2025年湖南省郴州市高三第一次模擬考試生物試卷注意事項(xiàng)：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列有關(guān)“用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A．可用菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮觀察葉綠體B．健那綠染液可將活細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)染成藍(lán)綠色C．可觀察到葉綠體和線粒體都具有雙層膜結(jié)構(gòu)D．可以使用同種材料同時(shí)觀察線粒體和葉綠體2．下列關(guān)于真核細(xì)胞增殖、分化過程的相關(guān)描述，合理的是（）A．癌細(xì)胞是能連續(xù)分裂的細(xì)胞B．哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞具有全能性C．細(xì)胞死亡對(duì)生物體是有利的D．染色體每復(fù)制一次，細(xì)胞就分裂一次3．某種遺傳病由X染色體上的b基因控制。一對(duì)夫婦（XBXb×XBY）生了一個(gè)患病男孩（XbXbY）。下列敘述正確的是（）A．患病男孩同時(shí)患有多基因遺傳病和染色體異常病B．若患病男孩長(zhǎng)大后有生育能力，產(chǎn)生含Y精子的比例理論上為1/3C．患病男孩的染色體異常是由于母親減數(shù)第一次分裂X染色體未分離導(dǎo)致的D．患病男孩的致病基因XbY來自祖輩中的外祖父或外祖母4．Hh血型系統(tǒng)是人類ABO血型系統(tǒng)的基礎(chǔ)。人類ABO血型系統(tǒng)由位于9號(hào)染色體上的I/i和位于19號(hào)染色體上的H/h兩對(duì)等位基因控制，血型與基因型的對(duì)應(yīng)關(guān)系如下表，不考慮突變。下列敘述錯(cuò)誤的是（）血型ABABO基因型H-ⅠA-H-ⅠB-H-ⅠAⅠBH-ii、hh--A．上述兩對(duì)等位基因的遺傳遵循基因的自由組合定律B．H基因的表達(dá)產(chǎn)物是A型、B型、AB型三種血型表現(xiàn)的基礎(chǔ)C．親本均為AB型血時(shí)，有可能生出O型血的子代D．親本均為O型血時(shí)，不可能生出A型血或B型血的子代5．下列關(guān)于人體在一些生理狀態(tài)下的敘述正確的是（）A．人體劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)，骨骼肌細(xì)胞會(huì)進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生ATPB．寒冷環(huán)境中，人體的散熱量比炎熱環(huán)境種的散熱量少C．人體饑餓時(shí)，細(xì)胞內(nèi)無法保持ATP與ADP含量的動(dòng)態(tài)平衡D．一般來說，人體的生命活動(dòng)常常只受神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)6．下列有關(guān)組成細(xì)胞的多糖、蛋白質(zhì)和核酸的敘述，正確的是（）A．三者共有的元素有C、H、O、NB．遺傳信息只能從DNA流向RNA，再流向蛋白質(zhì)C．三者的單體均以碳鏈為基本骨架D．絕大多數(shù)的酶是蛋白質(zhì)，少數(shù)的酶是多糖二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）近年來，隨著溫室效應(yīng)的加劇，高溫脅迫對(duì)農(nóng)作物的生長(zhǎng)和發(fā)育造成了不可逆轉(zhuǎn)的影響。研究發(fā)現(xiàn)，高溫脅迫會(huì)造成自由基等氧化物積累，從而引起農(nóng)作物凈光合作用速率下降。下表是高溫脅迫對(duì)不同葡萄品種光能轉(zhuǎn)化效率、氣孔導(dǎo)度（氣孔張開的程度）以及胞間CO2濃度的影響。葡萄品種光能轉(zhuǎn)化效率氣孔導(dǎo)度胞間CO2濃度常溫高溫常溫高溫常溫高溫早熟紅無核1．81131．66721．421．392．313．11莫麗莎1．82311．62291．381．254．455．25寶石1．81271．61321．411．286．327．74請(qǐng)分析表中的數(shù)據(jù)，回答下列問題：（1）高溫脅迫會(huì)使三種葡萄品種的光能轉(zhuǎn)化效率__________，其直接原因可能是自由基等氧化物破壞了__________、__________和__________，從而影響了光反應(yīng)的正常進(jìn)行。（2）表中三個(gè)葡萄品種中，光能轉(zhuǎn)化效率受高溫脅迫影響最小的是__________。（3）據(jù)表分析，莫麗莎在高溫脅迫下光合速率降低的主要原因是__________（選填“氣孔限制”或“非氣孔限制”），判斷理由是_____________________。8．（10分）圖1為某地自然生態(tài)系統(tǒng)中碳循環(huán)示意圖，①?⑧代表生理過程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：（1）圖1中所有生物共同組成一個(gè)__________，①?⑧中代表同一生理過程的是__________。（2）碳在無機(jī)環(huán)境和生物群落之間主要以__________形式進(jìn)行循環(huán)。（3）若將該生態(tài)系統(tǒng)沒有的狼引入該生態(tài)系統(tǒng)，將可能造成該地區(qū)__________減少，請(qǐng)預(yù)測(cè)圖2坐標(biāo)系中狼數(shù)量的變化曲線為_____型。若要調(diào)查狼的種群密度，應(yīng)采用的方法是_________。（4）狼被引入該生態(tài)系統(tǒng)后，建立了如圖3所示的食物關(guān)系，則狼與野狗屬于__________關(guān)系。（5）人類對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)進(jìn)行調(diào)查研究，其意義：一是__________，二是還可幫助人類建立人工生態(tài)系統(tǒng)，使能量得到最有效的利用。9．（10分）研究人員利用基因工程借助大腸桿菌生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素?；卮鹣铝袉栴}。（1）借助PCR技術(shù)可在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因，原因之一是利用了____酶。（2）要使目的基因在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并表達(dá)，需要借助質(zhì)粒載體，原因是______。將目的基因?qū)氪竽c桿菌，常用____處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)。（3）研究人員在大腸桿菌提取液中未能檢測(cè)到生長(zhǎng)激素，但在細(xì)胞中檢測(cè)到生長(zhǎng)激素基因，推測(cè)可能是轉(zhuǎn)錄或翻譯過程出錯(cuò)，通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)行判斷的方法及預(yù)期結(jié)果是________。（4）能否利用基因工程通過大腸桿菌直接生產(chǎn)人體細(xì)胞膜上的糖蛋白？請(qǐng)做出判斷并說明理由_________。10．（10分）2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道，中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”。回答下列問題：（1）作為核移植受體細(xì)胞的去核卵母細(xì)胞一般處在____________期，常通過____________（物理方法）進(jìn)行激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。（2）胚胎移植一般在胚胎發(fā)育的_________時(shí)期進(jìn)行操作，在進(jìn)行該操作前，是否需要進(jìn)行DNA分析性別鑒定__________（填“需要”或“不需要”），原因是____________。（3）若將代孕母猴換成母羊，能否順利生出克隆猴_______（填“能”或“不能”），理由是_________。11．（15分）藍(lán)莓營養(yǎng)價(jià)值高，為開發(fā)耐鹽品種的藍(lán)莓，以利于沿海地區(qū)栽種，進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答問題：（1）為了獲得耐鹽基因，可以從已知耐鹽的植物中獲取耐鹽基因，也可以根據(jù)耐鹽堿蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)推測(cè)________________序列出發(fā)，找到控制合成該蛋白基因的________，再用化學(xué)合成法合成目的基因，然后用________技術(shù)擴(kuò)增目的基因。（2）要確認(rèn)耐鹽基因在藍(lán)莓植株中是否正確表達(dá)，可以檢測(cè)__________________。如果檢測(cè)結(jié)果呈陽性，再用________________方法從個(gè)體水平檢測(cè)植株的________________是否得到提高。（3）假設(shè)用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐鹽植株自交，子代中耐鹽與不耐鹽株系的數(shù)量比例為15：1，則可以推測(cè)有幾個(gè)耐鹽基因整合到了染色體上，請(qǐng)用圖表示。（耐鹽基因用A表示）________

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、A【解析】

健那綠染液是專一性染線粒體的活細(xì)胞染料，可以使活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色，而細(xì)胞質(zhì)接近無色。葉肉細(xì)胞中的葉綠體，散布于細(xì)胞質(zhì)中，呈綠色、扁平的橢球形?？梢栽诟弑讹@微鏡下觀察它的形態(tài)和分布?！驹斀狻緼、菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮部位葉綠體大而稀疏，適合作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象觀察，A正確；B、健那綠染液可將活細(xì)胞的線粒體染成藍(lán)綠色，B錯(cuò)誤；C、葉綠體和線粒體都具有雙層膜結(jié)構(gòu)屬于亞顯微結(jié)構(gòu)，在光學(xué)顯微鏡下觀察不到，C錯(cuò)誤；D、葉肉細(xì)胞可用于觀察葉綠體而不能用于觀察線粒體，因?yàn)槿~綠體的綠色會(huì)掩蓋健那綠的染色效果，影響實(shí)驗(yàn)觀察，D錯(cuò)誤。故選A?！军c(diǎn)睛】本題考查觀察線粒體和葉綠體實(shí)驗(yàn)，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)選擇的材料是否合理、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意積累。2、A【解析】

細(xì)胞凋亡是由基因決定的細(xì)胞自動(dòng)結(jié)束生命的過程，也稱為細(xì)胞編程性死亡。是細(xì)胞和生物體的正常的生命現(xiàn)象，與細(xì)胞壞死不同?！驹斀狻緼、癌細(xì)胞能無限增殖，是能連續(xù)分裂的細(xì)胞，A正確；B、哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核，故其也不具有全能性，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞調(diào)亡對(duì)生物體是有利的，但細(xì)胞壞死對(duì)生物體是有害的，C錯(cuò)誤；D、減數(shù)分裂過程中染色體復(fù)制一次，但細(xì)胞連續(xù)分裂兩次，D錯(cuò)誤。故選A。3、D【解析】

某種遺傳病由X染色體上的b基因控制，屬于伴X隱性遺傳病。一對(duì)夫婦（XBXb×XBY）所生后代的基因型應(yīng)為XBXB、XBXb、XBY、XbY，現(xiàn)生了一個(gè)患病男孩（XbXbY），說明發(fā)生了染色體變異，是母親減數(shù)第二次分裂后期著絲點(diǎn)分裂后，含b基因的X染色體未分離導(dǎo)致的?！驹斀狻緼、患病男孩同時(shí)患有單基因遺傳病和染色體異常病，A錯(cuò)誤；B、若患病男孩長(zhǎng)大后有生育能力，產(chǎn)生的配子有XbXb、Y、Xb、XbY，比例為1：1：2：2，其中含Y精子的比例理論上為1/2，B錯(cuò)誤；C、患病男孩的染色體異常是由于母親減數(shù)第二次分裂兩條X染色單體未分離導(dǎo)致的，C錯(cuò)誤；D、患病男孩的致病基因Xb來自母親，母親的致病基因Xb來自祖輩中的外祖父或外祖母，D正確。故選D。4、D【解析】

據(jù)表格信息可知，A型血孩子的基因型有H-IAIA或H-IAi，B型血孩子的基因型有H-IBIB或H-IBi，AB型血孩子的基因型有H-IAIB，O型血孩子的基因型有hh__和H_ii兩類，所對(duì)應(yīng)的基因型為HHii、Hhii、hhIAIA、hhIAIB、hhIBIB、hhIAi、hhIBi、hhii。【詳解】A、根據(jù)“人類ABO血型系統(tǒng)由位于9號(hào)染色體上的I/i和位于19號(hào)染色體上的H/h兩對(duì)等位基因控制”可知，上述兩對(duì)等位基因的遺傳遵循基因的自由組合定律，A正確；B、由表格信息可知，A型、B型、AB型三種血型對(duì)應(yīng)的基因型中都有H基因，說明H基因的表達(dá)產(chǎn)物是A型、B型、AB型三種血型表現(xiàn)的基礎(chǔ)，B正確；C、親本均為AB型血時(shí)，有可能生出O型血的子代，如HhIAIB和HhIAIB的后代會(huì)出現(xiàn)hh—的O型，C正確；D、親本均為O型血時(shí)，也可能生出A型血或B型血的子代，如HHii和hhIAIB均為O型血，其后代為HhIAi（A型血）、HhIBi（B型血），D錯(cuò)誤。故選D。5、A【解析】

1．劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)大多數(shù)骨骼肌細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸，只有部分骨骼肌細(xì)胞因缺氧而進(jìn)行厭氧呼吸。2．寒冷環(huán)境→皮膚冷覺感受器→下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞→增加產(chǎn)熱（骨骼肌戰(zhàn)栗、立毛肌收縮、甲狀腺激素分泌增加），減少散熱（毛細(xì)血管收縮、汗腺分泌減少）→體溫維持相對(duì)恒定。3．炎熱環(huán)境→皮膚溫覺感受器→下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞→增加散熱（毛細(xì)血管舒張、汗腺分泌增加）→體溫維持相對(duì)恒定?！驹斀狻緼、人在長(zhǎng)時(shí)間劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)肌肉細(xì)胞會(huì)進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生ATP，A正確；B、當(dāng)人處在寒冷環(huán)境中時(shí)，人體的散熱量和產(chǎn)熱量都比炎熱環(huán)境多，B錯(cuò)誤；C、人在饑餓時(shí)，依然可以通過ADP和ATP相互之間的迅速轉(zhuǎn)化維持穩(wěn)定，C錯(cuò)誤；D、生命活動(dòng)受神經(jīng)、體液與免疫共同調(diào)節(jié)，D錯(cuò)誤。故選A。6、C【解析】

1、多糖、蛋白質(zhì)、核酸都是生物大分子，都是由單體連接成的多聚體。2、中心法則：（1）遺傳信息可以從DNA流向DNA，即DNA的復(fù)制；（2）遺傳信息可以從DNA流向RNA，進(jìn)而流向蛋白質(zhì)，即遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯。后來中心法則又補(bǔ)充了遺傳信息從RNA流向RNA以及從RNA流向DNA兩條途徑。【詳解】A、蛋白質(zhì)的組成元素有C、H、O、N，有些還含有S；核酸的組成元素為C、H、O、N、P；脂質(zhì)的組成元素有C、H、O，有些還含有N、P；糖類的組成元素為C、H、O；故三者共有的元素是C、H、O，A錯(cuò)誤；B、遺傳信息可以從DNA流向子代DNA（DNA復(fù)制），也可以從DNA流向RNA（轉(zhuǎn)錄），再流向蛋白質(zhì)（翻譯），被RNA病毒感染的靶細(xì)胞，遺傳信息可能從RNA流向RNA（RNA的自我復(fù)制）或RNA流向DNA（逆轉(zhuǎn)錄），B錯(cuò)誤；C、蛋白質(zhì)、核酸、多糖的單體依次為氨基酸、核苷酸、葡萄糖，均以碳鏈為基本骨架，C正確；D、絕大多數(shù)的酶是蛋白質(zhì)，少數(shù)的酶是RNA，D錯(cuò)誤。故選C。【點(diǎn)睛】本題考查物質(zhì)的組成元素、遺傳信息的傳遞和酶的本質(zhì)等知識(shí)，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。二、綜合題：本大題共4小題7、降低光合色素類囊體膜結(jié)構(gòu)酶的結(jié)構(gòu)早熟紅無核非氣孔限制氣孔導(dǎo)度低于其他兩組，而胞間二氧化碳濃度高于其他兩組，說明高溫破壞了光合色素或膜結(jié)構(gòu)導(dǎo)致光反應(yīng)降低，使胞間二氧化碳濃度升高【解析】

1.溫度對(duì)光合作用的影響：在最適溫度下酶的活性最強(qiáng)，光合作用強(qiáng)度最大，當(dāng)溫度低于最適溫度，光合作用強(qiáng)度隨溫度的增加而加強(qiáng)，當(dāng)溫度高于最適溫度，光合作用強(qiáng)度隨溫度的增加而減弱。2.溫度對(duì)酶活性的影響：在一定溫度范圍內(nèi)酶促反應(yīng)速率隨溫度的升高而加快，在一定條件下，每一種酶在某一溫度時(shí)活力最大，稱最適溫度；當(dāng)溫度高于最適溫度時(shí)，酶促反應(yīng)速率反而隨溫度的升高而降低。【詳解】（1）分析表格中的結(jié)果可知，無論哪個(gè)品種，在高溫條件下，光能轉(zhuǎn)化效率都低于常溫條件，即高溫脅迫會(huì)使三種葡萄品種的光能轉(zhuǎn)化效率降低，題中信息顯示高溫脅迫會(huì)造成自由基等氧化物積累，因此可推測(cè)，光能轉(zhuǎn)化效率低的直接原因可能是自由基等氧化物破壞了光合色素、類囊體膜結(jié)構(gòu)和酶的結(jié)構(gòu)，從而影響了光反應(yīng)的正常進(jìn)行。（2）結(jié)合表中數(shù)據(jù)可知，三個(gè)葡萄品種中，光能轉(zhuǎn)化效率受高溫脅迫影響最小的是早熟紅無核，因其光能轉(zhuǎn)化效率下降最少。（3）據(jù)表分析，莫麗莎在高溫脅迫下氣孔導(dǎo)度低于其他兩組，而胞間二氧化碳濃度高于其他兩組，說明高溫破壞了光合色素或膜結(jié)構(gòu)導(dǎo)致光反應(yīng)降低，進(jìn)而影響了二氧化碳的吸收，因此表現(xiàn)出胞間二氧化碳濃度升高的現(xiàn)象，據(jù)此可知，莫麗莎在高溫脅迫下光合速率降低的主要原因是非氣孔限制引起，而是色素或膜結(jié)構(gòu)被破壞所致?！军c(diǎn)睛】熟知溫度對(duì)酶活性以及對(duì)光合作用的影響是解答本題的關(guān)鍵！能夠正確分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果并能從實(shí)驗(yàn)結(jié)果中獲得正確的結(jié)論是解答本題的另一關(guān)鍵！8、生物群落②⑥⑦CO2生物多樣性S型標(biāo)志重捕法捕食、競(jìng)爭(zhēng)調(diào)整能量流動(dòng)關(guān)系，使能量持續(xù)高效地流向?qū)θ祟愖钣幸娴牟糠帧窘馕觥?/p>

1.研究生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)，可以幫助人們科學(xué)規(guī)劃設(shè)計(jì)人工生態(tài)系統(tǒng)，使能量得到最有效的利用，實(shí)現(xiàn)了能量的多級(jí)利用，大大提高了能量的利用率，同時(shí)也降低了對(duì)環(huán)境的污染；研究生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)，還可以幫助人們合理地調(diào)整生態(tài)系統(tǒng)中的能量流動(dòng)關(guān)系，使能量持續(xù)高效的流向人類最有益的部分。題圖分析，圖1中甲是生產(chǎn)者，乙為消費(fèi)者，丙為分解者；①表示光合作用，②⑥⑦分別表示三類生物的呼吸作用，這里分解作用的本質(zhì)是呼吸作用，③表示植物的殘枝落葉流向分解者；④表示被捕食過程，⑤表示化石燃料燃燒，⑧表示消費(fèi)者的糞便、遺體殘骸流向分解者?！驹斀狻浚?）圖1為碳循環(huán)模式圖，其中的所有生物共同組成一個(gè)生物群落，①?⑧中②⑥⑦代表同一生理過程即群落中三類功能生物的呼吸作用。（2）碳以CO2的形式不斷的在無機(jī)環(huán)境和生物群落之間往復(fù)循環(huán)。（3）若將該生態(tài)系統(tǒng)沒有的物種狼引入該生態(tài)系統(tǒng)，將可能造成該地區(qū)生物多樣性減少，由于狼引入的是一個(gè)空間、資源有限的環(huán)境，因此可推知狼種群數(shù)量的變化曲線為S型。通常采用標(biāo)志重捕法方法調(diào)查動(dòng)物的種群密度，這里狼的種群密度的調(diào)查要用該方法。（4）圖中狼以野狗為食，并且與野狗有共同的食物來源，因此則狼與野狗之間的關(guān)系為捕食、競(jìng)爭(zhēng)。（5）由分析可知，人類對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)進(jìn)行調(diào)查研究的意義：一是調(diào)整能量流動(dòng)關(guān)系，使能量持續(xù)高效地流向?qū)θ祟愖钣幸娴牟糠?，二是還可幫助人類建立人工生態(tài)系統(tǒng)，使能量得到最有效的利用。【點(diǎn)睛】熟知碳循環(huán)的過程和研究能量流動(dòng)的意義是解答本題的關(guān)鍵，種群數(shù)量的調(diào)查方法以及變化規(guī)律也是本題的考查點(diǎn)，學(xué)會(huì)辨析食物網(wǎng)中的種間關(guān)系是解答本題的另一關(guān)鍵！9、Taq（耐高溫的DNA聚合）重組質(zhì)粒能在宿主細(xì)胞中不被分解，有復(fù)制原點(diǎn)和啟動(dòng)子，目的基因能被復(fù)制和表達(dá)Ca2+使用分子雜交技術(shù)檢測(cè)相應(yīng)的mRNA是否存在，若有雜交條帶出現(xiàn)說明翻譯出錯(cuò)；若無雜交條帶出現(xiàn)，則說明轉(zhuǎn)錄出錯(cuò)不能，因?yàn)榇竽c桿菌無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，無法對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步加工【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

1、目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）PCR技術(shù)可在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因，是因?yàn)槭褂昧藷岱€(wěn)定性DNA聚合酶，即Taq酶。（2）質(zhì)粒在宿主細(xì)胞中不被分解，有復(fù)制原點(diǎn)和啟動(dòng)子，用質(zhì)粒做載體可使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和表達(dá)；將目的基因?qū)氪竽c桿菌，可將大腸桿菌經(jīng)過鈣離子處理，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，易于吸收外源DNA。（3）若要驗(yàn)證是轉(zhuǎn)錄過程還是翻譯過程出錯(cuò)，可以使用分子雜交技術(shù)檢測(cè)相應(yīng)的mRNA是否存在。若有雜交條帶出現(xiàn)，說明轉(zhuǎn)錄出了mRNA，則應(yīng)為翻譯出錯(cuò)；若無雜交條帶出現(xiàn)，則說明轉(zhuǎn)錄出錯(cuò)。（4）因?yàn)榇竽c桿菌無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，無法對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步加工，因此不能利用基因工程通過大腸桿菌直接生產(chǎn)人體細(xì)胞膜上的糖蛋白。【點(diǎn)睛】本題以“借助大腸桿菌生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素”為題材，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，識(shí)記PCR技術(shù)的條件、過程等，能結(jié)合題中信息準(zhǔn)確答題。10、MⅡ中（減數(shù)第二次分裂中）電脈沖（或電激）囊胚或桑椹胚不需要胚胎細(xì)胞的染色體組成與核供體猴相同，性別已知不能母羊?qū)σ迫胱訉m的猴胚胎發(fā)生免疫排斥，導(dǎo)致胚胎死亡【解析】

克隆是用體細(xì)作為供體細(xì)胞進(jìn)行的細(xì)胞核移植，它利用了胚胎細(xì)胞進(jìn)行核移植的傳統(tǒng)方式，沒有經(jīng)過雌雄交配，不需要精子和卵子的結(jié)合，只需要從動(dòng)物身上提取一個(gè)細(xì)胞，通過核移植、早期胚胎培養(yǎng)將其培養(yǎng)成胚胎，再將胚胎移植到雌性動(dòng)物子宮內(nèi)，就可以孕育出新的個(gè)體，中中”和“華華”的獲得就是利用了克隆技術(shù)?！驹斀狻浚?）核移植技術(shù)模擬受精作用過程，應(yīng)選取處在MⅡ中（減數(shù)第二次分裂中）期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞；通過電脈沖（或電刺激）進(jìn)行激活，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育進(jìn)程。