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ICSC T/CACM1326.21—TechnicalcodeofpracticeforcryopreservationofVitexquinata(Lour.)Wall. 中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)T/CACMT/CACM1326.21—目前 活 附錄A(規(guī)范性附錄)試劑的配制和保存方 前——T/CACM1326.1——T/CACM1326.2——T/CACM1326.3——T/CACM1326.4——T/CACM1326.5——T/CACM1326.6——T/CACM1326.7——T/CACM1326.8——T/CACM1326.9——T/CACM1326.10GB/T1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》給出的規(guī)則起草。T/CACMT/CACM1326.21—Vitexquinata(Lour.)WallGB/T3543.6山牡荊Vitexquinata(Lour.)為馬鞭草科(Verbenaceae)牡荊屬(VitexLinn.)常綠喬木,別稱鶯歌公、山布荊。是一種珍山牡荊果實(shí)Vitexquinata(Lour.)Wall.山牡荊種子Vitexquinata(Lour.)Wall.seedof℃9月份開始果實(shí)成熟,果皮由青綠色變成暗綠色時(shí)即可采收。果實(shí)成熟后極易脫落,應(yīng)立即采收4(30d)法測(cè)定山牡荊種子生活力。待測(cè)種子在30℃~35℃溫水中浸種2h,隨后取吸脹種子20粒,整齊地埋于備好的1.5%BTB瓊脂凝膠中,注意要將胚埋入凝膠中。將培養(yǎng)皿置于35℃溫箱中5hBTBAA.1≥85??
用尼龍網(wǎng)袋包裹山牡荊種子,置于盛有變色硅膠的干燥器內(nèi),硅膠與種子的體積比為45:1,室溫條件下干燥處理5h~10h,在干燥過程可定期測(cè)定種子含水量,將種子含水量由18%~20%降至10%~15%。
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400山牡荊種子超低溫保存的冷凍方式為玻璃化冷凍法,即將裝有種子的15mL凍存管(每管60種子)置于裝載液(LS)中并于25℃處理種子20min,再用玻璃化保護(hù)溶液(PVS2)冰浴處理種子30min,換上預(yù)冷新鮮的PVS2后迅速投入液氮中進(jìn)行超低溫保存。LSPVS2AA.2A.3液氮中至少凍存24h后,取出1個(gè)凍存管,立即放入40℃水浴中快速解凍2min,洗滌液(DS)15min3DSAA.4305.1子生活力≥50%時(shí)視為保存成功。30500.52h播種到帶有無菌濾紙的帶蓋發(fā)芽盒中,溫度25℃~30℃,濕度70%~85%條件下培養(yǎng)。附錄BTB精密稱取BTB0.1g,溶解于煮沸過的100mL純水中,然后用濾紙去殘?jiān)?。濾液若呈黃色,可1.5BTB0.1BTB40mL0.5g加入杯中,加熱并不斷攪拌使之完全溶解。待溶液稍稍冷卻即可趁熱倒入9cm培養(yǎng)皿中,使之成一13.7g11.9mLMSpH5.8100mL,高溫高壓滅菌,4℃冷藏。23.8mL13.6mL13.6mL13.7gMS中,調(diào)pH至5.8后,定容至100mL,高溫高壓滅菌,4℃冷藏。精密稱取蔗糖41.1gMS溶液中,調(diào)pH至5.8后,定容至100mL,高溫高壓滅菌,4℃65(1)M].ChenShou-liang;MichaelG.Gilbert.Verbenaceae[M]//FloraOfChinaBeijing:SciencePress/St.Louis:MissouriBotanicalGardenPress.
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