第2章細(xì)胞工程第2節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程第1課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)希普：首例胚胎移植成功哈里森:首創(chuàng)動(dòng)物組織體外培養(yǎng)法張明覺(jué)：發(fā)現(xiàn)哺乳動(dòng)物精子獲能現(xiàn)象格登、童第周：體細(xì)胞核移植成功試管家兔誕生米爾斯坦和科勒：創(chuàng)立單克隆抗體技術(shù)胚胎分割移植成功埃文斯：成功分離和培養(yǎng)小鼠的胚胎干細(xì)胞克隆羊多莉誕生山中伸彌：獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞單細(xì)胞基因組測(cè)序進(jìn)行遺傳病篩查的試管嬰兒誕生我國(guó)科學(xué)家首次培育了體細(xì)胞克隆猴1890年1907年1951年1958年1959年1975年1978年1981年1996年2006年2014年2017年科技探索之路動(dòng)物細(xì)胞工程（含胚胎工程）的發(fā)展歷程發(fā)酵工程目錄/CONTENTS0102動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用微生物的純培養(yǎng)03習(xí)題檢測(cè)閱讀P43-44，快速找答案1）動(dòng)物細(xì)胞工程的3大技術(shù)2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的4大條件3）找?guī)讉€(gè)名詞：細(xì)胞貼壁、接觸抑制、原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)4）干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用自主預(yù)習(xí)動(dòng)物細(xì)胞工程常用三大技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞核移植克隆皮膚單克隆抗體克隆猴：中中和華華小面積燒傷：患者通過(guò)切除+植皮(自身)后恢復(fù)。大面積燒傷？皮膚的自體移植使用他人皮膚如何？患者自身的不夠用，如何解決？培養(yǎng)自身細(xì)胞？目前，科學(xué)家還在研究對(duì)皮膚干細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，以獲得適合臨床上使用的人造皮膚。通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)構(gòu)建的人造皮膚從社會(huì)中來(lái)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.概念2.原理從動(dòng)物體中取出

，將它分散成

，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞

的技術(shù)。相關(guān)的組織單個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖動(dòng)物體組織單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖取出分散成適宜條件有絲分裂（細(xì)胞增殖）培育的終點(diǎn)：細(xì)胞將組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞后，細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)易供應(yīng)，其代謝廢物易排出3.目的獲得細(xì)胞或者細(xì)胞產(chǎn)物，不能獲得完整動(dòng)物個(gè)體4.培養(yǎng)對(duì)象選擇幼齡動(dòng)物or老齡動(dòng)物？Why?一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)幼齡個(gè)體細(xì)胞分化程度低、分裂能力強(qiáng)、容易培養(yǎng)4.培養(yǎng)對(duì)象選擇胚胎或幼齡動(dòng)物的細(xì)胞思考：體外培育皮膚細(xì)胞實(shí)際上是在體外模擬體內(nèi)的生理?xiàng)l件進(jìn)行的培養(yǎng)。你還記得為了維持正常的生命活動(dòng)，機(jī)體給細(xì)胞提供了哪些適宜的條件嗎？充足的營(yíng)養(yǎng)穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)5.培養(yǎng)條件營(yíng)養(yǎng)條件其他條件<<糖類(lèi)氨基酸無(wú)機(jī)鹽維生素?zé)o菌、無(wú)毒的環(huán)境適宜溫度、pH和滲透壓適宜的氣體環(huán)境動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本條件不能以淀粉、蔗糖為碳源一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)直接用合成然培養(yǎng)基嗎？Why？合成培養(yǎng)基+血清等天然成分含人類(lèi)未知、細(xì)胞生長(zhǎng)增殖所必需的物質(zhì)，滿(mǎn)足細(xì)胞對(duì)未知營(yíng)養(yǎng)成分的需求。血清等天然成分將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按種類(lèi)和所需量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基

一般使用液體培養(yǎng)基也稱(chēng)培養(yǎng)液。培養(yǎng)瓶培養(yǎng)皿一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境無(wú)毒無(wú)菌防止微生物污染清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。目的：定期更換培養(yǎng)液①對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理②在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作③添加一定量的抗生素如何維持無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境？一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)溫度、pH、滲透壓與相應(yīng)動(dòng)物內(nèi)環(huán)境的理化性質(zhì)保持一致。①人體細(xì)胞外液的溫度一般維持在：36.5±0.5℃②正常人的血漿近中性，pH約為：7.35~7.45③滲透壓：在37℃時(shí)，人的血漿滲透壓約為：770kPa人體？（1）哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多以

為宜36.5±0.5℃（2）多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜pH為

；7.2-7.4目的

維持細(xì)胞正常的形態(tài)和功能指溶液中溶質(zhì)微粒對(duì)水的吸引力。（3）適宜的滲透壓：一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)氣體環(huán)境動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有_____和______用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,在含有___________和____

__的混合氣體的________

O2CO2細(xì)胞代謝所必需的維持培養(yǎng)液的pH95%空氣5%CO2CO2培養(yǎng)箱①組成不同氣體的作用是什么？②培養(yǎng)儀器（95%）O2:（5%）CO2：液體培養(yǎng)基松蓋培養(yǎng)瓶2、用動(dòng)植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是(

)A.都需要用含95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱B.都需要用液體培養(yǎng)基C.都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行D.都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性C1、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件的敘述，錯(cuò)誤的是(

)A.體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)環(huán)境必須保證無(wú)菌、無(wú)毒B.在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常還需要加入血清等天然成分C.細(xì)胞培養(yǎng)液需要定時(shí)更換，以便清除其中的代謝廢物D.可使用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶在25℃和純氧條件下培養(yǎng)趁熱打鐵D二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程思考：在適宜的體外培養(yǎng)皮膚細(xì)胞培養(yǎng)條件下，怎么培養(yǎng)健皮膚細(xì)胞？能直接培養(yǎng)皮膚組織嗎？不能，組織中的細(xì)胞與細(xì)胞緊密接觸在一起，會(huì)限制細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。怎樣解決這一問(wèn)題？放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程傳代培養(yǎng)放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)取動(dòng)物組織制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液進(jìn)行原代培養(yǎng)分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)1.取動(dòng)物組織取材對(duì)象:取材原因:動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官。細(xì)胞分化程度低，增殖能力強(qiáng)易培養(yǎng)2.分散成單個(gè)細(xì)胞原因：①?gòu)膭?dòng)物體取出的成塊組織中，細(xì)胞與細(xì)胞靠在一起，彼此限制了生長(zhǎng)和增殖。②利于細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，保證O2與營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)和有害代謝物的及時(shí)排出，更易進(jìn)行物質(zhì)交換。制成細(xì)胞懸液取動(dòng)物組織二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)2.分散成單個(gè)細(xì)胞蛋白質(zhì)不可以，因?yàn)槲傅鞍酌傅淖钸mPH為1.5左右細(xì)胞膜也含蛋白質(zhì)，長(zhǎng)時(shí)間會(huì)分解細(xì)胞膜蛋白，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，把細(xì)胞消化掉。注意控制時(shí)間和酶用量。①說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分？②用胃蛋白酶可以嗎？③胰蛋白酶真的不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎，為什么？機(jī)械的方法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理一段時(shí)間方法:纖維蛋白、膠原蛋白等二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)3.制備細(xì)胞懸液用培養(yǎng)液將細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。制成細(xì)胞懸液取動(dòng)物組織放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿進(jìn)行原代培養(yǎng)

將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，置于適宜環(huán)境中進(jìn)行原代培養(yǎng)。概念:二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)4.原代培養(yǎng)制成細(xì)胞懸液取動(dòng)物組織放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿進(jìn)行原代培養(yǎng)

懸浮生長(zhǎng)類(lèi)：貼壁生長(zhǎng)類(lèi)：培養(yǎng)細(xì)胞類(lèi)型能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖。需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)增殖。往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上。——細(xì)胞貼壁指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞貼壁二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)4.原代培養(yǎng)懸浮生長(zhǎng)類(lèi)：貼壁生長(zhǎng)類(lèi)：培養(yǎng)細(xì)胞類(lèi)型能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖（血細(xì)胞、淋巴細(xì)胞）需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)增殖（多數(shù)細(xì)胞上皮、纖維、神經(jīng)細(xì)胞等）指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無(wú)毒、易于貼附。細(xì)胞貼壁過(guò)程（大多數(shù)細(xì)胞屬于這種類(lèi)型）二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)4.原代培養(yǎng)指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞通常會(huì)停止分裂增殖懸浮生長(zhǎng)類(lèi)：貼壁生長(zhǎng)類(lèi)：培養(yǎng)細(xì)胞類(lèi)型會(huì)因細(xì)胞密度過(guò)大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻。除受以上因素影響外，還會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象思考：細(xì)胞培養(yǎng)一段時(shí)間，分裂會(huì)受阻，為什么？怎樣解決？貼壁生長(zhǎng)與接觸抑制二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)4.原代培養(yǎng)指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。圓球形細(xì)胞剛開(kāi)始鋪展貼壁生長(zhǎng)（100×）培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)并進(jìn)行有絲分裂（100×）細(xì)胞單層貼壁生長(zhǎng)鋪滿(mǎn)瓶壁后接觸抑制（100×）二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)4.原代培養(yǎng)指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。正常細(xì)胞增殖到相互接觸的時(shí)，糖蛋白識(shí)別了這種信息，會(huì)使細(xì)胞停止繼續(xù)增殖，出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象。某些異常細(xì)胞能解除這種現(xiàn)象腫瘤細(xì)胞正常細(xì)胞瓶壁上的細(xì)胞層數(shù)是一層（或單層）失去接觸抑制，可以形成多層細(xì)胞癌細(xì)胞的細(xì)胞膜上糖蛋白等物質(zhì)減少適宜條件下在培養(yǎng)液可以無(wú)限增殖下去二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程4.原代培養(yǎng)體外動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)如何解決細(xì)胞分裂受阻的問(wèn)題呢？分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。制成細(xì)胞懸液取動(dòng)物組織放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液進(jìn)行原代培養(yǎng)

放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)傳代培養(yǎng)需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分瓶培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖?！獋鞔囵B(yǎng)二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程5.傳代培養(yǎng)體外動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)如何解決細(xì)胞分裂受阻的問(wèn)題呢？需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分瓶培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖?！獋鞔囵B(yǎng)即分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)。（細(xì)胞由原代培養(yǎng)瓶中分離稀釋后，轉(zhuǎn)到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)的過(guò)程）概念:收集細(xì)胞將收集的細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，分瓶培養(yǎng)過(guò)程:分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程5.傳代培養(yǎng)分瓶取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)收集細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)類(lèi)：直接用離心法收集貼壁生長(zhǎng)類(lèi)：將收集的細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，分瓶培養(yǎng)過(guò)程:重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，然后再用離心法收集判斷依據(jù)：是否分瓶！動(dòng)物細(xì)胞的整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中可能多次用到胰蛋白酶或膠原蛋白酶：第一次:貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)：使組織細(xì)胞分散開(kāi)使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái)，分散成單個(gè)細(xì)胞，便于分瓶后繼續(xù)培養(yǎng)。2．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中需要經(jīng)常轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基即“轉(zhuǎn)管”。下列對(duì)“轉(zhuǎn)管”原因的表述有誤的是(

)A．正常細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)一段時(shí)間后出現(xiàn)接觸抑制，不能重疊只能形成單層細(xì)胞B．考慮到氧氣的供應(yīng)，在培養(yǎng)瓶中加入的培養(yǎng)基較少，會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)不足C．活細(xì)胞產(chǎn)生的一些代謝物對(duì)細(xì)胞自身有毒害作用，需要定時(shí)“轉(zhuǎn)管”清除D．細(xì)胞長(zhǎng)到一定階段，需更換培養(yǎng)基，誘導(dǎo)產(chǎn)生各種組織、器官D趁熱打鐵二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程思考：正常細(xì)胞能否一直傳代培養(yǎng)下去？傳代培養(yǎng)部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，增殖緩慢，甚至完全停止大部分細(xì)胞衰老死亡少數(shù)細(xì)胞會(huì)克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性，這些細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生了突變，正朝癌細(xì)胞發(fā)展10~50代繼續(xù)培養(yǎng)（50代以后）有限細(xì)胞系無(wú)限細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)使用或保存的細(xì)胞通常為10代以?xún)?nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型(遺傳物質(zhì)不改變)這一階段的細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞株二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系遺傳物質(zhì)改變遺傳物質(zhì)有的改變多數(shù)細(xì)胞固定在表面生長(zhǎng)和分裂隨細(xì)胞增多，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞無(wú)限傳代培養(yǎng)危機(jī)：危機(jī)1危機(jī)2思考：正常細(xì)胞能否一直傳代培養(yǎng)下去？二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞貼壁剝離、分瓶細(xì)胞加培養(yǎng)液胰蛋白酶剪碎接觸抑制細(xì)胞株細(xì)胞系（遺傳物質(zhì)沒(méi)改變）原代保持細(xì)胞正常二倍體核型部分細(xì)胞核型改變傳代遺傳物質(zhì)改變突破細(xì)胞壽限（遺傳物質(zhì)有的改變）二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞解決懸浮生長(zhǎng)貼壁生長(zhǎng)(大多數(shù)）細(xì)胞密度過(guò)大、有害代謝物積累、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等接觸抑制傳代培養(yǎng)用機(jī)械法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理制成細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)分瓶培養(yǎng)①原代培養(yǎng)：指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。②細(xì)胞貼壁：某些細(xì)胞需要貼附于某些基質(zhì)表面才能增殖，這類(lèi)細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上。③接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象。④傳代培養(yǎng)：分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)。加培養(yǎng)液在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)細(xì)胞分裂受阻②制成細(xì)胞懸液，分瓶培養(yǎng)①收集細(xì)胞注意：相關(guān)酶可使細(xì)胞裂解，應(yīng)注意用量和時(shí)間二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果是否體現(xiàn)全能性相同點(diǎn)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較否常用固體培養(yǎng)基完整的植株葡萄糖、動(dòng)物血清常用液體培養(yǎng)基細(xì)胞增殖細(xì)胞的全能性許多細(xì)胞是蔗糖、植物激素1.培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞都進(jìn)行有絲分裂，不涉及減數(shù)分裂2.均需無(wú)菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件趁熱打鐵3．下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較，正確的是(

)

植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)前的處理離體將組織細(xì)胞分散開(kāi)特有成分植物激素血清特殊環(huán)境條件再分化需光氣體環(huán)境主要過(guò)程脫分化、再分化原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)A.后者未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，是因?yàn)榧?xì)胞核中沒(méi)有本物種全套的遺傳物質(zhì)B.將動(dòng)物組織細(xì)胞分散開(kāi)時(shí)只能使用膠原蛋白酶或胰蛋白酶C.兩者的培養(yǎng)過(guò)程都只涉及有絲分裂，不進(jìn)行減數(shù)分裂D.植物組織培養(yǎng)時(shí)也有將組織細(xì)胞分散開(kāi)的操作C二、干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用干細(xì)胞1.概念2.分布3.分類(lèi)動(dòng)物和人體內(nèi)仍保留的少數(shù)具有分裂和分化能力的細(xì)胞。在一定條件下，干細(xì)胞可以分化成其他類(lèi)型的細(xì)胞。干細(xì)胞存在于

、

和

等多種組織和器官中。早期胚胎骨髓臍帶血胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞受精卵原始胚胎干細(xì)胞囊胚胎兒成人胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞二、干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用1.胚胎干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱(chēng)ES細(xì)胞)1.分布2.特點(diǎn)3.應(yīng)用實(shí)例4.局限性早期胚胎中目前科學(xué)家已分離出了小鼠、兔、牛、猴和人等的ES細(xì)胞，在體外培養(yǎng)可分化分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞和造血干細(xì)胞等必須從胚胎中獲取，涉及倫理問(wèn)題；因而限制了在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。(1)形態(tài)上：(2)功能上：具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的

類(lèi)型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至

的潛能。任何一種個(gè)體體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯。具有發(fā)育的全能性。二、干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用2.成體干細(xì)胞1.分布2.常見(jiàn)類(lèi)型3.特點(diǎn)5.應(yīng)用實(shí)例成體組織或器官內(nèi)造血干細(xì)胞（骨髓、外周血和臍帶血中）神經(jīng)干細(xì)胞（神經(jīng)系統(tǒng)中）精原干細(xì)胞（睪丸中）具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾?。ㄈ缗两鹕?、阿爾茨海默病等）治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病造血干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞發(fā)現(xiàn)最早、研究最多、應(yīng)用最成熟4.作用有著自我更新能力

及分化潛能的干細(xì)胞，與組織、器官的

、

和

等密切相關(guān)。發(fā)育再生修復(fù)3.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）二、干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用二、干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用3.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)1.概念2.制備方法3.優(yōu)點(diǎn)4.應(yīng)用通過(guò)體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞得到的類(lèi)似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞②用小分子化合物誘導(dǎo)形成。①誘導(dǎo)過(guò)程無(wú)須破壞胚胎；②iPS細(xì)胞可取自病人的體細(xì)胞，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)?？芍委熺牋罴?xì)胞貧血癥；在治療阿爾茲海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也取得新進(jìn)展。所以，科學(xué)家普遍認(rèn)為iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。①將特定基因或蛋白導(dǎo)入細(xì)胞（成纖維細(xì)胞、已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞）。二、干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用iPS細(xì)胞應(yīng)用移植取成纖維細(xì)胞等iPS細(xì)胞轉(zhuǎn)入相關(guān)因子細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化分化胰島細(xì)胞神經(jīng)元血細(xì)胞腸上皮細(xì)胞心肌細(xì)胞肝細(xì)胞病人iPS細(xì)胞用于治療人類(lèi)疾病示意圖取成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)入相關(guān)因子轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞誘導(dǎo)iPS細(xì)胞定向分化為多種組織細(xì)胞移植回病人體內(nèi)二、干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用干細(xì)胞將在再生醫(yī)學(xué)、藥物安全性與有效性檢測(cè)等領(lǐng)域發(fā)揮大作用。面臨的問(wèn)題：存在導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。應(yīng)用展望：面臨的問(wèn)題及展望二、干細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)用

來(lái)源或存在功能、特點(diǎn)局限性胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)成體干細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)早期胚胎能夠分化成為動(dòng)物體內(nèi)的任何細(xì)胞，并進(jìn)一步形成組織、器官甚至生物個(gè)體成體組織或器官，如造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞和精原干細(xì)胞等體外誘導(dǎo)體細(xì)胞產(chǎn)生能分化成為具有特定功能的細(xì)胞來(lái)治療疾病。無(wú)須破壞胚胎，且避免免疫排斥反應(yīng)。具有組織特異性，能分化成特定的細(xì)胞或組織不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力需從胚胎中獲取，涉及倫理問(wèn)題，限制了它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用技術(shù)不成熟。三種干細(xì)胞的比較即時(shí)練習(xí)√1.目前實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的小鼠干細(xì)胞經(jīng)過(guò)定向誘導(dǎo)分化，可成功地修復(fù)小鼠損傷的心臟，下列相關(guān)敘述正確的是A.此項(xiàng)研究體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性B.在培養(yǎng)干細(xì)胞時(shí)需通入O2，不需通入CO2C.干細(xì)胞具有免疫力，不需要在無(wú)菌環(huán)境中培養(yǎng)D.此成果的應(yīng)用可避免器官移植出現(xiàn)的免疫排斥沒(méi)有發(fā)育成完整個(gè)體需要需要即時(shí)練習(xí)2.肌萎縮性側(cè)索硬化癥即“漸凍癥”，該病病因之一是突變的基因?qū)е掠卸疚镔|(zhì)積累，運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷。最新研究結(jié)果表明，利用誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)制作前驅(qū)細(xì)胞，然后移植給漸凍癥實(shí)驗(yàn)鼠，能延長(zhǎng)其壽命。下列關(guān)于誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的敘述，不正確的是A.iPS細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，細(xì)胞種類(lèi)增多B.iPS細(xì)胞分化成的多種細(xì)胞中所有核酸均相同，蛋白質(zhì)卻不完全相同C.若將突變的相關(guān)基因替換，或許可以起到治療該病的作用D.經(jīng)體外誘導(dǎo)產(chǎn)生造血干細(xì)胞，在小鼠骨髓中能夠增殖分化出B細(xì)胞mRNA不完全相同√總結(jié)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念和原理動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程原理：細(xì)胞的增殖在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)(1)營(yíng)養(yǎng)條件(2)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境(3)溫