持細胞外液滲透壓和酸堿平衡，參與神經(jīng)-肌肉興奮性調節(jié)。低鈉血癥見于腎上腺皮質功能減退、心力衰竭、SIADH等；高鈉血癥見于脫水、尿崩癥、高滲性非酮癥糖尿病昏迷等。2鉀（K?）人體主要細胞內陽離子，血鉀參考范圍3.5-5.5mmol/L。對心臟和神經(jīng)-肌肉功能至關重要。低鉀血癥（<3.5mmol/L）見于嘔吐、腹瀉、利尿劑使用等；高鉀血癥（>5.5mmol/L）見于腎功能不全、腎上腺皮質功能減退等，嚴重時可致心律失常。3氯（Cl?）主要細胞外陰離子，參考范圍95-105mmol/L。與鈉共同維持細胞外液滲透壓，參與酸堿平衡。低氯血癥常見于嘔吐、胃腸減壓、代謝性堿中毒；高氯血癥見于脫水、腎小管性酸中毒等。血氯與血鈉變化通常平行。4鈣（Ca2?）參考范圍：總鈣2.1-2.6mmol/L，離子鈣1.1-1.3mmol/L。鈣參與骨骼形成、血液凝固、肌肉收縮和神經(jīng)傳導。低鈣血癥見于甲狀旁腺功能減退、維生素D缺乏等；高鈣血癥見于甲狀旁腺功能亢進、惡性腫瘤等。凝血功能檢查-概述凝血功能基礎凝血是機體防止出血的重要機制，涉及血管、血小板和凝血因子三大系統(tǒng)。凝血過程包括內源性和外源性兩條途徑，最終形成纖維蛋白凝塊。凝血功能檢查旨在評估止血和凝血系統(tǒng)的功能狀態(tài)。1主要檢測項目常規(guī)凝血檢查包括凝血時間(CT)、出血時間(BT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)、纖維蛋白原(FIB)和D-二聚體等。這些指標共同反映凝血各個環(huán)節(jié)的功能狀態(tài)。2檢測原理現(xiàn)代凝血檢測多采用光學法或機械法，基于凝血過程中血漿渾濁度變化或機械阻力變化。樣本為枸櫞酸抗凝血漿，必須嚴格控制血漿比例(9:1)，并在采集后4小時內完成檢測。3臨床應用凝血功能檢查廣泛應用于出血性疾病診斷、抗凝藥物監(jiān)測、肝功能評估、DIC診斷等方面。異常結果需結合臨床表現(xiàn)和其他檢查綜合判斷，必要時進行特異性凝血因子活性測定。4凝血時間（CT）和出血時間（BT）凝血時間（CT）凝血時間是指新鮮全血在試管中自發(fā)凝固所需的時間，正常參考范圍為5-15分鐘。主要反映內源性凝血系統(tǒng)功能，包括Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ因子的活性。CT延長見于血友病、彌散性血管內凝血（DIC）、嚴重肝病和抗凝治療等?，F(xiàn)已較少使用，多被APTT替代。出血時間（BT）出血時間是指皮膚標準切口出血至自然止血所需時間，正常參考范圍為2-7分鐘（Duke法）或1-3分鐘（Ivy法）。主要反映初級止血功能，評估血小板數(shù)量和功能以及血管壁完整性。BT延長見于血小板減少癥、血小板功能異常、血管壁病變和阿司匹林等抗血小板藥物的應用。檢測方法CT測定采用Lee-White法，將新鮮全血置于37℃水浴中，每30秒傾斜試管一次，直到血液完全凝固不再流動。BT常用Duke法（耳垂穿刺）或Ivy法（前臂加壓穿刺），記錄從穿刺到出血自然停止的時間?，F(xiàn)代血小板功能分析儀可提供更客觀的血小板功能參數(shù)。臨床應用CT和BT對于篩查出血性疾病有一定價值，但特異性和敏感性不高。CT現(xiàn)已較少使用，多被APTT代替；BT仍用于評估先天性或獲得性血小板功能障礙，如血小板無力癥、尿毒癥以及阿司匹林等藥物影響。對于術前凝血功能評估，現(xiàn)更傾向于采用PT、APTT和血小板計數(shù)的組合?；罨糠帜蠲笗r間（APTT）檢測原理APTT是在添加活化劑（高嶺土、硅酸鹽等）和鈣離子的條件下，測定血漿凝固所需時間?；罨瘎┠芗せ顑仍葱阅到y(tǒng)的接觸因子（XII因子），啟動內源性凝血途徑，最終形成纖維蛋白凝塊?，F(xiàn)代凝血儀通過光電法或機械法檢測凝固時間。參考范圍APTT的正常參考范圍為25-35秒，但不同實驗室因試劑和儀器差異可能有所不同。APTT主要反映內源性凝血系統(tǒng)功能，是臨床最常用的凝血篩查試驗之一。與PT聯(lián)合使用，可全面評估凝血系統(tǒng)功能。臨床意義APTT延長見于：①凝血因子缺乏（VIII、IX、XI、XII因子等），如血友病A和B；②肝功能不全；③彌散性血管內凝血（DIC）；④抗凝治療（肝素）；⑤狼瘡抗凝物質存在。其中肝素治療監(jiān)測是最常見的應用，肝素治療時APTT目標通常為正常值的1.5-2.5倍。注意事項影響APTT結果的因素包括：①抗凝劑濃度不當；②采血技術不良導致組織液污染；③標本存放時間過長；④患者服用抗凝藥物。單純APTT延長需進一步檢測以確定原因，如混合試驗可鑒別凝血因子缺乏和抑制物，特異性凝血因子活性測定可明確缺乏的具體因子。凝血酶原時間（PT）11-15秒正常PT范圍成人凝血酶原時間的正常參考范圍，不同實驗室可能略有差異1.0正常INR值國際標準化比值的正常參考值，用于標準化PT結果2.0-3.0華法林治療目標INR大多數(shù)適應癥下華法林抗凝治療的目標INR范圍7維生素K依賴因子PT可反映凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ及凝血酶原的活性凝血酶原時間（PT）是測定血漿在加入組織因子（組織凝血活酶）和鈣離子后凝固所需的時間，主要反映外源性凝血系統(tǒng)功能。PT延長見于維生素K缺乏、肝功能不全、DIC、口服抗凝藥物（華法林）治療等情況。由于不同實驗室使用的試劑敏感性不同，PT結果可能存在較大差異。為了標準化PT結果，引入了國際標準化比值（INR）概念：INR=(PT患者/PT正常)^ISI，其中ISI為國際敏感系數(shù)。INR主要用于華法林抗凝治療的監(jiān)測，不同疾病有不同的目標INR范圍：大多數(shù)情況為2.0-3.0，機械瓣膜患者為2.5-3.5。纖維蛋白原（FIB）測定生理功能纖維蛋白原是由肝臟合成的一種可溶性糖蛋白，是凝血系統(tǒng)中含量最高的凝血因子（Ⅰ因子）。在凝血過程中，纖維蛋白原在凝血酶作用下轉變?yōu)椴蝗苄岳w維蛋白，形成血栓網(wǎng)絡。此外，纖維蛋白原還是急性期反應蛋白，參與炎癥反應過程。檢測方法纖維蛋白原測定主要有:①Clauss法：最常用方法，基于凝血酶催化纖維蛋白原轉變?yōu)槔w維蛋白的時間與纖維蛋白原濃度成反比的原理；②免疫比濁法：利用抗人纖維蛋白原抗體測定；③熱沉淀法：現(xiàn)已較少使用。參考范圍為2.0-4.0g/L。升高原因纖維蛋白原升高見于:①急性炎癥反應（如感染、創(chuàng)傷、手術等）；②妊娠和激素治療；③惡性腫瘤；④組織壞死（心肌梗死等）；⑤慢性肝病早期；⑥原發(fā)性高纖維蛋白原血癥。升高表明凝血系統(tǒng)處于高凝狀態(tài)，增加血栓形成風險。降低原因纖維蛋白原降低見于:①先天性纖維蛋白原異常；②嚴重肝功能不全（合成減少）；③DIC（消耗增加）；④纖溶亢進（降解增加）；⑤大量失血和輸液稀釋。當FIB<1.0g/L時可出現(xiàn)出血傾向，嚴重時需輸注冷沉淀或纖維蛋白原濃縮物。D-二聚體檢測生物學基礎D-二聚體是纖維蛋白特異性降解產(chǎn)物，含有交聯(lián)D片段。當纖維蛋白在凝血酶作用下交聯(lián)形成血栓，繼而被纖溶系統(tǒng)中的纖溶酶降解時產(chǎn)生。正常人體內存在微量D-二聚體（<0.5μg/mlFEU），代表生理性凝血和纖溶平衡。檢測方法主要有膠乳凝集法、免疫比濁法和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。ELISA法敏感性最高但耗時長；膠乳凝集法快速但靈敏度較低；免疫比濁法兼顧二者優(yōu)點，目前應用最廣?，F(xiàn)代全自動凝血分析儀多采用免疫比濁法。肺栓塞診斷D-二聚體是排除肺栓塞的重要指標，對臨床低危和中?；颊撸珼-二聚體陰性（<0.5μg/ml）可基本排除肺栓塞可能（陰性預測值>95%）。但陽性結果特異性差，需結合臨床危險度評分和影像學檢查確診。深靜脈血栓診斷與肺栓塞類似，D-二聚體主要用于排除深靜脈血栓形成（DVT）。對于臨床可能性低的患者，陰性結果可安全排除DVT。對于臨床可能性高或D-二聚體陽性者，需進一步行靜脈超聲等檢查確診。D-二聚體升高見于多種凝血活躍和纖溶亢進狀態(tài)，包括DIC、肺栓塞、深靜脈血栓、主動脈夾層、心肌梗死、腦卒中、嚴重感染、惡性腫瘤、妊娠、手術創(chuàng)傷等。老年人和腎功能不全患者基礎水平可能升高，影響診斷特異性，可采用年齡調整的臨界值。血型檢查和交叉配血1ABO血型系統(tǒng)ABO血型基于紅細胞表面A、B抗原的存在與否，分為A型（有A抗原）、B型（有B抗原）、AB型（有A和B抗原）和O型（無A和B抗原）。血清中存在與紅細胞表面不存在的抗原相對應的抗體（自然抗體）。檢測方法包括紅細胞正定型（細胞側）和血清反定型（血清側）。2Rh血型系統(tǒng)Rh系統(tǒng)包含多種抗原，其中D抗原最重要，有D抗原者為Rh陽性，無D抗原者為Rh陰性。Rh陰性人群不存在自然抗體，但接觸Rh陽性血液后可產(chǎn)生抗D抗體。Rh血型對輸血和妊娠有重要意義，尤其是Rh陰性孕婦懷Rh陽性胎兒時可引起新生兒溶血病。3交叉配血試驗交叉配血是輸血前必須進行的重要檢查，包括主側（受血者血清+供血者紅細胞）和次側（供血者血清+受血者紅細胞）。主側交叉配血主要檢測受血者血清中是否存在針對供血者紅細胞的抗體，是保證輸血安全的最后一道防線。4不規(guī)則抗體篩查不規(guī)則抗體是指針對自身紅細胞上不存在抗原的抗體，主要由輸血或妊娠等異體抗原刺激產(chǎn)生。常見的不規(guī)則抗體有抗D、抗K、抗Fy^a等。篩查方法包括鹽水介質法、蛋白質介質法和抗人球蛋白試驗，陽性者需進一步鑒定抗體特異性。輸血相容性檢測輸血相容性檢測是保障輸血安全的關鍵步驟，包括血型檢測、不規(guī)則抗體篩查和交叉配血試驗。ABO和Rh(D)血型鑒定是基礎，一般包括正反定型以交叉驗證。不規(guī)則抗體篩查旨在檢測受血者血清中是否存在可能導致輸血不良反應的抗體，陽性者需進一步鑒定抗體特異性并尋找相應抗原陰性的供血者。交叉配血試驗是輸血前最后的安全檢查，主側交叉配血（受血者血清+供血者紅細胞）是關鍵，通常采用鹽水法、白蛋白法和抗人球蛋白法三種方法。緊急情況下可采用縮短的配血程序，但至少應完成血型鑒定和主側交叉配血。對于需長期、多次輸血的患者，應定期進行不規(guī)則抗體篩查以防同種免疫。血液免疫學檢查-概述1分子水平檢測PCR、基因芯片等核酸檢測2細胞功能檢測淋巴細胞轉化試驗、細胞因子檢測3免疫細胞分析淋巴細胞亞群、NK細胞活性4血清學檢測免疫球蛋白、補體、自身抗體5基礎檢查血常規(guī)、炎癥標志物、變態(tài)反應試驗血液免疫學檢查是評估機體免疫功能狀態(tài)的重要手段，對免疫系統(tǒng)疾病的診斷、分類和治療監(jiān)測具有重要價值。免疫系統(tǒng)主要包括細胞免疫和體液免疫兩大部分，對應的檢查項目也圍繞這兩個方面展開?；A檢查包括外周血白細胞計數(shù)和分類、炎癥標志物（CRP、ESR等）；血清學檢查包括免疫球蛋白測定、補體測定、自身抗體檢測等；細胞免疫檢查包括淋巴細胞亞群分析、NK細胞活性、細胞因子測定等；分子免疫學檢測包括基因多態(tài)性分析、HLA分型等。免疫學檢查結果解釋需結合臨床，單一指標異常往往難以確診特定疾病。炎癥標志物檢測（CRP,ESR）C反應蛋白（CRP）CRP是由肝臟合成的急性期反應蛋白，在炎癥、組織損傷和感染時迅速升高，正常值<8mg/L。特點是反應迅速（6-8小時開始升高），恢復也快（半衰期約19小時）。檢測方法主要有免疫比濁法和免疫散射比濁法。高敏CRP（hs-CRP）可檢測更低濃度（<1mg/L），主要用于心血管風險評估。紅細胞沉降率（ESR）ESR反映紅細胞在靜止血漿中沉降的速度，正常值男性0-15mm/h，女性0-20mm/h。ESR升高主要受血漿蛋白（尤其是纖維蛋白原、免疫球蛋白）變化影響。與CRP相比，ESR反應較慢（24-48小時），恢復也慢（數(shù)天至數(shù)周）。ESR檢測簡便，但受年齡、性別、貧血等因素影響較大。臨床應用CRP和ESR廣泛用于炎癥性疾病的篩查、診斷和監(jiān)測。細菌感染中CRP升高更明顯，而病毒感染中可能輕度升高或正常。在自身免疫性疾病如類風濕性關節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡中，兩者常用于疾病活動性評估和治療反應監(jiān)測。臨床上常結合兩項指標綜合判斷，提高診斷準確性。臨床解釋CRP和ESR均為非特異性炎癥標志物，單獨升高診斷價值有限。兩者均升高提示活動性炎癥，如感染、自身免疫病、惡性腫瘤等；CRP升高而ESR正常常見于早期細菌感染；ESR升高而CRP正?？梢娪谀承┳陨砻庖卟§o止期。兩者均正?；究膳懦@著炎癥存在。自身抗體檢測自身抗體相關疾病檢測方法臨床意義抗核抗體(ANA)系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、干燥綜合征等間接免疫熒光法(IIF)、ELISA篩查性指標，陽性需進一步分型抗dsDNA抗體系統(tǒng)性紅斑狼瘡ELISA、IIF特異性高，與腎損傷相關抗ENA抗體各種結締組織病ELISA、免疫印跡法包括Sm,SSA,SSB,RNP等多種抗體抗CCP抗體類風濕性關節(jié)炎ELISA特異性高，早期診斷和預后評估ANCA血管炎綜合征IIF、ELISA分為p-ANCA和c-ANCA兩種類型自身抗體是機體對自身組織成分產(chǎn)生的抗體，在自身免疫性疾病診斷中具有重要價值。檢測方法主要包括間接免疫熒光法（IIF）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、免疫印跡法和放射免疫分析法（RIA）等。自身抗體檢測在結締組織病診斷中尤為重要：系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者常見ANA和抗dsDNA抗體陽性；類風濕關節(jié)炎患者中抗CCP抗體和類風濕因子陽性；干燥綜合征患者抗SSA/Ro和抗SSB/La抗體陽性；硬皮病患者抗Scl-70抗體陽性。自身抗體水平還可反映疾病活動度和預后，如抗dsDNA抗體與狼瘡腎炎相關，抗CCP抗體高滴度提示類風濕關節(jié)炎預后較差。過敏原特異性IgE檢測1檢測原理過敏原特異性IgE是機體對特定過敏原產(chǎn)生的特異性抗體，是Ⅰ型變態(tài)反應的介質。檢測方法包括放射免疫吸附試驗（RAST）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、化學發(fā)光免疫分析（CLIA）等?，F(xiàn)代自動化分析系統(tǒng)可同時檢測多種過敏原特異性IgE，提高效率。2常見過敏原吸入性過敏原：塵螨、花粉、霉菌、動物皮屑等；食入性過敏原：牛奶、雞蛋、花生、海鮮等；接觸性過敏原：金屬、化妝品、藥物等；昆蟲毒液：蜜蜂毒、螞蟻毒等。不同地區(qū)和人群常見過敏原譜存在差異，檢測前應根據(jù)臨床表現(xiàn)有針對性地選擇過敏原。3結果解釋結果通常以級別（0-6級）或數(shù)值（kU/L）表示，0級為陰性，1級為邊緣陽性，2級及以上為陽性。級別越高提示過敏可能性越大，但并不一定與臨床癥狀嚴重程度完全一致。陽性結果需結合臨床癥狀綜合判斷其意義，避免過度診斷。4臨床應用主要用于過敏性疾病如過敏性鼻炎、過敏性哮喘、特應性皮炎、食物過敏等的診斷和過敏原篩查。確定致敏過敏原有助于制定避免接觸措施和脫敏治療方案。也可用于評估過敏風險，如藥物過敏風險評估，減少不良反應發(fā)生。血液腫瘤標志物檢測AFP（甲胎蛋白）主要用于原發(fā)性肝癌篩查和監(jiān)測，正常值<20ng/mL。肝癌患者70-80%可出現(xiàn)AFP升高，且水平常與腫瘤大小相關。其他如生殖細胞腫瘤、妊娠和某些良性肝病也可導致AFP升高。1CEA（癌胚抗原）主要用于結直腸癌監(jiān)測，正常值<5ng/mL。CEA不適合早期篩查，但對評估手術徹底性和復發(fā)監(jiān)測有價值。其他如胃癌、肺癌、乳腺癌等也可引起CEA升高。2CA125主要用于卵巢癌的輔助診斷和監(jiān)測，正常值<35U/mL。約80%卵巢癌患者CA125升高，但特異性不高，子宮內膜異位癥、盆腔炎等良性疾病也可引起升高。3CA199主要用于胰腺癌和膽道系統(tǒng)腫瘤的輔助診斷和監(jiān)測，正常值<37U/mL。敏感性和特異性有限，胰腺炎和膽道梗阻等良性疾病也可引起顯著升高。4PSA（前列腺特異抗原）用于前列腺癌篩查和監(jiān)測，正常值<4ng/mL。PSA有較高組織特異性，但器官特異性不足，前列腺增生、前列腺炎等也可引起升高。游離/總PSA比值有助于良惡性鑒別。5腫瘤標志物是由腫瘤細胞產(chǎn)生或機體對腫瘤的反應而產(chǎn)生的物質，可通過血液檢測。常用檢測方法包括化學發(fā)光免疫分析、酶聯(lián)免疫吸附試驗等。腫瘤標志物在腫瘤早期篩查、輔助診斷、預后評估、治療監(jiān)測和復發(fā)監(jiān)測中有重要應用。血液病毒學檢查乙型肝炎病毒（HBV）HBV檢測包括五項血清學標志物：HBsAg（表面抗原）、抗HBs（表面抗體）、HBeAg（e抗原）、抗HBe（e抗體）和抗HBc（核心抗體）。HBsAg陽性提示感染HBV，HBeAg陽性提示高復制期，抗HBs陽性提示免疫力。HBV-DNA定量可評估病毒復制水平，指導抗病毒治療。丙型肝炎病毒（HCV）HCV檢測包括抗HCV抗體和HCV-RNA?？笻CV陽性僅提示曾經(jīng)感染，確診現(xiàn)癥感染需檢測HCV-RNA。HCV基因分型對治療方案選擇和預后判斷有價值。直接抗病毒藥物（DAAs）治療后需監(jiān)測HCV-RNA，評估治愈效果。人類免疫缺陷病毒（HIV）HIV檢測包括抗HIV抗體和HIV抗原（p24）聯(lián)合檢測，以及HIV-RNA定量。初篩陽性需進行確證試驗，如蛋白質印跡法。HIV-RNA定量用于監(jiān)測病毒載量，指導抗病毒治療和判斷療效。CD4+T淋巴細胞計數(shù)是評估免疫功能的重要指標。其他病毒檢測EB病毒（EBV）檢測對傳染性單核細胞增多癥和某些淋巴瘤診斷有價值；巨細胞病毒（CMV）檢測在器官移植和免疫抑制患者中尤為重要；人類T淋巴細胞白血病病毒（HTLV）與成人T細胞白血病/淋巴瘤相關；新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）檢測包括核酸檢測和抗體檢測。血培養(yǎng)和微生物學檢查血培養(yǎng)技術血培養(yǎng)是檢測血流感染的金標準。采血前需嚴格消毒，減少污染。通常采集2-3套血培養(yǎng)，每套包括需氧和厭氧培養(yǎng)瓶。成人每瓶采血8-10ml，兒童適當減少。血培養(yǎng)瓶放入自動培養(yǎng)系統(tǒng)，可連續(xù)監(jiān)測微生物生長產(chǎn)生的CO?，陽性信號提示有微生物生長。細菌學檢查血培養(yǎng)陽性后，首先進行革蘭染色，初步區(qū)分為革蘭陽性菌（紫色）或革蘭陰性菌（紅色）。然后接種于適當培養(yǎng)基，分離純培養(yǎng)物，進行生化鑒定和藥敏試驗?，F(xiàn)代全自動微生物鑒定系統(tǒng)和質譜分析可快速鑒定微生物種類，縮短報告時間。真菌學檢查懷疑真菌血癥時，可使用專門真菌培養(yǎng)基或延長培養(yǎng)時間。常見致病真菌包括念珠菌、隱球菌和曲霉菌等。除培養(yǎng)外，還可檢測β-D-葡聚糖、半乳甘露聚糖等真菌標志物，或通過PCR檢測真菌DNA，提高檢出率。血培養(yǎng)是診斷血流感染（菌血癥、真菌血癥）的重要手段，對于不明原因發(fā)熱尤其是伴有寒戰(zhàn)、高熱的患者應及時進行。血培養(yǎng)陽性率與多種因素有關，包括采血時機、采血量、培養(yǎng)瓶數(shù)量和抗生素使用情況等。除常規(guī)培養(yǎng)外，還可采用分子生物學方法如多重PCR和宏基因組測序等快速檢測血液中的病原體，尤其適用于難培養(yǎng)微生物和抗生素預處理患者。分子生物學技術在血液檢測中的應用聚合酶鏈反應（PCR）PCR技術通過特異性引物和酶促擴增，可檢測微量靶DNA序列。在血液學中廣泛應用于：①白血病融合基因檢測（如BCR-ABL、PML-RARα）；②病毒載量檢測（HBV、HCV、HIV、CMV等）；③遺傳病基因突變檢測（如血友病、地中海貧血）；④微小殘留病變（MRD）監(jiān)測。定量PCR可準確測定靶序列拷貝數(shù)，用于疾病監(jiān)測和療效評估?；驕y序技術從Sanger測序到新一代測序（NGS），測序技術顯著提高了通量和降低了成本。NGS在血液學中的應用包括：①血液腫瘤全外顯子或靶向基因組測序，發(fā)現(xiàn)驅動突變；②RNA測序分析基因表達譜；③液體活檢檢測循環(huán)腫瘤DNA；④宏基因組測序檢測病原體。這些技術為精準醫(yī)療提供了分子基礎。熒光原位雜交（FISH）FISH利用熒光標記的DNA探針與靶序列特異性雜交，可檢測染色體結構或數(shù)目異常。在血液學中主要用于：①檢測特定的染色體易位，如t(9;22)、t(15;17)等；②檢測基因擴增或缺失，如17p缺失、1q21擴增等；③監(jiān)測造血干細胞移植后嵌合狀態(tài)。FISH比傳統(tǒng)核型分析更敏感，可檢測間期細胞。數(shù)字PCR和液體活檢數(shù)字PCR將樣本分成數(shù)千個微反應體系，實現(xiàn)單分子檢測，靈敏度極高。液體活檢通過檢測外周血中的循環(huán)腫瘤DNA、循環(huán)腫瘤細胞、外泌體等，實現(xiàn)非侵入性腫瘤檢測。這些技術在血液腫瘤早期診斷、微小殘留病變監(jiān)測、耐藥突變篩查等方面有廣闊應用前景。流式細胞術在血液檢測中的應用技術原理流式細胞術是利用液流動力學使細胞單個通過檢測區(qū)域，同時收集散射光和熒光信號的技術。前向散射（FSC）反映細胞大小，側向散射（SSC）反映細胞內部復雜度，多色熒光通道檢測不同熒光標記的細胞表面或內部抗原?，F(xiàn)代流式細胞儀可同時檢測10-30種參數(shù)。白血病免疫分型流式細胞術是白血病分型的金標準，通過檢測細胞表面和胞內抗原表達譜識別不同類型白血病。如B-ALL表達CD19、CD20、CD22；T-ALL表達CD2、CD3、CD7；AML表達CD13、CD33、MPO等。精確分型對治療方案選擇和預后評估至關重要。淋巴細胞亞群分析可檢測外周血T細胞（CD3+）、B細胞（CD19+）、NK細胞（CD3-CD16+CD56+）及其亞群。廣泛應用于免疫缺陷疾病診斷、HIV感染免疫狀態(tài)監(jiān)測、自身免疫性疾病評估和造血干細胞移植后免疫重建監(jiān)測等領域。流式細胞術還用于微小殘留病變（MRD）監(jiān)測，通過檢測特異性抗原組合或異常表達模式，可檢測出常規(guī)形態(tài)學無法發(fā)現(xiàn)的少量殘留腫瘤細胞（敏感度可達10??-10??）。其他應用包括血小板功能檢測、細胞周期分析、細胞凋亡檢測、干細胞計數(shù)和分選等。多參數(shù)流式細胞術和質譜流式細胞術等新技術的發(fā)展，進一步拓展了流式細胞術在血液學中的應用。質量控制在血液檢測中的重要性內部質量控制指實驗室內部開展的質量控制活動，主要包括：①質控品測定，通過定期測定已知濃度的質控品，評估方法的精密度；②均值圖和西格瑪規(guī)則，用于監(jiān)測檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性；③平行樣本重復測定，評估方法重復性；④空白樣本測定，檢查系統(tǒng)污染；⑤儀器性能驗證，確保儀器各項參數(shù)符合要求。1外部質量評價由第三方機構組織的質量評價活動，多家實驗室同時檢測相同樣本，結果與靶值或同行業(yè)水平比較。主要形式包括：①室間質量評價，定期進行，比較不同實驗室間結果差異；②能力驗證，評估實驗室檢測特定項目的能力；③盲樣測試，不預先告知樣本性質。參加外部質量評價是實驗室認證的必要條件。2標準操作程序標準操作程序（SOP）是規(guī)范實驗室工作的重要文件，應包括檢測原理、適用范圍、樣本要求、操作步驟、質量控制、結果判斷和注意事項等內容。SOP應定期更新，確保符合最新標準和技術要求。所有實驗室人員必須嚴格按照SOP操作，減少人為差異。3實驗室認證實驗室認證是對實驗室質量管理體系的認可，如ISO15189醫(yī)學實驗室認證。認證內容包括質量管理體系、人員資質、設備管理、方法學驗證、質量控制程序等。認證實驗室需接受定期監(jiān)督和再評審，確保持續(xù)符合標準要求。認證有助于提高實驗室檢測質量和社會認可度。4常見血液檢測誤差分析1分析后誤差結果報告和解釋中的錯誤，如數(shù)據(jù)傳輸錯誤、單位換算錯誤等2分析中誤差檢測過程中的儀器故障、試劑問題或操作不當3分析前誤差樣本采集、處理和運輸過程中的問題4生物學變異個體內和個體間的自然生物學差異誤差分析和控制是保證血液檢測質量的關鍵。分析前誤差占實驗室總誤差的60%-70%，包括患者準備不當（如未空腹）、錯誤識別、不當采血技術（如止血帶使用時間過長、采血困難導致溶血）、樣本標記錯誤、標本量不足、抗凝劑選擇或比例不當、樣本保存和運輸條件不當（溫度、時間）等。分析中誤差包括儀器校準不準確、質控失控未處理、檢測方法干擾因素（如溶血、高脂血、高膽紅素血）、操作人員技術不熟練等。分析后誤差包括結果錄入錯誤、單位換算錯誤、數(shù)據(jù)傳輸系統(tǒng)故障、報告解釋不準確等。減少誤差的關鍵措施包括標準化操作流程、完善質量控制體系、人員培訓、信息系統(tǒng)改進和實驗室認證等。血液檢測結果的臨床解釋參考區(qū)間的含義參考區(qū)間通常是基于健康人群95%的分布范圍確定的，即健康人群中有5%的人可能在區(qū)間外。結果超出參考區(qū)間并不一定意味著疾病，同樣，在參考區(qū)間內也不能完全排除疾病。解釋結果時應結合臨床表現(xiàn)、其他檢查結果和患者個體情況。動態(tài)變化的價值連續(xù)多次檢測結果的變化趨勢常比單次檢測更有臨床意義。即使在參考區(qū)間內的變化也可能提示潛在問題。例如，血小板數(shù)量持續(xù)下降但仍在正常范圍內，可能是某些疾病的早期表現(xiàn)。應關注變化率和變化模式，而非僅關注單一數(shù)值。聯(lián)合分析的重要性單項指標異常通常不足以做出診斷，多項指標聯(lián)合分析可提高診斷準確性。例如，貧血診斷需結合紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、MCV等多項指標；肝功能評估需綜合轉氨酶、膽紅素、白蛋白等指標。某些疾病有典型的實驗室指標組合模式。臨床綜合判斷實驗室結果只是臨床決策的一部分，應結合病史、體檢、影像學等共同判斷。醫(yī)生需要了解檢測的敏感性、特異性和預測值，評估假陽性和假陰性的可能性。某些特殊人群（如老年人、孕婦）可能需要使用特定的參考區(qū)間。貧血的實驗室診斷貧血是指血紅蛋白濃度低于正常參考范圍（男性<130g/L，女性<120g/L）。根據(jù)紅細胞形態(tài)學特征可分為小細胞低色素性貧血（MCV<80fL，MCHC<320g/L）、正細胞正色素性貧血（MCV80-100fL）和大細胞正色素性貧血（MCV>100fL）。小細胞低色素性貧血常見于缺鐵性貧血、地中海貧血和部分慢性病貧血，鑒別診斷需檢測血清鐵蛋白、轉鐵蛋白飽和度、血紅蛋白電泳和基因檢測等；正細胞正色素性貧血常見于急性失血、溶血性貧血和某些骨髓疾病，需檢測網(wǎng)織紅細胞計數(shù)、庫姆斯試驗、血清LDH和膽紅素等；大細胞性貧血主要見于巨幼紅細胞貧血，應檢測維生素B12、葉酸水平和骨髓象等。不同類型貧血治療方案差異較大，準確分型至關重要。白血病的實驗室診斷1血常規(guī)篩查白血病患者常見白細胞計數(shù)異常（急性白血病可增高或降低，慢性粒細胞白血病顯著增高），貧血和血小板減少。外周血涂片可見原始細胞或異常細胞，如急性髓系白血病可見Auer小體，慢性粒細胞白血病可見各階段粒系細胞增多。2骨髓形態(tài)學檢查白血病診斷的金標準，急性白血病骨髓中原始細胞>20%。形態(tài)學結合特殊染色如過氧化物酶（MPO）、非特異性酯酶（NSE）等，可初步分型為急性髓系白血病（AML）或急性淋巴細胞白血?。ˋLL）。慢性粒細胞白血?。–ML）骨髓增生活躍，以粒系為主。3免疫表型分析流式細胞術檢測白血病細胞表面和胞內抗原表達譜，是白血病精確分型的重要手段。如B-ALL表達CD19、CD10、CD20；T-ALL表達CD2、CD3、CD7；AML表達CD13、CD33、CD117、MPO等。不同亞型有特征性表達模式，對治療方案選擇和預后評估至關重要。4細胞遺傳學分析檢測白血病相關染色體異常，包括傳統(tǒng)核型分析和FISH技術。如AML-M2常有t(8;21)，急性早幼粒細胞白血病有t(15;17)，CML有Ph染色體t(9;22)。這些異常對白血病分型、預后判斷和靶向治療選擇具有重要價值。5分子生物學檢測PCR和測序技術檢測白血病相關基因突變和融合基因，如BCR-ABL1、PML-RARα、RUNX1-RUNX1T1、FLT3-ITD、NPM1等。這些分子標志物對白血病精準分型、微小殘留病變監(jiān)測和靶向治療選擇具有關鍵作用。血小板疾病的實驗室診斷原發(fā)性血小板減少癥免疫性血小板減少癥（ITP）是最常見的原發(fā)性血小板減少癥，是一種獲得性自身免疫性疾病。實驗室特點包括：①單純血小板減少，其他血細胞正常；②骨髓中巨核細胞數(shù)量正?；蛟龆啵“迳蓽p少；③血小板抗體（如抗GPIIb/IIIa抗體）陽性；④排除其他引起血小板減少的疾病。ITP的診斷主要是排除性診斷，需結合臨床表現(xiàn)和實驗室檢查。繼發(fā)性血小板減少癥繼發(fā)性血小板減少癥常見原因包括：①骨髓疾病（如白血病、再生障礙性貧血）；②感染（如病毒性肝炎、HIV感染）；③藥物相關；④DIC；⑤脾功能亢進；⑥妊娠相關。診斷需根據(jù)原發(fā)疾病的特點進行針對性檢查，如骨髓檢查、病毒學檢測、藥物史評估等。不同原因引起的血小板減少，治療方案差異較大。血小板增多癥血小板計數(shù)>300×10?/L稱為血小板增多癥，可分為原發(fā)性和繼發(fā)性。原發(fā)性血小板增多癥是一種骨髓增殖性腫瘤，特點是JAK2、CALR或MPL基因突變，骨髓巨核細胞增生，血小板持續(xù)性增高，常伴脾大。繼發(fā)性血小板增多是對感染、炎癥、失血、手術、惡性腫瘤等應激狀態(tài)的反應性增高，多為一過性，隨原發(fā)疾病改善而恢復正常。血小板功能障礙先天性血小板功能障礙包括Bernard-Soulier綜合征（GPIb-IX-V缺陷）、Glanzmann血小板無力癥（GPIIb/IIIa缺陷）等；獲得性血小板功能障礙常見于尿毒癥、肝病、骨髓增殖性腫瘤以及阿司匹林等藥物影響。檢測方法包括出血時間、血小板聚集功能測定、流式細胞術評估血小板活化標志物和特定糖蛋白表達，以及基因檢測等。凝血障礙的實驗室診斷凝血障礙包括先天性和獲得性兩大類。先天性凝血障礙主要有血友病A（VIII因子缺乏）、血友病B（IX因子缺乏）和vonWillebrand病。實驗室診斷包括篩查試驗（APTT、PT、TT）和確診試驗（凝血因子活性測定、vonWillebrand因子抗原和活性測定、基因檢測）。血友病A特點是APTT延長而PT正常，VIII因子活性降低；血友病B表現(xiàn)為APTT延長，IX因子活性降低。獲得性凝血障礙常見的有維生素K缺乏、肝功能不全、DIC和抗凝藥物過量。DIC是最嚴重的獲得性凝血障礙之一，實驗室特點包括血小板減少、纖維蛋白原降低、PT和APTT延長、D-二聚體顯著升高。血栓彈力圖（TEG）可提供全面的凝血功能評估，對指導輸血和凝血因子替代治療有重要價值。實驗室檢測結果需結合臨床表現(xiàn)和出血史綜合判斷。血液檢測在慢性病管理中的應用1糖尿病管理血糖監(jiān)測是糖尿病管理的基礎，包括空腹血糖、餐后血糖和糖化血紅蛋白（HbA1c）。HbA1c反映近2-3個月的平均血糖水平，是評估長期血糖控制的金標準，目標值通常<7%。新技術如連續(xù)血糖監(jiān)測（CGM）可提供24小時血糖波動情況，有助于識別無癥狀低血糖和優(yōu)化治療方案。血脂、腎功能和微量白蛋白尿等檢測對評估并發(fā)癥風險和監(jiān)測治療效果也很重要。2高血壓和心血管疾病除常規(guī)血壓監(jiān)測外，血液檢測在心血管疾