高二年級(jí)下學(xué)期第二次月考生物學(xué)科試卷一、單選題（每小題2分）1．廣西是我國(guó)甘蔗主產(chǎn)地。甘蔗一般采用無性繁殖，但會(huì)由于病毒積累而產(chǎn)量下降，可通過植物組織培養(yǎng)獲得脫毒苗的方法來解決。關(guān)于該方法，下列說法錯(cuò)誤的是（）A．可選用甘蔗的莖尖為外植體B．選用的外植體需經(jīng)高溫滅菌處理C．一般采用加入瓊脂的固體培養(yǎng)基D．脫毒苗的形成包括再分化過程2．轉(zhuǎn)錄因子Gh1和GhE1能調(diào)控棉花愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育，參與體細(xì)胞胚胎發(fā)生過程中細(xì)胞命運(yùn)的重塑，其機(jī)制如圖所示。下列相關(guān)分析正確的是（）A．提高培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例可促進(jìn)愈傷組織形成芽B．Gh1基因發(fā)生甲基化可能會(huì)抑制愈傷組織細(xì)胞的增殖C．促進(jìn)GhE1基因的表達(dá)可促進(jìn)愈傷組織再分化D．Gh1與GhE1單獨(dú)作用均能調(diào)控GhPs基因的表達(dá)3．自體皮膚細(xì)胞培養(yǎng)移植是治療皮膚嚴(yán)重燙傷、燒傷的有效方法。取受損者的皮膚進(jìn)行處理后置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，直至鋪滿整個(gè)培養(yǎng)瓶的底部，單層細(xì)胞相互連接形成很薄的“皮膚”。將這些“人造皮膚”移植到患者的傷處進(jìn)行治療。下列關(guān)于皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A．將皮膚細(xì)胞置于含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、瓊脂等物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)B．在合成培養(yǎng)基中加入抗生素和血清為皮膚細(xì)胞提供無菌、無毒的環(huán)境C．松蓋培養(yǎng)瓶應(yīng)置于含95％氧氣和5％CO?的混合氣體的CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D．“人造皮膚”的獲得說明皮膚細(xì)胞具有貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制的特點(diǎn)4．科學(xué)家將兩株不同的雜交瘤細(xì)胞A和B融合形成雙雜交瘤細(xì)胞AB，雙雜交瘤細(xì)胞AB能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)繁殖，其產(chǎn)生的雙特異性抗體AB結(jié)構(gòu)如圖所示。下列敘述正確的是（

）A．培養(yǎng)雙雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需提供5%的CO2以刺激細(xì)胞呼吸B．雙雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)的過程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象C．雙特異性抗體AB可同時(shí)識(shí)別兩種抗原并與它們結(jié)合D．雙特異性抗體AB與靶細(xì)胞結(jié)合，可使靶細(xì)胞直接裂解死亡5．A．采卵的過程中可以給母親注射性激素，促進(jìn)卵細(xì)胞的生成，使其排出更多成熟的卵子B．采集的精子需置于人工配制的肝素溶液中獲取能量，與卵細(xì)胞膜接觸后阻止后續(xù)的精子進(jìn)入透明帶受精過程中精子核膜破裂形成雄原核，卵子排出第二極體形成雌原核，二者融合完成受精作用D．6．利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得人組織纖溶酶原激活物（htPA）（一種重要的藥用蛋白），流程如下圖。下列敘述正確的是（

）A．體外受精時(shí)，經(jīng)過ATP獲能處理的精子才可與卵（母）細(xì)胞完成受精作用B．可用核酸分子雜交技術(shù)或者PCR技術(shù)檢測(cè)htPA基因是否成功導(dǎo)入受精卵C．須取早期囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定，以獲得雌性胚胎后進(jìn)行胚胎移植D．利用乳腺產(chǎn)生羊乳來獲取htPA的優(yōu)點(diǎn)是可在羊的全生命周期連續(xù)獲得相應(yīng)產(chǎn)品7．科研人員將插入了抗病毒蛋白基因K的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌后，再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將基因K導(dǎo)入番木瓜愈傷組織細(xì)胞中，從而培育出轉(zhuǎn)基因抗病番木瓜。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．導(dǎo)入基因K后，Ti質(zhì)粒上發(fā)生了基因突變和基因重組B．導(dǎo)入基因K后的番木瓜愈傷組織沒有卡那霉素抗性C．若番木瓜愈傷組織不能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，其細(xì)胞中一定含有基因KD．轉(zhuǎn)入番木瓜細(xì)胞中的基因K在遺傳時(shí)可能遵循基因的分離和自由組合定律8．某研究所將“黑寡婦”蜘蛛體內(nèi)合成蛛絲蛋白的基因?qū)肷窖蚴芫?，成功培育出轉(zhuǎn)基因山羊乳腺生物反應(yīng)器，并利用該技術(shù)獲得高強(qiáng)度蛛絲蛋白（命名為“生物鋼”），其流程如下圖所示。為提高“生物鋼”產(chǎn)量，下列方案最不可行的是（

）A．通過提高乳腺細(xì)胞中目的基因的拷貝數(shù)，增加蛛絲蛋白表達(dá)量B．參照乳腺生物反應(yīng)器技術(shù)原理，開發(fā)轉(zhuǎn)基因山羊膀胱生物反應(yīng)器C．優(yōu)化啟動(dòng)子序列并增強(qiáng)其活性，促進(jìn)目的基因在乳腺細(xì)胞中的高效表達(dá)D．將蜘蛛體細(xì)胞與大腸桿菌融合構(gòu)建“工程菌”，實(shí)現(xiàn)“生物鋼”大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)9．PCR和瓊脂糖凝膠電泳是基因工程中常用的兩種技術(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．PCR反應(yīng)緩沖液中一般要添加Mg2+來激活耐高溫的DNA聚合酶B．采用PCR技術(shù)對(duì)一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，若每個(gè)DNA分子的每條鏈都做模板，則第n次循環(huán)共需要引物2n個(gè)C．電泳時(shí)，DNA遷移速率與DNA分子的大小、構(gòu)象有關(guān)而與凝膠的濃度無關(guān)D．配制凝膠溶液時(shí)所添加的瓊脂糖含量與待分離的DNA片段的大小有關(guān)10．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法廣泛應(yīng)用于植物基因工程中，研究人員利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將海島棉中抗草銨膦除草劑基因Bar導(dǎo)入陸地棉中，經(jīng)培養(yǎng)篩選獲得抗草銨膦除草劑的轉(zhuǎn)基因棉花。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法主要用于雙子葉植物和裸子植物B．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含Bar基因的重組Ti質(zhì)粒整合到陸地棉細(xì)胞的染色體DNA上C．檢測(cè)Bar基因是否在陸地棉細(xì)胞中翻譯常利用抗原—抗體雜交技術(shù)D．培育轉(zhuǎn)基因棉花還可利用我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的花粉管通道法11．將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因Pin-Ⅱ?qū)霔顦浼?xì)胞，可培育抗蟲楊樹?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建過程如圖所示，其中AmpR表示氨芐青霉素抗性基因，Neo8表示新霉素抗性基因，箭頭表示限制酶的酶切位點(diǎn)，相關(guān)酶的識(shí)別序列如表所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，應(yīng)該選用引物2和引物3B．選用KpnI和SmaI，可提高目的基因與質(zhì)粒的重組效率C．為將表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌中，可以使用Ca2+處理該細(xì)胞D．成功導(dǎo)入目的基因的楊樹細(xì)胞只對(duì)新霉素產(chǎn)生抗性12．cDNA文庫(kù)是利用某一生物體特定發(fā)育時(shí)期細(xì)胞內(nèi)的mRNA為模板合成雙鏈cDNA，再將這些cDNA片段與適當(dāng)?shù)妮d體拼接后，轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞所構(gòu)建的文庫(kù)。從cDNA文庫(kù)中可篩選出所需要的目的基因片段。下列敘述正確的是（

）A．構(gòu)建cDNA文庫(kù)過程中需使用逆轉(zhuǎn)錄酶、限制酶和DNA聚合酶等B．從不同組織細(xì)胞中提取出的mRNA建立的cDNA文庫(kù)完全相同C．通過定向改變cDNA序列進(jìn)而改造蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)屬于基因工程技術(shù)D．從cDNA文庫(kù)中篩選出的目的基因與真核生物中對(duì)應(yīng)的原基因相同二、多選題（每小題4分；漏選得2分；錯(cuò)選、多選不得分）13．動(dòng)物細(xì)胞合成核苷酸有全合成(D)途徑和補(bǔ)救合成(S)途徑，物質(zhì)A能阻斷全合成途徑，物質(zhì)H、T能用于合成核苷酸，相關(guān)過程示意圖如下。骨髓瘤細(xì)胞只能利用全合成途徑進(jìn)行無限增殖，B淋巴細(xì)胞兩種途徑都能進(jìn)行但不能無限增殖?，F(xiàn)將某實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(染色體數(shù)為2N)的1000個(gè)骨髓瘤細(xì)胞和1000個(gè)B淋巴細(xì)胞共同加入含H、A、T3種物質(zhì)的培養(yǎng)基(HAT培養(yǎng)基)中，加入適量PEG，在適宜的條件下培養(yǎng)。只考慮2個(gè)細(xì)胞間的融合，下列敘述正確的是（

）A．在HAT培養(yǎng)基中，可篩選得到1000個(gè)雜交瘤細(xì)胞B．在HAT培養(yǎng)基中，有4種細(xì)胞不能無限增殖而死亡C．在HAT培養(yǎng)基中，融合形成的細(xì)胞中均有4N條染色體D．在HAT培養(yǎng)基中，雜交瘤細(xì)胞可通過S途徑合成核苷酸14．以甘蔗為原料生產(chǎn)的蔗糖占我國(guó)食糖產(chǎn)量的90%，但其受到花葉病毒侵染后會(huì)引起減產(chǎn)。通過誘變處理和植物組織培養(yǎng)相結(jié)合可以培育出抗花葉病毒的甘蔗。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．該育種過程的原理有基因突變和細(xì)胞的全能性B．脫分化階段應(yīng)給予適當(dāng)光照C．對(duì)愈傷組織進(jìn)行誘變處理后需接種病毒進(jìn)行篩選D．此方法可能需要處理大量的材料才可得到抗花葉病毒的甘蔗菌株ATPNADHNADPH初始藍(lán)細(xì)菌6263249工程菌K829624915．藍(lán)細(xì)菌可通過D-乳酸脫氫酶（Ldh），利用NADH將丙酮酸還原為D-乳酸這種重要的工業(yè)原料。藍(lán)細(xì)菌還存在一種只產(chǎn)生ATP不參與水光解的光合作用途徑。研究者構(gòu)建了該途徑被強(qiáng)化的工程菌K，以補(bǔ)充ATP產(chǎn)量，使更多NADH用于生成D-乳酸。測(cè)定初始藍(lán)細(xì)菌、工程菌K中細(xì)胞質(zhì)ATP、NADH和NADPH含量，結(jié)果如下表。研究人員進(jìn)一步把Ldh基因引入工程菌K中，構(gòu)建工程菌L，工程菌L能積累更多D-乳酸。下列有關(guān)敘述正確的有（

）注：數(shù)據(jù)單位為pmolOD750A．與初始藍(lán)細(xì)菌相比，工程菌K的ATP和NADH含量都升高B．與初始藍(lán)細(xì)菌相比，工程菌K的有氧呼吸第三階段被抑制C．與初始藍(lán)細(xì)菌相比，工程菌L光合作用產(chǎn)生了更多ATP，從而有利于積累更多D-乳酸D．16．乙肝基因工程疫苗的生產(chǎn)過程如圖所示，其中質(zhì)粒上箭頭所指部位為相應(yīng)的限制酶的切割位點(diǎn)。質(zhì)粒中LacZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解培養(yǎng)基中的X-gal，產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色。下列相關(guān)分析錯(cuò)誤的是（

）A．過程①選擇BamHⅠ和EcoRⅤ切割目的基因和質(zhì)粒，可避免目的基因和質(zhì)粒反向連接B．過程②利用農(nóng)桿菌的T-DNA可將重組質(zhì)粒上的目的基因轉(zhuǎn)移到大腸桿菌細(xì)胞的DNA上C．篩選大腸桿菌的培養(yǎng)基中需要添加青霉素和X-gal，便于重組質(zhì)粒的篩選D．三、解答題（除標(biāo)注外，每空1分）17（12分）．2019年我國(guó)科學(xué)家利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)和體細(xì)胞核移植（SCNT）技術(shù)，成功構(gòu)建了世界首例體細(xì)胞BMAL1基因（產(chǎn)生晝夜節(jié)律必需的基因）敲除的生物節(jié)律紊亂獼猴，為相關(guān)疾病研究提供了新型動(dòng)物模型，其基本構(gòu)建流程如圖所示。CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)能在DNA特定位置進(jìn)行切割，被切割的DNA修復(fù)時(shí)會(huì)發(fā)生基因突變而導(dǎo)致靶基因失活，第一代BMAL1基因敲除猴的5只個(gè)體表現(xiàn)出不同程度的節(jié)律紊亂癥狀。為進(jìn)一步獲得理想動(dòng)物模型，研究團(tuán)隊(duì)采集A6個(gè)體的成纖維細(xì)胞，經(jīng)SCNT后最終獲得多只第二代BMAL1基因敲除獼猴模型。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題：(1)在獼猴各級(jí)神經(jīng)中樞中，與生物節(jié)律控制有關(guān)的中樞在(2分)。(2)經(jīng)CRISPR/Cas9基因編輯和胚胎移植獲得的第一代BMAL1基因敲除猴的不同個(gè)體表現(xiàn)出不同程度的節(jié)律紊亂癥狀，原因是（2分）。實(shí)驗(yàn)中采集的卵母細(xì)胞通常在體外培養(yǎng)至期，核移植成功后，用（2分）（填具體方法，寫出2種即可）去激活重構(gòu)胚。為提高胚胎的發(fā)育率和妊娠率，研究人員還將組蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重組融合細(xì)胞，推測(cè)Kdm4d的mRNA的作用是（2分）。(5)與第一代BMAL1基因敲除猴模型相比，第二代獼猴模型用于研究生物節(jié)律紊亂及相關(guān)藥物研發(fā)的優(yōu)勢(shì)是（2分）（寫出1點(diǎn)即可）。18（12分）．羔羊胚胎移植技術(shù)是集誘導(dǎo)羔羊卵泡發(fā)育技術(shù)、體外受精、胚胎移植等技術(shù)為一體的胚胎生物技術(shù)體系，主要用于提高優(yōu)良品種的繁殖速度和遺傳品質(zhì)，其技術(shù)流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)為獲得更多的卵子，對(duì)甲羊注射激素使其超數(shù)排卵，該激素作用的靶器官是。(2)為保持親子代之間染色體數(shù)量的穩(wěn)定，在受精階段，卵細(xì)胞只允許一個(gè)精子進(jìn)入。卵細(xì)胞防止多精入卵的機(jī)制是（2分）和（2分）。已知線粒體中的蛋白質(zhì)主要由核基因編碼。在受精前后，卵細(xì)胞線粒體中蛋白質(zhì)的組成有差異，原因是（3分）。(3)將獲得的受精卵進(jìn)行培養(yǎng)，早期胚胎一般發(fā)育至期移入受體母羊子宮內(nèi)。在胚胎移植前，可通過技術(shù)獲得較多胚胎。移植的早期胚胎能在丙羊的子宮內(nèi)存活，其生理基礎(chǔ)是（2分）。19（12分）．干擾素是病毒侵入細(xì)胞后，由細(xì)胞合成并分泌的一種糖蛋白，其幾乎能抵抗所有病毒引起的感染，同時(shí)對(duì)乳腺癌、骨髓癌等有一定療效，“中國(guó)干擾素之父”侯云德院士利用基因工程的方法獲得了人干擾素α-1b，用于臨床疾病治療。圖1、圖2為質(zhì)粒和人干擾素α-1b基因的結(jié)構(gòu)圖。請(qǐng)回答下列問題：(1)從人體臍帶血白細(xì)胞中提取干擾素α-1b基因的mRNA，通過的方法合成目的基因，再通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。擴(kuò)增時(shí)，引物與模板鏈的端堿基互補(bǔ)配對(duì)。PCR過程中延伸階段選用72℃而非90℃綜合考慮了兩個(gè)因素，這兩個(gè)因素是（2分）。(2)用基因工程生產(chǎn)人干擾素α-1b一般包括目的基因的篩選與獲取→（3分）這四個(gè)步驟。欲利用上述材料構(gòu)建基因表達(dá)載體，最好選用限制酶，所構(gòu)建表達(dá)載體上的標(biāo)記基因是。將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞時(shí)需先用Ca2+進(jìn)行處理，目的是。(3)干擾素體外保存相當(dāng)困難，如果將其分子上的一個(gè)半胱氨酸變成絲氨酸，就可在-70℃下保存半年，這需要用到蛋白質(zhì)工程，但對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行改造時(shí)，一般通過對(duì)基因的操作來實(shí)現(xiàn)，原因是（寫出2點(diǎn)；2分）。20（10分）．科學(xué)家將鼠抗人大腸癌單克隆抗體基因（（ND-1）與酵母胞嘧啶脫氨酶基因（CD）融合，在大腸桿菌中成功地表達(dá)了單鏈抗體與酶的融合蛋白，這類蛋白的療法稱為由抗體介導(dǎo)的酶解前藥療法（ADEPT）。ND-1-CD融合基因的構(gòu)建方法如圖所示。回答下列問題：(1)PCR技術(shù)需要用到引物，引物是指（2分）。通過PCR構(gòu)建ND-1-CD融合基因基因需要用到圖中4種引物，其中引物P2和引物P3的相應(yīng)序列（填“能”或“不能”）互補(bǔ)配對(duì)。(2)圖中兩條雜交鏈的獲得至少需要經(jīng)過次擴(kuò)增循環(huán)，雜交鏈延伸生成ND-1-CD融合基因的過程（填“需要”“不需要”或“不一定需要”）加入引物。(3)獲得ND-1-CD融合基因后，欲獲得轉(zhuǎn)化的大腸桿菌作為菌種，來大量生產(chǎn)融合蛋白。試簡(jiǎn)要寫出獲得轉(zhuǎn)化的大腸桿菌的操作流程：（3分）。(4)采用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)，需有特定的抗原對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行免疫，其目的是（2分）。21（14分）．甘藍(lán)型油菜是我國(guó)重要的油料作物之一。黑籽油菜具有耐寒、耐旱、耐鹽堿等多種優(yōu)良性狀，黃籽油菜種子含油量（SOC）更高，木質(zhì)纖維素含量（SLC）更低，二者均可用于甘藍(lán)型油菜的育種。(1)甘藍(lán)型油菜是油菜（AA，）和甘藍(lán)（CC，）雜交得到的異源四倍體，可通過形成含有兩個(gè)的配子。(2)目前已克隆的黃籽基因多為隱性基因，限制了甘藍(lán)型油菜黃籽品種的培育?？蒲腥藛T新發(fā)現(xiàn)一株種皮顏色（SCC）為黃色的甘藍(lán)型油菜N，通過雜交實(shí)驗(yàn)確認(rèn)其黃色SCC基因?yàn)轱@性基因，極大加快了甘藍(lán)型油菜黃籽品種的培育進(jìn)程。①?gòu)闹仓闚中克隆出基因D。推測(cè)D對(duì)SCC、SOC和SLC三種性狀都有改善作用，為驗(yàn)證此推測(cè)，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)組1：構(gòu)建D基因表達(dá)載體，導(dǎo)入黑籽油菜中；實(shí)驗(yàn)組2：構(gòu)建能敲除D基因的表達(dá)載體，導(dǎo)入中；對(duì)照組：（2分）。②與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組2的預(yù)期結(jié)果為（3分）。a．SCC變黃

b．SOC升高

c．SLC升高

d．SCC變黑

e．SOC降低

f．SLC降低(3)甘藍(lán)型油菜種子含油量的部分調(diào)控機(jī)制如圖，D基因在種皮中特異性表達(dá)，苯丙烷、類黃酮生物合成途徑，原花青素和木質(zhì)纖維素含量，使種皮發(fā)生相應(yīng)變化。(4)為培育出油量高、且能保持黑籽油菜品系（K）多種優(yōu)良性狀的油菜新品種，請(qǐng)寫出雜交育種流程（4分）。高二年級(jí)下學(xué)期第二次月考生物學(xué)科試卷參考答案題號(hào)12345678910111213141516答案BBDCCBCDCBBABDACDABCAB1．B【詳解】A、培育脫毒苗時(shí)，一般選取莖尖（或芽尖或根尖）作為外植體，其依據(jù)是植物分生區(qū)附近（莖尖）病毒極少，甚至無病毒，A正確；B、植物組織培養(yǎng)過程中，為防止雜菌污染，外植體需消毒處理，B錯(cuò)誤；C、植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化與再分化所用的培養(yǎng)基一般采用加入了不同植物激素比例的瓊脂固體培養(yǎng)基，C正確；D、細(xì)胞脫分化是指已經(jīng)分化的細(xì)胞，經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只?xì)胞的過程，切取植物的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)經(jīng)過脫分化與再分化的過程可以獲得脫毒苗，D正確。故選B。2．B【詳解】A、提高培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例可促進(jìn)愈傷組織形成根，A錯(cuò)誤；B、甲基化會(huì)抑制Gh1表達(dá)，不能與GhE1的表達(dá)產(chǎn)物形成復(fù)合物，GhPs基因不能表達(dá)，會(huì)抑制愈傷組織細(xì)胞的增殖，B正確；C、促進(jìn)GhEl基因的表達(dá)，可能會(huì)導(dǎo)致GhPs的表達(dá)產(chǎn)物增多，從而促進(jìn)愈傷組織細(xì)胞的增殖，抑制愈傷組織分化成根等器官，C錯(cuò)誤；D、Gh1與GhE1表達(dá)后形成的蛋白質(zhì)相互結(jié)合可調(diào)控GhPs的表達(dá)，Gh1與GhE1單獨(dú)作用不能調(diào)控GhPs基因的表達(dá)，D錯(cuò)誤。故選B。3．D【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，不需要加入瓊脂，A錯(cuò)誤；B、合成培養(yǎng)基滅菌及培養(yǎng)液中加抗生素是為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)提供無菌環(huán)境，無毒環(huán)境是通過及時(shí)更換培養(yǎng)基來實(shí)現(xiàn)的，B錯(cuò)誤；C、培養(yǎng)皮膚細(xì)胞的培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶應(yīng)置于95%的空氣和5%的CO2的CO2培養(yǎng)箱中，C錯(cuò)誤；D、細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)瓶的底部，說明皮膚細(xì)胞需要貼壁生長(zhǎng)，貼壁生長(zhǎng)的皮膚細(xì)胞不具備無限增殖的能力，具有接觸抑制，D正確。故選D。4．C【詳解】A、培養(yǎng)雙雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需提供5%的CO2維持培養(yǎng)液的pH，A錯(cuò)誤；B、雜交瘤細(xì)胞是懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞，細(xì)胞之間并未接觸，即雙雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)的過程中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；C、根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性可推測(cè)，雙特異性抗體AB可同時(shí)識(shí)別兩種抗原并與它們結(jié)合，C正確；D、雙特異性抗體AB與靶細(xì)胞結(jié)合，不會(huì)可靶細(xì)胞直接裂解死亡，二利用雙抗體可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞，從而使藥物發(fā)揮相應(yīng)的作用，細(xì)胞毒性T細(xì)胞才會(huì)使靶細(xì)胞裂解、死亡，D錯(cuò)誤。故選C。5．C【詳解】A、采卵的過程中可以給母親注射促性腺激素，促進(jìn)卵細(xì)胞的生成，使其排出更多成熟的卵子，A錯(cuò)誤；B、采集的精子需置于人工配制的肝素溶液中獲能是獲得受精的能力，但不是獲得能量，B錯(cuò)誤；C、受精的過程中精子核膜破裂，形成雄原核，卵細(xì)胞排出第二極體形成雌原核，二者融合形成受精卵，完成受精作用，C正確；D、胚胎發(fā)育過程中，囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大，會(huì)導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎從其中伸展出來，稱為孵化，D錯(cuò)誤。故選C。6．B【詳解】A、精子的獲能不是使用ATP處理，A錯(cuò)誤；B、檢測(cè)目的基因（htPA基因）是否成功導(dǎo)入受精卵，可采用核酸分子雜交技術(shù)（利用DNA探針與受體細(xì)胞中的DNA進(jìn)行雜交，若出現(xiàn)雜交帶則說明導(dǎo)入成功）或PCR技術(shù)（以受體細(xì)胞中的DNA為模板，根據(jù)htPA基因的特定序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，若能擴(kuò)增出相應(yīng)片段則說明導(dǎo)入成功），B正確；C、對(duì)早期囊胚進(jìn)行性別鑒定可取滋養(yǎng)層細(xì)胞，不必取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞進(jìn)行鑒定，C錯(cuò)誤；D、乳腺產(chǎn)生羊乳來獲取htPA僅在羊的泌乳期進(jìn)行，不可在羊的全生命周期連續(xù)獲得相應(yīng)產(chǎn)品，D錯(cuò)誤。故選B。7．C【詳解】A、導(dǎo)入基因K使四環(huán)素基因插入外來堿基而失活，發(fā)生了基因突變，而對(duì)于Ti質(zhì)粒則重新組合了新的基因，發(fā)生了基因重組，A正確；B、導(dǎo)入農(nóng)桿菌的是完整Ti質(zhì)粒，因此獲得卡那霉素抗性，而導(dǎo)入番木瓜的只是T-DNA，卡那霉素基因不在T-DNA上，因此不能使番木瓜獲得該抗性，B正確；C、不能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的番木瓜愈傷組織有兩種：①導(dǎo)入了基因K(把四環(huán)素基因插入失活了)，②沒有導(dǎo)入T-DNA(不具有四環(huán)素抗性)，C錯(cuò)誤；D、導(dǎo)入細(xì)胞中的T-DNA會(huì)整合到植物染色體上，因此可以隨著染色體發(fā)生同源分離、非同源自由組合的現(xiàn)象，D正確。故選C。8．D【詳解】A、通過提高乳腺細(xì)胞中目的基因的拷貝數(shù)，可以提高基因的表達(dá)，增加蛛絲蛋白量，A正確；B、參照乳腺生物反應(yīng)器技術(shù)原理，可開發(fā)轉(zhuǎn)基因山羊膀胱生物反應(yīng)器，因?yàn)榕c乳腺生物反應(yīng)器相比，膀胱生物反應(yīng)器具有多種優(yōu)點(diǎn)，如沒有性別上的要求、提取時(shí)間長(zhǎng)、提取方便和產(chǎn)量高等，B正確；C、為使蛛絲蛋白基因能在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)，應(yīng)該在目的基因前插入能在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的基因的啟動(dòng)子或優(yōu)化啟動(dòng)子序列并增強(qiáng)其活性，促進(jìn)目的基因在乳腺細(xì)胞中的高效表達(dá)，C正確；D、若要實(shí)現(xiàn)“生物鋼”大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)，可將蜘蛛的絲蛋白基因?qū)氪竽c桿菌構(gòu)建“工程菌”，D錯(cuò)誤。故選D。9．C【詳解】A、PCR反應(yīng)緩沖液中需添加Mg2?作為輔助因子，以激活耐高溫的DNA聚合酶（如Taq酶）的活性，A正確；B、如果開始的基因只有一個(gè)，第n?1次復(fù)制結(jié)束后有2n-1個(gè)DNA分子，合成一個(gè)DNA分子需要2個(gè)引物，因此需要的引物數(shù)目為2n-1×2=2n個(gè)，B正確；C、電泳時(shí)，DNA遷移速率與DNA分子的大小、構(gòu)象、凝膠的濃度等有關(guān)，C錯(cuò)誤；D、配制凝膠溶液時(shí)所添加的瓊脂糖含量與待分離的DNA片段的大小有關(guān)，故需要根據(jù)待分離DNA片段的大小去配制瓊脂糖溶液，D正確。故選C。10．B【詳解】A、在自然條件下，農(nóng)桿菌感染雙子葉植物和裸子植物，因此農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法主要用于雙子葉植物和裸子植物，A正確；B、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將含目的基因（Bar基因）的重組Ti質(zhì)粒的T-DNA整合到植物細(xì)胞的染色體DNA上，而不是整個(gè)重組Ti質(zhì)粒整合到染色體DNA上，B錯(cuò)誤；C、檢測(cè)目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)，常利用抗原-抗體雜交技術(shù)，C正確；D、花粉管通道法是我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的一種將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法，培育轉(zhuǎn)基因棉花可以利用該方法，D正確。故選B。11．B【詳解】A、DNA聚合酶只能從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，利用PCR擴(kuò)增目的基因時(shí)，應(yīng)該選擇引物2和引物3，A正確；B、為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，選用KpnⅠ和HindⅢ比選用KpnⅠ和SmaⅠ效果更好，因?yàn)镾maI切割DNA后形成平末端，T4DNA連接酶連接平末端的效率相對(duì)較低，B錯(cuò)誤；C、為將表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌，可以使用Ca2+處理受體細(xì)胞，使其處于能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)，然后再將重組質(zhì)粒導(dǎo)入其中，C正確；D、只有T-DNA區(qū)段會(huì)導(dǎo)入植物受體細(xì)胞，因此氨芐青霉素抗性基因不會(huì)導(dǎo)入植物受體細(xì)胞中，即成功導(dǎo)入目的基因的楊樹細(xì)胞只能表現(xiàn)出新霉素抗性，D正確。故選B。12．A【詳解】A、mRNA為模板合成cDNA單鏈的過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶；將雙鏈cDNA片段插入到適當(dāng)?shù)妮d體時(shí)，需要用限制酶切割載體和cDNA，使它們產(chǎn)生相同的黏性末端或平末端，再用DNA連接酶連接；以單鏈cDNA為模板合成雙鏈cDNA的過程需要DNA聚合酶，A正確；B、由于基因的選擇性表達(dá)，不同組織細(xì)胞中表達(dá)的基因不完全相同，即轉(zhuǎn)錄出的mRNA不完全相同，所以從不同組織細(xì)胞中提取的mRNA建立的cDNA文庫(kù)也不完全相同，B錯(cuò)誤；C、蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），通過定向改變cDNA序列進(jìn)而改造蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)屬于蛋白質(zhì)工程的范疇，C錯(cuò)誤；D、cDNA文庫(kù)中的基因是由mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成的，由于真核生物基因中含有內(nèi)含子，而轉(zhuǎn)錄形成的mRNA中不含內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的序列，所以從cDNA文庫(kù)中篩選出的目的基因與真核生物中的原基因不相同，原基因中含有內(nèi)含子、啟動(dòng)子和終止子序列，而cDNA中沒有，D錯(cuò)誤。故選A。13．BD【詳解】A、細(xì)胞融合具有隨機(jī)性，可能骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B細(xì)胞和B細(xì)胞融合，故即使1000個(gè)骨髓瘤細(xì)胞和1000個(gè)B淋巴細(xì)胞共同加入HAT培養(yǎng)基，不能篩選得到1000個(gè)雜交瘤細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、題干信息可知，在HAT培養(yǎng)基中，骨髓瘤細(xì)胞不能無限增殖而死亡、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合不能在HAT培養(yǎng)基上無限增殖而死亡，B細(xì)胞高度分化不能無限增殖最后會(huì)死亡，B細(xì)胞與B細(xì)胞融合的細(xì)胞不能無限增殖最后會(huì)死亡，故在HAT培養(yǎng)基中，有4種細(xì)胞不能無限增殖而死亡，B正確；C、在HAT培養(yǎng)基中，融合形成的骨髓瘤細(xì)胞可以進(jìn)行有絲分裂，有絲分裂后期染色體著絲粒分裂，染色體加倍，有8N條染色體，C錯(cuò)誤；D、雜交瘤細(xì)胞是B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合，其中B細(xì)胞含有D和S兩個(gè)途徑，骨髓瘤細(xì)胞含有D途徑，在HAT培養(yǎng)基中，雜交瘤細(xì)胞中由于D途徑被A物質(zhì)阻斷，故雜交瘤細(xì)胞可通過S途徑合成核苷酸，D正確。故選BD。14．ACD【詳解】A、誘變處理的原理是基因突變，植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性，所以該育種過程的原理有基因突變和細(xì)胞的全能性，A正確；B、脫分化階段不需要光照，再分化階段需要適當(dāng)光照，以利于葉綠素的形成等，B錯(cuò)誤；C、對(duì)愈傷組織進(jìn)行誘變處理后，需要接種病毒，看其是否能正常生長(zhǎng)，以此篩選出抗花葉病毒的變異類型，C正確；D、由于基因突變具有不定向性，所以此方法可能需要處理大量的材料，才有可能得到抗花葉病毒的甘蔗，D正確。故選ACD。15．ABC【詳解】A、初始藍(lán)細(xì)菌的ATP和NADH含量為626、32，工程菌K的ATP和NADH含量為829、62，與初始藍(lán)細(xì)菌相比，工程菌K的ATP和NADH含量都升高，A正確；B、與初始藍(lán)細(xì)菌相比，構(gòu)建的工程菌K中NADH含量升高，NHAPH含量基本保持不變，所以有氧呼吸第三階段被抑制，B正確；C、研究者構(gòu)建了該途徑被強(qiáng)化的工程菌K，以補(bǔ)充ATP產(chǎn)量，使更多NADH用于生成D-乳酸，C正確；D、與初始藍(lán)細(xì)菌相比，工程菌L有氧呼吸第三階段消耗較少NADH，NADH增多，有利于D-乳酸的積累，D錯(cuò)誤。故選ABC。16．AB【詳解】A、由圖可知，BamHI和EcoRI的酶切位點(diǎn)在目的基因兩側(cè)，用BamHI和EcoRI來切割含有目的基因的DNA片段可以獲得完整的目的基因，且質(zhì)粒上也存在這兩種酶的識(shí)別位點(diǎn)，因此過程①應(yīng)該選擇BamHI和EcoRI來切割目的基因和質(zhì)粒，可避免目的基因和質(zhì)粒反向連接，A錯(cuò)誤；B、過程②是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，需要用Ca2+處理大腸桿菌，增大其細(xì)胞壁的通透性,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，B錯(cuò)誤；C、質(zhì)粒中LacZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解培養(yǎng)基中的X-gal，產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色。LacZ基因內(nèi)部含有BamHI的酶切位點(diǎn)，構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，目的基因的插入導(dǎo)致lacZ基因被破壞，因此在添加X-gal的培養(yǎng)基上，含重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)白色，導(dǎo)入空載質(zhì)粒的大腸桿菌菌落顯藍(lán)色，沒有導(dǎo)入任何外源DNA的大腸桿菌不含青霉素抗性基因，不能在含有青霉素的培養(yǎng)基上生存，因此篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入X-gal和青霉素，便于重組質(zhì)粒的篩選，C正確；D、BamHI破壞了質(zhì)粒上的LacZ基因，若添加X-gal的培養(yǎng)基上的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)白色，則說明大腸桿菌成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒，D正確。故選AB。17．(1)下丘腦(2)CRISPR/Cas9對(duì)不同個(gè)體的DNA特定位置進(jìn)行切割，被切割的DNA修復(fù)時(shí)最終導(dǎo)致不同位點(diǎn)的基因突變(3)MⅡ電刺激、Ca2+載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等(4)降低組蛋白的甲基化程度，有利于與細(xì)胞分裂和分化相關(guān)基因的表達(dá)(5)遺傳背景一致【詳解】（1）在獼猴各級(jí)神經(jīng)中樞中，與生物節(jié)律控制有關(guān)的中樞在下丘腦。（2）CRISPR/Cas9對(duì)不同個(gè)體的DNA特定位置進(jìn)行切割，被切割的DNA修復(fù)時(shí)最終導(dǎo)致不同位點(diǎn)的基因突變，所以不同個(gè)體表現(xiàn)出不同程度的節(jié)律紊亂癥狀。（3）由于MII期卵母細(xì)胞具備受精能力，細(xì)胞質(zhì)中含有激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)核營(yíng)養(yǎng)條件，實(shí)驗(yàn)中采集的卵母細(xì)胞通常在體外培養(yǎng)至MⅡ期.核移植成功后，用電刺激、Ca2+載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等去激活重構(gòu)胚。（4）去甲基化酶Kdm4d的mRNA，翻譯產(chǎn)生去甲基化酶，可以降低組蛋白的甲基化程度，有利于與細(xì)胞分裂和分化相關(guān)基因的表達(dá)。（5）根據(jù)提示，第二代基因敲除猴是由A6的成纖維細(xì)胞進(jìn)行克隆獲得，因此他們的基因型應(yīng)該相同，因此將第二代獼猴模型用于研究生物節(jié)律紊亂及相關(guān)藥物研發(fā)的優(yōu)勢(shì)是遺傳背景一致。18．(1)卵巢/性腺(2)透明帶反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)線粒體蛋白質(zhì)主要由核基因編碼，卵細(xì)胞受精后，接受了精子的核基因(3)桑葚胚或囊胚胚胎分割受體不會(huì)對(duì)供體的胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)【詳解】（1）促性腺激素作用的靶器官是卵巢（或性腺），它能促進(jìn)卵巢產(chǎn)生更多的卵子，實(shí)現(xiàn)超數(shù)排卵。所以甲羊注射激素使其超數(shù)排卵，該激素作用的靶器官是卵巢（或性腺）。（2）卵細(xì)胞防止多精入卵有兩道屏障，第一道是透明帶反應(yīng)，當(dāng)精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，會(huì)產(chǎn)生阻止后來精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)；第二道是卵細(xì)胞膜反應(yīng)，精子入卵后，卵細(xì)胞膜會(huì)立即發(fā)生一種生理反應(yīng)，拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)。已知線粒體中的蛋白質(zhì)主要由核基因編碼，在受精前后，卵細(xì)胞線粒體中蛋白質(zhì)的組成有差異，是因?yàn)槁鸭?xì)胞受精后，接受了精子的核基因，精子的核基因表達(dá)后影響了線粒體中蛋白質(zhì)的組成。（3）進(jìn)行胚胎移植時(shí)，早期胚胎一般發(fā)育至桑葚胚或囊胚期才移入受體母羊子宮內(nèi)，此時(shí)胚胎的分化程度相對(duì)較低，移植成功率較高。在胚胎移植前，可通過胚胎分割技術(shù)，將早期胚胎分割成多個(gè)胚胎，從而獲得較多胚胎。移植的早期胚胎能在母羊的子宮內(nèi)存活，其生理基礎(chǔ)是受體不會(huì)對(duì)供體的胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，使得胚胎能在受體子宮內(nèi)正常生長(zhǎng)發(fā)育。19．(1)逆轉(zhuǎn)錄3'防止DNA變性（保證引物與模板鏈結(jié)合）和保證TaqDNA聚合酶所需的溫度條件(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定BamHⅠ和HindⅢAmpr（氨芐青霉素抗性基因）使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)(3)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)由基因編碼，蛋白質(zhì)不能復(fù)制，基因可以遺傳，改造過的基因可以指導(dǎo)新的蛋白質(zhì)合成；對(duì)基因的改造比對(duì)蛋白質(zhì)的改造要容易（寫出2點(diǎn)）【詳解】（1）以mRNA為模板合成cDNA的方法稱為逆轉(zhuǎn)錄法；DNA分子的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械模珼NA分子合成時(shí)從3'末端延伸，因此擴(kuò)增時(shí)，引物與模板鏈的3'端堿基互補(bǔ)配對(duì)。PCR過程中延伸階段選用72℃而非90℃綜合考慮了兩個(gè)因素，這兩個(gè)因素是防止DNA變性（保證引物與模板鏈結(jié)合）和保證TaqDNA聚合酶所需的溫度條件。（2）基因工程一般包括目的基因的篩選與獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定這四個(gè)步驟。分析題圖可知，若選用EcoRⅠ，EcoRⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的復(fù)制原點(diǎn)，導(dǎo)致無法正常復(fù)制，因此不能選用EcoRⅠ，最好選用BamHⅠ和HindⅢ，所構(gòu)建表達(dá)載體上的標(biāo)記基因是Ampr（氨芐青霉素抗性基因）。將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞時(shí)一般先用Ca2+處理，使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。（3）干擾素體外保存相當(dāng)困難，如果將其分子上的一個(gè)半