2025屆吉林省公主嶺市高三壓軸卷生物試卷注意事項(xiàng)：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．抗生素的廣泛使用，使得部分細(xì)菌表現(xiàn)出對抗生素的耐藥性。下列敘述錯誤的是（）A．自然選擇作用于細(xì)菌個體而導(dǎo)致基因頻率改變B．細(xì)菌在接觸抗生素后產(chǎn)生抗藥性而被保留下來C．耐藥性菌可能是若干個突變累加一起的產(chǎn)物D．細(xì)菌耐藥性的增強(qiáng)是適應(yīng)性進(jìn)化的一種體現(xiàn)2．在實(shí)驗(yàn)室里的一個果蠅種群中，10%的果蠅體色為黑色，體色為棕色的果蠅中純合子占1/3。該果蝸種群中黑色基因的頻率為A．10% B．20% C．40% D．60%3．某植物花的紅色和白色受多對等位基因控制，用該種植物的三個基因型不同的紅花純系（甲、乙、丙）分別與白花純系雜交，其子一代都開紅花，子二代都出現(xiàn)了白花植株，且紅花和白花的比例分別為15：1、63：1、4095：1。下列描述正確是（）A．這對相對性狀至少受5對等位基因控制B．只有當(dāng)每對基因都有顯性基因存在時才表現(xiàn)為紅色C．讓甲和乙雜交，其子二代開白花概率的最大值是1/64D．讓甲與白花純系雜交的子一代測交，其子代紅花：白花為3：14．關(guān)于酶的敘述，錯誤的是（）A．同一種酶可存在于分化程度不同的活細(xì)胞中B．低溫能降低酶活性的原因是其破壞了酶的空間結(jié)構(gòu)C．酶通過降低化學(xué)反應(yīng)的活化能來提高化學(xué)反應(yīng)速度D．酶既可以作為催化劑，也可以作為另一個化學(xué)反應(yīng)的底物5．下列相關(guān)實(shí)驗(yàn)中涉及“分離”的敘述正確的是A．植物細(xì)胞質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)中，滴加蔗糖溶液的目的是使細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞壁分離B．綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，色素分離是因其在層析液中溶解度不同C．植物根尖細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中，可以觀察到姐妹染色單體彼此分離的過程D．T2噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中，離心的目的是使噬菌體的DNA與蛋白質(zhì)分離6．細(xì)胞分化是活細(xì)胞的正常生命活動，下列有關(guān)細(xì)胞分化的敘述，不正確的是（）A．細(xì)胞分化是生物個體發(fā)育的基礎(chǔ)B．細(xì)胞分化使細(xì)胞DNA發(fā)生了改變C．細(xì)胞分化使細(xì)胞功能趨向?qū)ｉT化D．細(xì)胞分化使細(xì)胞器數(shù)目發(fā)生改變7．大豆種子萌發(fā)過程中鮮重的變化曲線如圖。下列說法錯誤的是（）A．階段I中種子細(xì)胞的結(jié)合水/自由水的比值下降B．階段II中胚細(xì)胞合成有解除休眠作用的赤霉素逐漸增多C．階段I中種子細(xì)胞有機(jī)物總質(zhì)量變多而鮮重增加D．階段I后根向地生長的原因是生長素分布不均8．（10分）當(dāng)呼吸道黏膜受到機(jī)械刺激或化學(xué)刺激后，產(chǎn)生的興奮傳到腦干的相關(guān)中樞，進(jìn)而引起呼吸肌快速收縮或舒張，產(chǎn)生咳嗽反射。下列敘述正確的是（）A．刺激呼吸道黏膜引起的咳嗽反射屬于條件反射B．刺激引發(fā)的興奮以局部電流的形式在神經(jīng)纖維上傳導(dǎo)C．咳嗽反射過程中，神經(jīng)遞質(zhì)在突觸間隙處的移動需要消耗ATPD．長期咳嗽伴發(fā)的咽喉腫痛的痛覺中樞位于腦干二、非選擇題9．（10分）生物體的大部分細(xì)胞都可分泌外泌體，它是內(nèi)含生物大分子的小膜泡，研究人員發(fā)現(xiàn)胰腺癌細(xì)胞的擴(kuò)散轉(zhuǎn)移與外泌體相關(guān)。為了給胰腺癌的綜合治療提供方向和思路，科學(xué)家進(jìn)行了相關(guān)的研究。（1）請寫出題干中未提到的癌細(xì)胞的兩個特點(diǎn)_________。（2）腫瘤內(nèi)部處于低氧條件下的胰腺癌細(xì)胞會分泌外泌體，內(nèi)含一段小分子RNA（稱為miR-650），外泌體可將miR-650傳遞給周圍常氧條件下胰腺癌細(xì)胞N。miR-650可與細(xì)胞N中某些mRNA結(jié)合，從而導(dǎo)致mRNA被降解或其_________過程被抑制。（3）研究人員進(jìn)行了劃痕實(shí)驗(yàn)，證明細(xì)胞N的遷移是由外泌體中的miR-650引起的。具體做法：將細(xì)胞N與外泌體混合培養(yǎng)至細(xì)胞剛剛長滿培養(yǎng)板時，在培養(yǎng)板上均勻劃兩條直線。劃線后，用培養(yǎng)液洗去兩線之間的細(xì)胞并在顯微鏡下拍照；然后放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)24小時后，取出培養(yǎng)板在同一位置拍照，對比細(xì)胞的遷移情況，結(jié)果見下圖。請寫出該實(shí)驗(yàn)應(yīng)設(shè)置的另一組及其結(jié)果_________。（4）目前已知的細(xì)胞缺氧調(diào)控機(jī)制是：缺氧情況下，細(xì)胞中的HIF-1α（低氧誘導(dǎo)因子）會進(jìn)入細(xì)胞核激活缺氧調(diào)節(jié)基因。這一基因能進(jìn)一步激活多種基因的表達(dá)，引起系列反應(yīng)，如：促進(jìn)氧氣的供給與傳輸、促進(jìn)細(xì)胞的轉(zhuǎn)移等。而正常氧條件時，HIF-1α?xí)cVHL蛋白結(jié)合，最終被蛋白酶體降解。具體機(jī)制如下圖所示。研究發(fā)現(xiàn)，與低氧胰腺癌外泌體混合培養(yǎng)后的常氧胰腺癌細(xì)胞N中HIF-1α水平明顯升高。請結(jié)合上述研究，推測低氧胰腺癌細(xì)胞促進(jìn)其周圍的常氧胰腺癌細(xì)胞N轉(zhuǎn)移的機(jī)理_________。10．（14分）家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力，科學(xué)家將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。請回答下列相關(guān)問題：（1）進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需將獲得的幼蠶組織先剪碎，并用_____________短時處理以便獲得單個細(xì)胞。（2）在培養(yǎng)獲得單個細(xì)胞時，為避免雜菌污染，除對培養(yǎng)液和用具進(jìn)行無菌處理以外，還應(yīng)在培養(yǎng)液中添加一定量的_____________。培養(yǎng)過程中，發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞分裂生長到相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖，此現(xiàn)象稱為_______________。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以增大_____________，從而增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于氣體交換。（3）將干擾素基因?qū)肱囵B(yǎng)的家蠶細(xì)胞時，需要載體協(xié)助，而載體一般不選擇___________（填“噬菌體”或“昆蟲病毒”），原因是___________________________________。（4）若干擾素基因來自cDNA文庫，在構(gòu)建過程中______________（填“需要”或“不需要”）在目的基因的首端添加啟動子，原因是__________________________________。11．（14分）應(yīng)用基因工程技術(shù)可以獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請根據(jù)資料和圖解回答下列問題：資料1：蜘蛛絲(絲蛋白)被稱為“生物鋼”，有著超強(qiáng)的抗張強(qiáng)度?？芍瞥煞缽棻承?、降落傘繩等。蜘蛛絲還可被制成人造韌帶和人造肌腱?？茖W(xué)家研究出集中生產(chǎn)蜘蛛絲的方法——培育轉(zhuǎn)基因蜘蛛羊。資料2：注射疫苗往往會在兒童和部分成年人身上引起痛苦。將疫苗藏身水果蔬菜中，人們在食用這些轉(zhuǎn)基因植物的同時也獲得免疫力，因而無需免疫接種，這一新概念將引起疫苗研究的一場革命。(1)過程①⑤所需要的工具酶有_______________和________________，構(gòu)建的蜘蛛絲蛋白基因表達(dá)載體一般由____________、____________、啟動子、終止子等部分組成。(2)過程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入山羊受體細(xì)胞時，采用最多也最有效的方法是_______________。通過①～④過程培育的蜘蛛羊可以作為乳腺生物反應(yīng)器，從____________中提取所需要的蜘蛛絲蛋白。(3)如果將過程③獲得的早期胚胎進(jìn)行如圖分割，則操作正確的是_______________。(4)通過⑤⑥⑦培育轉(zhuǎn)基因萵苣，相比誘變育種和雜交育種方法，具有______和____等突出優(yōu)點(diǎn)。12．為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C（圖1），擬將其與Ti質(zhì)粒（圖2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中?；卮鹣铝袉栴}：（1）PCR技術(shù)所用到的關(guān)鍵酶是__________，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，其目的是__________。（2）圖1是花色基因C兩側(cè)被EcoRI酶切后所形成的末端結(jié)構(gòu)，請寫出EcoRI酶識別序列并標(biāo)出切點(diǎn)：__________（用“↓”表示切點(diǎn)位置）。圖2中EcoRI酶所識別的位點(diǎn)應(yīng)在Ti質(zhì)粒的__________片段上。（3）將導(dǎo)人目的基因的菊花細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用__________技術(shù)，其原理是__________。（4）在個體生物學(xué)水平上，如何鑒定轉(zhuǎn)基因菊花培育是否成功？____________________

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

現(xiàn)代生物進(jìn)化理論內(nèi)容：種群是生物進(jìn)化的基本單位，生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是種群基因頻率的定向改變；突變和基因重組為生物進(jìn)化提供原材料；自然選擇決定生物進(jìn)化的方向；隔離是物種形成的必要條件。【詳解】A、自然選擇作用于細(xì)菌個體，淘汰一部分沒有抗藥性的細(xì)菌，導(dǎo)致種群基因頻率改變，A正確；B、細(xì)菌在接觸抗生素之前就已經(jīng)產(chǎn)生了抗藥性變異，在抗生素的選擇作用下被寶留下了，B錯誤；C、耐藥性菌可能是若干個突變累加一起的產(chǎn)物，C正確；D、細(xì)菌耐藥性的增強(qiáng)，是適應(yīng)性進(jìn)化的一種體現(xiàn)，D正確。故選B。2、C【解析】

本題考查種群的基因型頻率和基因頻率的計算，要求考生能根據(jù)題意確定種群內(nèi)AA、Aa、aa的基因型頻率，再根據(jù)公式計算出a的基因頻率=aa的基因型頻率+Aa的基因型頻率x1/2。根據(jù)題意可知，果蠅體色中棕色（A）對黑色（a）為顯性，10%的果蠅體色為黑色（aa），體色為棕色的果蠅中純合子（AA）占1/3，則種群中AA占（1-10%）x1/3=30%，Aa占（1-10%）×2/3=60%，因此該果蠅種群中黑色基因（a）的頻率為10%+60%×1/2=40%，C正確，ABD錯誤?！军c(diǎn)睛】解題思路點(diǎn)撥：關(guān)于常染色體上種群基因型頻率和基因頻率的計算可借助于下列公式進(jìn)行：1）某種基因型頻率=某種基因型個體數(shù)/種群個體總數(shù)x100%。2）種群中A的基因頻率=AA基因型頻率+Aa的基因型頻率×1/2，a的基因頻率=aa基因型頻率+Aa的基因型頻率×1/2。3、D【解析】

本題考查基因自由組合定律的相關(guān)知識。根據(jù)題意分析可知：甲、乙、丙不同的紅花純系分別與白花純系雜交，在所有的雜交組合中，子一代都開紅花，子二代都出現(xiàn)了白花植株，遵循基因的自由組合定律。由于子一代均開紅花，因此紅花為顯性性狀?！驹斀狻緼、由分析可知，控制花色的基因遵循基因的自由組合定律，紅花和白花的比例分別為15：1、63：1、4095：1，說明只有純隱性個體才會表現(xiàn)為白花；子二代中紅花和白花的比例為15：1時，說明子一代有2對基因是雜合的；子二代中紅花和白花的比例為63：1時，說明子一代有3對基因是雜合的；子二代中紅花和白花的比例為4095：1也就是（1/4）6=1/4096時，說明子一代有6對基因是雜合的，A錯誤；B、由以上分析可知，只要所有等位基因中任何一對有顯性基因存在就會表現(xiàn)為紅色，B錯誤；C、讓甲和乙雜交，如果兩個體的顯性基因均不同，由以上分析可知，則不同的顯性基因有2+3=5對，則子二代開白花的概率的最大值是（1/4）5=1/1024，如果有相同的顯性基因，則沒有開白花的個體，C錯誤；D、讓甲與白花純系雜交，子一代有2對基因是雜合的，子一代測交，其子代紅花：白花為3：1，D正確。故選D。4、B【解析】

1.同一種酶可存在于分化程度不同的活細(xì)胞中，例如，與呼吸作用有關(guān)的酶。

2.酶既可以作為催化劑，也可以作為另一個化學(xué)反應(yīng)的底物，例如，唾液淀粉酶在口腔中催化淀粉分解，但是到了胃中就成為胃蛋白酶的底物。

3.低溫能降低酶活性的原因是，低溫使分子運(yùn)動減弱，從而使酶和底物結(jié)合率降低，反應(yīng)速率就降低，表現(xiàn)出酶活性降低，并沒有破壞其結(jié)構(gòu)，當(dāng)溫度回升時，仍然可以恢復(fù)期活性?！驹斀狻緼、有些酶是生命活動所必須，比如呼吸作用有關(guān)的酶，在分化程度不同的活細(xì)胞中都存在，A正確；

B、導(dǎo)致酶空間結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞變性的因素有：過酸、過堿、高溫等，低溫只能抑制酶的活性，不會破壞結(jié)構(gòu)，B錯誤；

C、酶的作用實(shí)質(zhì)即為降低反應(yīng)所需活化能從而提高化學(xué)反應(yīng)速率，C正確；

D、酶是蛋白質(zhì)或者RNA，本身是催化劑，也可作為底物被蛋白酶或者RNA酶降解，D正確。

故選B?！军c(diǎn)睛】易錯點(diǎn)：酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的、具有催化作用的有機(jī)物；每種酶都有其最適宜的溫度，低溫使酶的活性降低，溫度過高會使酶的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變進(jìn)而使酶失去活性。5、B【解析】

A、觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)中，蔗糖溶液使原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離，A錯誤；B、綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，因四種色素在層析液中溶解度不同，可以用紙層析法分離色素，B正確；C、植物根尖細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中，通過解離使細(xì)胞死亡固定在某個時期，可以找到不同分裂時期的圖像，不能觀察到姐妹染色單體彼此分離的過程，C錯誤；D、在T2噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，離心的目的是把噬菌體的蛋白質(zhì)外殼和被侵染的細(xì)菌分離開來，D錯誤。故選B。6、B【解析】

細(xì)胞分化的概念：在個體發(fā)育中，由一個或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)：遺傳信息的執(zhí)行情況不同。細(xì)胞分化的意義：是生物個體發(fā)育的基礎(chǔ)；使多細(xì)胞生物中的細(xì)胞趨向?qū)ｉT化，有利于提高各種生理功能的效率。在細(xì)胞分化過程中，細(xì)胞的遺傳信息和細(xì)胞的數(shù)量不變?！驹斀狻緼、細(xì)胞分化發(fā)生在生物體的整個生命過程中，是生物個體發(fā)育的基礎(chǔ)，A正確；B、細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因選擇性的表達(dá)，細(xì)胞DNA不變，B錯誤；C、細(xì)胞分化使多細(xì)胞生物的細(xì)胞趨向?qū)ｉT化，有利于提高各種生理功能的效率，C正確；D、由于細(xì)胞分化使細(xì)胞功能趨向?qū)ｉT化，細(xì)胞器的數(shù)目發(fā)生改變，D正確。故選B?！军c(diǎn)睛】本題主要考查細(xì)胞分化有關(guān)知識，答題關(guān)鍵在于掌握細(xì)胞分化的概念、實(shí)質(zhì)和意義。7、C【解析】

種子萌發(fā)的過程中，需要經(jīng)歷吸水，增強(qiáng)代謝，從而促進(jìn)種子的萌發(fā)，根據(jù)圖像中I階段中種子吸脹吸水，進(jìn)入胚細(xì)胞中的水含量上升，因此自由水的含量升高；階段II中種子細(xì)胞不斷合成赤霉素，赤霉素可以打破種子休眠，促進(jìn)種子萌發(fā)；階段III中，種子代謝增強(qiáng)，細(xì)胞呼吸增強(qiáng)，有機(jī)物含量減少，但由于細(xì)胞中的水和小分子有機(jī)物種類增多，因此細(xì)胞的鮮重增加；根的向地性的原因是因?yàn)樗椒胖玫闹参?，其近地一?cè)的生長素濃度高于背地一側(cè)，而過高濃度的生長素抑制根近地一側(cè)的生長，因此背地一側(cè)增長較快，因此根向地生長?！驹斀狻緼、階段I中種子吸水，水進(jìn)入干種子胚細(xì)胞，使種子細(xì)胞的自由水含量上升，因此結(jié)合水/自由水的比值下降，A正確；B、階段II中胚細(xì)胞合成赤霉素逐漸增多，B正確；C、階段III中解除休眠，種子萌發(fā)生長需要消耗細(xì)胞內(nèi)有機(jī)物，細(xì)胞有機(jī)物總質(zhì)量變少而鮮重逐漸堿少，C錯誤；D、階段III后根向地生長及莖背地生長的原因都是生長素分布不均所致，D正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題中通過種子萌發(fā)質(zhì)量的變化來考察種子細(xì)胞代謝過程的理化指標(biāo)的改變，種子萌發(fā)過程通過吸水、準(zhǔn)備萌發(fā)、增強(qiáng)呼吸過程等為萌發(fā)提供能量，于此同時植物激素的變化也在調(diào)控種子萌發(fā)過程中的生命活動。8、B【解析】

神經(jīng)調(diào)節(jié)的基本方式是反射，反射的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是反射弧，反射弧由感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中樞、傳出神經(jīng)、效應(yīng)器五部分構(gòu)成。神經(jīng)纖維未受到刺激時，K+外流，細(xì)胞膜內(nèi)外的電荷分布情況是外正內(nèi)負(fù)；當(dāng)某一部位受刺激時，Na+內(nèi)流，其膜電位變?yōu)橥庳?fù)內(nèi)正。興奮在神經(jīng)元之間的傳遞是通過突觸進(jìn)行的，信號變化為電信號→化學(xué)信號→電信號。【詳解】A、刺激呼吸道黏膜引起的咳嗽反射屬于非條件反射，A錯誤；B、刺激引發(fā)的興奮以局部電流的形式在神經(jīng)纖維上傳導(dǎo)，B正確；C、神經(jīng)遞質(zhì)在突觸間隙處通過擴(kuò)散的方式移動到突觸后膜，不需要消耗ATP，C錯誤；D、痛覺產(chǎn)生于大腦皮層，D錯誤。故選B。二、非選擇題9、無限增殖、細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)改變翻譯對照組處理：敲除外泌體AmiR-650，與胰腺癌細(xì)胞N混合培養(yǎng)至細(xì)胞剛剛長滿培養(yǎng)板，隨后進(jìn)行劃痕實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果：24h后無細(xì)胞區(qū)域的寬度與0h差別不大低氧條件下的胰腺癌細(xì)胞外泌體A的miR-650進(jìn)入周圍常氧胰腺癌細(xì)胞N中，與VHL基因mRNA的部分序列結(jié)合，抑制VHL的表達(dá)，解除了VHL對HIF-1a的降解作用，HIF-1a含量升高，激活低氧信號通路，促進(jìn)N的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥?/p>

癌細(xì)胞是構(gòu)成癌癥的最小的一個單位。一般癌細(xì)胞的特征主要表現(xiàn)在細(xì)胞核上，可能細(xì)胞核比普通的正常細(xì)胞要大很多，而且形態(tài)不規(guī)則，可能含有豐富的染色質(zhì)，所以染色的時候會表現(xiàn)出顏色深淺不一。癌細(xì)胞由于基因發(fā)生改變，粘連蛋白減少或缺少，容易在組織間轉(zhuǎn)移。另外癌細(xì)胞還有一個最重要的特點(diǎn)，是無限增殖的特性，正常的細(xì)胞不可能出現(xiàn)無限增殖?！驹斀狻浚?）題干中提到了癌細(xì)胞易擴(kuò)散轉(zhuǎn)移，未提到的癌細(xì)胞的兩個特點(diǎn)：無限增殖、細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)改變。（2）mRNA是翻譯的模板，miR-650可與細(xì)胞N中某些mRNA結(jié)合，從而導(dǎo)致mRNA被降解或其翻譯過程被抑制。（3）欲證明細(xì)胞N的遷移是由外泌體中的miR-650引起的，自變量是外泌體中的miR-650的有無，題干中設(shè)置的實(shí)驗(yàn)組是含外泌體中的miR-650的，從0h與24h對比可以看出對細(xì)胞遷移的影響，因此應(yīng)設(shè)置對照組：不含外泌體中的miR-650的組別。故對照組處理為：敲除外泌體AmiR-650，與胰腺癌細(xì)胞N混合培養(yǎng)至細(xì)胞剛剛長滿培養(yǎng)板，隨后進(jìn)行劃痕實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果：24h后無細(xì)胞區(qū)域的寬度與0h差別不大。（4）缺氧情況下，細(xì)胞中的HIF-1α（低氧誘導(dǎo)因子）會進(jìn)入細(xì)胞核激活缺氧調(diào)節(jié)基因。這一基因能進(jìn)一步激活多種基因的表達(dá)，引起系列反應(yīng)。結(jié)合圖中信息可知，低氧條件下的胰腺癌細(xì)胞外泌體A的miR-650進(jìn)入周圍常氧胰腺癌細(xì)胞N中，與VHL基因mRNA的部分序列結(jié)合，抑制VHL的表達(dá)，解除了VHL對HIF-1a的降解作用，HIF-1a含量升高，激活低氧信號通路，促進(jìn)N的轉(zhuǎn)移?！军c(diǎn)睛】本題以實(shí)驗(yàn)和圖解的形式考查學(xué)生對癌變知識的理解和應(yīng)用，要求學(xué)生有一定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計能力，且對圖形信息有一定的處理能力，以此來解釋常氧胰腺癌細(xì)胞N轉(zhuǎn)移的機(jī)理。10、胰蛋白酶抗生素接觸抑制細(xì)胞貼壁生長的附著面積噬菌體噬菌體的宿主細(xì)胞是細(xì)菌，而不是家蠶細(xì)胞需要cDNA文庫中的基因是由mRNA反轉(zhuǎn)錄而來的，基因中無啟動子【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，要想獲得單個動物細(xì)胞，需將獲得的動物組織先剪碎，并用胰蛋白酶短時處理。

（2）在培養(yǎng)獲得的單個細(xì)胞時，為避免雜菌污染，除對培養(yǎng)液和用具進(jìn)行無菌處理以外，還應(yīng)在培養(yǎng)液中添加一定的抗生素。培養(yǎng)細(xì)胞過程中，發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞分裂生長到相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖，此現(xiàn)象稱為接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以增大細(xì)胞貼壁生長的附著面積，從而增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于氣體交換。

（3）將干擾素基因?qū)肱囵B(yǎng)的家蠶細(xì)胞時，需要載體協(xié)助，由于噬菌體的宿主細(xì)胞是細(xì)菌而不是家蠶，因此將干擾素基因?qū)肱囵B(yǎng)的家蠶細(xì)胞時，運(yùn)載體一般不選擇噬菌體。

（4）若干擾素基因來自cDNA文庫，由于cDNA文庫中的基因是由mRNA反轉(zhuǎn)錄而來的，基因中無啟動子，故在構(gòu)建過程中需要在目的基因的首端添加啟動子?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程及條件，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。11、限制酶DNA連接酶目的基因標(biāo)記基因顯微注射法乳汁B目的性強(qiáng)克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性(或能有效地打破物種的生殖隔離界限)【解析】

分析題圖：圖中①～④為蜘蛛羊的培育過程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；②表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過程；③表示早期胚胎培養(yǎng)過程；④表示胚胎移植過程．⑤～⑦表示轉(zhuǎn)基因萵苣的培育過程，其中⑤表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；⑥表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過程；⑦表示植物組織培養(yǎng)過程?！驹斀狻浚?）圖中①和⑤均表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程中需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，還需DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體以形成重組質(zhì)粒，基因表達(dá)載體的組成：目