喹諾酮類藥物的殘留分析——樣品處理方法Residueanalysisofquinolones--samplehandlingmethod藥物殘留檢測(cè)技術(shù)動(dòng)物藥學(xué)院學(xué)院:賈紀(jì)萍主講教師：目錄CONTENTS提取方法凈化方法0102提取方法01喹諾酮類藥物的結(jié)構(gòu)決定了其可溶于極性有機(jī)溶劑、親水性的有機(jī)酸或有機(jī)堿或酸/堿水溶液中，可以采用多種方法從生物樣品中提取。溶液對(duì)光不穩(wěn)定，應(yīng)避光保存。提取方法01喹諾酮類藥物結(jié)構(gòu)中有一個(gè)羧基，根據(jù)在7位是否有呈堿性的哌嗪環(huán)又可以把它們分為哌嗪喹諾酮（PQ）和酸性喹諾酮（AQ）。PQ為兩性化合物，在不同pH值的水溶液中，存在陽(yáng)離子、兩性離子和陰離子3種形式，而AQ為酸性化合物，只存在中性和陰離子兩種形式。提取方法01（一）用與水不相混溶的有機(jī)溶劑提取

結(jié)合喹諾酮類藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，其提取方法分為四類。用于提取喹諾酮的與水相混溶的有機(jī)溶劑包括丙酮，乙腈，甲醇,乙腈-四氫呋喃混合液。丙酮主要用于提取酸性喹諾酮。而乙腈除了提取酸性喹諾酮，還可以用于提取沙拉沙星，達(dá)氟沙星，恩諾沙星，環(huán)丙沙星等。喹諾酮類藥物的中性分子形式可用水不相混溶的有機(jī)溶劑如乙酸乙酯，氯仿或二氯甲烷來(lái)提取。最常用的有機(jī)溶劑是乙酸乙酯，有少數(shù)也用氯仿和二氯甲烷。（二）用與水相混溶的有機(jī)溶劑提取提取方法01（三）酸性溶液提取堿性或中性溶液提取喹諾酮多數(shù)用含乙腈和氫氧化鈉（氨水）的混合液提取，少數(shù)也用含丙酮或甲醇的堿性液體提取，部分用磷酸緩沖液或氫氧化鈉水溶液提取。提取喹諾酮最常用的酸性溶劑是由水相和有機(jī)相組成的pH值為3.6~4.0的混合液。有機(jī)相主要為乙腈或甲醇，水相則主要含有鹽酸、三氯乙酸、磷酸、高氯酸-磷酸混合物或McIlvaine緩沖液。乙醇或乙腈常用乙酸酸化，而甲醇可用乙酸、草酸或鹽酸酸化。（四）堿性或中性溶液提取結(jié)合喹諾酮類藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，其提取方法分為四類。提取方法01由于動(dòng)物性食品中常含有大量的蛋白質(zhì)和脂肪，因此，在提取樣品時(shí)應(yīng)考慮到同時(shí)除蛋白、脫脂，一般提取時(shí)用甲醇、乙腈、二氯甲烷、三氯乙酸作溶劑除蛋白，提取液用正己烷萃取脫脂。凈化方法02為降低內(nèi)源性雜質(zhì)對(duì)測(cè)定的干擾，初提取液還需要進(jìn)行凈化處理，包括：液-液萃取、固相萃取、基質(zhì)固相分散、在線透析和痕量富集等方法。為了達(dá)到更好的凈化效果，有時(shí)可將幾種方法結(jié)合使用。02凈化方法基于分析物在不同溶劑間的分配系數(shù)不同的原理，亦可通過(guò)控制pH調(diào)節(jié)藥物在兩相中的分配。乙酸乙酯、正己烷等均為常見(jiàn)的有機(jī)萃取溶劑。（1）液-液萃?。↙LE）02凈化方法

固相萃?。⊿PE）是氟喹諾酮類多殘留分析中最常用的凈化方法，幾乎占到了喹諾酮類藥物殘留分析方法的70%。根據(jù)喹諾酮類藥物的化學(xué)性質(zhì)，常用的SPE柱是硅膠鍵合C18或C8聚合物的反相SPE柱以及硅膠鍵合苯磺酸基或丙酸基等基團(tuán)的陽(yáng)離子交換SPE柱。喹諾酮類藥物從SPE小柱的洗脫常用100%的甲醇或甲醇（含量大于75%）-水混合液，少數(shù)用堿性或酸性的乙腈溶液洗脫。（2）固相萃?。⊿PE）Residueanalysisofquinolones