目的要求1.掌握對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)；2.掌握代表性藥物的鑒別、檢查方法和含量測定的亞硝酸鈉滴定法；3.熟悉對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物的雜質(zhì)結(jié)構(gòu)、危害、檢查方法和含量限度；4.了解影響對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物穩(wěn)定性的主要因素。第1頁，共53頁。第一頁，共53頁。局麻藥物：改變神經(jīng)膜對鈉離子的通透性，防止膜去極化產(chǎn)生可逆的神經(jīng)傳導(dǎo)阻滯。

可卡因三部分結(jié)構(gòu)芳香環(huán)、中間鏈（酯、酰胺）、氨基團(tuán)決定代謝、消除方式。第2頁，共53頁。第二頁，共53頁。第一節(jié)對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)酯鍵（對氨基苯甲酸酯類藥物）酰胺鍵（酰苯胺類藥物）中間鏈第3頁，共53頁。第三頁，共53頁。一、對氨基苯甲酸酯類藥物H芳伯氨基酯鍵,易水解取代基第4頁，共53頁。第四頁，共53頁。代表性藥物鹽酸普魯卡因Procainehydrochloride苯佐卡因benzocaine鹽酸丁卡因Tetracainehydrochloride第5頁，共53頁。第五頁，共53頁。鹽酸普魯卡因胺第6頁，共53頁。第六頁，共53頁。芳伯氨基酯鍵,易水解脂烴胺Cl－反應(yīng)鹽酸普魯卡因第7頁，共53頁。第七頁，共53頁?；瘜W(xué)性質(zhì)(Feature)2.水解：受光線、熱、堿的影響；鹽酸丁卡因→BABA，其余藥物→PABA3.弱堿性：叔胺氮原子，生物堿沉淀劑反應(yīng)，非水溶劑滴定4.溶解性：游離堿，油狀液體或低熔點(diǎn)固體難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；鹽酸鹽白色結(jié)晶粉末，具一點(diǎn)的熔點(diǎn)，易溶于水和乙醇，難溶于有機(jī)溶劑。1.芳伯氨基：重氮化－偶合反應(yīng)；與芳醛縮合成Schiff堿；易氧化變色等第8頁，共53頁。第八頁，共53頁。二、酰苯胺類藥物潛在芳伯氨基酰胺鍵，易水解取代基第9頁，共53頁。第九頁，共53頁。代表性藥物鹽酸利多卡因Lidocainehydrochloride鹽酸布比卡因bupivacainehydrochloride第10頁，共53頁。第十頁，共53頁。鹽酸利多卡因脂烴胺空間位阻Cl－反應(yīng)第11頁，共53頁。第十一頁，共53頁。1.水解→芳伯胺基？2.水解產(chǎn)物(醋酸)+乙醇/硫酸→醋酸乙酯3.弱堿性：叔胺氮原子＋生物沉淀劑→沉淀4.酰胺氮原子與金屬離子絡(luò)合顯色化學(xué)性質(zhì)(Feature)第12頁，共53頁。第十二頁，共53頁。鹽酸普魯卡因苯佐卡因一、重氮化-偶合反應(yīng)直接反應(yīng)第二節(jié)、鑒別試驗(yàn)第13頁，共53頁。第十三頁，共53頁。橙黃色-猩紅色

-萘酚重氮鹽第14頁，共53頁。第十四頁，共53頁。乳白色鹽酸丁卡因N-亞硝基化合物無重氮化反應(yīng)第15頁，共53頁。第十五頁，共53頁。鹽酸利多卡因，鹽酸布比卡因在酰氨基鄰位有兩個(gè)甲基，因空間位阻影響，較難水解，故重氮化-偶合反應(yīng)較難。第16頁，共53頁。第十六頁，共53頁。

直接：鹽酸普魯卡因、對氨基水楊酸鈉、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺第17頁，共53頁。第十七頁，共53頁。鹽酸普魯卡因ChP（2005）[鑒別]（1）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

第18頁，共53頁。第十八頁，共53頁。

間接：對乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、貝諾酯

第19頁，共53頁。第十九頁，共53頁。對乙酰氨基酚ChP（2005）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加稀鹽酸5m1，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5m1，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性β-萘酚試液2m1，振搖，即顯紅色。第20頁，共53頁。第二十頁，共53頁。第21頁，共53頁。第二十一頁，共53頁。與Cu2+，Co2+，Hg2+的反應(yīng)鹽酸利多卡因在碳酸鈉溶液中與硫酸銅反應(yīng)生成藍(lán)紫色配位化合物，轉(zhuǎn)溶入氯仿，顯黃色。鹽酸利多卡因在酸性溶液中與氯化鈷反應(yīng)，生成亮綠色細(xì)小鈷鹽沉淀。鹽酸利多卡因在硝酸性溶液中與硝酸汞反應(yīng)，顯黃色。二、與重金屬離子反應(yīng)第22頁，共53頁。第二十二頁，共53頁。2第23頁，共53頁。第二十三頁，共53頁。在同樣條件下，鹽酸普魯卡因、丁卡因、苯佐卡因等不顯Cu2+反應(yīng)。對氨基苯甲酸酯類藥物在同樣條件下與Hg2+反應(yīng)顯紅色或橙黃色（鹽酸利多卡因顯黃色）。與其他有關(guān)藥物的區(qū)別第24頁，共53頁。第二十四頁，共53頁。羥肟酸鐵鹽酸普魯卡因胺具芳酰胺結(jié)構(gòu)，可被H2O2氧化，生成羥肟酸，再與FeCl3反應(yīng)生成羥肟酸鐵而顯紫紅色→暗棕色至棕黑色。羥肟酸鐵鹽反應(yīng)++3+3HCl

第25頁，共53頁。第二十五頁，共53頁。具有酯鍵結(jié)構(gòu)的藥物易在堿性溶液中水解，可利用其水解產(chǎn)物進(jìn)行鑒別。三、水解產(chǎn)物反應(yīng)黃色苯佐卡因第26頁，共53頁。第二十六頁，共53頁。鹽酸普魯卡因白色二乙氨基乙醇白色沉淀溶解石蕊試紙石蕊試紙PABA第27頁，共53頁。第二十七頁，共53頁。第28頁，共53頁。第二十八頁，共53頁。四、其他鑒別試驗(yàn)方法實(shí)例內(nèi)容與現(xiàn)象測定衍生物mp三硝基苯酚衍生物；硫氰酸鹽衍生物鹽酸利多卡因228-232

C，鹽酸布比卡因194

C；鹽酸丁卡因131

C。紫外吸收特征苯佐卡因；鹽酸丁卡因;鹽酸普魯卡因胺;氯仿，278，與對照品一致；磷酸緩沖液,310,與對照品一致水,max=280nm;紅外吸收特征鹽酸普魯卡因;鹽酸普魯卡因胺

C=O1692,C-O1200,N+-H2585;

N+-H2645,N-H1550,C-N1280,

酰胺I帶,酰胺II帶兩者區(qū)別第29頁，共53頁。第二十九頁，共53頁。第三節(jié)

特殊雜質(zhì)與檢查一、鹽酸普魯卡因(對氨基苯甲酸)雜質(zhì)來源：水解產(chǎn)生對氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇

結(jié)果導(dǎo)致注射液變黃、療效下降、毒性增加

原料藥及注射用滅菌粉末中雜質(zhì)限量：

0.5%注射液中雜質(zhì)限量：

1.2%第30頁，共53頁。第三十頁，共53頁。檢查方法：HPLC雜質(zhì)對照品法固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠流動(dòng)相：0.1%庚烷磺酸鈉的0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH至3.0)-甲醇(68∶32)

檢測波長：279系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：理論板數(shù)按對氨基苯甲酸峰計(jì)算不低于2000鹽酸普魯卡因峰和對氨基苯甲酸峰的分離度應(yīng)大于2.0外標(biāo)法以峰面積計(jì)算第31頁，共53頁。第三十一頁，共53頁。第四節(jié)含量測定容量分析方法

(volumetricanalysis)分光光度法

(spectrometry)色譜法(chrometography)

亞硝酸鈉滴定法(sodiumnitritemethod)非水溶液滴定法(non-aqueoustitrimetry)第32頁，共53頁。第三十二頁，共53頁。

NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2OAr-NH2+NOClAr-NH-OH（慢）

Ar-N=N-OH（快）

Ar-N2Cl（快）一、亞硝酸鈉滴定法1.原理：Ar-NH2+NaNO2+2HCl→Ar-N2Cl第33頁，共53頁。第三十三頁，共53頁。第34頁，共53頁。第三十四頁，共53頁。加入適量KBr——以加速反應(yīng)KBr+HCl→HBr+KClHNO2+HBr→NOBr+H2O（1）HNO2+HCl→NOCl+H2O（2）2.測定主要條件因（1）式平衡常數(shù)比（2）式約大300倍，生成的NOBr量多，使溶液中NO+濃度大大增加，從而加速反應(yīng)進(jìn)行。第35頁，共53頁。第三十五頁，共53頁。酸的種類及其濃度在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3第36頁，共53頁。第三十六頁，共53頁。加過量鹽酸胺類藥物在鹽酸中溶解度大，反應(yīng)速度也快，其實(shí)際用量較理論量多，一般胺：酸的比例以1：2.5～6為宜。這是因?yàn)檫^量酸有利于：①重氮化反應(yīng)加快；②重氮鹽在酸中穩(wěn)定；③可防止生成偶氮氨基化合物。第37頁，共53頁。第三十七頁，共53頁。滴定溫度 將滴定管尖端插入液面下，一次將大部分滴定液在攪拌下加入，然后將滴定管尖端提出液面，緩緩滴定至終點(diǎn)。溫高反應(yīng)快，但重氮鹽易分解；溫低反應(yīng)慢，故室溫10～30

C為宜，15

C以下較準(zhǔn)確。滴定方法與滴定速度第38頁，共53頁。第三十八頁，共53頁。3.指示終點(diǎn)的方法陽極陰極永停滴定法ChP（2010）、BP（2000）電極：兩個(gè)相同的鉑電極（需活化，用加有1-2滴FeCl3試液的硝酸溫?zé)峤荩┙K點(diǎn)時(shí)：電位法USP（24）第39頁，共53頁。第三十九頁，共53頁。

原理：

NaNO2+KI+HCl→NO+I2I2+淀粉→藍(lán)色影響因素：溶液體積多次外試，供試品的損失指示劑需新配外指示劑法——碘化鉀-淀粉糊劑第40頁，共53頁。第四十頁，共53頁。內(nèi)指示劑法

常用的有：中性紅橙黃IV

–亞甲藍(lán)等第41頁，共53頁。第四十一頁，共53頁。二、非水滴定法鹽酸丁卡因、鹽酸布比卡因具有烴胺，可用非水滴定法測定含量。溶劑：冰醋酸指示劑：結(jié)晶紫滴定劑：高氯酸（0.1mol/L)注意鹽酸丁卡因、鹽酸布比卡因含有鹽酸，滴定前需加醋酸汞處理，以消除鹽酸干擾。第42頁，共53頁。第四十二頁，共53頁。三、分光光度法比色法利用本類藥物結(jié)構(gòu)中的酚羥基或芳伯氨基具有三氯化鐵反應(yīng)或重氮化偶合反應(yīng)，采用比色法測定含量。第43頁，共53頁。第四十三頁，共53頁。（四）、HPLC法

鹽酸普魯卡因注射液ChP（2005）可同時(shí)測定鹽酸普魯卡因及其降解產(chǎn)物對氨基苯甲酸離子抑制色譜法內(nèi)標(biāo)法定量(五)、體內(nèi)藥物分析HPCE研究人血漿中的普魯卡因、利多卡因、丁卡因和布比卡因第44頁，共53頁。第四十四頁，共53頁。1．鹽酸普魯卡因常用的鑒別反應(yīng)有A.重氮化—偶合反應(yīng)B.羥肟酸鐵鹽反應(yīng)C.氧化反應(yīng)D.磺化反應(yīng)E.碘化反應(yīng)

第45頁，共53頁。第四十五頁，共53頁。2．采用亞硝酸鈉法測定含量的藥物有A.苯巴比妥B.鹽酸丁卡因C.苯佐卡因D.醋氨苯砜E.鹽酸去氧腎上腺素

第46頁，共53頁。第四十六頁，共53頁。3．下列藥物中不能用亞硝酸鈉滴定法測定含量者A.乙酰水楊酸B.對氨基水楊酸鈉C.對乙酰氨基酚D.普魯卡因E.苯佐卡因

第47頁，共53頁。第四十七頁，共53