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文檔簡(jiǎn)介

醫(yī)學(xué)微生物學(xué)

總結(jié)得跟教材一樣的哦真的省了不少力氣

微生物:存在于自然界的一大群體形微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、肉眼干脆看不見(jiàn),必需借助光學(xué)

顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍。甚至數(shù)萬(wàn)倍才能視察到的微小生物。

1.微生物的分類(lèi):

種類(lèi)細(xì)胞結(jié)構(gòu)核酸特點(diǎn)代表

非細(xì)胞型微物無(wú)典型細(xì)胞結(jié)DNA或RNA,無(wú)產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng),只病毒

構(gòu)構(gòu)兩者不同時(shí)能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)增值

存在

原核細(xì)胞型微無(wú)核膜、核仁,DNA和RNA古生菌、細(xì)菌(細(xì)甚

生物僅有核糖體支原體、衣原體、立

次體、螺旋體和放線i

真核細(xì)胞型微細(xì)胞核分化程DNA和RNA真菌

生物度很高,有核

膜核仁,細(xì)胞

器完整

3、病原微生物:少數(shù)具有致病性,能引起人類(lèi)、植物病害的微生物。

機(jī)會(huì)致病性微生物;在正常狀況下不致病,只有在特定狀況下導(dǎo)致疾病的微生物。

4,郭霍法則:①特別的病原菌應(yīng)在同一種疾病中查見(jiàn),在健康人中不存在;②該特別病

原菌能被分別培育得純種;③該純培育物接種至易感動(dòng)物,能產(chǎn)生同樣病癥;④自人工

感染的試驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)能重新分別得到該病原菌純培育。

郭霍法則的特別狀況

5、免疫學(xué):㈠主動(dòng)免疫;㈡被動(dòng)免疫。

第一篇細(xì)菌學(xué)

第一章細(xì)菌的形態(tài)及結(jié)構(gòu)

第一節(jié)細(xì)菌的大小及形態(tài)

1、視察細(xì)菌常采納光學(xué)顯微鏡,一般以微米為單位。

2、按細(xì)菌外形可分為:

①球菌(雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌、四聯(lián)球菌、八福球菌)

②桿菌(鏈桿菌、棒狀桿菌、球桿菌、分枝桿菌、雙歧桿菌)

③螺形菌(弧菌、螺菌、螺桿菌)

其次節(jié)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)

1、基本結(jié)構(gòu):細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)

特別結(jié)構(gòu):莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞

2、革蘭陽(yáng)性菌(G+):顯紫色;革蘭陰性菌(G-):顯紅色。

3、

細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)革蘭陽(yáng)性菌G+革蘭陰性菌G-

由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈

肽聚糖組成五肽交聯(lián)橋構(gòu)成堅(jiān)韌三維構(gòu)成疏松二維平面網(wǎng)絡(luò)

立體結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)

肽聚糖厚度20?80nm10?15rl口

肽聚糖層數(shù)可達(dá)50層僅1?2層

肽聚糖含量占胞壁干重50-80%僅占胞壁干重5?20%

磷壁酸有無(wú)

外膜無(wú)有

4、G-菌的外膜{脂蛋白、脂多糖(LPS)-【脂質(zhì)A,核心多糖,特異多糖】、脂質(zhì)雙

層、}

脂多糖(LPS):即G-菌的內(nèi)毒素。LPS是G-菌的重要致病物質(zhì),使白細(xì)胞增多,直至休

克死亡;另一方面,LPS也可增加機(jī)體非特異性反抗力,并有抗腫瘤等有益作用。

①脂質(zhì)A:內(nèi)毒素的毒性和生物學(xué)活性的主要成分,無(wú)種屬特異性,不同細(xì)菌的脂質(zhì)A

骨架基本一樣,故不同細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素的毒性作用均相像。

②核心多糖:有屬特異性,位于脂質(zhì)A的外層。

③特意多糖:即G-菌的菌體抗原(0抗原),是脂多糖的最外層。

5、細(xì)胞壁的功能:維持菌體固有的形態(tài),并愛(ài)護(hù)細(xì)菌反抗低滲環(huán)境。

G-菌的外膜是一種有效的屏障結(jié)構(gòu),使細(xì)菌不易受到機(jī)體的體液殺菌物質(zhì)、腸道的膽鹽

及消化酶等的作用。

6、細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型(細(xì)菌L型):細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受到理化或生物因素的干

脆破壞或合成被抑制,這種細(xì)胞壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活者稱(chēng)為細(xì)菌細(xì)胞壁

缺陷型。

原生質(zhì)體:G+菌細(xì)胞壁缺失后,原生質(zhì)層僅被一層細(xì)胞膜包住

原生質(zhì)球:G-菌肽聚糖層受損后尚有外膜愛(ài)護(hù)

■細(xì)菌L型的誘發(fā)因素,如:溶菌酶,青霉素,溶葡萄球菌素,膽汁,抗體,補(bǔ)體等。

溶菌酶:能裂解肽聚糖中N-乙酰葡萄胺和N-乙酰胞壁酸之間的P-1,4糖昔鍵,破壞

聚精骨架,引起細(xì)菌裂解。

青霉素:能及細(xì)菌競(jìng)爭(zhēng)合成肽聚糖過(guò)程中所需的轉(zhuǎn)肽酶,抑制四肽側(cè)鏈上D-丙氨酸及

五肽橋間的聯(lián)結(jié),使細(xì)菌不能合成完整的肽聚糖,在一般滲透壓環(huán)境中科導(dǎo)致細(xì)菌死亡。

■紐菌L型需在高滲低瓊脂含血清的培育基中生長(zhǎng)。多形性、生長(zhǎng)繁殖緩慢、荷包蛋樣

菌落、有些可回復(fù)

G+菌細(xì)胞壁缺損形成的原生體,在一般培育基中很簡(jiǎn)潔脹裂死亡,必需保存在高滲環(huán)境

中。

7、細(xì)胞膜:

細(xì)胞膜的主要功能:①物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn);②呼吸和分泌;③生物合成;④參及細(xì)菌分裂:細(xì)菌

部分細(xì)胞膜內(nèi)陷、折疊、卷曲形成的囊狀物,稱(chēng)為中介體。

8、細(xì)胞質(zhì):

①核糖體:鏈霉素(及細(xì)菌核糖體的30s亞基結(jié)合)和紅霉素(及細(xì)菌核糖體的50s亞

基結(jié)合)均能干擾其蛋白質(zhì)合成,從而殺死細(xì)菌,但對(duì)人體核糖體無(wú)害。

②質(zhì)粒:染色體外的遺傳物質(zhì),為閉合環(huán)狀的雙鏈DNA

③胞制顆粒:貯藏有養(yǎng)分物質(zhì)。異染顆粒(也成迂回體,嗜堿性強(qiáng),用甲基藍(lán)染色時(shí)著

色較深呈紫色)常見(jiàn)于白喉棒狀桿菌。

9、核質(zhì):細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。

10、細(xì)菌的特別結(jié)構(gòu)

⑴莢膜:包繞在細(xì)胞壁外的一層粘液性物質(zhì),為多糖或蛋白質(zhì)的多聚體,用理化方法去

除后并不影響菌細(xì)胞的生命活動(dòng)。

①厚度工0.2微米邊界明顯的稱(chēng)為莢膜或大莢膜;厚度<0、2微米的為微莢膜。

②若粘液物質(zhì)疏松地附著于菌細(xì)胞表而,動(dòng)界不明顯FI.易被洗脫者成為粘液層。

③大多數(shù)細(xì)菌的莢膜為多糖,多糖分子組成和構(gòu)型的多樣化使其結(jié)構(gòu)極為困難,成為血

清學(xué)分型的基礎(chǔ)。

④莢膜對(duì)一般堿性染料親和力低,不易著色。

■莢膜的功能:①抗吞噬作用;②粘附作用;③抗有害物質(zhì)的損傷作用。

⑵鞭毛:包括:?jiǎn)蚊㈦p毛菌、叢毛菌、周毛菌

鞭毛由基礎(chǔ)小體、鉤狀體、絲狀體三部分組成。

■鞭毛的功能:使細(xì)菌能在液體中自由游動(dòng),速度快速。細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)有化學(xué)趨向性,常

向養(yǎng)分物質(zhì)處前進(jìn),而逃離有害物質(zhì)。有些細(xì)菌的鞭毛及致病性有關(guān)。

⑶菌毛:必需用電子顯微鏡視察

①一般菌毛:及細(xì)菌粘附有關(guān)。

②性菌毛:僅見(jiàn)于少數(shù)G-菌。具有傳遞遺傳物質(zhì)作用。

⑷芽胞:細(xì)菌的休眠形式,養(yǎng)分缺乏尤其是C、N、P元素不足時(shí),細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖減速,

啟動(dòng)芽胞形成的基因。

■紐菌的芽胞由內(nèi)向外依次是:核心、內(nèi)膜、芽胞壁、皮質(zhì)、外膜、芽胞殼和押寶外衣。

■芽胞的形成及發(fā)芽:芽胞具有完整的核質(zhì)、酶系統(tǒng)和合成菌體組分的結(jié)構(gòu),能保存細(xì)

菌的全部生命必需物質(zhì),芽胞形成后細(xì)菌即失去繁殖實(shí)力。一個(gè)細(xì)菌只形成一個(gè)芽胞,

一個(gè)芽胞也只能生成一個(gè)菌體。

■芽胞的功能:細(xì)菌的芽胞對(duì)熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒劑等理化因素均有強(qiáng)大的反

抗力。此外,當(dāng)芽胞成為繁殖體后,能快速大量繁殖而致病。

其次章細(xì)菌的生理

第一節(jié)細(xì)菌的理化性質(zhì)

1、細(xì)菌的化學(xué)組成:水、無(wú)機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、脂肪、核酸

2、細(xì)菌的物理性狀:①光學(xué)性質(zhì);②表面積;細(xì)菌的相對(duì)表面積大,有利于同外界進(jìn)行

物質(zhì)交換;③帶電現(xiàn)象;④半透性:細(xì)菌的細(xì)胞膜和細(xì)胞壁都有半透性,有利于汲取養(yǎng)

分和解除代謝產(chǎn)物;⑤滲透壓:細(xì)菌所處一般環(huán)境相對(duì)低滲。

其次節(jié)細(xì)菌的養(yǎng)分和生長(zhǎng)繁殖

一、細(xì)菌的養(yǎng)分類(lèi)型

1、自養(yǎng)菌:化能自養(yǎng)菌、光能自養(yǎng)菌

2、異養(yǎng)菌:腐生菌、寄生菌

全部的病原菌都是異養(yǎng)菌,大部分屬寄生菌。

二、細(xì)菌的養(yǎng)分物質(zhì)

1、水

2、碳源

3、氮源:作為菌體成分的原料

4、無(wú)機(jī)鹽:常用元素(P、5、K、Na、Mg、Ga^Fe)微量元素(Zn、Cu、Mn、鉆)

各類(lèi)無(wú)機(jī)鹽的公用:①構(gòu)成有機(jī)化合物,成為菌體的成分;②作為酶的組成成分,維

持酶的活性;③參及能量的儲(chǔ)存和轉(zhuǎn)運(yùn);④調(diào)整菌體內(nèi)外滲透壓;⑤某些元素及細(xì)菌的

生長(zhǎng)繁殖和致病作用親密相關(guān)。

5、生長(zhǎng)因子:生長(zhǎng)£巍指:某些細(xì)菌細(xì)菌生長(zhǎng)所必需的但自身又不能合成,必需由外

界供應(yīng)的物質(zhì)。

三、細(xì)菌攝取養(yǎng)分物質(zhì)的機(jī)制

1、被動(dòng)擴(kuò)散:

2、主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng):①依靠于周漿間隙結(jié)合蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng);

②化學(xué)滲透趨勢(shì)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng);

③基團(tuán)轉(zhuǎn)移。

四、影響細(xì)菌生長(zhǎng)的環(huán)境因素(簡(jiǎn)答)

1、養(yǎng)分物質(zhì):水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽及生長(zhǎng)因子為細(xì)菌的代謝及生長(zhǎng)繁殖供應(yīng)必需的

原料和足夠的能量

2、酸堿度(pH):多數(shù)病原菌最適pH為7.2—7.6,而結(jié)核桿菌最適pH值為6.5—6.8,

霍亂弧菌最適pH值為8.4-9.2o

3、溫度:病原菌最適溫度為37度。

4、氣體:

02:依據(jù)細(xì)菌代謝時(shí)對(duì)氧氣的須要及否分四類(lèi):

①專(zhuān)性需氧菌:具有完善的呼吸酶系統(tǒng),須要分子氧作為受氫體以完成需氧呼吸,僅能

在有氧環(huán)境下生長(zhǎng)。

②微需氧菌:在低氧壓(5%-6%)生長(zhǎng)最好。

③兼性厭氧菌:兼有有氧呼吸和無(wú)氧發(fā)酵兩種功能,在有氧、無(wú)氧環(huán)境中均能生長(zhǎng),但

以有氧時(shí)生長(zhǎng)較好。大多數(shù)病原菌屬于此。

④專(zhuān)性厭氧菌:缺乏完善的呼吸酶系統(tǒng),只能進(jìn)行無(wú)氧發(fā)酵,必需在無(wú)氧環(huán)境中生長(zhǎng)。

C02:對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)也很重要,大部分細(xì)菌在代謝中產(chǎn)生的C02可滿(mǎn)意須要,個(gè)別細(xì)菌初次

分別時(shí)需人工供應(yīng)5-10%C02o

5、滲透壓:

五、細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖

1、細(xì)菌個(gè)體的生長(zhǎng)繁殖:

繁殖方式一一細(xì)菌以簡(jiǎn)潔的二分裂方式進(jìn)行無(wú)性繁殖。

繁殖速度一一繁殖一代所需時(shí)間(代時(shí))約20-30min。但少數(shù)細(xì)菌代時(shí)較長(zhǎng),如結(jié)核分

枝桿菌代時(shí)為18小口寸。

2、細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖:遲緩期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期、衰退期

遲緩期:細(xì)菌被接種培育基的最初一段時(shí)間,主要是適應(yīng)新環(huán)境,同時(shí)為分裂繁殖作物

質(zhì)打算,此時(shí)細(xì)菌體積比較大,含有豐富的酶和中間代謝產(chǎn)物。

對(duì)數(shù)期:細(xì)菌分裂繁殖最快的時(shí)期,菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng),探討細(xì)菌的最佳時(shí)期。

穩(wěn)定期:由于養(yǎng)分物質(zhì)的消耗,代謝產(chǎn)物的積累,繁殖數(shù)及死亡數(shù)幾乎相等?;罹鷶?shù)保

持穩(wěn)定。一些細(xì)菌的芽胞、外毒素和抗生素等代謝產(chǎn)物大多在穩(wěn)定期產(chǎn)生。

衰退期:繁殖變慢,死菌數(shù)超過(guò)活菌數(shù)。細(xì)菌形態(tài)發(fā)生變更,生理活動(dòng)趨于停滯。

第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝和能量轉(zhuǎn)換

一、細(xì)菌的能量代謝

■紐菌能量代謝活動(dòng)中主要涉及ATP形式的化學(xué)能。細(xì)菌的有機(jī)物分解或無(wú)機(jī)物氧化過(guò)

程中釋放的能量通過(guò)底物的磷酸化或氧化磷酸化合成ATP。

■生物體能量代謝的基本生化反應(yīng)是生物氧化,其方式包括:加氧、脫氫和托電子反應(yīng),

細(xì)菌則以脫氫或氫的傳遞更為常見(jiàn)。

■發(fā)酵:以有機(jī)物為受氫體的生物氧化。呼吸:以無(wú)機(jī)物為受氫體的生物氧化。以分子

氧為受氫體的是有氧呼吸,以其他無(wú)機(jī)物為受氫體的是厭氧呼吸。

■病原菌合成細(xì)胞組分和獲得能量的基質(zhì)主要為糖類(lèi),通過(guò)糖的氧化或酵說(shuō)明放能量,

并以高能磷酸鍵的形式(ATP/ADP)儲(chǔ)存能量。

1、EMP途徑,又稱(chēng)糖酵解。大多數(shù)細(xì)菌共有的基本代謝途徑,有些專(zhuān)性厭氧菌產(chǎn)能的唯

一途徑。

2、磷酸戊糖途徑,又稱(chēng)一磷酸己糖途徑。為生物合成供應(yīng)前提和還原能。

3、需氧呼吸,需氧菌和兼性厭氧菌進(jìn)行需氧反應(yīng)。

4、厭氧呼吸,專(zhuān)性厭氧菌和兼性厭氧菌都能進(jìn)行厭氧呼吸。

二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物

㈠分解代謝產(chǎn)物和細(xì)菌的生化反應(yīng)

㈡合成代謝產(chǎn)物及其醫(yī)學(xué)上的意義

1、熱原質(zhì)(致熱源):是細(xì)菌合成的一種注入人體或動(dòng)物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。

產(chǎn)生熱致源的細(xì)菌大都為格蘭陰性菌,熱致源即其細(xì)胞壁的脂多糖。

2、毒素及侵襲性酶:①外毒素:多數(shù)G+菌和少數(shù)G-菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中釋放菌體外的

蛋白質(zhì);

②內(nèi)毒素:G-菌細(xì)胞壁的脂多糖;外毒素毒性強(qiáng)于內(nèi)毒素。

③侵襲性酶:某些細(xì)菌產(chǎn)生的,能損傷機(jī)體組織,促使菌體的侵襲

和擴(kuò)散,是細(xì)菌重要的致病物質(zhì)。

3、色素:①水溶性;②脂溶性。

4、抗生素:某些微生物代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一類(lèi)能抑制或殺死某些其他微生物或腫瘤細(xì)胞

的物質(zhì)。抗生素大多由放線菌和真菌產(chǎn)生。

5、細(xì)菌素:某些菌株產(chǎn)生的一類(lèi)具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。細(xì)菌素僅對(duì)及產(chǎn)生菌有親緣關(guān)

系的細(xì)菌有殺傷作用。

6、維生素:

第四節(jié)細(xì)菌的人工培育

一、培育基

1、基礎(chǔ)培育基

2、增菌培育基

3、選擇培育基

4、鑒別培育基

5、厭氧培育基

二、細(xì)菌在培育基中的生長(zhǎng)狀況

㈠液體培育基

㈡固體培育基

菌落:?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)菌分裂繁殖成肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌基團(tuán)。

1、光滑型菌落

2、粗糙型菌落

3、粘液型菌落

㈢半固體培育基

三、人工培育細(xì)菌的用途

1、醫(yī)學(xué):①感染性疾病的病原學(xué)診斷

②細(xì)菌學(xué)的探討

③生物制品的制備

2、工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)

3、基因工程

第三章消毒滅菌及病原微生物試驗(yàn)室生物平安

第一節(jié)消毒滅菌的常用術(shù)語(yǔ)

1、滅菌:殺滅生物體上全部微生物的方法。

2、消毒:殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物,并不肯定能殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生

物的方法。

3、防腐:防止或抑制皮膚表面細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。

4、無(wú)菌:無(wú)菌即不存在活菌,多是滅菌的結(jié)果。無(wú)菌操作:防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物

品的操作技術(shù)。

5、清潔:削減微生物數(shù)量的過(guò)程。

其次節(jié)消毒滅菌的方法

一、物理消毒滅菌法:熱力、輻射、濾過(guò)、干燥和低溫等。

㈠熱力滅菌法:分為干熱滅菌和濕熱滅菌

1、干熱滅菌法:一般細(xì)菌繁殖體在干燥狀態(tài)下,80-100C經(jīng)1小時(shí)可被殺死,芽胞則須

要更高溫度才能被殺死。

①焚燒:廢棄物、尸體

②灼燒:接種環(huán)、試管口

③干烤:(160~170℃,2h)利用干烤箱滅菌,一般加熱至171℃經(jīng)lh或160c2h或121℃

16ho適用于高溫下不變質(zhì)、不損害、不蒸發(fā)的器皿(如:玻璃器皿)。

④紅外線(0.7~1000um波長(zhǎng)的電磁波):醫(yī)療器械

2、濕熱滅菌法:最常用,在相同溫度下濕熱滅菌法比干熱滅菌法效果更好,因?yàn)椋篿濕

熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固變性;ii濕熱的穿透力比干熱大;適濕熱的蒸汽有潛熱效應(yīng)

存在。

①巴氏消毒法:用較低的溫度殺滅液體中的病原菌或特定微生物,以保持物品中所需的

不耐熱成分不被破壞的消毒方法(61.1-62.8℃30min或71.7℃15-30s,主要用于牛

乳消毒和酒類(lèi))。

②煮沸法(100°C,5min)食具、注射器等消毒

③流淌蒸汽消毒法(100℃15-30min)

④間歇蒸汽滅菌法(100℃5-30min,37℃24hX3天)

⑤高壓蒸汽滅菌法:

*壓力一103.4KPa(1.05Kg/cm2)

*溫度一121.3℃

*時(shí)間一15-20min

*效果一殺滅包括芽胞在內(nèi)全部微生物

*應(yīng)用一全部耐高溫、高壓、耐濕的物品

㈡輻射殺菌法:

①紫外線:波長(zhǎng)240—300nn)的紫外線具有殺菌作用,其中以265—266nm最強(qiáng)。紫外線

殺菌機(jī)理是干擾細(xì)菌DNA合成,導(dǎo)致細(xì)菌變異和死亡。手術(shù)室空氣消毒常采納紫外線消

②電離輻射:高速電子、X射線、y射線

③微波:波長(zhǎng)為1—1000mm的電磁波,不能穿透金屬表面。微波主要靠熱效應(yīng)發(fā)揮作用,

且必需在有肯定含水量條件下才能顯示出來(lái)。

㈢濾過(guò)殺菌法

㈣干燥殺菌法

㈤低溫殺菌法

二、化學(xué)消毒滅菌法

原理(填空):⑴破壞菌體蛋白;⑵干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝;⑶變更細(xì)胞膜的通透性。

第四節(jié)影響消毒滅菌效果的因素

㈠微生物的種類(lèi)

微生物對(duì)消毒滅菌的敏感性凹凸排序大致如下:真菌、細(xì)菌繁殖體、有包膜病毒、無(wú)包

膜病毒、分枝桿菌、細(xì)菌芽胞。

㈡微生物的物理狀態(tài)

㈢微生物的數(shù)量

㈣消毒劑的性質(zhì)、濃度及作用時(shí)間

㈤溫度:消毒劑的殺菌作用速度隨溫宿上升而加快。

閑酸堿度

(七)有機(jī)物

第五節(jié)病原微生物試驗(yàn)室生物平安

一、病原微生物的分類(lèi)

第一類(lèi):能夠引起人類(lèi)或動(dòng)物特別嚴(yán)峻疾病的微生物,以及我國(guó)尚未發(fā)覺(jué)或已經(jīng)宣布?xì)?/p>

滅的微生物。

其次類(lèi):能夠引起人類(lèi)或動(dòng)物嚴(yán)峻疾病,比較簡(jiǎn)潔干脆或間接在人及人、動(dòng)物及動(dòng)物、

動(dòng)物及人間傳播的微生物。

第三類(lèi):能夠引起人類(lèi)或動(dòng)物疾病,但一?般狀況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)峻危害,

傳播風(fēng)險(xiǎn)有限,試驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)峻疾病并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。

第四類(lèi):通常狀況下不會(huì)引起人類(lèi)或動(dòng)物疾病的微生物。

二、病原微生物試驗(yàn)室的分級(jí):依據(jù)生物平安防護(hù)水平(BSL)及試驗(yàn)室生物平安國(guó)家標(biāo)

準(zhǔn)

一級(jí).

一級(jí).

三級(jí):對(duì)人體、植物、動(dòng)物或環(huán)境具有高度危急性,主要通過(guò)氣溶膠使人類(lèi)傳染上嚴(yán)峻

的甚至是致命的疾病,或?qū)?dòng)物植物或環(huán)境具有高度危急的致病因子。通常有預(yù)防治療

措施。

四級(jí):對(duì)人體、植物、動(dòng)物或環(huán)境具有高度危急性,主要通過(guò)氣溶膠途徑傳播或傳播途

徑不明或未知的危急的致病因子。沒(méi)有預(yù)防治療措施。

第四章噬菌體

■噬菌體是感染細(xì)菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒;

■具有病毒的基本特性:個(gè)體微小,可以通過(guò)細(xì)菌濾器;

■無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),主要由衣殼(蛋白質(zhì))和核酸組成;

■只能在活的微生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,是一種專(zhuān)性胞內(nèi)寄生的微生物。

■噬菌體分布極廣。

第一節(jié)噬菌體的生物學(xué)性狀

1、形態(tài)及結(jié)構(gòu):

噬菌體很小,在光鏡下看不見(jiàn),需用電鏡視察。不同的噬菌體在電鏡下有三種形態(tài):蝌

蚪形、微球形和絲形。大多數(shù)噬菌體呈蝌蚪形,由頭部和尾部?jī)刹糠纸M成。

2、結(jié)構(gòu)及化學(xué)組成:

核心:核酸(DNA或RNA),多位DNA線狀雙鏈

頭部

蛋白衣殼:甯白質(zhì)呈20面體

噬菌體

尾部:蛋白質(zhì)與細(xì)菌(受體)接觸的部位

3、抗原性:噬菌體具有抗原性,能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體。

4、反抗力:噬菌體對(duì)理化因素及多數(shù)化學(xué)消毒劑的反抗力比一般細(xì)菌的繁殖體強(qiáng),75℃

30min滅活。噬菌體能耐受低溫柔冰凍,但對(duì)紫外線和X射線敏感。

其次節(jié)毒性噬菌體

1、噬菌體感染細(xì)菌有兩種結(jié)果:

①毒性噬菌體(virulentphage):能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,產(chǎn)生很多子代噬菌體,并

最終裂解細(xì)菌,建立溶菌周期。

②溫柔噬菌體(temperatephage):噬菌體基因及宿主染色體整合,成為前噬菌體,細(xì)

菌變成溶原性菌,不產(chǎn)生子代噬菌體,但噬菌體D\A能隨細(xì)菌DNA復(fù)制,并隨細(xì)菌的分

裂而傳代,建立溶原狀態(tài)。

2、毒性噬菌體

■毒性噬菌體在宿主菌內(nèi)以夏制方式進(jìn)行增殖,增殖過(guò)程包括:吸附、穿入、生物合成、

成熟和釋放。

液體培育基一一噬菌現(xiàn)象可使渾濁菌液變得澄清。

固體培育基一一若用適量的噬菌體和宿主菌液混合后接種培育,培育基表面可有透亮的

溶菌空斑出現(xiàn)。一個(gè)空斑系由一個(gè)噬■菌體夏制增殖并裂解細(xì)菌后形成,稱(chēng)為噬斑

(plaque),不同噬菌體噬斑的形態(tài)及大小不盡相同.

■若將噬菌體按肯定倍數(shù)稀釋?zhuān)ㄟ^(guò)噬斑計(jì)數(shù),可測(cè)定肯定體積內(nèi)的噬斑形成單位

(plaqueformingunits,pfu)數(shù)目,即噬菌體的數(shù)目。

第三節(jié)溫柔噬菌體

■前噬菌體(prophage)溫柔噬菌體的基因組能及宿主菌基因組整合,并隨細(xì)菌分裂傳

至子代細(xì)菌的基因組中,不引起細(xì)菌裂解。整合在細(xì)菌基因組中的噬菌體基因組稱(chēng)為前

噬菌體(prophage)。帶有前噬菌體基因組的細(xì)菌稱(chēng)為溶原性細(xì)菌。

■溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenicconversion):某些前噬菌體可導(dǎo)致細(xì)菌基因型和性狀發(fā)生變

更。例如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的機(jī)理。

第五章細(xì)菌的遺傳及變異

?遺傳(heredity):使微生物的性狀保持相對(duì)穩(wěn)定,子代及親代生物學(xué)的性狀基本相同,

旦代代相傳。

?變異(variation):在肯定條件下,子代及親代之間以及子代及子代之間的生物學(xué)性

狀出現(xiàn)的差異,有利于物種的進(jìn)化。

?基因型(genotype):細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。

?表型(phenotype):基因表現(xiàn)出的各種性狀。

?遺傳性變異:是細(xì)菌的基因結(jié)構(gòu)發(fā)生了變更,故又稱(chēng)基因型變異。常發(fā)生于個(gè)別的細(xì)

菌,不受環(huán)境因素的影響,變異發(fā)生后是不行逆的,產(chǎn)生的新性狀可穩(wěn)定地遺傳給后代。

?非遺傳性變異:細(xì)菌在肯定的環(huán)境條件影響下產(chǎn)生的變異,其基因結(jié)構(gòu)未變更,稱(chēng)為

表型變異。易受到環(huán)境因素的影響,凡在此環(huán)境因素作用下的全部細(xì)菌都出現(xiàn)變異,而

且當(dāng)環(huán)境中的影響因素去除后,變異的性狀又可復(fù)原,表型變異不能遺傳。

第一節(jié)細(xì)菌的遺傳物質(zhì)

?DNA的結(jié)構(gòu)及功能:

結(jié)構(gòu)一一兩條相互平行而方向相反的多核甘酸鏈

功能一一儲(chǔ)存、復(fù)制和傳遞遺傳信息

復(fù)制一一半保留復(fù)制

特點(diǎn)一一復(fù)制中易發(fā)生錯(cuò)誤一基因突變

蛋白合成——分子生物學(xué)中心法則(DNA-RNA-蛋白質(zhì))

?基因及基因的轉(zhuǎn)錄

結(jié)構(gòu)基因一一編碼結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)基因結(jié)構(gòu)

非結(jié)構(gòu)基因一一編碼功能蛋白質(zhì)基因轉(zhuǎn)錄

?遺傳信息的翻譯

其次節(jié)細(xì)菌的遺傳及變異

一、染色體(chromosome)

①一條環(huán)狀雙螺旋DNA長(zhǎng)鏈,按肯定構(gòu)型反復(fù)回旋形成松散的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu);

②缺乏組蛋白,無(wú)核膜包袱;

③約含有5000個(gè)基因;

二、質(zhì)粒一一是細(xì)菌染色體以外的遺傳物質(zhì),是閉合環(huán)狀的雙鏈DNA。

1、質(zhì)粒的特征:

①質(zhì)粒具有自我復(fù)制的實(shí)力。

②質(zhì)粒DNA所編碼的基因產(chǎn)物給予細(xì)菌某些性狀特征。

③質(zhì)??勺孕衼G失及消退。

④質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性。

⑤質(zhì)??煞譃橄嗳菪约安幌嗳菪?xún)煞N。

2、質(zhì)粒的分類(lèi)

(1)依據(jù)質(zhì)粒能否通過(guò)細(xì)菌的接合作用進(jìn)行傳遞

①接合性質(zhì)粒

②非接合性質(zhì)粒

(2)依據(jù)質(zhì)粒在細(xì)菌內(nèi)拷貝數(shù)多少

①?lài)?yán)緊型質(zhì)粒

②松弛型質(zhì)粒

(3)依據(jù)相容性

①相容性——幾種質(zhì)粒同時(shí)共存于同一菌體內(nèi)

②不相容性一一不能同時(shí)共存

*可借此對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行分組、分群。

(4)依據(jù)所編碼的生物學(xué)性狀

質(zhì)粒基因可編碼多種重要的生物學(xué)性狀:

致育質(zhì)粒(fertilityplasmid、F質(zhì)粒)編碼性菌三,介導(dǎo)細(xì)菌之間的接合傳遞;

■耐藥性質(zhì)粒(resistanceplasmid、R質(zhì)粒)編碼細(xì)菌對(duì)抗菌藥物或重金屬鹽類(lèi)的耐

藥性。分兩類(lèi),一是接合性耐藥質(zhì)粒(R質(zhì)粒),另一是非接合耐藥性質(zhì)粒(r質(zhì)粒);

■毒力質(zhì)粒(Vi質(zhì)粒)編碼及該菌致病性有關(guān)的毒力因子;

■細(xì)菌素養(yǎng)粒:編碼細(xì)菌產(chǎn)生細(xì)菌素;

■代謝質(zhì)粒:編碼產(chǎn)生相關(guān)的代謝酶。

三、轉(zhuǎn)位因子

?轉(zhuǎn)位因子(transposableelement):是一類(lèi)在細(xì)菌染色體、質(zhì)粒或噬菌體之間可自行

移動(dòng)的一段特異的具有轉(zhuǎn)位特性的核甘酸序列片段,又稱(chēng)移動(dòng)基因。

?轉(zhuǎn)座子有二類(lèi):

①插入序列(insertionsequence,IS):最小,不超過(guò)2kb,只攜帶及轉(zhuǎn)座功能有關(guān)的

基因。

②轉(zhuǎn)座子(transposon,Tn):長(zhǎng)度一般超過(guò)2kb,除攜帶及轉(zhuǎn)位有關(guān)的基因外還攜帶其

他基因(如耐藥性、毒素基因等)。

四、整合子

定位:細(xì)菌染色體、質(zhì)?;蜣D(zhuǎn)座子上。

基本結(jié)構(gòu):兩端為保守末端(attl,59-be),中間為可變區(qū)(orf1),含一個(gè)或多個(gè)基

因盒。

功能元件:重組位點(diǎn)(attl,59-be);整合酶基因(inti);啟動(dòng)子(Pc)。

功能:通過(guò)轉(zhuǎn)座子或接合性質(zhì)粒,使多種耐藥基因在細(xì)菌中進(jìn)行水平傳播。

第三節(jié)基因的轉(zhuǎn)移及重組

?基因轉(zhuǎn)移(gonetransfer):外源性的遺傳物質(zhì)由供體菌進(jìn)入某受體菌細(xì)胞內(nèi)的過(guò)程。

?基因重組(recombination):轉(zhuǎn)移的基因及受體菌DNA整合在一起,使受體菌獲得供

體菌某些特性。

?細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移和重組方式:轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、溶原性轉(zhuǎn)換、原生質(zhì)體融合。

1、轉(zhuǎn)化(transfonnation):受體菌干脆攝取供體菌游離的DNA片段獲得新的遺傳性狀

的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化。

2、接合(conjugation):是細(xì)菌通過(guò)性菌毛相互連接溝通,將遺傳物質(zhì)(主要是質(zhì)粒

DNA)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌。能通過(guò)結(jié)合方式轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒稱(chēng)為接合性質(zhì)粒,不能通過(guò)性

菌毛在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒為非接合性質(zhì)粒。

F質(zhì)粒的接合

■F+——即F質(zhì)粒,編碼性菌毛,稱(chēng)雄性菌

■Hfr——F質(zhì)粒整合到細(xì)菌染色體上,使細(xì)菌能高效地轉(zhuǎn)移染色體上的基因,故稱(chēng)高頻

重組菌

■F'——Hfr菌中的F質(zhì)粒可從染色體上脫離下來(lái),并帶染色體上幾個(gè)鄰近的基因,故

稱(chēng)F'

三者均有性菌毛,均可發(fā)生接合

R質(zhì)粒的接合

■細(xì)菌的耐藥性及耐藥性的基因突變及R質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移等有關(guān)。

■R質(zhì)粒有耐藥傳遞因子和耐藥確定因子兩部分組成。耐藥傳遞因子的功能及F質(zhì)粒相

像,可編碼性菌毛的產(chǎn)生和通過(guò)接合轉(zhuǎn)移;R確定子能編碼對(duì)抗菌藥物的耐藥性。

3、轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction):是以溫柔噬菌體為載體,將供體菌的一段DNA轉(zhuǎn)移到受體菌

內(nèi),使受體菌獲得新的性狀。

■依據(jù)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因片段的范圍,可將轉(zhuǎn)導(dǎo)分為兩類(lèi):普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA可是供菌染

色體上的任何部分)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA只限供菌染色體上的特定基因)。

4、溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenicconversion):溶原性細(xì)菌因染色體上整合有前噬菌體而獲

得新的遺傳性狀稱(chēng)為溶原性轉(zhuǎn)換。

5、原生質(zhì)體融合(protoplastfusion):G+菌形成原生質(zhì)體后,在聚乙二醇(PEG)作

用下,可使兩種不同的細(xì)菌細(xì)胞發(fā)生融合的過(guò)程。

■融合后形成雙倍體細(xì)胞,可短期生存,染色體重組,獲得多種不同表型的重組融合體。

人為試驗(yàn)基因轉(zhuǎn)移及重組。

第四節(jié)基因突變

一、基因突變規(guī)律:

1、自發(fā)突變及誘發(fā)突變

①突變可以自然發(fā)生為:自發(fā)突變,具自發(fā)性,隨機(jī)性。

?彷徨試驗(yàn)(fluctuationtest,波動(dòng)試驗(yàn)):隨機(jī)的、非定向的突變是在接觸噬菌體之

前就已發(fā)生,噬菌體對(duì)突變僅起篩選而不是誘導(dǎo)作用。

②人工誘導(dǎo)產(chǎn)生的突變?yōu)檎T發(fā)突變,可提高突變率。

2、突變率:是指細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)發(fā)生突變的頻率。

3、突變及選擇

?影印試驗(yàn)(replicaplating);耐藥突變株在接觸藥物之前出現(xiàn),藥物的蚱用是選擇

耐藥株,淘汰敏感株。

4、回復(fù)突變及抑制突變

?野生型(wildtype):未發(fā)生突變的菌株。

?突變型(mutanttype):相對(duì)于野生型,某一性狀發(fā)生變更的菌株。

?回復(fù)突變(reversemutation):有時(shí)突變株經(jīng)過(guò)又一次突變可復(fù)原為野生型的性狀。

第五節(jié)細(xì)菌遺傳變異在醫(yī)學(xué)上的實(shí)際意義

1、影響細(xì)菌學(xué)診斷

2、預(yù)防耐藥菌株的擴(kuò)散

3、制名疫苗

4、檢測(cè)致癌物

5、基因工程方面的應(yīng)用

第七章細(xì)菌的感染及免疫

第一節(jié)正常菌落及機(jī)會(huì)致病菌

1、正常菌群:當(dāng)人體免疫功能正常時(shí),對(duì)宿主無(wú)害的,某些還對(duì)人有利,是為正常微生

物群。

■正常菌群對(duì)宿主的生理學(xué)作用:(問(wèn)答)

⑴生物拮抗,其作用機(jī)制為:①受體競(jìng)爭(zhēng);②產(chǎn)生有害代謝產(chǎn)物;③養(yǎng)分競(jìng)爭(zhēng);④合成

細(xì)菌素。

⑵養(yǎng)分作用:參及宿主的物質(zhì)代謝、養(yǎng)分物質(zhì)轉(zhuǎn)化和合成。

⑶免疫作用

⑷抗蒼老作用

⑸抗腫瘤作用:①降解致癌物質(zhì);②激活巨噬細(xì)胞一一抑制腫瘤細(xì)胞。

2、機(jī)會(huì)致病菌(致病條件)-----填空

⑴正常菌群的寄生部位變更

⑵宿主免疫功能低下

⑶菌群失調(diào):在應(yīng)用抗生素治療感染性疾病的過(guò)程中,宿主某部位正常菌群中各菌種間

的比例發(fā)生較大幅度的變更而產(chǎn)生的疾病。常可引起二重感染或重疊感染,即在抗菌藥

物治療感染性疾病的過(guò)程中,發(fā)生了另一種新致病菌引起的感染。

其次節(jié)細(xì)菌的致病作用(問(wèn)答)

1、毒力:表示細(xì)菌致病性的強(qiáng)弱。

半數(shù)致死量:在肯定條件下能引起5096的試驗(yàn)動(dòng)物死亡的細(xì)菌數(shù)量或毒素劑量。

半數(shù)感染量:在肯定條件下能引起50%的組織培育細(xì)胞的細(xì)菌數(shù)量或毒素劑量。

2、細(xì)菌的致病作用取決于:細(xì)菌的毒力、細(xì)菌侵入的數(shù)量、細(xì)菌侵入的途徑

一、細(xì)菌的毒力

㈠侵襲力:致病菌能突破宿主皮膚、粘膜生理屏障,進(jìn)入機(jī)體并在體內(nèi)定植、繁殖擴(kuò)散

的實(shí)力。

1、黏附素

2、莢膜

3、侵襲性物質(zhì):侵襲素、侵襲性酶

4、細(xì)菌生物被膜

㈡毒素

■外毒素和內(nèi)毒素的主要區(qū)分(簡(jiǎn)述)

外毒素內(nèi)毒素

來(lái)源G+菌和部分G-菌G-菌

存在部分從活菌分泌出,少數(shù)菌崩解后釋出細(xì)胞壁組分,菌裂解后釋出

化學(xué)成分蛋白質(zhì)脂多糖

穩(wěn)定性60^80℃,30分鐘160℃,2~4小時(shí)

毒性作用強(qiáng),對(duì)組織器官有選擇性毒害效應(yīng),引起特較弱,各菌的毒性作用大致相同,引起發(fā)

別臨床表現(xiàn)白細(xì)胞增多、微循環(huán)障礙、休克、DIC勺

身反應(yīng)

抗原性強(qiáng),刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素;甲醛液處理脫毒弱,刺激機(jī)體產(chǎn)生的中和抗體作用弱;E

形成類(lèi)毒素液處理不產(chǎn)生類(lèi)毒素

特點(diǎn)1、大多數(shù)的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)1、產(chǎn)生于G-菌細(xì)胞壁

2、毒性作用強(qiáng),對(duì)組織器官有高度選擇性2、化學(xué)性質(zhì)是LPS

3、絕大多數(shù)不耐熱3、對(duì)理化因素穩(wěn)定

4、抗原性強(qiáng)4、毒素作用相對(duì)較弱

5、可用人工化學(xué)方法脫去毒性(A亞基活5、不能用甲醛液脫毒而成為類(lèi)毒素

性),保留其抗原性(B亞基結(jié)構(gòu))

分類(lèi)1、神經(jīng)毒素:破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌

2、細(xì)胞毒素:能干脆損失宿主細(xì)胞(成孔

毒素、磷脂酶類(lèi))

3、腸毒素:霍亂弧菌

主要生物1、發(fā)熱反應(yīng)

學(xué)作用2、白細(xì)胞反應(yīng)

3、內(nèi)毒素血癥和內(nèi)毒素休克

第三節(jié)宿主的免疫防衛(wèi)機(jī)制

<皮膚與粘膜

血腦屏障

廠屏障結(jié)構(gòu)J

、胎盤(pán)屏障

非特異性免疫(自然緡

吞噬細(xì)胞

廠疫)、補(bǔ)體

體液因素溶菌酶

r體液免疫、防衛(wèi)素

特異性免疫(獲得性免

疫))

細(xì)胞免疫

一、非特異性免疫機(jī)制

(一)屏障結(jié)構(gòu)

*皮膚及黏膜屏障;機(jī)械阻擋、纖毛運(yùn)動(dòng);分泌殺菌物質(zhì);菌群拮抗作用

*血腦屏障

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