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ICSC T/CACM1326.31—TechnicalcodeofpracticeforcryopreservationofAntiaristoxicariaLesch. 中華中醫(yī)藥學會T/CACMT/CACM1326.31—目前 活 附錄A(規(guī)范性附錄)試劑的配制和保存方 前——T/CACM1326.1——T/CACM1326.2——T/CACM1326.3——T/CACM1326.4——T/CACM1326.5——T/CACM1326.6——T/CACM1326.7——T/CACM1326.8——T/CACM1326.9——T/CACM1326.10GB/T1.1-2009《標準化工作導則第1部分:標準的結構和編寫》給出的規(guī)則起草。T/CACMT/CACM1326.31—GB/T3543.6GB/T3543.7見血封喉Antiaristoxicaria見血封喉果實AntiaristoxicariaLesch.2cm見血封喉種子AntiaristoxicariaLesch.seedof月~610010(2)見血封喉種子活力以種子生活力為判別標準。按照GB/T3543.7中的2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)法檢測種子生活力。隨機抽取30粒種子,剝?nèi)ネ鈱臃N皮,沿種脊小心將種子分成2爿后放培養(yǎng)皿內(nèi),內(nèi)側面向下,滴入TTC溶液浸沒種子,室溫(25℃)避光放置4h后觀察染色結果。TTCAA.1A.2≥60??
×100%?????????????????(1)用尼龍網(wǎng)袋包裹見血封喉種子,置于盛有變色硅膠的干燥器內(nèi),硅膠與種子的體積比為40:1,至20%~30%。
??1?
×100%……….36015mL(15種子)置于裝載液(LS)中并于25℃處理種子20min,再用玻璃化保護溶液(PVS2)冰浴處理種子30min,換上預冷新鮮的PVS2后迅速投入液氮中進行超低溫保存。LSPVS2AA.3A.4液氮中至少凍存24h后,取出2個凍存管,立即放入403min洗滌液(DS)15min3DSAA.5取出1管解凍后的種子,按照5.1活力檢測方法,進行超低溫保存后的初始生活力檢測。當種子生活力≥60%時視為保存成功。125~30濕度70%~85%條件下培養(yǎng)。見血封喉種子出芽周期大概25~40d。附錄TTC1.00g100mL1TTCpH6.5~7.54溶液I:9.08g磷酸二氫鉀溶于1L無菌水中。II:35.81g1LI﹕II2﹕313.7g11.9mLMSpH5.8100mL,高溫高壓滅菌,4℃冷藏。23.8mL13.6mL13.6mL13.7gMS中,調(diào)pH至5.8后,定容至100mL,高溫高壓滅菌,4℃冷藏。精密稱取蔗糖41.1gMS溶液中,調(diào)pH至5.8后,定容至100mL,高溫高壓滅菌,4℃23(1)[MZhouZhekun,MichaelG.Gilbert.Moraceae[M]//FloraOfChinaBeijing:SciencePress/St.Louis:MissouriBotanicalGardenPress.2003.5:21-73.(第二冊)[M]
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