果蔬中致病性大腸桿菌的測(cè)定主講教師：吳晨奇

蘇州農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院《技能大賽培訓(xùn)》食品質(zhì)量與安全專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)TeachingResourceLibraryofFoodQualityandSafety目錄Contents氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定1實(shí)驗(yàn)步驟43目的要求1實(shí)驗(yàn)原理2儀器與試劑34一、目的要求1.掌握微生物檢驗(yàn)的一般方法。2.學(xué)會(huì)果蔬中致病性大腸桿菌的測(cè)定方法。果蔬中致病性大腸桿菌的測(cè)定34二、實(shí)驗(yàn)原理果蔬中致病性大腸桿菌的測(cè)定一般采用生物試驗(yàn)的方法進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，經(jīng)過增菌、分離等過程，然后采用合適的方法“試驗(yàn)”，以10m(g)樣品中大腸南群最可能數(shù)(MPN)表示。果蔬中致病性大腸桿菌的測(cè)定34三、儀器與試劑1.儀器采樣箱;滅菌攪拌棒;滅菌具塞廣口瓶;滅菌塑料袋;酒精燈:冰箱:恒溫培養(yǎng)箱:恒溫水浴鍋;顯微鏡;離心機(jī);酶標(biāo)儀;均質(zhì)器(或滅菌乳缽);架盤藥物天平;細(xì)菌濃度比濁管:滅菌廣口瓶;滅菌錐形瓶;滅菌吸管;滅菌培養(yǎng)皿;滅菌試管;注射器;滅菌刀、剪、勺子、鑷子等;小鼠;硝酸纖維素濾膜(150mmX50mm,0.45pm)，滅菌備用。果蔬中致病性大腸桿菌的測(cè)定34三、儀器與試劑2.試劑①乳糖膽鹽發(fā)酵管。②營(yíng)養(yǎng)肉湯。③腸道菌增菌肉湯。④麥康凱瓊脂。⑤伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)。⑥三糖鐵瓊脂(TSI)。⑦克氏雙糖鐵瓊脂(KI)。⑧糖發(fā)酵管。⑨賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基。⑩尿素瓊脂。果蔬中致病性大腸桿菌的測(cè)定34四、實(shí)訓(xùn)(實(shí)驗(yàn))步驟1.增菌稱取檢樣25g,加入裝有225mLGN增菌液的500mL廣口瓶?jī)?nèi)(固體食品）應(yīng)用均質(zhì)器以8000~0000r/min打碎1lmin,或用乳缽加滅菌砂磨碎，粉狀食品應(yīng)用滅菌金屬匙或玻璃棒研磨使其乳化)，于36C士1C培養(yǎng)6~8h。2.分離取增菌液1環(huán)，劃線接種于HE瓊脂平板或SS瓊脂平板一個(gè)，麥康凱瓊脂平板或伊紅美藍(lán)瓊脂平板一個(gè)，于36C士1C培養(yǎng)18~24h。3.生化試驗(yàn)挑取平板上的可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂和半固體各一管。一般應(yīng)多挑幾個(gè)菌落以防遺漏。4.血清學(xué)試驗(yàn)5.結(jié)果報(bào)告果蔬中致