第六章中藥的含量測定反映其制劑中有效成分、指標成分或毒性成分的含量衡量其制劑工藝的穩(wěn)定性和中藥制劑的質(zhì)量優(yōu)劣

6-1中藥的含量測定常用定量分析方法方法學評價26-1中藥的含量測定結(jié)果表示二丁顆粒本品每袋含紫花地丁以秦皮乙素（C9H6O4）計，不得少于1.8mg。二至丸本品每1g含女貞子以齊墩果酸（C30H48O3）計，不得少于8.0mg。十滴水

本品每1ml含桉油以桉油精（C10H18O）計，不得少于6.3mg。七葉安神片本品每片含三七葉總皂苷以人參皂苷Rg3（C53H90O22）計不得少于5.0mg。左金膠囊本品每1粒含黃連以鹽酸小檗堿（C20H18ClNO4）計，不得少于5.5mg。紅景天本品按干燥品計算，含紅景天苷（C14H20O3）不得少于0.50%36-1中藥的含量測定化學分析法紫外-可見分光光度法原子吸收光譜法薄層掃描法氣相色譜法高效液相色譜46-1中藥的含量測定第一節(jié)化學分析法適用于含量較高的成分及無機成分的測定包括：重量分析和滴定分析無機藥物、總生物堿、總皂苷等56-1中藥的含量測定

一、重量分析揮發(fā)法：水分測定萃取法：地奧心血康膠囊中甾體總皂苷測定沉淀法：西瓜霜潤喉片中西瓜霜測定例西瓜霜潤喉片中西瓜霜（以Na2SO4計）測定精密取約18g，加水150ml，振搖，離心，濾過，水50ml分次洗滌，合并濾液，加鹽酸1ml，煮沸，緩緩加熱氯化鋇試液水浴加熱，靜置，用無灰濾紙濾過，沉淀用水洗滌，至洗液不再顯氯化物的反應，干燥，并熾灼至恒重，精密稱定，與0.6086相乘，計算，即得。66-1中藥的含量測定

二、滴定分析：含量1%以上酸堿滴定法：生物堿、有機酸、內(nèi)酯類

沉淀滴定法：含朱砂、紅粉中藥制劑配位滴定法：含Ca2+、Mg2+等礦物藥制劑氧化還原滴定法：酚類、糖類及含F(xiàn)e、雄黃等礦物藥制劑76-1中藥的含量測定1．滴定度（TT/A）計算

滴定度（TT/A）：每1ml某摩爾濃度的滴定液所相當?shù)谋粶y藥物成分的質(zhì)量（mg）如：每1ml硫酸滴定液（0.01mol/L）相當于5.788mg的莨菪堿（C17H23NO3）（mg/ml）

86-1中藥的含量測定2.樣品中被測成分的含量計算直接滴定法測定：

返滴定法測定：

如：每1ml硫酸滴定液（0.01mol/L）相當于5.788mg的莨菪堿（C17H23NO3）實際硫酸液濃度為0.01023mol/L則F=0.010230.0196-1中藥的含量測定例顛茄酊中生物堿的含量測定（酸堿滴定法）

◆精密取100ml，蒸發(fā)至約10ml，加乙醇適量使溶解，加0.1mol/L硫酸溶液10ml，用三氯甲烷分次提取，合并三氯甲烷液，用0.1mol/L硫酸溶液10ml洗滌，洗液并入酸液中。

◆加濃氨試液使呈堿性，用三氯甲烷分次提取。三氯甲烷液用同一水10ml洗滌，合并三氯甲烷液，蒸干，加乙醇3ml，蒸干，80℃干燥2小時，殘渣加三氯甲烷2ml微熱使溶解。

◆精密加硫酸滴定液（0.01mol/L）20ml，水浴加熱，除去三氯甲烷，放冷，加甲基紅指示液1～2滴，用氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）滴定。

◆每1ml硫酸滴定液（0.01mol/L）相當于5.788mg的莨菪堿（C17H23NO3）。106-1中藥的含量測定試樣100ml提取和純化游離生物堿RN精密加硫酸滴定液（0.01mol/L）20mlRN+-SO4和剩余H2SO4用氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）滴定RN+-SO4和Na2SO4甲基紅指示液116-1中藥的含量測定例：馬應龍麝香痔瘡膏中爐甘石粉測定（配位滴定法）試樣約2g→加三氯甲烷溶散→稀鹽酸提取→加緩沖溶液→加鉻黑T指示劑→用EDTA溶液滴定例：小兒金丹片中朱砂測定（沉淀滴定法）試樣約0.5g→加硫酸、硝酸鉀→加熱至乳白色→加水→加高錳酸鉀溶液至紅色→加硫酸亞鐵至紅色消失→加硫酸鐵銨指示劑→用硫氰酸銨滴定液126-1中藥的含量測定二、可見－紫外分光光度法◆較高靈敏度、準確、價廉、簡單?！舫煞謴碗s，干擾多?！籼崛?、凈化、顯色?！艨偝煞譁y定：總黃酮、總多糖、總蒽醌等

136-1中藥的含量測定1．比耳定律摩爾吸光系數(shù)ε

：λ一定，溶液為1mol/L，厚度為1cm時的吸光度

百分吸光系數(shù)：λ一定，溶液為1%，厚度為1cm時的吸光度2．儀器校正和檢定◆波長校正

◆

吸收度的準確度校正◆

雜散光檢查146-1中藥的含量測定3．對溶劑的要求溶劑截止波長：溶劑在1cm光徑中透光率＜25%的波長。溶劑試樣的溶解性、安全性溶劑的最大使用波長即截止波長156-1中藥的含量測定166-1中藥的含量測定4．測定法●參比溶液的選擇●λmax，±2nm●吸光度在0.3～0.7間⑴對照品比較法

●

cx為供試品溶液濃度●

cR對照品溶液濃度●

cR=(100%±10%)cx●

cx=(Ax/AR)cR176-1中藥的含量測定例黃楊寧片中環(huán)維黃楊星D測定對照品溶液：每1ml含環(huán)維黃楊星D10μg供試品溶液制備：取樣，置50ml量瓶，加0.05mol/LNaH2PO4至近刻度，80℃水浴溫浸，放冷，加緩沖液至刻度，離心，取上清液測定法：精密量取二種溶液各5ml，置分液漏斗，各精密加溴麝香草酚藍溶液5ml，搖勻，各精密加三氯甲烷10ml提取，取三氯甲烷液，加0.5g無水硫酸鈉，振搖，靜置，取上清液，以試劑空白為參比，在410nm處分別測定吸光度186-1中藥的含量測定⑵吸收系數(shù)法

●百分吸收系數(shù)＞100●無需對照品●方法簡便●儀器的校正和檢定例巖白菜素含量測定取約20mg，置50ml量瓶，加甲醇溶解至刻度，搖勻，精密量取1ml，加甲醇稀釋至25ml，以試劑為空白，在275nm測吸光度，按巖白菜素吸收系數(shù)248計算。196-1中藥的含量測定⑶標準曲線法

●標準系列一般要求5～7個點●相關系數(shù)（r）不得小于0.999●供試品溶液的吸光度在線性范圍中部例排石顆粒中總黃酮測定對照品溶液：每1ml含無水蘆丁0.2mg標準曲線：精密取對照品液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分別置10ml量瓶，加50%甲醇至5ml，加5%亞硝酸鈉0.3ml，放置6min，加10%硝酸鋁0.3ml，加氫氧化鈉試液4ml，加50%甲醇至刻度搖勻，以試劑為空白，在510nm測定吸光度樣品測定：···206-1中藥的含量測定三、原子吸收分光光度法◆準確度高◆靈敏度高◆選擇性好◆抗干擾能力強◆分析速度快含量測定：龍牡壯骨顆粒中鈣四、熒光分析法有害元素的檢查：Pb、Cd、As、Hg、Cu

共17個品種項216-1中藥的含量測定薄層洗脫定量薄層上直接定量薄層掃描掃描方式測定方式五、薄層掃描法6-1中藥的含量測定六、氣相色譜法●

以氣體為流動相。●

分離效能高、樣品用量少、分析速度快。●適合于含揮發(fā)性成分的中藥鑒別和含量測定。●

可與MS、IR聯(lián)用。236-1中藥的含量測定農(nóng)藥殘留量的檢查：六六六、DDT、PCNB甘草、黃芪、人參莖葉總皂苷、人參總皂苷樹脂殘留溶劑檢查：正己烷、甲苯、對二甲苯、鄰二甲苯、苯乙烯、二乙基苯、二乙烯苯、苯。三七三醇皂苷、三七皂苷、燈盞花素

246-1中藥的含量測定（一）基本原理1．塔板理論H越小，n越大，柱效越高，分離性能越好

2．速率理論

H=A+B/U+CU指導分離條件選擇：載體粒度和分布、填充均勻度、載氣種類和流速、柱溫、固定液液膜厚度256-1中藥的含量測定（二）系統(tǒng)適用性試驗

1．色譜柱的理論板數(shù)（n）：規(guī)定最低板數(shù)

2.分離度(R)：R≥1.53．重復性：連續(xù)5次，RSD≤2.0%

4．拖尾因子（T）

T應在0.95～1.05之間

266-1中藥的含量測定（三）儀器一般要求與條件選擇

1．載氣源與載氣的選擇：一般用N2作載氣

2．進樣系統(tǒng)：直接進樣或頂空進樣

；分流比；進樣口溫度高于柱溫30～50℃；3．色譜柱：填充柱或毛細管柱；常用固定液：甲基聚硅氧烷、苯基甲基聚硅氧烷、聚乙二醇等

276-1中藥的含量測定4．柱溫的選擇：恒溫和程序升溫；柱溫低于固定液最高使用溫度；合符要求的前提下，盡可能采用較低柱溫5．檢測器：FID；溫度應高于柱溫，＞150℃286-1中藥的含量測定（四）定量分析方法●內(nèi)標法●外標法●歸一化法●內(nèi)加法296-1中藥的含量測定1、內(nèi)標法內(nèi)標物溶液：如水楊酸甲酯，加乙酸乙酯溶解對照品溶液：如龍腦，加內(nèi)標溶液溶解供試品溶液：如冰片，加內(nèi)標溶液溶解取樣量m

定容體積如：50mlcsmg/mlcscimg/mlmg/mlcscxmg/mlmg/ml306-1中藥的含量測定進樣體積V，如1μltmVtmVtmVAsAiAs/Ax內(nèi)標液對照品供試品則求出cx316-1中藥的含量測定

內(nèi)標物須為原樣品中不含有的組分

對內(nèi)標物要求：

內(nèi)標物與待測物保留時間應接近，且R>1.5

內(nèi)標物為高純度標準物質(zhì)，或含量已知物質(zhì)

內(nèi)標物與待測組分的理化性質(zhì)相似326-1中藥的含量測定●消除進樣體積的誤差。●只需待測組分和內(nèi)標物出峰●適合測定微量組分優(yōu)點：

制樣要求高

找合適內(nèi)標物困難

已知校正因子缺點：336-1中藥的含量測定例：丁香羅勒油（丁香酚測定）固定相：二甲基聚硅氧烷（SE-30），濃度為10%柱溫：110℃內(nèi)標溶液：每1ml含20mg水楊酸甲酯的無水乙醇溶液校正因子測定：精密取約50mg對照品，置10ml量瓶，精密加內(nèi)標溶液2ml，加無水乙醇稀釋至刻度。吸取2μl進樣測定供試品溶液制備和測定：精密取約50mg，置10ml量瓶，精密加入內(nèi)標液2ml，加無水乙醇至刻度，吸取2μl進樣測定346-1中藥的含量測定a．工作曲線法：c．外標兩點法：前提：

各次進樣量要很準確

操作條件要十分穩(wěn)定b．外標一點法：sisiAACC=2、外標法356-1中藥的含量測定例：冠心蘇合丸（含土木香）固定相：聚乙二醇20000（PEG-20M；柱長30m）柱溫：190℃（30分鐘），120℃/分鐘升至240℃對照品溶液：每1ml各含0.2mg土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的乙酸乙酯溶液供試品溶液制備：精密取約8g，精密加硅藻土8～12g，研勻，精密取約6～8g，精密加水飽和的乙酸乙酯25ml，稱重，超聲處理，補重，濾過366-1中藥的含量測定3、歸一化法′376-1中藥的含量測定應用：藥物中雜質(zhì)和雜質(zhì)總量限量檢查前提：●試樣中所有組分都產(chǎn)生信號并能檢出色譜峰●386-1中藥的含量測定七、高效液相色譜法●儀器性能穩(wěn)定●靈敏準確●分離模式多●檢測手段多●應用最多396-1中藥的含量測定1、色譜柱C18柱：（octadecylsilaneODS柱）C8柱：－(CH2)7－CH3，罌粟殼、辛夷、地奧心血康

苯基柱：－(CH2)3－C6H5

，萊菔子、忍冬藤

氰基柱：－(CH2)3－CN

氨基柱：－(CH2)3－NH2

，苦參、濕毒清膠囊

（一）儀器一般要求與實驗條件選擇406-1中藥的含量測定2．流動相

●溶劑種類：甲醇、水、乙腈

●配比●

pH值：乙酸、磷酸、氨水、三乙胺

●添加劑：辛烷、庚烷和十二烷基磺酸鈉

平消片中士的寧測定：流動相：乙腈-0.02mol/L磷酸二氫鉀與0.01mol/L庚烷磺酸鈉等量混合液（用10%磷酸調(diào)節(jié)pH2.8）（21∶79）6-1中藥的含量測定天麻首烏片（二苯乙烯苷）固定相：ODS流動相：乙腈-水（22∶78） 檢測器：UVD320nm對照品溶液：每1ml含40μg的甲醇溶液供試品溶液制備：精密取約2片，精密加甲醇25ml，稱重，加熱回流，補重，濾過測定法：精密吸取二種溶液各10μl進樣測定規(guī)格：不得少于0.20mg/片426-1中藥的含量測定蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）

◆線性不過零點

◆線性范圍較窄

◆低濃度非線性