2025屆深圳四校發(fā)展聯(lián)盟體高考考前模擬生物試題注意事項1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于用顯微鏡觀察細胞的實驗，敘述正確的是A．轉(zhuǎn)換物鏡時應(yīng)該手握物鏡小心緩慢轉(zhuǎn)動B．以洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮為材料不能觀察到質(zhì)壁分離C．蘇丹Ⅲ染色后的花生子葉細胞中可觀察到橘黃色顆粒D．在新鮮黑藻小葉臨時裝片中可進行葉綠體形態(tài)觀察和計數(shù)2．某種二倍體高等植物的性別決定類型為XY型。該植物有寬葉和窄葉兩種葉形，寬葉對窄葉為顯性。控制這對相對性狀的基因（B/b）位于X染色體上，含有基因b的花粉不育。下列敘述錯誤的是A．窄葉性狀只能出現(xiàn)在雄株中，不可能出現(xiàn)在雌株中B．寬葉雌株與寬葉雄株雜交，子代中可能出現(xiàn)窄葉雄株C．寬葉雌株與窄葉雄株雜交，子代中既有雌株又有雄株D．若親本雜交后子代雄株均為寬葉，則親本雌株是純合子3．將某種植物的成熟細胞放入一定濃度的物質(zhì)A溶液中，其液泡的體積變化趨勢如圖所示。下列敘述正確的是（）A．0?4h內(nèi)物質(zhì)A沒有通過細胞膜進入細胞內(nèi)B．0?lh內(nèi)細胞體積與液泡體積的變化量相等C．2?3h內(nèi)物質(zhì)A溶液的濃度小于細胞液的濃度D．1?2h內(nèi)由于失水過多，細胞可能已經(jīng)死亡4．調(diào)查某與外界隔絕的島嶼上的居民的兩種單基因遺傳病甲和乙分別在男性群體和女性群體的發(fā)病率，得到如圖所示的數(shù)據(jù)，據(jù)此下列說法中不正確的是（）A．甲病的遺傳方式為伴X染色體的隱性遺傳B．乙病的遺傳方式為伴X染色體的顯性遺傳C．該群體中控制乙病基因的基因頻率為10%D．男性個體中同時患兩種遺傳病的概率為2%5．下列有關(guān)實驗的敘述，錯誤的是（）A．除了一個因素之外，其余因素都保持不變的是對照實驗B．探究細胞大小與物質(zhì)運輸效率的實驗中，自變量為瓊脂塊表面積與體積比，因變量為NaOH在瓊脂塊中的擴散體積與瓊脂塊體積比C．探究生長素類似物促進插條生根的最適濃度時，可通過預(yù)試驗減小誤差D．采用建立模型的方法可以幫助人們認識人體血糖的調(diào)節(jié)機制6．下列有關(guān)細胞結(jié)構(gòu)及其功能的敘述，錯誤的是（）A．細胞膜、線粒體膜上均有運輸葡萄糖的載體B．主動運輸可使細胞內(nèi)外離子濃度差異加大C．葉肉細胞吸收Mg2+所需的ATP不會來自光反應(yīng)D．控制細菌性狀的基因主要位于擬核DNA上7．研究者采用投放食浮游植物的魚類和種植大型挺水植物構(gòu)建生物修復(fù)系統(tǒng)的方法治理水體富營養(yǎng)化，下圖表示水體中部分能量流動關(guān)系（圖中數(shù)字表示同化的能量）。下列敘述錯誤的是（）A．生物修復(fù)系統(tǒng)構(gòu)建后，種間關(guān)系會發(fā)生變化B．挺水植物能遮光，從而影響藻類生長C．該生態(tài)系統(tǒng)中第一營養(yǎng)級到第二營養(yǎng)級能量的傳遞效率為1．6%D．除了已標出的能量去向之外，甲的能量去向還有自身呼吸作用以熱能形式散失8．（10分）熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中某種DNA含量。其原理是在PCR體系中每加入一對引物的同時加入一個與某條模板鏈互補的熒光探針，當(dāng)Taq酶催化子鏈延伸至探針處，會水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號，即每擴增一次，就有一個熒光分子生成。相關(guān)敘述錯誤的是（）A．引物與探針均具特異性，與模板結(jié)合時遵循堿基互補配對原則B．反應(yīng)最終的熒光強度與起始狀態(tài)模板DNA含量呈正相關(guān)C．若用cDNA作模板，上述技術(shù)也可檢測某基因的轉(zhuǎn)錄水平D．Taq酶催化DNA的合成方向總是從子鏈的3’端向5’端延伸二、非選擇題9．（10分）溫室大棚養(yǎng)殖蔬菜瓜果，最重要的是水肥管理。為探究施肥及CO2濃度對藍莓凈光合速率的影響，科研人員進行了相關(guān)實驗，結(jié)果如下圖所示：（注：NPK指添加氮、磷肥和鉀肥;NP指添加氮和磷肥）?；卮鹣铝袉栴}：（1）據(jù)圖分析，實驗的自變量不止一個，除CO2濃度外，還有________________________。（2）a點所代表的含義為________________。（3）CO2濃度為2.0×10-2時，根據(jù)圖表可知，_____組促進藍莓的凈光合速率最低。在CO2濃度為3.0×10-2時，單獨施用鉀肥藍莓凈光合速率低的原因是：很多與光合作用過程直接相關(guān)的物質(zhì)的合成離不開N、P等元素，如__________（至少寫兩種）。（4）中耕松土能促進無機鹽的吸收，其原因是________________________。10．（14分）棉蚜吸取棉花植株汁液為食，其排泄物含糖量很高可吸引一種黃蟻來取食?？蒲腥藛T對某地棉田中的棉蚜的種群數(shù)量及其防治展開研究。請回答下列問題：（1）生態(tài)學(xué)上可以通過調(diào)查害蟲的___________來預(yù)測害蟲種群數(shù)量的變化趨勢。種群數(shù)量“S”型曲線，屬于建立________模型的方法描述種群數(shù)量的發(fā)展變化。（2）瓢蟲是棉蚜的天敵，黃蟻可幫棉蚜驅(qū)趕瓢蟲，棉蚜與黃蟻的種間關(guān)系為____________，判斷依據(jù)是________________________________。（3）使用某種藥物防治棉蚜，施藥超過一定次數(shù)，棉蚜的數(shù)量不降反增，請從進化和種間關(guān)系兩個角度進行分析可能的原因________________________。（4）與大規(guī)模單一栽培棉花相比，在棉田周圍設(shè)置以苜蓿為主的防護帶，可降低棉蚜的病蟲害，其原因是___________________________。11．（14分）基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段。如圖是基因工程示意圖，請據(jù)圖回答下列問題：（1）從基因文庫中提取的目的基因通過PCR技術(shù)進行擴增時，所用的酶與細胞內(nèi)同類酶的差異在于該酶______________。（2）進行①過程時，需用______________酶切開載體以插入目的基因。若要使目的基因在受體細胞中表達，需要通過表達載體而不能直接將目的基因?qū)耸荏w細胞，原因是應(yīng)___________________（答出兩點即可）。（3）若圖中宿主細胞為大腸桿菌，一般情況下②過程不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是____________________________；已轉(zhuǎn)化的宿主細胞（大腸桿菌）指的是____________________________。（4）真核生物基因（目的基因）在大腸桿菌細胞內(nèi)表達時，表達出的蛋白質(zhì)可能會被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解，在實驗中應(yīng)選用______________的大腸桿菌作為受體細胞，在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加______________的抑制劑。12．生態(tài)專家把某一廢棄池塘改造成新型池塘，并對該生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)和能量流動進行了調(diào)查，結(jié)果如圖所示。該新型池塘生態(tài)系統(tǒng)中有香蓮、蘆蒿、多種藻類、水草，還有多種魚類、蟲類，塘邊建有豬舍和蘑菇房。回答下列問題：（1）在該池塘上發(fā)生的群落演替類型屬于____；調(diào)查池塘中草魚的種群密度，常采用的方法是______。該生態(tài)系統(tǒng)中的挺水植物、浮游植物、沉底植物及生活在水體中的其他生物形成了群落的____結(jié)構(gòu)。（2）改造后的生態(tài)系統(tǒng)生物組分增多，食物網(wǎng)變復(fù)雜，提高了生態(tài)系統(tǒng)的____。寫出該生態(tài)系統(tǒng)中營養(yǎng)級最多的一條食物鏈_____。（3）該生態(tài)系統(tǒng)的能量來源是____。消費者的新陳代謝和分解者的分解作用，能把有機物轉(zhuǎn)化成無機物，這體現(xiàn)了生態(tài)系統(tǒng)具有____的功能，圖中的分解者有__________

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

1、葉肉細胞中的葉綠體，呈綠色、扁平的橢球形或球形，散布于細胞質(zhì)中，可以在高倍顯微鏡下觀察它的形態(tài)；2、脂肪可用蘇丹Ⅲ染液（或蘇丹Ⅳ染液）鑒定，呈橘黃色（或紅色）；3、發(fā)生質(zhì)壁分離的細胞為：活的成熟的植物細胞。【詳解】A、轉(zhuǎn)換物鏡時應(yīng)該手握物鏡轉(zhuǎn)換器小心緩慢轉(zhuǎn)動，A錯誤；B、以洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮為材料也能觀察到質(zhì)壁分離，只需要將視野調(diào)暗，B錯誤；C、蘇丹Ⅲ染色后的花生子葉細胞中可觀察到橘黃色顆粒，C正確；D、在新鮮黑藻小葉裝片中可進行葉綠體形態(tài)和分布的觀察，不可以計數(shù)，D錯誤。故選C?！军c睛】本題主要考查顯微鏡的使用及相關(guān)實驗，要求考生理解顯微鏡使用的步驟，理解實驗材料的選擇要求。2、C【解析】

XY型性別決定的生物中，基因型XX代表雌性個體，基因型XY代表雄性個體，含有基因b的花粉不育即表示雄配子Xb不育，而雌配子Xb可育?！驹斀狻坑捎诟副緹o法提供正常的Xb配子，故雌性后代中無基因型為XbXb的個體，故窄葉性狀只能出現(xiàn)在雄性植株中，A正確；寬葉雌株的基因型為XBX-，寬葉雄株的基因型為XBY，若寬葉雌株與寬葉雄株雜交，當(dāng)雌株基因型為XBXb時，子代中可能會出現(xiàn)窄葉雄株XbY，B正確；寬葉雌株與窄葉雄株，寬葉雌株的基因型為XBX-，窄葉雄株的基因型為XbY，由于雄株提供的配子中Xb不可育，只有Y配子可育，故后代中只有雄株，不會出現(xiàn)雌株，C錯誤；若雜交后代中雄株均為寬葉，且母本的Xb是可育的，說明母本只提供了XB配子，故該母本為寬葉純合子，D正確。故選C。3、C【解析】

分析曲線圖：0～1h內(nèi)，液泡的相對體積不斷縮小，說明此時期細胞失水而發(fā)生質(zhì)壁分離；2～4h內(nèi)，液泡的相對體積不斷增大，說明此時期細胞吸水發(fā)生質(zhì)壁分離的自動復(fù)原?！驹斀狻緼、由圖可知，該細胞中液泡的相對體積先減小后增大，這說明該細胞先發(fā)生質(zhì)壁分離后發(fā)生質(zhì)壁分離的復(fù)原，由此可推知物質(zhì)A可通過細胞膜進入細胞，A錯誤；B、0～1h內(nèi)，液泡的體積不斷縮小，由于原生質(zhì)體的伸縮性要遠大于細胞壁，因此該時間段內(nèi)細胞體積與液泡體積的變化量不相等，B錯誤；C、2～3h內(nèi)液泡的相對體積逐漸增大，這說明細胞吸水，由此可推知該時間段內(nèi)物質(zhì)A溶液的濃度小于細胞液的濃度，C正確；D、2h后細胞仍能發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原，說明1?2h細胞未死亡，D錯誤。故選C。4、D【解析】

由表可知，甲病的男性患者多于女性，因此甲病是伴X染色體的隱性遺傳病，乙病的男性患者少于女性，因此乙病是伴X染色體的顯性遺傳病。【詳解】A、由表可知，甲病的男性患者多于女性，因此甲病是伴X染色體的隱性遺傳病，A正確；B、乙病的男性患者少于女性，因此乙病是伴X染色體的顯性遺傳病，B正確；C、乙病的男性患者占10%，由于乙病是伴X染色體的顯性遺傳病，XBY占10%，XbY占90%，則XB的基因頻率為10%，C正確；D、甲病和乙病的致病基因都在X染色體上，因此控制這兩種遺傳病的基因不遵循自由組合定律，此時乘法定律不適用，D錯誤。故選D。5、C【解析】

1.探究“細胞大小與物質(zhì)運輸?shù)年P(guān)系”的實驗的目的是通過探究細胞表面積與體積之比，與物質(zhì)運輸速率之間的關(guān)系，探討細胞不能無限長大的原因；實驗中測量不同大小的瓊脂塊上NaOH擴散的深度相同；通過模擬實驗可看出，細胞體積越小，其相對表面積越大，細胞的物質(zhì)運輸效率就越高。2.實驗誤差是高中生做實驗時經(jīng)常面對的問題，為了減少偶然誤差，一般采取的措施是：平均取樣、多次取樣并計算平均值等。在做探性狀分離比模擬的實驗時，增加試驗次數(shù)能使統(tǒng)計的結(jié)果更準確，減少實驗的誤差。預(yù)實驗可以檢驗實驗設(shè)計的科學(xué)性和可行性。3.模型構(gòu)建法：模型是人們?yōu)榱四撤N特定的目的而對認識對象所做的一種簡化的概括性的描述，這種描述可以是定性的，也可以是定量的；有的借助具體的實物或其它形象化的手段，有的則抽象的形式來表達。模型的形式很多，包括物理模型、概念模型、數(shù)學(xué)模型等。以實物或圖畫形式直觀的表達認識對象的特征，這種模型就是物理模型。沃森和克里克制作的著名的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，就是物理模型。4.對照實驗：在探究某種條件對研究對象的影響時，對研究對象進行的除了該條件不同以外，其他條件都相同的實驗?！驹斀狻緼、根據(jù)以上分析可知，除了一個因素之外，其余因素都保持不變的是對照實驗，A正確；B、根據(jù)以上分析可知，在探究細胞大小與物質(zhì)運輸效率關(guān)系的實驗中，自變量為瓊脂塊表面積與體積比，因變量為NaOH在瓊脂塊中的擴散體積與瓊脂塊體積比，B正確；C、探究生長素類似物促進插條生根的最適濃度時，在預(yù)實驗中需要設(shè)置用蒸餾水處理的對照組，這樣能大致確定促進生根和抑制生根的濃度范圍，但不能減小實驗誤差，C錯誤；D、采用建立模型的方法可以幫助人們認識人體血糖的調(diào)節(jié)機制，D正確。故選C。6、A【解析】

葡萄糖的氧化分解發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)中，故細胞膜上有它的載體而線粒體上沒有其載體等。主動運輸能逆濃度梯度運輸離子，使得細胞內(nèi)外存在濃度差?！驹斀狻緼、葡萄糖不能進入線粒體，因此線粒體膜上沒有運輸葡萄糖的載體，A錯誤；B、主動運輸保證細胞按照生命活動的需要主動地選擇吸收營養(yǎng)物質(zhì)，可逆濃度梯度進行運輸，使細胞內(nèi)外離子濃度差異加大，B正確；C.真核細胞葉綠體光反應(yīng)中產(chǎn)生的ATP只能用于暗反應(yīng)，植物葉肉細胞吸收Mg2+所需的能量可由線粒體合成的ATP提供，葉肉細胞吸收Mg2+所需的ATP不會來自光反應(yīng)，C正確；D、細菌是原核生物，無染色體，控制細菌性狀的基因主要位于擬核DNA上，D正確。故選A。7、C【解析】

1、食物鏈反映的是生產(chǎn)者與消費者之間吃與被吃的關(guān)系，所以食物鏈中不應(yīng)該出現(xiàn)分解者和非生物部分。食物鏈的正確寫法是：生產(chǎn)者→初級消費者→次級消費者…注意起始點是生產(chǎn)者。2、在生態(tài)系統(tǒng)中能量沿著食物鏈流動逐級遞減，即能量往下一級傳遞只是傳遞上一級能量的10%～20%?！驹斀狻緼.生物修復(fù)系統(tǒng)構(gòu)建后，種間關(guān)系會發(fā)生變化，A正確；B、挺水植物能遮光，使藻類獲得的光能減少，光合作用減弱，從而影響藻類生長，B正確；C、水草、藻類流向甲的能量有1900÷25000×100%=1.6%，而第二營養(yǎng)級還包括其他魚類，因此圖中所示食物網(wǎng)中第一營養(yǎng)級到第二營養(yǎng)級能量的傳遞效率大于1.6%，C錯誤；D、除了已標出的能量去向之外，甲的能量去向還有自身呼吸作用以熱能形式散失，D正確。故選C。8、D【解析】

PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中某種DNA含量的原理是在PCR體系中每加入一對引物的同時加入一個與某條模板鏈互補的熒光探針，當(dāng)Taq酶催化子鏈延伸至探針處，會水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號，即每擴增一次，就有一個熒光分子生成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成完全同步?！驹斀狻緼、引物與探針均具特異性，與模板結(jié)合時遵循堿基互補配對原則，A正確；B、題干中提出“每加入一對引物的同時加入一個與某條模板鏈互補的熒光探針”，并且“每擴增一次，就有一個熒光分子生成”，因此反應(yīng)最終的熒光強度與起始狀態(tài)模板DNA含量呈正相關(guān)，B正確；C、由于cDNA是以某基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成的，所以若用cDNA作模板，上述技術(shù)也可檢測某基因的轉(zhuǎn)錄水平，C正確；D、由圖可知，Taq酶催化DNA的合成方向總是從子鏈的5’端向3’端延伸，D錯誤。故選D。二、非選擇題9、施肥（不同）種類（也可以是否含鉀肥）及鉀肥濃度添加N肥和P肥時（NP組）的CO2的補償點（光合速率等于呼吸速率時的CO2濃度）NP（CK）酶、ATP、[H]、葉綠素等中耕松土促進根細胞有氧呼吸，有利于主動運輸吸收無機鹽【解析】

影響光合作用的環(huán)境因素：光照、二氧化碳濃度、溫度、水、礦質(zhì)元素等；由題圖可知，該實驗的自變量是礦質(zhì)元素的種類和二氧化碳度，因變量是凈光合作用強度因此實驗的目的是探究礦質(zhì)元素和二氧化碳濃度對光合作用強度的影響；分析實驗的過程應(yīng)該遵循對照原則和單一變量原則?！驹斀狻浚?）由分析可知，自變量是施肥種類及鉀肥濃度和二氧化碳濃度，光照強度、溫度等屬于無關(guān)變量，無關(guān)變量應(yīng)該保持一致且適宜。（2）NP組中，a點凈光合速率為0，即光合作用固定的二氧化碳與呼吸作用產(chǎn)生的二氧化碳相等，a點對應(yīng)的二氧化碳濃度是二氧化碳的補償點。（3）看圖可知，CO2濃度為2.0×10-2時，NP組藍莓的凈光合速率最低。光合作用過程中，需要N、P等元素參與的物質(zhì)有酶、ATP、[H]、葉綠素等。（4）植物根細胞吸收無機鹽的方式是主動運輸，需要消耗能量，中耕松土促進根細胞有氧呼吸，有利于主動運輸吸收無機鹽。【點睛】本題考查學(xué)生理解礦質(zhì)元素、二氧化碳濃度對凈光合作用的影響，學(xué)會按照實驗的對照原則和單一變量的原則分析實驗結(jié)果、獲取結(jié)論。解答該題要注意對長句答案的描述準確性、簡潔性、完整性。10、年齡組成數(shù)學(xué)互利共生兩種生物共同生活在一起，相互依存，彼此有利隨著施藥次數(shù)增加，棉蚜的抗藥性增強；藥物在殺滅棉蚜的同時可能殺死了棉蚜的天敵提高生物多樣性，進一步提高生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性（或為棉蚜的天敵提供食物和棲息的場所）【解析】

1.種群的特征有：種群密度、出生率和死亡率、遷出率和遷入率、年齡組成和性別比例四個基本特征。種群在單位面積或單位體積中的個體數(shù)就是種群密度。種群密度是衡量種群大小的數(shù)量指標，出生率和死亡率、遷出率和遷入率是決定種群數(shù)量變化的主要特征，年齡組成是預(yù)測種群數(shù)量變化的重要因素，性別比例是影響種群數(shù)量的重要因素。2.互利共生是指兩種生物共同生活在一-起，相互依賴，彼此有利；如果分開，則雙方或一方不能獨立生活，共生生物之間呈現(xiàn)出同步變化，即"同生共死，榮辱與共”?！驹斀狻浚?）種群的數(shù)量特征包括種群密度、年齡組成、性別比例、出生率和死亡率等，其中年齡組成可以預(yù)測種群數(shù)量的變化趨勢。種群數(shù)量“S”型曲線，屬于建立數(shù)學(xué)模型的方法描述種群數(shù)量的發(fā)展變化。（2）瓢蟲是棉蚜的天敵，黃蟻可幫棉蚜驅(qū)趕瓢蟲，同時黃蟻還以蚜蟲的排泄物為食，據(jù)此可知，棉蚜與黃蟻的種間關(guān)系為互利共生，表現(xiàn)為兩種生物共同生活在一起，相互依存，彼此有利。（3）使用某種藥物防治棉蚜，施藥超過一定次數(shù)，棉蚜的數(shù)量不降反增，從進化角度分析，可能的原因是通過農(nóng)藥的選擇作用棉蚜的抗藥性增強；從種間關(guān)系角度分析，可能的原因是藥物在殺滅棉蚜的同時可能殺死了棉蚜的天敵。（4）與大規(guī)模單一栽培棉花相比，在棉田周圍設(shè)置以苜蓿為主的防護帶，能提高生物多樣性，使得營養(yǎng)結(jié)構(gòu)變得復(fù)雜，進而可以進一步提高生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性，降低棉蚜的病蟲害?！军c睛】熟知種群的特征以及與個特征與種群數(shù)量之間的聯(lián)系是解答本題的關(guān)鍵！關(guān)注抗藥性的形成以及化學(xué)防治的危害是解答本題的另一關(guān)鍵！11、耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）限制（或限制性核酸內(nèi)切）目的基因無復(fù)制原點、目的基因無表達所需啟動子目的基因無表達所需的終止子未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力弱已導(dǎo)入目的基因并且目的基因能穩(wěn)定遺傳和表達的細胞蛋白酶缺陷型蛋白酶【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA??分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，需要特殊的耐高溫的DNA聚合酶。（2）在構(gòu)建基因表達載體時，需用限制酶將載體切開，以便目的基因的插入；若要使目的基因在受體細胞中表達，需要通過表達載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細胞，原因是目的基因無復(fù)制原點、目的基因無表達所需啟動子和終止子。（3）若受體細胞是大腸桿菌（微生物），由于未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力弱，則需要用鈣離子處理大腸桿菌，使之成為感受態(tài)細胞；已轉(zhuǎn)化的宿主細胞（大腸桿菌）指的是已導(dǎo)入目的基因并且目的基因能穩(wěn)定遺傳和表達的細胞。（4）真核生物基因（目的基因）在大腸桿菌細胞內(nèi)表達時，表達出的蛋白質(zhì)可能會被降解，為防止蛋白質(zhì)被降解，可以選用不能產(chǎn)