餅干主講教師：王若超知識與技能提升模塊——尚德蘊能日精日新樣品采集1數(shù)據(jù)處理4目錄CONTENTS餅干樣品制備及保存2樣品檢驗3報告填寫5樣品檢驗3目錄CONTENTS餅干堿度的測定色素的檢測糖精鈉的測定甜蜜素的測定苯甲酸、山梨酸的測定有機磷含量的測定總砷含量的測定高效液相色譜法原理01試劑及配制02標(biāo)準(zhǔn)溶液配制03材料及儀器設(shè)備04分析步驟05計算06餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算原理：試樣用無水乙醇或80%乙醇提取后，經(jīng)固相萃取柱凈化，采用液相色譜檢測，以保留時間定性，外標(biāo)法定量。餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算甲醇(CH3OH)：色譜純無水乙醇(CH3CH2OH)：色譜純冰乙酸(CH3COOH)乙酸銨(CH3COONH4)餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算試劑配制：乙酸-乙酸銨溶液(pH=5)：準(zhǔn)確稱取0.77g乙酸銨置于1L容量瓶內(nèi)，加900mL水溶解，用冰乙酸調(diào)節(jié)pH=5.0，加水定容至1L，混勻，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后使用。甲醇溶液(20%)：量取甲醇20mL，加水稀釋并定容至100mL，混勻。甲醇溶液(40%)：量取甲醇40mL，加水稀釋并定容至100mL，混勻。乙醇溶液(80%)：量取乙醇800mL，加水稀釋并定容至1L，混勻。餅干-樣品檢驗色素的檢測餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算標(biāo)準(zhǔn)品：紅曲紅素標(biāo)準(zhǔn)品(C23H26O5，CAS號：874807-57-5)，純度≥99.0%

紅曲素標(biāo)準(zhǔn)品(C21H26O5，CAS號：21516-68-7)，純度≥97.0%紅曲紅胺標(biāo)準(zhǔn)品(C23H27NO4，CAS號：126631-93-4)，純度≥99.0%餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：紅曲紅素、紅曲素、紅曲紅胺混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：分別準(zhǔn)確(精確至0.01mg)稱取紅曲紅素0.25g、紅曲素2.5mg、紅曲紅胺5.0mg于50mL小燒杯中，加甲醇溶解，用甲醇轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶中，定容，混勻，于4℃保存，其中紅曲紅素質(zhì)量濃度為5000μg/mL、紅曲素為50μg/mL、紅曲紅胺為100μg/mL。紅曲紅素、紅曲素、紅曲紅胺混合標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液：分別吸取混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液0.50mL、1.00mL、2.00mL、5.00mL、10.00mL于25mL容量瓶中，用甲醇溶液定容至刻度，混勻，于4℃保存。餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算材料：HLB固相萃取柱（N-乙烯吡咯烷酮和二乙烯基苯聚合物，200mg/6mL。使用前依次用5mL甲醇、5mL水活化。）餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算儀器和設(shè)備：高效液相色譜儀（配置紫外可見檢測器）分析天平：感量為0.01mg和0.01g離心機：轉(zhuǎn)速≥4000r/min高速均質(zhì)器高速粉碎機

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀固相萃取裝置有機相型微孔濾膜：孔徑0.45μm餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算試樣處理及保存試液制備儀器參考條件標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作試樣溶液的測定樣品經(jīng)高速粉碎機粉碎、分裝，于室溫下避光密閉保存。餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算試樣處理及保存試液制備儀器參考條件標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作試樣溶液的測定5g均勻試樣(精確至0.01g)50mL離心管20mL80%乙醇溶液15000r/min均質(zhì)提取2min上清液①②③4000r/min離心3min④⑤50mL容量瓶殘渣⑥20mL80%乙醇溶液上清液重復(fù)提取1次⑦⑧③④無水乙醇定容提取餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算試樣處理及保存試液制備儀器參考條件標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作試樣溶液的測定凈制流速：1mL/min~2mL/min棄去流出液⑧5mL甲醇洗脫25mL刻度離心管45℃氮吹干2mL20%甲醇溶液⑨0.45μm有機濾膜⑩④提取液20mL100mL雞心瓶無水乙醇10mL60℃±2℃旋轉(zhuǎn)濃縮至近干2mL20%甲醇溶液洗滌雞心瓶2次①②③⑤5mL40%甲醇溶液淋洗⑥棄去流出液⑦預(yù)活化的HLB固相萃取柱待凈化液餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算試樣處理及保存試液制備儀器參考條件標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作試樣溶液的測定色譜柱：高純度球形多孔硅膠多點鍵合C18色譜柱，柱長250mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5μm，或同等性能的色譜柱；流動相：A：乙酸-乙酸銨溶液(pH=5)，B：甲醇，梯度洗脫見表1；柱溫：40℃；進(jìn)樣量：20μL；檢測波長：紅曲紅胺為264nm，紅曲紅素和紅曲素為390nm。餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算試樣處理及保存試液制備儀器參考條件標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作試樣溶液的測定將混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作液及混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液分別注入高效液相色譜儀中，測定相應(yīng)的峰高或峰面積。以標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(標(biāo)準(zhǔn)圖譜見圖A.1)。餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算試樣處理及保存試液制備儀器參考條件標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作試樣溶液的測定將試樣溶液注入高效液相色譜儀中，得到峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測液中紅曲色素的濃度。如果樣品中紅曲色素的含量超出標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍，用20%甲醇溶液稀釋待測樣品溶液，使待測液中紅曲色素濃度在線性范圍內(nèi)。餅干-樣品檢驗色素的檢測高效液相色譜法>>原理

試劑及配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制材料及儀器和設(shè)備分析步驟計算試樣中紅曲色素的含量按式(1)計算式中：X—試樣中紅曲色素的