微生物農(nóng)藥毒理學(xué)試驗(yàn)準(zhǔn)則Microbialpesticidetoxicologicaltestguidelines—2012-09-01實(shí)施2012-09-01實(shí)施INY/T2186.6—2012——第1部分：急性經(jīng)口毒性/致病性試驗(yàn)；——第2部分：急性經(jīng)呼吸道毒性/致病性試驗(yàn)；——第3部分：急性注射毒性/致病性試驗(yàn)；——第4部分：細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)；——第5部分：亞慢性毒性/致病性試驗(yàn)；——第6部分：繁殖/生育影響試驗(yàn)。本部分為《微生物農(nóng)藥毒理學(xué)試驗(yàn)準(zhǔn)則》的第6部本部分按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本部分由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部種植業(yè)管理司提出并歸口。1微生物農(nóng)藥毒理學(xué)試驗(yàn)準(zhǔn)則第6部分：繁殖/生育影響試驗(yàn)本部分規(guī)定了繁殖/生育影響試驗(yàn)的基本原則、方法和要求。本部分適用于為微生物農(nóng)藥登記而進(jìn)行的繁殖/生育影響試驗(yàn)。2試驗(yàn)?zāi)康牧私馕⑸镛r(nóng)藥對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生育和胚胎及胎仔發(fā)育的影響，同時(shí)也評(píng)價(jià)微生物農(nóng)藥的垂直感染作用。3試驗(yàn)概述在親代動(dòng)物交配前和雌性動(dòng)物受孕后的妊娠期，給予微生物農(nóng)藥，觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的反應(yīng)，定量檢測(cè)動(dòng)物體內(nèi)的受試微生物，分娩后檢查子代情況，評(píng)價(jià)對(duì)動(dòng)物生殖機(jī)能和胚胎發(fā)育等的影響。4受試物受試物一般為微生物農(nóng)藥原藥。通常以下幾種微生物農(nóng)藥需要進(jìn)行本試驗(yàn)：a)在亞慢性毒性/致病性試驗(yàn)中出現(xiàn)明顯感染性，但沒(méi)有毒性或致病性的微生物農(nóng)藥；b)能在哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中生存或復(fù)制的病毒；c)與已知哺乳動(dòng)物體內(nèi)寄生的微生物雖然分類(lèi)不完全相同，但有一定關(guān)聯(lián)的微生物農(nóng)藥；d)產(chǎn)品未充分純化，可能含有哺乳動(dòng)物寄生性污染物的微生物農(nóng)藥。5試驗(yàn)步驟5.1動(dòng)物選擇5.1.1種屬和品系首選大鼠或小鼠，應(yīng)使用實(shí)驗(yàn)室常用的品系。選用其他種屬動(dòng)物應(yīng)說(shuō)明理由。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)不攜帶特定微生物或寄生蟲(chóng)，不能使用低生育力的品種。第一次給藥前，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為6周齡～8周齡。為全面了解受試物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生育力的影響，需對(duì)雌性和雄性動(dòng)物同時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)。每個(gè)試驗(yàn)組和對(duì)照組需要至少20只雄性動(dòng)物和足夠的雌性動(dòng)物，以保證每組能得到至少20只孕5.2.1需要設(shè)一個(gè)平行的未經(jīng)處理的對(duì)照組。5.2.2一般不需要設(shè)單獨(dú)的溶劑或介質(zhì)對(duì)照組，除非溶劑或介質(zhì)的毒性未知。5.3給藥方案2試驗(yàn)組動(dòng)物給藥劑量至少為1.0×10?單位/只。如果劑量達(dá)不到1.0×10?單位/只，應(yīng)說(shuō)明理由。劑量的定量宜和試驗(yàn)同步進(jìn)行。一般采用經(jīng)口給藥。如果以前試驗(yàn)中僅在其他給藥途徑觀察到受試物的持久性或感染性，則應(yīng)采用相應(yīng)的給藥途徑。給藥頻率應(yīng)能保證交配前和交配期的親代，以及孕期母體體內(nèi)的受試物維持在顯著水平。5.4觀察期觀察持續(xù)時(shí)間應(yīng)該從親代給予受試物開(kāi)始到分娩以及子代處死整個(gè)期間。5.5動(dòng)物觀察5.5.1每天對(duì)所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物至少進(jìn)行一次仔細(xì)的臨床觀察。每天應(yīng)進(jìn)行必要的額外觀察，并采取適減少試驗(yàn)中動(dòng)物信息的丟失。5.5.2籠旁觀察應(yīng)包括，但不限于以下方面的變化：a)皮膚和被毛；b)眼睛和黏膜；c)呼吸系統(tǒng)；d)循環(huán)系統(tǒng)；e)自主神經(jīng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)；f)身體活動(dòng)性；g)行為方式。親代雌雄動(dòng)物按1:1比例同籠交配。將一只雌性動(dòng)物與一只隨機(jī)選擇的雄性動(dòng)物同籠飼養(yǎng)，直到雌性動(dòng)物受孕或3周后。如同籠3周后仍未受孕則停止交配，作為不孕處理。每天早上檢查雌性動(dòng)物陰道內(nèi)是否有精子或陰栓，以發(fā)現(xiàn)精子或陰栓的當(dāng)日作為受孕的第0d。交配期間應(yīng)避免雌性動(dòng)物與其他雄性動(dòng)物發(fā)生交配。臨近分娩的雌性動(dòng)物應(yīng)在分娩籠或產(chǎn)籠中單獨(dú)飼養(yǎng)，并給予筑窩材料。籠子和材料應(yīng)無(wú)受試物的污染。妊娠雌性動(dòng)物在分籠前停止給藥。5.8妊娠雌性動(dòng)物的觀察5.8.1除本部分5.5規(guī)定的觀察內(nèi)容外，還要記錄攝食量和延遲分娩情況。從受孕的第0d開(kāi)始計(jì)算妊娠期。5.8.3出生時(shí)或出生后立即稱(chēng)量幼鼠體重并計(jì)算每窩的重量。5.9親代和子代體內(nèi)受試物的定量檢測(cè)5.9.1用敏感的方法定量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)的受試物情況，以評(píng)價(jià)微生物農(nóng)藥的感染性和持久性。5.9.3出生后的第1d,對(duì)每窩幼鼠體內(nèi)的受試物進(jìn)行定量檢測(cè)。31)生育