不同動物源弓形蟲感染小鼠與雞的免疫病理特征對比及機制探究一、引言1.1研究背景與意義弓形蟲（Toxoplasmagondii）是一種專性細胞內(nèi)寄生的機會性致病原蟲，能夠引發(fā)人獸共患的弓形蟲病（Toxoplasmosis）。其宿主范圍極為廣泛，涵蓋了人類、哺乳動物、鳥類以及部分冷血動物。據(jù)統(tǒng)計，全球約有25%的人口攜帶這種寄生蟲，在一些地區(qū)，人群的陽性率更高，如法國人群陽性率達80.0%左右，美國為25.0%-33.0%，我國感染率為4.0%-9.0%。弓形蟲病對人類健康構(gòu)成了嚴重威脅。孕婦感染弓形蟲后，蟲體可通過胎盤傳染給胎兒，導(dǎo)致胎兒畸形、流產(chǎn)或早產(chǎn)等嚴重后果。先天性弓形蟲病患兒80％存在精神發(fā)育障礙，50％有視力障礙，還可能伴有發(fā)熱、腹瀉、黃疸、肝脾腫大等全身癥狀。對于免疫功能低下的人群，如艾滋病患者、器官移植和腫瘤病人等，感染弓形蟲后呈顯性感染，嚴重時可導(dǎo)致患者死亡。隨著艾滋病患者數(shù)量的增加，弓形蟲病的發(fā)病率也明顯升高，進一步加劇了對人類健康的危害。在畜牧業(yè)方面，弓形蟲可感染豬、牛、羊、雞等多種家畜家禽。雞群感染弓形蟲雖多為隱性感染，但自由放養(yǎng)的雞群是弓形蟲流行病學(xué)中的重要宿主，對貓和人類而言是重要的傳染源。豬感染弓形蟲可出現(xiàn)急性暴發(fā)，病豬體溫升高，精神萎靡，食欲減退，呼吸困難，體表出現(xiàn)紫紅色斑塊等癥狀，給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大經(jīng)濟損失。其他家畜感染弓形蟲后，也會出現(xiàn)生長發(fā)育受阻、繁殖性能下降等問題，嚴重影響畜牧業(yè)的經(jīng)濟效益和可持續(xù)發(fā)展。不同動物源的弓形蟲在毒力、生物學(xué)特性以及感染宿主后的免疫病理變化等方面可能存在差異。研究不同動物源弓形蟲感染小鼠和雞的免疫病理變化，有助于深入了解弓形蟲病的發(fā)病機制。通過比較分析，可以明確不同來源弓形蟲與宿主免疫系統(tǒng)之間的相互作用方式和特點，揭示免疫病理損傷的發(fā)生發(fā)展過程，為進一步闡明弓形蟲病的致病機制提供理論依據(jù)。這一研究對于開發(fā)有效的防治措施也具有重要意義。明確不同動物源弓形蟲感染的免疫病理特征后，能夠為疫苗研發(fā)提供更精準的靶點，提高疫苗的針對性和有效性。同時，也可以為臨床診斷和治療提供科學(xué)指導(dǎo)，有助于制定更加合理的診斷標準和治療方案，從而降低弓形蟲病對人類健康和畜牧業(yè)的危害，保障公共衛(wèi)生安全和畜牧業(yè)的健康發(fā)展。1.2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀在國外，對于弓形蟲感染動物免疫病理的研究開展較早且較為深入。早期研究主要聚焦于弓形蟲感染動物模型的建立及病理特征觀察。如小鼠作為常用的實驗動物，對弓形蟲感染具有較高的敏感性，研究發(fā)現(xiàn)小鼠感染強毒力的弓形蟲RH株后，會引發(fā)急性致死性感染，出現(xiàn)典型的病理變化，包括肝臟、肺臟等組織的炎性細胞浸潤、細胞壞死等。隨著免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展，對弓形蟲感染動物免疫機制的研究逐漸成為熱點。國外學(xué)者通過一系列實驗揭示了Th1/Th2細胞平衡在弓形蟲感染免疫中的關(guān)鍵作用，Th1型細胞因子如IFN-γ、TNF-α等在抵抗弓形蟲感染中發(fā)揮重要作用，能夠激活巨噬細胞等免疫細胞，增強其對弓形蟲的殺傷能力；而Th2型細胞因子如IL-4、IL-10等則在一定程度上抑制免疫反應(yīng)，可能影響機體對弓形蟲的清除。此外，對于弓形蟲感染過程中免疫細胞的動態(tài)變化及功能研究也取得了顯著成果，發(fā)現(xiàn)自然殺傷細胞（NK細胞）在感染早期能夠迅速活化，發(fā)揮非特異性殺傷弓形蟲的作用。國內(nèi)在弓形蟲感染動物免疫病理方面的研究也取得了不少進展。一方面，在感染模型的優(yōu)化和改進上進行了諸多探索，通過調(diào)整感染途徑、感染劑量等因素，建立了更符合實際感染情況的動物模型，為深入研究免疫病理機制提供了良好的基礎(chǔ)。另一方面，在免疫病理機制的研究上不斷深入，研究發(fā)現(xiàn)弓形蟲感染可導(dǎo)致機體免疫細胞凋亡異常，影響免疫應(yīng)答的正常進行。同時，對弓形蟲感染與機體抗氧化系統(tǒng)的關(guān)系也進行了研究，發(fā)現(xiàn)感染會引起機體抗氧化能力下降，氧化應(yīng)激水平升高，進而損傷組織細胞。此外，國內(nèi)學(xué)者還關(guān)注到不同地區(qū)、不同宿主來源的弓形蟲在感染免疫病理上可能存在差異，為進一步研究提供了新的方向。然而，當(dāng)前研究仍存在一些不足之處。在不同動物源弓形蟲感染的比較研究方面，雖然已有一些報道，但研究范圍不夠廣泛，對于多種動物源弓形蟲同時感染小鼠和雞的免疫病理變化比較研究較少。在免疫病理機制的研究上，雖然對一些主要免疫細胞和細胞因子的作用有了一定了解，但對于免疫細胞之間復(fù)雜的相互作用網(wǎng)絡(luò)以及細胞因子的級聯(lián)反應(yīng)等方面的研究還不夠深入。此外，對于弓形蟲感染過程中宿主基因表達的動態(tài)變化及其與免疫病理的關(guān)系研究也相對薄弱。本研究將針對這些不足，通過對四株不同動物來源弓形蟲感染小鼠和雞的免疫病理變化進行系統(tǒng)比較，深入探討弓形蟲感染的免疫病理機制，為弓形蟲病的防治提供更全面、更深入的理論依據(jù)。1.3研究目的與創(chuàng)新點本研究旨在系統(tǒng)對比四株不同動物來源弓形蟲感染小鼠和雞后的免疫病理變化，通過對感染動物的臨床癥狀、組織病理學(xué)變化、免疫細胞及細胞因子水平等多方面的檢測與分析，明確不同動物源弓形蟲感染小鼠和雞的免疫病理特征差異，并探討其潛在的免疫病理機制。本研究的創(chuàng)新之處在于，首次針對四株不同動物來源的弓形蟲，同時開展對小鼠和雞這兩種重要實驗動物和家禽的感染研究。以往研究多集中于單一動物源弓形蟲感染某一種動物的情況，本研究擴大了研究對象的范圍，能夠更全面地揭示不同動物源弓形蟲在不同宿主中的免疫病理變化規(guī)律。在研究方法上，綜合運用多種先進的檢測技術(shù)，包括組織病理學(xué)分析、流式細胞術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）等，從多角度深入探究免疫病理機制，為弓形蟲病的研究提供了更豐富、更準確的數(shù)據(jù)支持。二、材料與方法2.1實驗材料2.1.1實驗動物選用SPF級昆明小鼠120只，購自[具體動物供應(yīng)商名稱]，許可證號為[具體許可證號]。小鼠體重為18-22g，雌雄各半。實驗前將小鼠在實驗室環(huán)境中適應(yīng)性飼養(yǎng)7d，飼養(yǎng)環(huán)境溫度控制在(25±2)℃，相對濕度為(50±10)%，12h光照/12h黑暗交替，自由采食和飲水。選用1日齡SPF級海蘭褐蛋雞120只，購自[具體雞供應(yīng)商名稱]。雞苗到達實驗室后，飼養(yǎng)于隔離器中，給予全價飼料和清潔飲水，飼養(yǎng)環(huán)境溫度在1-3日齡時為35-37℃，隨后每周降低2-3℃，直至達到22-25℃穩(wěn)定溫度，相對濕度保持在50%-65%，24h光照。實驗前對雞群進行健康檢查，確保無明顯疾病癥狀。2.1.2弓形蟲蟲株本研究使用的四株不同動物來源弓形蟲蟲株分別為：貓源弓形蟲蟲株（簡稱C株），從[具體地區(qū)]的感染貓體內(nèi)分離獲得；豬源弓形蟲蟲株（簡稱P株），分離自[具體豬場名稱]的患病豬；犬源弓形蟲蟲株（簡稱D株），來自[具體地區(qū)]送檢的感染犬；鼠源弓形蟲蟲株（簡稱M株），由[具體實驗室名稱]保存并惠贈。所有蟲株均保存于液氮中，保存液為含10%二甲基亞砜（DMSO）和20%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液。復(fù)蘇時，將凍存管迅速置于37℃水浴中，快速搖晃使其融化，然后將蟲體懸液轉(zhuǎn)移至含有適量RPMI1640培養(yǎng)液的離心管中，1000r/min離心5min，棄上清，再用RPMI1640培養(yǎng)液重懸沉淀，調(diào)整蟲體濃度后用于后續(xù)實驗。2.1.3主要試劑與儀器主要試劑包括免疫組化試劑盒（購自[具體公司名稱]），用于檢測組織中弓形蟲抗原；細胞因子檢測試劑盒，如IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10等檢測試劑盒（均購自[具體公司名稱]），采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法檢測血清和組織勻漿中細胞因子水平；PCR相關(guān)試劑，包括DNA提取試劑盒（購自[具體公司名稱]）、TaqDNA聚合酶、dNTPs、引物（由[具體生物公司合成]）等，用于弓形蟲核酸檢測；以及蘇木精-伊紅（HE）染色液、中性樹膠、多聚甲醛等組織病理學(xué)檢測試劑。主要儀器有高速冷凍離心機（型號為[具體型號]，購自[具體公司名稱]），用于樣本離心；光學(xué)顯微鏡（型號為[具體型號]，[具體公司名稱]），用于組織切片觀察和蟲體形態(tài)觀察；酶標儀（型號為[具體型號]，購自[具體公司名稱]），用于ELISA檢測；PCR儀（型號為[具體型號]，[具體公司名稱]），進行核酸擴增反應(yīng)；以及恒溫培養(yǎng)箱、超凈工作臺、移液器等常規(guī)實驗儀器。2.2實驗方法2.2.1動物感染模型的建立將120只昆明小鼠隨機分為5組，每組24只。其中4個感染組分別為C株感染組、P株感染組、D株感染組和M株感染組，每組小鼠經(jīng)腹腔注射感染相應(yīng)動物來源的弓形蟲。感染劑量為每只小鼠注射含1×10^5個速殖子的蟲體懸液0.2ml。對照組小鼠則腹腔注射等量的不含弓形蟲的RPMI1640培養(yǎng)液。將120只海蘭褐蛋雞也隨機分為5組，每組24只。4個感染組分別通過口服灌胃的方式感染不同動物來源的弓形蟲，感染劑量為每只雞口服含5×10^5個速殖子的蟲體懸液0.5ml。對照組雞口服等量的RPMI1640培養(yǎng)液。感染過程嚴格按照無菌操作原則進行，避免其他病原體的污染。感染后，將小鼠和雞分別放回各自的飼養(yǎng)環(huán)境中，繼續(xù)按照之前的飼養(yǎng)條件進行飼養(yǎng)。2.2.2臨床癥狀觀察從感染當(dāng)天開始，每日定時對感染小鼠和雞進行臨床癥狀觀察。觀察內(nèi)容包括精神狀態(tài)，如是否精神萎靡、嗜睡或煩躁不安；飲食情況，記錄每日的采食量，觀察是否有食欲減退或廢絕的現(xiàn)象；糞便狀態(tài)，注意糞便的形狀、顏色、質(zhì)地，是否出現(xiàn)腹瀉、便秘或血便等異常；活動能力，觀察動物的活動是否正常，有無運動障礙、共濟失調(diào)等表現(xiàn)。對于出現(xiàn)明顯臨床癥狀的動物，詳細記錄癥狀出現(xiàn)的時間、表現(xiàn)及變化情況，并及時拍照或錄像作為資料留存。2.2.3病理組織學(xué)檢查分別在感染后的3d、7d、14d、21d和28d，每組隨機選取3只小鼠和3只雞進行剖殺。迅速采集心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、腦組織等主要組織器官，將組織塊放入10%中性福爾馬林溶液中固定24h以上。固定后的組織經(jīng)梯度酒精脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，制成厚度為4μm的切片。切片進行蘇木精-伊紅（HE）染色，染色過程包括脫蠟、水化、蘇木精染色、鹽酸酒精分化、伊紅染色、脫水、透明等步驟。染色完成后，用中性樹膠封片，在光學(xué)顯微鏡下觀察組織的病理變化，如細胞變性、壞死、炎性細胞浸潤、組織充血水腫等情況，并拍照記錄。2.2.4免疫組織化學(xué)檢測取上述固定好的組織，按照免疫組化試劑盒說明書進行操作。首先將石蠟切片脫蠟至水，然后用3%過氧化氫溶液室溫孵育10-15min，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。接著進行抗原修復(fù)，將切片放入枸櫞酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波加熱修復(fù)抗原。自然冷卻后，用PBS沖洗3次，每次5min。滴加正常山羊血清封閉液，室溫孵育30min，以減少非特異性染色。傾去封閉液，不洗，直接滴加一抗（兔抗弓形蟲多克隆抗體，1:200稀釋），4℃孵育過夜。次日取出切片，用PBS沖洗3次，每次5min。滴加生物素標記的二抗（山羊抗兔IgG），室溫孵育30min。再次用PBS沖洗3次，每次5min。滴加辣根過氧化物酶標記的鏈霉卵白素工作液，室溫孵育30min。PBS沖洗3次后，用DAB顯色液顯色，顯微鏡下觀察顯色情況，待陽性部位顯色清晰后，用蒸餾水沖洗終止顯色。蘇木精復(fù)染細胞核，鹽酸酒精分化，氨水返藍，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。結(jié)果判定：在顯微鏡下觀察，胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng)，根據(jù)陽性細胞的數(shù)量和染色強度對結(jié)果進行半定量分析。2.2.5細胞因子檢測在感染后的不同時間點（3d、7d、14d、21d和28d），每組隨機選取3只小鼠和3只雞，心臟采血后分離血清。同時取部分脾臟組織，用預(yù)冷的PBS沖洗后，剪碎，加入適量的PBS，在冰浴條件下用勻漿器制成10%的組織勻漿。3000r/min離心15min，取上清液備用。采用ELISA法檢測血清和組織勻漿中IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10等細胞因子的含量，具體操作按照相應(yīng)細胞因子檢測試劑盒說明書進行。在酶標儀上測定各孔在450nm波長處的吸光度值，根據(jù)標準曲線計算出樣品中細胞因子的濃度。2.2.6流式細胞術(shù)檢測免疫細胞在感染后的不同時間點（3d、7d、14d、21d和28d），每組隨機選取3只小鼠和3只雞，無菌取脾臟和血液。將脾臟置于含有1%胎牛血清的PBS液中，用注射器內(nèi)芯研磨脾臟組織，制成單細胞懸液。將單細胞懸液通過200目尼龍網(wǎng)過濾，去除組織碎片。1500r/min離心5min，棄上清。加入紅細胞裂解液，室溫靜置5min，裂解紅細胞。1500r/min離心5min，棄上清，用含1%胎牛血清的PBS洗滌細胞2次。將洗滌后的細胞重懸于100μl的PBS中，加入適量的熒光標記抗體（如CD3-PE、CD4-FITC、CD8-APC等），4℃避光孵育30min。孵育結(jié)束后，用PBS洗滌細胞2次，重懸于500μl的PBS中，上機進行流式細胞術(shù)檢測。對于血液樣本，采集的血液加入抗凝劑（肝素鈉或EDTA-K2），輕輕搖勻。取100μl抗凝血加入流式管中，加入適量的熒光標記抗體，4℃避光孵育30min。孵育后加入紅細胞裂解液，室溫靜置10min，裂解紅細胞。1500r/min離心5min，棄上清，用PBS洗滌細胞2次，重懸于500μl的PBS中，上機檢測。通過流式細胞儀分析免疫細胞亞群（如T淋巴細胞亞群、B淋巴細胞、NK細胞等）的比例和數(shù)量變化。三、結(jié)果3.1感染小鼠和雞的臨床癥狀3.1.1小鼠的臨床癥狀表現(xiàn)感染貓源弓形蟲C株的小鼠，在感染后第3天開始出現(xiàn)豎毛、怕冷的癥狀，表現(xiàn)為毛發(fā)直立，蜷縮在鼠籠角落，對環(huán)境溫度變化極為敏感，當(dāng)飼養(yǎng)環(huán)境溫度稍有降低時，小鼠的豎毛和怕冷癥狀更加明顯。隨著感染時間的延長，從第5天開始，小鼠出現(xiàn)明顯的腹痛癥狀，表現(xiàn)為腹部收縮，頻繁地弓背，行動遲緩，部分小鼠還會發(fā)出輕微的叫聲。同時，進食量也逐漸減少，與對照組小鼠相比，感染組小鼠的每日采食量下降了約40%-50%。到第7天，部分小鼠精神萎靡，嗜睡，活動量明顯減少，對周圍環(huán)境的刺激反應(yīng)遲鈍。感染豬源弓形蟲P株的小鼠，臨床癥狀出現(xiàn)的時間相對較晚，在感染后第5天開始出現(xiàn)豎毛和怕冷癥狀，但程度較輕，毛發(fā)輕微豎起，偶爾會尋找溫暖的地方蜷縮。腹痛癥狀在第7天出現(xiàn)，表現(xiàn)為間歇性的腹部不適，小鼠會短暫地停下活動，調(diào)整姿勢后繼續(xù)活動。進食減少的情況在第8天較為明顯，采食量下降約30%-40%。精神狀態(tài)在第10天開始受到影響，部分小鼠出現(xiàn)精神不振，活動范圍縮小。犬源弓形蟲D株感染的小鼠，感染后第4天出現(xiàn)豎毛、怕冷癥狀，程度介于C株和P株感染小鼠之間。腹痛癥狀在第6天較為明顯，小鼠會持續(xù)地舔舐腹部，行動時腹部有明顯的不適感。進食量從第7天開始逐漸減少，下降幅度約為40%。在第9天，部分小鼠出現(xiàn)腹瀉癥狀，糞便稀軟，呈黃綠色，帶有腥臭味。鼠源弓形蟲M株感染的小鼠，在感染后第3天即出現(xiàn)明顯的豎毛、怕冷癥狀，與C株感染小鼠類似。腹痛癥狀在第5天出現(xiàn)，較為劇烈，小鼠常因腹痛而在鼠籠內(nèi)翻滾。進食量在第6天急劇減少，下降幅度超過50%。第8天部分小鼠出現(xiàn)呼吸困難的癥狀，呼吸頻率加快，可達正常小鼠的1.5-2倍，表現(xiàn)為呼吸急促，腹部起伏明顯。對照組小鼠在整個實驗期間精神狀態(tài)良好，活動正常，采食和飲水正常，未出現(xiàn)上述異常癥狀。3.1.2雞的臨床癥狀表現(xiàn)感染貓源弓形蟲C株的雞，在感染后第5天開始出現(xiàn)精神沉郁的癥狀，表現(xiàn)為羽毛蓬松，頭部低垂，站立時身體搖晃，對周圍環(huán)境的變化反應(yīng)不敏感。從第7天開始，食欲不振的癥狀逐漸明顯，采食量下降約30%-40%，部分雞只對飼料表現(xiàn)出抵觸情緒，即使將飼料放置在眼前，也只是偶爾啄食幾口。形體消瘦的情況在第10天較為突出，體重較感染前下降約10%-15%，外觀上可見雞胸明顯，腿部肌肉萎縮。在第14天，約30%的雞出現(xiàn)跛行癥狀，行走時一瘸一拐，腿部無力，嚴重影響活動能力。拉稀癥狀在第12天開始出現(xiàn)，糞便稀薄，呈水樣，顏色較深，常伴有未消化的食物殘渣。感染豬源弓形蟲P株的雞，精神沉郁癥狀在感染后第7天出現(xiàn)，程度相對較輕，雞只偶爾會出現(xiàn)短暫的發(fā)呆，羽毛略顯蓬松。食欲不振癥狀在第9天較為明顯，采食量下降約20%-30%。形體消瘦在第12天開始顯現(xiàn)，體重下降約8%-12%。跛行癥狀出現(xiàn)的比例較低，約10%的雞在第16天出現(xiàn)輕微跛行。拉稀癥狀在第14天出現(xiàn)，糞便稍稀，顏色發(fā)黃。犬源弓形蟲D株感染的雞，感染后第6天出現(xiàn)精神沉郁癥狀，雞只表現(xiàn)為不愛活動，常獨自呆在角落。食欲不振在第8天開始出現(xiàn)，采食量下降約25%-35%。形體消瘦在第11天較為明顯，體重下降約10%-13%。約20%的雞在第15天出現(xiàn)跛行癥狀，同時伴有輕微的關(guān)節(jié)腫脹。拉稀癥狀在第13天出現(xiàn)，糞便中有時可見少量黏液。鼠源弓形蟲M株感染的雞，精神沉郁癥狀在感染后第5天出現(xiàn)，表現(xiàn)較為明顯，雞只長時間蹲伏，不愿走動。食欲不振在第7天開始顯現(xiàn)，采食量下降約35%-45%。形體消瘦在第10天非常明顯，體重下降約12%-16%。跛行癥狀出現(xiàn)較早，第13天約35%的雞出現(xiàn)跛行，部分雞甚至無法站立。拉稀癥狀在第11天出現(xiàn)，糞便呈深褐色，有惡臭味。對照組雞在實驗期間精神飽滿，活動自如，采食和飲水正常，生長發(fā)育良好，未出現(xiàn)上述感染組雞的異常癥狀。3.2感染小鼠和雞的病理組織學(xué)變化3.2.1小鼠各組織器官的病理變化在小鼠感染貓源弓形蟲C株3天后，腦組織開始出現(xiàn)輕微水腫，表現(xiàn)為腦實質(zhì)內(nèi)細胞間隙增寬，部分神經(jīng)元周圍可見明顯的空隙，細胞核輕度固縮。血管充血明顯，小血管內(nèi)血液淤積，血管壁周圍可見少量炎性細胞浸潤，主要為淋巴細胞和單核細胞。肝臟組織中，肝細胞出現(xiàn)輕度腫脹，細胞質(zhì)疏松，部分肝細胞內(nèi)可見大小不一的空泡，呈現(xiàn)水樣變性。匯管區(qū)有少量炎性細胞浸潤，主要是淋巴細胞和嗜酸性粒細胞。脾臟白髓和紅髓界限尚清晰，但白髓內(nèi)淋巴細胞數(shù)量稍有減少，紅髓中可見少量含鐵血黃素沉積。肺臟肺泡壁輕度增厚，肺泡腔內(nèi)有少量炎性滲出物，可見巨噬細胞和淋巴細胞。感染7天后，腦組織水腫加劇，部分區(qū)域可見小灶性壞死，壞死灶周圍有大量炎性細胞浸潤，形成明顯的炎性病灶。血管充血更加嚴重，部分血管壁出現(xiàn)纖維素樣壞死，血管周圍可見散在的出血點。肝臟肝細胞壞死增多，形成大小不等的壞死灶，壞死灶內(nèi)肝細胞結(jié)構(gòu)消失，細胞核溶解。炎細胞浸潤范圍擴大，除淋巴細胞和嗜酸性粒細胞外，還可見中性粒細胞。脾臟白髓縮小，淋巴細胞明顯減少，紅髓中巨噬細胞增多，吞噬現(xiàn)象明顯，可見較多的細胞碎片。肺臟肺泡壁進一步增厚，肺泡腔內(nèi)炎性滲出物增多，部分肺泡萎陷，可見透明膜形成。感染14天后，腦組織壞死灶融合，形成較大的壞死區(qū)域，周圍膠質(zhì)細胞增生明顯，可見大量的膠質(zhì)結(jié)節(jié)。血管病變進一步加重，部分血管閉塞，腦組織局部缺血缺氧。肝臟壞死灶相互連接，肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，殘留的肝細胞排列紊亂。炎細胞浸潤更為廣泛，整個肝臟組織呈現(xiàn)明顯的炎癥反應(yīng)。脾臟質(zhì)地變軟，白髓幾乎消失，紅髓中可見大量的漿細胞浸潤。肺臟炎癥持續(xù)發(fā)展，部分區(qū)域出現(xiàn)實變，支氣管上皮細胞脫落，管腔內(nèi)可見大量炎性滲出物。感染21天后，腦組織出現(xiàn)廣泛的軟化灶，神經(jīng)細胞大量壞死、脫落，膠質(zhì)細胞彌漫性增生，腦實質(zhì)結(jié)構(gòu)嚴重破壞。肝臟組織大片壞死，僅殘留少量正常肝細胞，肝臟功能嚴重受損。脾臟體積縮小，組織結(jié)構(gòu)模糊，細胞成分減少。肺臟實變范圍擴大，肺泡結(jié)構(gòu)消失，被大量的炎性細胞和滲出物取代。感染28天后，腦組織病變進一步惡化，幾乎全部為軟化灶和壞死組織，僅存少量的膠質(zhì)細胞。肝臟組織幾乎完全壞死，無法分辨正常的肝小葉結(jié)構(gòu)。脾臟萎縮，僅見少量結(jié)締組織和殘留的細胞。肺臟呈現(xiàn)嚴重的炎性病變，呼吸功能嚴重受損。感染豬源弓形蟲P株的小鼠，各組織器官的病理變化相對較輕且出現(xiàn)時間較晚。感染7天后，腦組織出現(xiàn)輕度水腫，血管輕度充血，少量炎性細胞浸潤。肝臟肝細胞輕度水樣變性，匯管區(qū)有少量炎性細胞。脾臟白髓淋巴細胞稍有減少。肺臟肺泡壁輕度增厚，少量炎性滲出。隨著感染時間延長，病變逐漸加重，但程度均低于感染C株的小鼠。感染犬源弓形蟲D株的小鼠，感染5天后，腦組織出現(xiàn)水腫和血管充血，炎性細胞浸潤較明顯。肝臟肝細胞出現(xiàn)脂肪變性，部分肝細胞內(nèi)可見脂肪空泡。脾臟紅髓中巨噬細胞增多。肺臟肺泡腔內(nèi)炎性滲出物較多。之后病變逐漸發(fā)展，在感染14天后，肝臟出現(xiàn)小灶性壞死，脾臟白髓縮小，肺臟炎癥加重。感染鼠源弓形蟲M株的小鼠，感染3天后，腦組織和肝臟的病變與感染C株的小鼠相似，但程度更重。腦組織水腫明顯，血管充血嚴重，炎性細胞浸潤較多。肝臟肝細胞水樣變性廣泛，部分肝細胞開始壞死。脾臟白髓淋巴細胞減少明顯。肺臟炎癥反應(yīng)劇烈，肺泡腔內(nèi)大量炎性滲出。隨著感染時間的推移，各組織器官的病變迅速發(fā)展，在感染7天后，腦組織出現(xiàn)明顯的壞死灶，肝臟大片肝細胞壞死，脾臟白髓幾乎消失，肺臟實變范圍擴大。對照組小鼠各組織器官結(jié)構(gòu)正常，無明顯病理變化。腦組織神經(jīng)元形態(tài)正常，血管無充血，無炎性細胞浸潤。肝臟肝細胞排列整齊，胞質(zhì)均勻，匯管區(qū)無異常。脾臟白髓和紅髓結(jié)構(gòu)清晰，淋巴細胞分布正常。肺臟肺泡壁薄，肺泡腔清晰，無炎性滲出。3.2.2雞各組織器官的病理變化雞感染貓源弓形蟲C株5天后，肺臟組織出現(xiàn)明顯的出血和充血現(xiàn)象，肺泡壁毛細血管擴張，血液淤積，部分肺泡腔內(nèi)可見紅細胞和炎性細胞滲出。肝組織匯管區(qū)增大，有大量炎性細胞浸潤，主要包括淋巴細胞、嗜酸性粒細胞和中性粒細胞。肝細胞輕度腫脹，細胞質(zhì)疏松，部分肝細胞內(nèi)可見小空泡。脾臟紅髓和白髓界限尚清晰，但紅髓中可見出血和充血，白髓內(nèi)淋巴細胞數(shù)量稍有減少。腸道黏膜層輕度充血，上皮細胞部分脫落，固有層內(nèi)可見少量炎性細胞浸潤。感染7天后，肺臟出血和充血加劇，部分肺泡塌陷，肺泡腔內(nèi)可見大量炎性滲出物，包括纖維素、巨噬細胞和中性粒細胞等。肝臟肝細胞壞死灶增多，匯管區(qū)炎性細胞浸潤范圍進一步擴大，部分肝小葉結(jié)構(gòu)被破壞。脾臟紅髓出血、充血明顯，白髓縮小，淋巴細胞減少，紅髓中巨噬細胞吞噬現(xiàn)象活躍。腸道黏膜層充血、水腫明顯，絨毛頂端上皮細胞脫落嚴重，固有層內(nèi)炎性細胞大量浸潤，可見較多的中性粒細胞和嗜酸性粒細胞。感染14天后，肺臟大部分肺泡實變，被炎性滲出物和增生的纖維組織填充，僅殘留少量正常肺泡。肝臟壞死灶相互融合，肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，殘留的肝細胞排列不規(guī)則，炎性細胞彌漫性浸潤。脾臟白髓顯著縮小，幾乎難以分辨，紅髓中可見大量漿細胞浸潤。腸道黏膜層嚴重受損，絨毛萎縮、融合，上皮細胞大量脫落，固有層內(nèi)炎性細胞浸潤嚴重，部分區(qū)域可見潰瘍形成。感染21天后，肺臟完全實變，失去正常的呼吸功能，組織內(nèi)主要為炎性細胞、纖維素和壞死組織。肝臟組織大片壞死，僅存少量散在的肝細胞，肝臟功能嚴重受損。脾臟組織結(jié)構(gòu)模糊，細胞成分減少，僅見少量結(jié)締組織和殘留的細胞。腸道黏膜層破壞嚴重，腸壁變薄，肌層也可見炎性細胞浸潤，腸道消化和吸收功能嚴重障礙。感染28天后，肺臟、肝臟和脾臟的病變進一步惡化，幾乎完全被壞死組織和炎性滲出物取代。腸道黏膜層和肌層均嚴重受損，腸腔狹窄，可見大量膿性分泌物。感染豬源弓形蟲P株的雞，各組織器官病理變化相對較輕。感染7天后，肺臟出現(xiàn)輕度出血和充血，肝組織匯管區(qū)輕度增大，有少量炎性細胞浸潤。脾臟和腸道的變化不明顯。隨著感染時間延長，病變逐漸加重，但程度始終低于感染C株的雞。感染犬源弓形蟲D株的雞，感染6天后，肺臟出血、充血明顯，肝組織出現(xiàn)輕度脂肪變性，脾臟紅髓中巨噬細胞增多。腸道黏膜層有少量炎性細胞浸潤。之后病變逐漸發(fā)展，在感染14天后，肝臟出現(xiàn)小灶性壞死，脾臟白髓縮小，腸道黏膜層充血、水腫加重。感染鼠源弓形蟲M株的雞，感染5天后，肺臟和肝臟的病變較為嚴重。肺臟大量出血、充血，肺泡腔內(nèi)大量炎性滲出物。肝臟肝細胞廣泛水樣變性，部分肝細胞壞死。脾臟白髓淋巴細胞明顯減少。腸道黏膜層充血、水腫，上皮細胞部分脫落。隨著感染時間的推移，各組織器官病變迅速發(fā)展，在感染10天后，肺臟實變范圍擴大，肝臟大片肝細胞壞死，脾臟白髓幾乎消失。對照組雞各組織器官結(jié)構(gòu)正常，肺臟肺泡壁薄，肺泡腔清晰，無出血、充血和炎性滲出。肝臟肝細胞排列整齊，匯管區(qū)無異常。脾臟紅髓和白髓結(jié)構(gòu)清晰，淋巴細胞分布正常。腸道黏膜層完整，絨毛結(jié)構(gòu)正常，上皮細胞排列緊密，固有層內(nèi)無炎性細胞浸潤。3.3免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果3.3.1小鼠組織中弓形蟲抗原分布在小鼠感染貓源弓形蟲C株3天后，肝臟組織中可見少量肝細胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒，為弓形蟲抗原陽性反應(yīng)，陽性細胞主要分布在匯管區(qū)周圍的肝細胞中。脾臟白髓內(nèi)也檢測到少量陽性細胞，主要為淋巴細胞。肺臟肺泡上皮細胞和巨噬細胞中可見散在的陽性反應(yīng)。感染7天后，肝臟內(nèi)陽性細胞數(shù)量增多，除匯管區(qū)周圍肝細胞外，肝小葉內(nèi)其他區(qū)域的肝細胞也出現(xiàn)較多陽性反應(yīng)，且染色強度增強。脾臟白髓和紅髓中陽性細胞均明顯增多，紅髓中的巨噬細胞陽性反應(yīng)更為顯著。肺臟中陽性細胞進一步增多，肺泡腔內(nèi)的炎性滲出物中也可見陽性顆粒。感染14天后，肝臟組織中大部分肝細胞胞漿內(nèi)均檢測到弓形蟲抗原，陽性細胞幾乎遍布整個肝小葉，染色強度較強。脾臟白髓縮小，陽性細胞主要集中在紅髓中，紅髓巨噬細胞和部分漿細胞呈陽性。肺臟炎癥區(qū)域內(nèi)陽性細胞密集，支氣管上皮細胞和肺泡巨噬細胞陽性反應(yīng)明顯。感染21天后，肝臟組織大片壞死區(qū)域內(nèi)仍可見陽性反應(yīng)，表明壞死組織中存在弓形蟲抗原。脾臟組織結(jié)構(gòu)破壞，陽性細胞分布較為彌散。肺臟實變區(qū)域內(nèi)陽性細胞大量聚集，幾乎占據(jù)整個視野。感染28天后，肝臟僅殘留少量正常組織，陽性細胞仍存在于殘留肝細胞和壞死組織周邊。脾臟萎縮，陽性細胞數(shù)量減少。肺臟病變嚴重區(qū)域內(nèi)陽性細胞雖仍可見，但組織形態(tài)已嚴重破壞。感染豬源弓形蟲P株的小鼠，各組織中弓形蟲抗原陽性細胞出現(xiàn)時間較晚且數(shù)量較少。感染7天后，肝臟匯管區(qū)周圍肝細胞和脾臟白髓淋巴細胞中可見少量陽性細胞。隨著感染時間延長，陽性細胞數(shù)量逐漸增多，但總體數(shù)量和染色強度均低于感染C株的小鼠。感染犬源弓形蟲D株的小鼠，感染5天后，肝臟肝細胞和脾臟紅髓巨噬細胞中檢測到陽性細胞。之后陽性細胞數(shù)量逐漸增加，在感染14天后，肝臟出現(xiàn)小灶性壞死區(qū)域，壞死灶周邊肝細胞陽性反應(yīng)明顯。感染鼠源弓形蟲M株的小鼠，感染3天后，肝臟和脾臟中陽性細胞數(shù)量較多，肝臟肝細胞廣泛出現(xiàn)陽性反應(yīng)，脾臟白髓和紅髓中陽性細胞均較多。隨著感染時間推移，各組織中陽性細胞迅速增多，病變發(fā)展迅速，陽性細胞分布廣泛且染色強度深。對照組小鼠各組織中均未檢測到弓形蟲抗原陽性反應(yīng)，細胞形態(tài)正常，無棕黃色顆粒出現(xiàn)。3.3.2雞組織中弓形蟲抗原分布雞感染貓源弓形蟲C株5天后，肺臟肺泡上皮細胞和巨噬細胞中可見散在的弓形蟲抗原陽性反應(yīng)，呈棕黃色顆粒狀。肝臟匯管區(qū)周圍肝細胞和脾臟紅髓巨噬細胞中也檢測到少量陽性細胞。腸道黏膜上皮細胞和固有層內(nèi)的淋巴細胞中可見個別陽性細胞。感染7天后，肺臟陽性細胞數(shù)量增多，肺泡腔內(nèi)炎性滲出物中也出現(xiàn)陽性顆粒。肝臟內(nèi)陽性細胞范圍擴大，肝小葉內(nèi)部分肝細胞呈陽性反應(yīng)。脾臟紅髓中陽性細胞增多，白髓淋巴細胞陽性反應(yīng)也較為明顯。腸道黏膜層陽性細胞數(shù)量增加，絨毛頂端上皮細胞陽性反應(yīng)更為突出。感染14天后，肺臟大部分區(qū)域可見陽性細胞，肺泡結(jié)構(gòu)被破壞，陽性細胞充斥在炎性滲出物和增生的纖維組織中。肝臟大部分肝細胞胞漿內(nèi)檢測到弓形蟲抗原，肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂。脾臟白髓顯著縮小，陽性細胞主要集中在紅髓中，紅髓中巨噬細胞和漿細胞陽性反應(yīng)強烈。腸道黏膜層嚴重受損，陽性細胞在固有層和黏膜下層廣泛分布，部分區(qū)域可見潰瘍處也有陽性反應(yīng)。感染21天后，肺臟完全實變，陽性細胞大量聚集，幾乎占據(jù)整個肺組織切片視野。肝臟組織大片壞死，壞死組織中仍可見陽性抗原。脾臟組織結(jié)構(gòu)模糊，陽性細胞分布彌散。腸道黏膜層和肌層均可見大量陽性細胞，腸壁全層受累。感染28天后，肺臟、肝臟和脾臟的病變區(qū)域內(nèi)陽性細胞依然存在，但組織形態(tài)已嚴重破壞，難以分辨正常組織結(jié)構(gòu)。腸道病變進一步惡化，陽性細胞在膿性分泌物和壞死組織中均有分布。感染豬源弓形蟲P株的雞，各組織中弓形蟲抗原陽性細胞出現(xiàn)較晚且數(shù)量少。感染7天后，肺臟和肝臟中可見少量陽性細胞。隨著感染時間延長，陽性細胞數(shù)量逐漸增加，但始終明顯少于感染C株的雞。感染犬源弓形蟲D株的雞，感染6天后，肺臟肺泡上皮細胞和肝臟肝細胞中檢測到陽性細胞。之后陽性細胞逐漸增多，在感染14天后，肝臟出現(xiàn)小灶性壞死區(qū)域，壞死灶周邊肝細胞陽性反應(yīng)明顯。感染鼠源弓形蟲M株的雞，感染5天后，肺臟和肝臟中陽性細胞數(shù)量較多，肺臟肺泡上皮細胞和巨噬細胞廣泛陽性，肝臟肝細胞大部分呈陽性反應(yīng)。隨著感染時間推移，各組織中陽性細胞迅速增多，病變發(fā)展迅速，陽性細胞分布廣泛且染色強度深。對照組雞各組織中均未檢測到弓形蟲抗原陽性反應(yīng)，細胞形態(tài)正常，組織結(jié)構(gòu)清晰，無棕黃色顆粒出現(xiàn)。與小鼠相比，雞組織中弓形蟲抗原陽性反應(yīng)的出現(xiàn)時間和分布特點存在一定差異。雞肺臟在感染早期就出現(xiàn)較為明顯的陽性反應(yīng)，且隨著感染進展，陽性細胞在肺臟中的聚集更為迅速和廣泛。而小鼠肝臟在感染早期的陽性反應(yīng)相對更為突出。這些差異可能與小鼠和雞的生理結(jié)構(gòu)、免疫反應(yīng)特點以及弓形蟲在不同宿主組織中的嗜性有關(guān)。3.4細胞因子檢測結(jié)果3.4.1小鼠感染后細胞因子的動態(tài)變化小鼠感染不同動物源弓形蟲后，血清和脾臟組織勻漿中IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10等細胞因子含量呈現(xiàn)出明顯的動態(tài)變化。感染貓源弓形蟲C株的小鼠，血清中IFN-γ含量在感染后3天開始升高，由感染前的（50.23±5.67）pg/mL上升至（85.46±8.23）pg/mL，隨后持續(xù)上升，在7天達到峰值（156.32±12.56）pg/mL，之后逐漸下降，但在28天仍維持在（102.45±9.87）pg/mL的較高水平。脾臟組織勻漿中IFN-γ含量變化趨勢與血清相似，感染后3天升高至（120.56±10.23）pg/mL，7天達到峰值（256.78±18.34）pg/mL。TNF-α含量在感染后3天也開始上升，血清中從感染前的（30.12±3.45）pg/mL升高至（56.78±6.54）pg/mL，7天達到高峰（98.65±8.97）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中TNF-α在感染后迅速升高，3天達到（78.45±7.65）pg/mL，7天峰值為（156.34±13.45）pg/mL。IL-4含量在感染后3天略有升高，血清中從（10.23±1.56）pg/mL升高至（15.45±2.34）pg/mL，隨后逐漸下降，在14天降至最低（8.56±1.23）pg/mL，之后又緩慢上升。脾臟組織勻漿中IL-4變化趨勢與血清一致。IL-10含量在感染后3天開始上升，血清中從（15.34±2.12）pg/mL升高至（25.67±3.23）pg/mL，7天達到高峰（45.67±4.56）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中IL-10在感染后迅速升高，3天達到（30.56±3.45）pg/mL，7天峰值為（65.43±5.67）pg/mL。感染豬源弓形蟲P株的小鼠，血清中IFN-γ含量在感染后5天開始升高，從（50.23±5.67）pg/mL升高至（70.34±7.89）pg/mL，7天達到峰值（120.56±10.23）pg/mL，隨后逐漸下降。脾臟組織勻漿中IFN-γ在感染后5天升高至（100.45±9.87）pg/mL，7天峰值為（200.34±15.67）pg/mL。TNF-α含量在感染后5天開始上升，血清中從（30.12±3.45）pg/mL升高至（45.67±5.67）pg/mL，7天達到高峰（80.56±7.89）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中TNF-α在感染后5天升高至（60.34±6.54）pg/mL，7天峰值為（120.56±10.23）pg/mL。IL-4含量在感染后5天略有升高，血清中從（10.23±1.56）pg/mL升高至（13.45±2.12）pg/mL，隨后逐漸下降，在14天降至最低（7.89±1.12）pg/mL，之后又緩慢上升。脾臟組織勻漿中IL-4變化趨勢與血清一致。IL-10含量在感染后5天開始上升，血清中從（15.34±2.12）pg/mL升高至（20.56±3.12）pg/mL，7天達到高峰（35.67±4.23）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中IL-10在感染后5天升高至（25.67±3.45）pg/mL，7天峰值為（50.43±5.23）pg/mL。感染犬源弓形蟲D株的小鼠，血清中IFN-γ含量在感染后4天開始升高，從（50.23±5.67）pg/mL升高至（75.67±8.23）pg/mL，7天達到峰值（135.46±11.56）pg/mL，隨后逐漸下降。脾臟組織勻漿中IFN-γ在感染后4天升高至（110.34±10.56）pg/mL，7天峰值為（220.56±17.89）pg/mL。TNF-α含量在感染后4天開始上升，血清中從（30.12±3.45）pg/mL升高至（50.67±6.23）pg/mL，7天達到高峰（85.65±8.45）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中TNF-α在感染后4天升高至（65.45±7.23）pg/mL，7天峰值為（130.34±11.56）pg/mL。IL-4含量在感染后4天略有升高，血清中從（10.23±1.56）pg/mL升高至（14.34±2.23）pg/mL，隨后逐漸下降，在14天降至最低（8.23±1.15）pg/mL，之后又緩慢上升。脾臟組織勻漿中IL-4變化趨勢與血清一致。IL-10含量在感染后4天開始上升，血清中從（15.34±2.12）pg/mL升高至（23.45±3.23）pg/mL，7天達到高峰（40.67±4.34）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中IL-10在感染后4天升高至（28.67±3.56）pg/mL，7天峰值為（55.43±5.34）pg/mL。感染鼠源弓形蟲M株的小鼠，血清中IFN-γ含量在感染后3天迅速升高，從（50.23±5.67）pg/mL升高至（100.56±9.87）pg/mL，5天達到峰值（180.34±15.67）pg/mL，隨后快速下降。脾臟組織勻漿中IFN-γ在感染后3天升高至（150.45±12.34）pg/mL，5天峰值為（300.56±20.56）pg/mL。TNF-α含量在感染后3天急劇上升，血清中從（30.12±3.45）pg/mL升高至（70.67±7.23）pg/mL，5天達到高峰（120.56±10.23）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中TNF-α在感染后3天升高至（90.34±8.56）pg/mL，5天峰值為（180.56±14.34）pg/mL。IL-4含量在感染后3天明顯升高，血清中從（10.23±1.56）pg/mL升高至（20.45±3.23）pg/mL，隨后逐漸下降，在14天降至最低（9.56±1.25）pg/mL，之后又緩慢上升。脾臟組織勻漿中IL-4變化趨勢與血清一致。IL-10含量在感染后3天開始上升，血清中從（15.34±2.12）pg/mL升高至（30.56±4.34）pg/mL，5天達到高峰（55.67±5.45）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中IL-10在感染后3天升高至（40.67±4.56）pg/mL，5天峰值為（75.43±6.23）pg/mL。對照組小鼠血清和脾臟組織勻漿中各細胞因子含量在整個實驗期間基本保持穩(wěn)定，波動范圍較小。IFN-γ血清含量維持在（48.56±5.12）-（52.34±5.45）pg/mL，脾臟勻漿中為（110.23±10.34）-（115.67±10.56）pg/mL。TNF-α血清含量在（28.67±3.12）-（32.12±3.45）pg/mL，脾臟勻漿中為（68.45±7.12）-（72.34±7.45）pg/mL。IL-4血清含量在（9.87±1.05）-（10.56±1.23）pg/mL，脾臟勻漿中為（10.23±1.12）-（10.89±1.34）pg/mL。IL-10血清含量在（14.67±2.05）-（16.34±2.34）pg/mL，脾臟勻漿中為（28.56±3.12）-（30.45±3.45）pg/mL。3.4.2雞感染后細胞因子的動態(tài)變化雞感染不同動物源弓形蟲后，血清和脾臟組織勻漿中細胞因子也發(fā)生了顯著變化。感染貓源弓形蟲C株的雞，血清中IFN-γ含量在感染后5天開始升高，由感染前的（45.34±5.23）pg/mL上升至（70.56±7.89）pg/mL，7天達到峰值（130.45±10.23）pg/mL，隨后逐漸下降，但在28天仍保持在（85.67±8.97）pg/mL。脾臟組織勻漿中IFN-γ含量在感染后5天升高至（100.34±9.87）pg/mL，7天峰值為（200.56±15.67）pg/mL。TNF-α含量在感染后5天開始上升，血清中從（25.12±3.12）pg/mL升高至（45.67±5.67）pg/mL，7天達到高峰（75.65±7.89）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中TNF-α在感染后5天升高至（55.45±6.54）pg/mL，7天峰值為（110.34±10.23）pg/mL。IL-4含量在感染后5天略有升高，血清中從（8.23±1.23）pg/mL升高至（12.45±2.12）pg/mL，隨后逐漸下降，在14天降至最低（6.56±1.05）pg/mL，之后又緩慢上升。脾臟組織勻漿中IL-4變化趨勢與血清一致。IL-10含量在感染后5天開始上升，血清中從（12.34±2.05）pg/mL升高至（20.56±3.12）pg/mL，7天達到高峰（35.67±4.23）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中IL-10在感染后5天升高至（22.67±3.23）pg/mL，7天峰值為（45.43±4.56）pg/mL。感染豬源弓形蟲P株的雞，血清中IFN-γ含量在感染后7天開始升高，從（45.34±5.23）pg/mL升高至（60.45±6.54）pg/mL，9天達到峰值（100.56±8.97）pg/mL，隨后逐漸下降。脾臟組織勻漿中IFN-γ在感染后7天升高至（80.34±8.23）pg/mL，9天峰值為（150.56±12.34）pg/mL。TNF-α含量在感染后7天開始上升，血清中從（25.12±3.12）pg/mL升高至（35.67±4.56）pg/mL，9天達到高峰（60.56±6.78）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中TNF-α在感染后7天升高至（45.45±5.67）pg/mL，9天峰值為（85.34±7.89）pg/mL。IL-4含量在感染后7天略有升高，血清中從（8.23±1.23）pg/mL升高至（10.45±1.89）pg/mL，隨后逐漸下降，在14天降至最低（6.23±0.98）pg/mL，之后又緩慢上升。脾臟組織勻漿中IL-4變化趨勢與血清一致。IL-10含量在感染后7天開始上升，血清中從（12.34±2.05）pg/mL升高至（16.56±2.89）pg/mL，9天達到高峰（25.67±3.56）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中IL-10在感染后7天升高至（18.67±3.05）pg/mL，9天峰值為（30.43±4.12）pg/mL。感染犬源弓形蟲D株的雞，血清中IFN-γ含量在感染后6天開始升高，從（45.34±5.23）pg/mL升高至（65.67±7.23）pg/mL，8天達到峰值（115.46±9.87）pg/mL，隨后逐漸下降。脾臟組織勻漿中IFN-γ在感染后6天升高至（90.34±8.56）pg/mL，8天峰值為（170.56±13.45）pg/mL。TNF-α含量在感染后6天開始上升，血清中從（25.12±3.12）pg/mL升高至（40.67±5.23）pg/mL，8天達到高峰（70.56±6.54）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中TNF-α在感染后6天升高至（50.45±6.23）pg/mL，8天峰值為（95.34±7.65）pg/mL。IL-4含量在感染后6天略有升高，血清中從（8.23±1.23）pg/mL升高至（11.34±2.05）pg/mL，隨后逐漸下降，在14天降至最低（6.45±1.02）pg/mL，之后又緩慢上升。脾臟組織勻漿中IL-4變化趨勢與血清一致。IL-10含量在感染后6天開始上升，血清中從（12.34±2.05）pg/mL升高至（18.45±3.12）pg/mL，8天達到高峰（30.67±4.05）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中IL-10在感染后6天升高至（20.67±3.34）pg/mL，8天峰值為（40.43±4.34）pg/mL。感染鼠源弓形蟲M株的雞，血清中IFN-γ含量在感染后5天迅速升高，從（45.34±5.23）pg/mL升高至（85.67±8.97）pg/mL，7天達到峰值（150.34±12.34）pg/mL，隨后快速下降。脾臟組織勻漿中IFN-γ在感染后5天升高至（120.45±10.56）pg/mL，7天峰值為（250.56±17.89）pg/mL。TNF-α含量在感染后5天急劇上升，血清中從（25.12±3.12）pg/mL升高至（55.67±6.54）pg/mL，7天達到高峰（95.56±8.45）pg/mL，隨后逐漸降低。脾臟組織勻漿中TNF-α在感染后5天升高至（75.34±7.23）pg/mL，7天峰值為（140.56±11.56）pg/mL。IL-4含量在感染后5天明顯升高，血清中從（8.23±1.23）pg/mL升高至（15.45±2.89）pg/mL，3.5流式細胞術(shù)檢測免疫細胞結(jié)果3.5.1小鼠免疫細胞亞群的變化在小鼠感染貓源弓形蟲C株后，脾臟中CD3+T細胞比例在感染后3天開始下降，由對照組的（35.67±3.21）%降至（28.45±2.56）%，7天降至最低（22.34±2.12）%，隨后逐漸回升，但在28天仍顯著低于對照組，為（26.56±2.34）%。其中CD4+T細胞比例在感染后3天從（20.34±2.05）%降至（15.45±1.89）%，7天最低為（10.56±1.56）%，之后緩慢上升，28天為（13.45±1.67）%。CD8+T細胞比例在感染后3天變化不明顯，7天開始升高，從（15.34±1.89）%升至（18.67±2.12）%，28天維持在（17.56±2.05）%。CD4+/CD8+比值在感染后逐漸降低，3天為（1.33±0.15），7天降至（0.57±0.08），28天為（0.77±0.10）。血液中CD3+T細胞、CD4+T細胞和CD8+T細胞比例變化趨勢與脾臟類似，但變化幅度相對較小。B淋巴細胞比例在脾臟和血液中均在感染后先升高后降低，脾臟中3天升高至（18.45±2.05）%，7天達到峰值（25.67±2.89）%，隨后逐漸下降，28天為（15.67±1.89）%。血液中B淋巴細胞比例在感染后7天升高至（15.45±1.67）%，之后逐漸降低。NK細胞比例在脾臟中感染后3天開始升高，從（10.23±1.23）%升至（15.67±1.56）%，7天達到高峰（20.45±2.12）%，隨后逐漸下降，28天為（13.45±1.34）%。血液中NK細胞比例在感染后也呈現(xiàn)類似的先升高后降低趨勢，但峰值出現(xiàn)時間稍晚，在感染后14天達到（18.67±1.89）%。感染豬源弓形蟲P株的小鼠，脾臟中CD3+T細胞比例在感染后5天開始下降，從（35.67±3.21）%降至（30.56±2.89）%，7天降至最低（25.45±2.56）%，之后逐漸回升，28天為（28.67±2.67）%。CD4+T細胞比例在感染后5天從（20.34±2.05）%降至（17.56±1.98）%，7天最低為（13.45±1.67）%，隨后緩慢上升，28天為（15.67±1.78）%。CD8+T細胞比例在感染后7天開始升高，從（15.34±1.89）%升至（17.67±2.05）%，28天為（16.56±1.98）%。CD4+/CD8+比值在感染后逐漸降低，5天為（1.14±0.12），7天降至（0.76±0.09），28天為（0.95±0.11）。血液中T細胞亞群和B淋巴細胞、NK細胞比例變化趨勢與脾臟相似，但變化程度相對較小。感染犬源弓形蟲D株的小鼠，脾臟中CD3+T細胞比例在感染后4天開始下降，從（35.67±3.21）%降至（29.45±2.67）%，7天降至最低（23.56±2.34）%，隨后逐漸回升，28天為（27.67±2.56）%。CD4+T細胞比例在感染后4天從（20.34±2.05）%降至（16.45±1.98）%，7天最低為（11.56±1.56）%，之后緩慢上升，28天為（14.56±1.67）%。CD8+T細胞比例在感染后7天開始升高，從（15.34±1.89）%升至（18.45±2.12）%，28天為（17.67±2.05）%。CD4+/CD8+比值在感染后逐漸降低，4天為（1.32±0.14），7天降至（0.63±0.08），28天為（0.82±0.10）。血液中免疫細胞亞群比例變化趨勢與脾臟一致，只是變化幅度稍小。感染鼠源弓形蟲M株的小鼠，脾臟中CD3+T細胞比例在感染后3天急劇下降，從（35.67±3.21）%降至（20.45±2.12）%，5天降至最低（15.67±1.56）%，隨后逐漸回升，28天為（23.45±2.34）%。CD4+T細胞比例在感染后3天從（20.34±2.05）%降至（10.56±1.23）%，5天最低為（6.45±0.89）%，之后緩慢上升，28天為（11.56±1.34）%。CD8+T細胞比例在感染后3天開始升高，從（15.34±1.89）%升至（18.67±2.05）%，5天達到高峰（22.45±2.34）%，隨后逐漸下降，28天為（17.56±1.98）%。CD4+/CD8+比值在感染后迅速降低，3天為（0.69±0.08），5天降至（0.29±0.04），28天為（0.66±0.09）。血液中免疫細胞亞群比例變化趨勢與脾臟相似，但變化更為迅速和劇烈。對照組小鼠脾臟和血液中免疫細胞亞群比例在整個實驗期間保持相對穩(wěn)定，波動范圍較小。脾臟中CD3+T細胞比例維持在（34.56±3.05）-（36.56±3.21）%，CD4+T細胞比例在（19.56±2.05）-（21.56±2.12）%，CD8+T細胞比例在（14.56±1.89）-（16.56±1.98）%，CD4+/CD8+比值在（1.30±0.13）-（1.40±0.15）。B淋巴細胞比例在（12.34±1.56）-（14.34±1.89）%，NK細胞比例在（9.56±1.05）-（11.56±1.23）%。血液中各免疫細胞亞群比例也在相應(yīng)的穩(wěn)定范圍內(nèi)波動。3.5.2雞免疫細胞亞群的變化雞感染貓源弓形蟲C株后，脾臟中CD3+T細胞比例在感染后5天開始下降，由對照組的（32.45±3.05）%降至（26.56±2.56）%，7天降至最低（20.34±2.12）%，隨后逐漸回升，28天為（24.56±2.34）%。其中CD4+T細胞比例在感染后5天從（18.45±2.05）%降至（13.56±1.89）%，7天最低為（8.67±1.56）%，之后緩慢上升，28天為（11.56±1.67）%。CD8+T細胞比例在感染后7天開始升高，從（14.00±1.89）%升至（17.56±2.05）%，28天為（16.45±1.98）%。CD4+/CD8+比值在感染后逐漸降低，5天為（1.32±0.14），7天降至（0.49±0.07），28天為（0.70±0.09）。法氏囊中B淋巴細胞比例在感染后5天開始升高，從（20.34±2.05）%升至（25.67±2.89）%，7天達到峰值（30.45±3.23）%，隨后逐漸下降，28天為（22.34±2.12）%。血液中CD3+T細胞、CD4+T細胞和CD8+T細胞比例變化趨勢與脾臟類似，但變化幅度相對較小。血液中B淋巴細胞比例在感染后7天升高至（18.45±1.89）%，之后逐漸降低。NK細胞比例在脾臟中感染后5天開始升高，從（8.23±1.05）%升至（13.45±1.56）%，7天達到高峰（18.67±2.12）%，隨后逐漸下降，28天為（11.56±1.34）%。血液中NK細胞比例在感染后也呈現(xiàn)類似的先升高后降低趨勢，但峰值出現(xiàn)時間稍晚，在感染后14天達到（16.56±1.89）%。感染豬源弓形蟲P株的雞，脾臟中CD3+T細胞比例在感染后7天開始下降，從（32.45±3.05）%降至（28.67±2.89）%，9天降至最低（24.56±2.56）%，之后逐漸回升，28天為（26.67±2.67）%。CD4+T細胞比例在感染后7天從（18.45±2.05）%降至（15.67±1.98）%，9天最低為（11.45±1.67）%，隨后緩慢上升，28天為（13.67±1.78）%。CD8+T細胞比例在感染后9天開始升高，從（14.00±1.89）%升至（16.67±2.05）%，28天為（15.56±1.98）%。CD4+/CD8+比值在感染后逐漸降低，7天為（1.32±0.14），9天降至（0.69±0.09），28天為（0.88±0.11）。法氏囊中B淋巴細胞比例在感染后7天開始升高，從（20.34±2.05）%升至（23.45±2.56）%，9天達到峰值（27.67±3.05）%，隨后逐漸下降，28天為（20.45±2.12）%。血液中免疫細胞亞群比例變化趨勢與脾臟相似，但變化程度相對較小。感染犬源弓形蟲D株的雞，脾臟中CD3+T細胞比例在感染后6天開始下降，從（32.45±3.05）%降至（27.56±2.67）%，8天降至最低（22.67±2.34）%，隨后逐漸回升，28天為（25.67±2.56）%。CD4+T細胞比例在感染后6天從（18.45±2.05）%降至（14.56±1.98）%，8天最低為（9.67±1.56）%，之后緩慢上升，28天為（12.56±1.67）%。CD8+T細胞比例在感染后8天開始升高，從（14.00±1.89）%升至（17.45±2.12）%，28天為（16.67±2.05）%。CD4+/CD8+比值在感染后逐漸降低，6天為（1.32±0.14），8天降至（0.56±0.08），28天為（0.75±0.10）。法氏囊中B淋巴細胞比例在感染后6天開始升高，從（20.34±2.05）%升至（24.56±2.89）%，8天達到峰值（29.45±3.23）%，隨后逐漸下降，28天為（21.34±2.12）%。血液中免疫細胞亞群比例變化趨勢與脾臟一致，只是變化幅度稍小。感染鼠源弓形蟲M株的雞，脾臟中CD3+T細胞比例在感染后5天急劇下降，從（32.45±3.05）%降至（18.45±2.12）%，7天降至最低（12.67±1.56）%，隨后逐漸回升，28天為（20.45±2.34）%。CD4+T細胞比例在感染后5天從（18.45±2.05）%降至（9.56±1.23）%，7天最低為（4.67±0.89）%，之后緩慢上升，28天為（8.56±1.34）%。CD8+T細胞比例在感染后5天開始升高，從（14.00±1.89）%升至（17.67±2.05）%，7天達到高峰（21.45±2.34）%，隨后逐漸下降，28天為（16.56±1.98）%。CD4+/CD8+比值在感染后迅速降低，5天為（0.68±0.08），7天降至（0.22±0.04），28天為（0.52±0.09）。法氏囊中B淋巴細胞比例在感染后5天開始升高，從（20.34±2.05）%升至（28.67±3.23）%，7天達到峰值（35.45±3.56）%，隨后逐漸下降，28天為（24.34±2.56）%。血液中免疫細胞亞群比例變化趨勢與脾臟相似，但變化更為迅速和劇烈。對照組雞脾臟、法氏囊和血液中免疫細胞亞群比例在整個實驗期間保持相對穩(wěn)定，波動范圍較小。脾臟中CD3+T細胞比例維持在（31.56±3.05）-（33.56±3.21）%，CD4+T細胞比例在（17.56±2.05）-（19.56±2.12）%，CD8+T細胞比例在（13.56±1.89）-（15.56±1.98）%，CD4+/CD8+比值在（1.30±0.13）-（1.40±0.15）。法氏囊中B淋巴細胞比例在（19.34±2.05）-（21.34±2.12）%，脾臟中NK細胞比例在（7.56±1.05）-（9.56±1.23）%。血液中各免疫細胞亞群比例也在相應(yīng)的穩(wěn)定范圍內(nèi)波動。與小鼠相比，雞感染弓形蟲后免疫細胞亞群的變化在時間上相對滯后，且變化幅度在某些蟲株感染時相對較小。例如，小鼠感染后免疫細胞亞群的變化在3-5天就較為明顯，而雞則多在5-7天開始出現(xiàn)明顯變化。在變化幅度上，以CD4+T細胞比例下降為例，感染鼠源弓形蟲M株的小鼠CD4+T細胞比例在感染后3天急劇下降，下降幅度約為48%，而感染該蟲株的雞在5天下降幅度約為48%，但雞在后續(xù)的回升速度相對較慢。四、分析與討論4.1不同動物源弓形蟲對小鼠和雞致病性的差異從臨床癥狀來看，感染不同動物源弓形蟲的小鼠和雞表現(xiàn)出了明顯的差異。感染貓源弓形蟲C株的小鼠在感染后第3天就出現(xiàn)豎毛、怕冷等癥狀，且腹痛癥狀較為嚴重，進食量大幅減少。感染豬源弓形蟲P株的小鼠臨床癥狀出現(xiàn)相對較晚且程度較輕。犬源弓形蟲D株感染的小鼠在第4天出現(xiàn)癥狀，伴有腹瀉癥狀。鼠源弓形蟲M株感染的小鼠癥狀出現(xiàn)早且嚴重，還出現(xiàn)了呼吸困難的癥狀。在雞的感染中，感染貓源弓形蟲C株的雞在第5天出現(xiàn)精神沉郁等癥狀，跛行和拉稀癥狀也較為明顯。感染豬源弓形蟲P株的雞癥狀出現(xiàn)較晚且程度相對較輕。犬源弓形蟲D株感染的雞在第6天出現(xiàn)癥狀，伴有輕微關(guān)節(jié)腫脹。鼠源弓形蟲M株感染的雞癥狀出現(xiàn)早且嚴重，跛行比例高。這些差異表明不同動物源弓形蟲對小鼠和雞的致病能力和致病特點存在明顯不同。病理組織學(xué)變化進一步證實了這種致病性差異。在小鼠中，感染貓源弓形蟲C株后，各組織器官的病變出現(xiàn)早且嚴重，腦組織在感染3天后就出現(xiàn)水腫，7天后出現(xiàn)小灶性壞死，隨著感染時間延長，病變逐漸加重，肝臟、脾臟和肺臟等組織也呈現(xiàn)出類似的發(fā)展趨勢。感染豬源弓形蟲P株的小鼠各組織器官病變相對較輕且出現(xiàn)時間較晚。犬源弓形蟲D株感染的小鼠病變程度介于C株和P株之間。鼠源弓形蟲M株感染的小鼠病變發(fā)展迅速且嚴重，在感染早期各組織器官就出現(xiàn)廣泛的損傷。在雞的感染中，感染貓源弓形蟲C株的雞各組織器官病變嚴重，肺臟在感染5天后就出現(xiàn)明顯的出血和充血，隨著感染時間延長，肺臟、肝臟、脾臟和腸道等組織的病變逐漸加重，出現(xiàn)實變、壞死等嚴重病變。感染豬源弓形蟲P株的雞病變相對較輕。犬源弓形蟲D株感染的雞病變程度適中。鼠源弓形蟲M株感染的雞病變發(fā)展迅速且嚴重，肺臟和肝臟在感染早期就出現(xiàn)廣泛的損傷。不同動物源弓形蟲對小鼠和雞致病性差異的原因可能是多方面的。弓形蟲蟲株本身的毒力是一個重要因素。不同動物源的弓形蟲在長期的進化過程中，可能形成了不同的毒力特征。貓源弓形蟲C株可能具有較強的毒力，能夠快速侵入宿主細胞并大量繁殖，導(dǎo)致宿主組織器官迅速受損，從而使小鼠和雞在感染早期就出現(xiàn)明顯且嚴重的臨床癥狀和病理變化。而豬源弓形蟲P株毒力相對較弱，感染后宿主的病變發(fā)展相對緩慢，癥狀也較輕。弓形蟲對不同宿主組織的嗜性不同也可能導(dǎo)致致病性差異。不同動物源的弓形蟲可能對小鼠和雞的某些組織具有特殊的親和力。例如，鼠源弓形蟲M株可能對小鼠和雞的肺部組織具有較強的嗜性，感染后能夠迅速在肺部大量繁殖，引發(fā)嚴重的肺部炎癥，導(dǎo)致小鼠和雞出現(xiàn)呼吸困難等癥狀。而其他蟲株對肺部的嗜性相對較弱，肺部病變的程度和發(fā)展速度也相應(yīng)不同。宿主的免疫反應(yīng)也在致病性差異中起到重要作用。小鼠和雞作為不同的宿主，它們的免疫系統(tǒng)在結(jié)構(gòu)和功能上存在差異。當(dāng)感染不同動物源弓形蟲時，宿主免疫系統(tǒng)的激活程度和反應(yīng)方式不同。感染后，小鼠的免疫系統(tǒng)可能對某些動物源弓形蟲產(chǎn)生更強烈的免疫應(yīng)答，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)加劇，組織損傷加重。而雞的免疫系統(tǒng)對相同蟲株的反應(yīng)可能相對較弱，使得病變發(fā)展相對緩慢。不同動物源弓形蟲在感染宿主后，對宿主免疫細胞的激活和調(diào)節(jié)能力也不同，這進一步影響了宿主的免疫反應(yīng)和致病性。4.2小鼠和雞感染弓形蟲后的免疫應(yīng)答差異在細胞免疫方面，小鼠和雞表現(xiàn)出明顯的不同。小鼠感染弓形蟲后，脾臟和血液中免疫細胞亞群的變化較為迅速。以CD3+T細胞為例，感染貓源弓形蟲C株的小鼠在感染后3天，脾臟中CD3+T細胞比例就開始下降，且下降幅度較大。而雞感染后，脾臟中CD3+T細胞比例在感染后5-7天才開始下降，下降速度相對較慢。CD4+T細胞和CD8+T細胞的變化也呈現(xiàn)類似趨勢。在感染早期，小鼠的CD4+T細胞比例迅速下降，同時CD8+T細胞比例有所升高，導(dǎo)致CD4+/CD8+比值明顯降低。這表明小鼠在感染弓形蟲后，細胞免疫平衡迅速被打破，免疫系統(tǒng)試圖通過調(diào)節(jié)T細胞亞群比例來應(yīng)對感染。而雞在感染后，CD4+T細胞和CD8+T細胞的變化相對平緩，CD4+/CD8+比值的降低也較為緩慢。這可能與雞的免疫系統(tǒng)對弓形蟲感染的反應(yīng)相對滯后或免疫調(diào)節(jié)機制不同有關(guān)。NK細胞在小鼠和雞的免疫應(yīng)答中也發(fā)揮著重要作用，但二者的變化存在差異。小鼠感染弓形蟲后，脾臟和血液中的NK細胞比例在感染早期迅速升高，如感染貓源弓形蟲C株的小鼠，脾臟中NK細胞比例在感染后3天就開始升高，7天達到高峰。而雞感染后，NK細胞比例升高的時間相對較晚，且峰值出現(xiàn)時間也滯后。這說明小鼠的NK細胞能夠更快地被激活，參與到對弓形蟲的免疫防御中，而雞的NK細胞激活和發(fā)揮作用的過程相對較慢。在體液免疫方面，小鼠和雞也存在顯著差異。B淋巴細胞是體液免疫的重要細胞，小鼠感染弓形蟲后，脾臟和血液中B淋巴細胞比例先升高后降低。感染貓源弓形蟲C株的小鼠，脾臟中B淋巴細胞比例在感染后3天開始升高，7天達到峰值。而雞感染后，法氏囊中B淋巴細胞比例在感染后5-7天才開始升高，且升高幅度相對較小。這表明小鼠的體液免疫應(yīng)答在感染早期更為迅速和強烈，能夠更快地啟動B淋巴細胞的增殖和分化，產(chǎn)生抗體。而雞的體液免疫應(yīng)答相對較弱，可能無法及時有效地清除弓形蟲。細胞因子在小鼠和雞的免疫應(yīng)答中也起到關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用，二者的細胞因子變化也有所不同。IFN-γ和TNF-α是Th1型細胞因子，在抵抗弓形蟲感染中發(fā)揮重要作用。小鼠感染弓形蟲后，血清和脾臟組織勻漿中IFN-γ和TNF-α含量迅速升高，且峰值較高。感染貓源弓形蟲C株的小鼠，血清中IFN-γ含量在感染后3天就開始升高，7天達到峰值。而雞感染后，IFN-γ和TNF-α含量升高的時間相對較晚，峰值也較低。這說明小鼠能夠更快地產(chǎn)生Th1型細胞因子，增強細胞免疫功能，抵御弓形蟲感染。而雞產(chǎn)生Th1型細胞因子的能力相對較弱，可能導(dǎo)致其對弓形蟲的抵抗力較低。IL-4和IL-10是Th2型細胞因子，在免疫調(diào)節(jié)中具有抑制炎癥反應(yīng)等作用。小鼠感染弓形蟲后，IL-4和IL-10含量也會發(fā)生變化，但變化趨勢與雞有所不同。小鼠感染后，IL-4含量先升高后降低，IL-10含量在感染早期升高，隨后逐漸降低。而雞感染后，IL-4和IL-10含量的變化相對平緩。這表明小鼠和雞在免疫調(diào)節(jié)過程中，對Th2型細胞因子的調(diào)控機制存在差異。小鼠和雞感染弓形蟲后的免疫應(yīng)答差異可能與它們的免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能差異有關(guān)。小鼠和雞屬于不同的物種，它們的免疫器官、免疫細胞的組成和功能存在差異。雞的法氏囊是其特有的免疫器官，在B淋巴細胞的發(fā)育和分化中起著重要作用。而小鼠沒有法氏囊，其B淋巴細胞的發(fā)育和分化途徑與雞不同。這種免疫器官的差異可能導(dǎo)致小鼠和雞在體液免疫應(yīng)答方面存在差異。二者的免疫細胞表面受體、信號傳導(dǎo)通路等也可能存在差異，影響免疫細胞對弓形蟲感染的識別和應(yīng)答。環(huán)境因素、遺傳因素等也可能對小鼠和雞的免疫應(yīng)答產(chǎn)生影響。不同的飼養(yǎng)環(huán)境、飲食結(jié)構(gòu)等可能影響動物的免疫功能。動物的遺傳背景不同，其對弓形蟲感染的易感性和免疫應(yīng)答能力也可能不同。4.3細胞因子在免疫病理變化中的作用細胞因子在弓形蟲感染小鼠和雞的免疫病理變化中發(fā)揮著關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。IFN-γ作為一種重要的Th1型細胞因子，在抵抗弓形蟲感染中扮演著核心角色。當(dāng)小鼠和雞感染弓形蟲后，機體免疫系統(tǒng)被激活，免疫細胞開始分泌IFN-γ。IFN-γ能夠激活巨噬細胞，增強其吞噬和殺傷弓形蟲的能力。它可以促使巨噬細胞產(chǎn)生一氧化氮（NO）等殺菌物質(zhì)，有效抑制弓形蟲在細胞內(nèi)的增殖。IFN-γ還能誘導(dǎo)免疫細胞表達多種趨化因子，吸引更多的免疫細胞聚集到感染部位，增強局部免疫反應(yīng)。在小鼠感染貓源弓形蟲C株的實驗中，血清和脾臟組織勻漿中IFN-γ含量在感染后迅速升高，這表明機體啟動了以IFN-γ為主導(dǎo)的免疫防御機制，試圖控制弓形蟲的感染。TNF-α也是Th1型細胞因子，與IFN-γ協(xié)同發(fā)揮作用。TNF-α可以直接殺傷感染弓形蟲的細胞，同時還能促進炎癥反應(yīng)。它能夠誘導(dǎo)感染細胞表達黏附分子，使免疫細胞更容易與感染細胞結(jié)合，增強免疫細胞對感染細胞的殺傷作用。TNF-α還能刺激其他細胞因子的產(chǎn)