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15ThecodeofpracticeondetectinginsulinsensitivityinperinatalI1利用葡萄糖鉗夾技術(shù)檢測圍產(chǎn)期母羊胰島素敏感性的操作規(guī)程本文件規(guī)定了檢測圍產(chǎn)期母羊胰島素敏感性方法胰島素敏感性insulinsensitivity24.2.110%糖鹽溶液:稱取12.5g葡萄糖,溶解在125mL生理鹽水中。4.2.2葡萄糖滴注液:125mL10%糖鹽溶液與75mL50%葡萄糖溶液混勻,用0.22μm的一L6N鹽酸制備為凍存液。稱取0.23gBSA、量取2.88mL凍存液溶解于237.12mL生理鹽水中,混勻5.1恒流泵(型號:HL-2,輸出流量:2×(1mL/h~600mL/h))。5.2注射泵(型號:WO109-1B,流量范圍:5.297μL/min~52.97mL/min(60mL注射器))。5.3快速測血糖儀(室溫~30℃)。6測定步驟滴注前一周對母羊進(jìn)行3d適應(yīng)性訓(xùn)練,在代謝籠中飼養(yǎng),自由飲水,每隔兩小時飼喂一次,為避免采食量變化對機(jī)體血糖水平的影響,需要對動物進(jìn)行定量限飼,飼喂量為前一日飼喂量的80%。糖輸注泵,輸注滴注液。同時,在動物的另一側(cè)200mL胰島素滴注液使用注射泵調(diào)節(jié),保證胰島素滴注液100mL葡萄糖滴注液使用恒流泵調(diào)節(jié),灌注速率隨機(jī)體血糖水平定,此時葡萄糖滴注液的滴注速率為8mL/h,此滴注過程大約需要10h~12h。用快速測血糖儀測定血糖濃度,確定基礎(chǔ)血糖在1.4mmol/L~4.4mmol/L范圍內(nèi)。灌注期:葡萄糖,胰島素灌注后每隔10min測定一次血糖,并根據(jù)血糖濃度調(diào)節(jié)目標(biāo)血糖水平,使其穩(wěn)定在基礎(chǔ)血糖1.4mmol/L~4.4mmol/L范圍內(nèi)。待血糖穩(wěn)定后,每隔1h采一次血樣測定血糖完成期:鉗夾結(jié)束時,首先停止泵入胰島素,預(yù)防低血糖發(fā)生,然后逐漸減少葡萄采集的血樣中加入肝素鈉抗凝,低速臺式離心機(jī)3000rpm,離心15min,取血漿以分析胰島素和3血糖濃度。6.6
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