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文檔簡(jiǎn)介

ICS65.020.20

CCSB21

37

山東省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB37/T4485—2021

玉米種子活力測(cè)定加速老化法、抗冷法、

冷浸法、破裂法

Maizeseedvigourtestbyacceleratedageingtest,coldtest,coldsoakingtest,rupture

test

2021-12-29發(fā)布2022-01-29實(shí)施

山東省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB37/T4485—2021

目次

前言................................................................................III

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語和定義.........................................................................1

4縮略語.............................................................................2

5測(cè)定原理...........................................................................2

5.1加速老化法.....................................................................2

5.2抗冷法.........................................................................2

5.3冷浸法.........................................................................2

5.4破裂法.........................................................................3

6測(cè)定方案...........................................................................3

6.1總則...........................................................................3

6.2樣品...........................................................................3

6.3測(cè)定平臺(tái).......................................................................3

6.4測(cè)定條件.......................................................................3

7試材和設(shè)備.........................................................................3

7.1試材...........................................................................3

7.2設(shè)備...........................................................................3

8試驗(yàn)步驟...........................................................................4

8.1加速老化法.....................................................................4

8.2抗冷法.........................................................................5

8.3冷浸法.........................................................................6

8.4破裂法.........................................................................7

9試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理.......................................................................8

9.1加速老化法.....................................................................8

9.2抗冷法.........................................................................8

9.3冷浸法.........................................................................8

9.4破裂法.........................................................................9

9.5重新試驗(yàn).......................................................................9

10結(jié)果計(jì)算和表示...................................................................10

10.1加速老化法、抗冷法、冷浸法...................................................10

10.2破裂法.......................................................................11

11結(jié)果報(bào)告.........................................................................11

附錄A(資料性)玉米種子活力測(cè)定(加速老化法、抗冷法、冷浸法)發(fā)芽試驗(yàn)原始記錄表....12

附錄B(資料性)玉米種子活力測(cè)定(破裂法)發(fā)芽試驗(yàn)原始記錄表........................13

附錄C(資料性)玉米種子活力測(cè)定結(jié)果報(bào)告單..........................................14

I

DB37/T4485—2021

參考文獻(xiàn).............................................................................15

II

DB37/T4485—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。

本文件由山東省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并組織實(shí)施。

本文件由山東省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)種植業(yè)分技術(shù)委員會(huì)歸口。

III

DB37/T4485—2021

玉米種子活力測(cè)定加速老化法、抗冷法、冷浸法、破裂法

1范圍

本文件規(guī)定了玉米(ZeamaysL.)種子活力測(cè)定加速老化法、抗冷法、冷浸法、破裂法的測(cè)定原則、

測(cè)定方案、測(cè)定程序和結(jié)果報(bào)告。

本文件適用于普通玉米品種的種子活力測(cè)定,亦可作為特用玉米品種的種子活力測(cè)定推薦方法。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本

文件。

GB/T3543.2農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程扦樣

GB/T3543.4農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程發(fā)芽試驗(yàn)

GB/T8170數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示與判定

GB/T26462種子發(fā)芽紙

3術(shù)語和定義

GB/T3543.2界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

種子活力seedvigour

在廣泛的田間條件下,決定種子迅速整齊出苗和長(zhǎng)成正常幼苗潛在能力的總稱。

3.2

種子批seedlot

同一來源、同一品種、同一年度、同一時(shí)期收獲和質(zhì)量基本一致、在規(guī)定數(shù)量之內(nèi)的種子。

[來源:GB/T3543.2—1995,3.1]

3.3

送驗(yàn)樣品submittedsample

送到種子檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)、規(guī)定數(shù)量的樣品。

[來源:GB/T3543.2—1995,3.4]

3.4

試驗(yàn)樣品(簡(jiǎn)稱“試樣”)workingsample

在實(shí)驗(yàn)室中從送驗(yàn)樣品中分出的部分樣品,供測(cè)定某一檢驗(yàn)項(xiàng)目之用。

[來源:GB/T3543.2—1995,3.5]

3.5

加速老化測(cè)定acceleratedagingtest

將試樣置于高溫高濕條件下進(jìn)行人工老化處理,處理后進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗(yàn),統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù),計(jì)算

發(fā)芽率。

1

DB37/T4485—2021

3.6

抗冷測(cè)定coldtest

將試樣低溫發(fā)芽一定時(shí)間后轉(zhuǎn)適溫發(fā)芽試驗(yàn),定期統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

3.7

冷浸測(cè)定coldsoakingtest

將試樣低溫水浴處理后進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗(yàn),統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

3.8

破裂測(cè)定rupturetest

在特定發(fā)芽溫度下,定時(shí)統(tǒng)計(jì)試樣種子已發(fā)生果種皮破裂和胚根鞘破裂的種子粒數(shù),計(jì)算破裂率,

包括果種皮破裂率、胚根鞘破裂率、果種皮胚根鞘破裂率和果種皮未破裂率。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件。

AAT:加速老化測(cè)定(AcceleratedAgeingTest)

CT:抗冷測(cè)定(ColdTest)

CST:冷浸測(cè)定(ColdSoakingTest)

RT:破裂測(cè)定(RuptureTest)

TR:果種皮破裂(Testa-pericarpRupture)

CR:胚根鞘破裂(coleorhizaRupture)

TU:果種皮破裂(Testa-pericarpUnrupture)

TRP:果種皮破裂率(Testa-pericarpRupturePercentage)

CRP:胚根鞘破裂率(ColeorhizaRupturePercentage)

TRCRP:果種皮胚根鞘破裂率((Testa-pericarpRupture+Coleorhizarupture)Percentage)

TUP:果種皮未破裂率(Testa-pericarpUnrupturePercentage)

5測(cè)定原理

5.1加速老化法

采用高溫高濕處理種子,加速種子老化,其劣變程度在幾天內(nèi)相當(dāng)于數(shù)月或數(shù)年之久的自然劣變程

度。高活力種子經(jīng)一定條件的老化處理后仍能正常發(fā)芽,低活力種子則產(chǎn)生不正常幼苗甚至喪失生活力。

因此,加速老化法能較好地預(yù)測(cè)田間出苗率和種子耐貯藏性。

5.2抗冷法

玉米為春播喜溫作物,將種子置于低溫潮濕環(huán)境中處理一定時(shí)間后,移至適宜環(huán)境下生長(zhǎng),模擬早

春田間逆境條件,觀察種子發(fā)芽成苗的能力。高活力種子經(jīng)一定條件的低溫處理后仍能形成正常幼苗,

而低活力種子則不能形成正常幼苗甚至喪失生活力。因此,抗冷法能較好地預(yù)測(cè)田間出苗率。

5.3冷浸法

玉米春播常遇冷害、快速吸脹及缺氧傷害等逆境脅迫。將種子浸泡在低溫水中處理一定時(shí)間后,移

至適宜環(huán)境下生長(zhǎng),模擬早春田間逆境條件,觀察種子發(fā)芽成苗的能力。高活力種子由于抗逆性強(qiáng)仍能

保持發(fā)芽力,形成正常幼苗,而低活力種子則不能形成正常幼苗甚至喪失生活力。因此,冷浸法能較好

地預(yù)測(cè)田間出苗率。

2

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5.4破裂法

玉米種子發(fā)芽中伴隨著果種皮破裂(胚根鞘伸長(zhǎng)突破果種皮)和胚根鞘破裂(胚根伸長(zhǎng)突破胚根鞘)

兩個(gè)連續(xù)萌發(fā)質(zhì)變事件。高活力種子萌發(fā)事件發(fā)生速率快,而低活力種子發(fā)生速率慢甚至不能完成上述

萌發(fā)事件。因此,破裂法能快速反映種子活力狀況,較好地預(yù)測(cè)田間出苗率。

6測(cè)定方案

6.1總則

在嚴(yán)格控制條件下,對(duì)試樣按模擬逆境處理、標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽、數(shù)據(jù)分析的程序(加速老化測(cè)定、抗冷測(cè)

定、冷浸測(cè)定)和低溫發(fā)芽、萌發(fā)事件統(tǒng)計(jì)、數(shù)據(jù)分析的程序(破裂測(cè)定)進(jìn)行測(cè)定。

按規(guī)定要求填報(bào)測(cè)定結(jié)果,測(cè)定報(bào)告應(yīng)注明測(cè)定方案所規(guī)定的條件。

6.2樣品

送驗(yàn)樣品為玉米種子,重量應(yīng)不低于1000g。

6.3測(cè)定平臺(tái)

人工氣候箱、光照培養(yǎng)箱、發(fā)芽室或其它能夠精準(zhǔn)控溫的發(fā)芽環(huán)境。

6.4測(cè)定條件

種子活力測(cè)定應(yīng)在有利于正確實(shí)施測(cè)定的控制條件下進(jìn)行,包括但不限于下列條件:

——種子檢驗(yàn)員具備熟悉所使用測(cè)定方法的知識(shí)和技能;

——所有儀器與使用的技術(shù)相適應(yīng),并已經(jīng)過定期維護(hù)、驗(yàn)證和校準(zhǔn)。

7試材和設(shè)備

7.1試材

7.1.1老化盒:100mm×100mm×30mm等規(guī)格。

7.1.2尼龍網(wǎng)袋:150mm×100mm、400mm×150mm等規(guī)格。

7.1.3置種板:可輔助玉米種子置床,每次可平行或交錯(cuò)置種50?;?00粒。

7.1.4數(shù)種板:可輔助數(shù)取一定數(shù)目的玉米種子。

7.1.5塑料框架:外邊框尺寸為350mm×250mm,內(nèi)邊框尺寸為300mm×200mm,厚為5mm,輔助砂床

鋪設(shè)。

7.1.6自封袋:12號(hào)(450mm×340mm)等規(guī)格。

7.1.7發(fā)芽盒(盤):450mm×300mm×90mm等規(guī)格。

7.1.8發(fā)芽紙:GB/T26462,380mm×255mm等規(guī)格。

7.1.9試劑藥品:次氯酸鈉溶液等。

7.1.10其它:其它發(fā)芽裝置、溫濕度計(jì)、玻璃棒、三角瓶、鑷子、蒸餾水、標(biāo)簽紙、紗布、油性記號(hào)

筆、酒精、砂子、噴壺等。

7.2設(shè)備

7.2.1人工老化處理設(shè)備:種子老化箱等。

7.2.2發(fā)芽設(shè)備:人工氣候箱、光照培養(yǎng)箱、發(fā)芽室、恒溫循環(huán)槽或其它能夠精準(zhǔn)控溫發(fā)芽的設(shè)備。

3

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7.2.3消毒干燥設(shè)備:高壓蒸汽滅菌鍋、電熱鼓風(fēng)干燥箱等。

8試驗(yàn)步驟

8.1加速老化法

8.1.1試樣準(zhǔn)備

啟封后,隨機(jī)數(shù)取試樣凈種子100粒,4次重復(fù),共400粒。種子老化處理前用1.0%的次氯酸鈉溶液

浸泡消毒10min,消毒后用無菌蒸餾水沖洗3遍,拭去種子表面浮水,備用。包衣種子可先柔性清洗后

消毒,或無須消毒處理。

8.1.2試驗(yàn)材料準(zhǔn)備

發(fā)芽紙:將發(fā)芽紙121℃±1℃高壓蒸汽滅菌20min后,烘干備用;

發(fā)芽盒(盤):將發(fā)芽盒(盤)清洗干凈后,用75%的酒精溶液擦拭消毒,風(fēng)干備用。

8.1.3加速老化測(cè)定

按將種子放入老化盒或尼龍網(wǎng)袋中,置于種子老化箱內(nèi),控制溫度在45℃±0.3℃、相對(duì)濕度不低

于98%條件下,加速老化處理72h,取出,薄攤,回干(自然晾干或在不高于60℃的條件下烘干),備

用。

蓋紙發(fā)芽:取2張發(fā)芽紙(380mm×255mm),疊放入發(fā)芽盒(盤)(450mm×300mm×90mm)內(nèi),

加入蒸餾水,充分潤(rùn)濕,用無菌紗布輕拭床面,除去余液和紙間氣泡后,置種板輔助平行置種,紙邊距

2cm~2.5cm。種子置床后,加蓋1張潤(rùn)濕的發(fā)芽紙,蓋上發(fā)芽盒(盤)蓋,貼好標(biāo)簽并標(biāo)注品種名稱、

樣品編號(hào)、重復(fù)次數(shù)、置床時(shí)間等基本信息,放入人工氣候箱。按照GB/T3543.4,25℃±0.5℃標(biāo)準(zhǔn)

發(fā)芽7d統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

卷紙發(fā)芽:用75%的酒精溶液消毒操作臺(tái),將2張發(fā)芽紙(380mm×255mm)疊放好,用油性記號(hào)筆

在發(fā)芽紙一角較小區(qū)域標(biāo)識(shí)樣品信息(或備樣品信息防水條),如:樣品名稱、重復(fù)編號(hào)等。發(fā)芽紙用

蒸餾水充分潤(rùn)濕,用無菌紗布輕拭床面,除去余液和紙間氣泡后,置種板輔助交錯(cuò)置種,種孔朝向一致,

紙邊距5cm。種子置床后加蓋1張潤(rùn)濕的發(fā)芽紙,將紙床(或夾樣品信息防水條)卷起,紙卷兩端整平,

并用皮筋扣住。將紙卷放入自封袋密封好(朝向一致),在自封袋上粘貼標(biāo)簽紙或用油性記號(hào)筆標(biāo)識(shí)相

關(guān)信息后,垂直放入人工氣候箱(紙卷種孔端朝下)。按照GB/T3543.4,25℃±0.5℃標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽7d統(tǒng)

計(jì)正常幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

同時(shí)按照GB/T3543.4,對(duì)未老化處理種子進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽測(cè)定,25℃±0.5℃標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽7d統(tǒng)計(jì)正常

幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

8.1.4檢查管理

在種子老化處理和發(fā)芽期間,應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)臋z查管理,以維持原有老化處理及發(fā)芽條件。老化36h

和發(fā)芽4d時(shí)分別檢查1次老化和發(fā)芽環(huán)境,若有問題及時(shí)進(jìn)行相應(yīng)維護(hù)。

老化處理:溫度和濕度檢測(cè);溫度保持在45℃±0.3℃范圍,相對(duì)濕度不低于98%。

發(fā)芽床檢查:發(fā)芽床始終保持濕潤(rùn)。

發(fā)芽溫度檢查:溫度保持在25℃±0.5℃范圍內(nèi)。

種子檢查:發(fā)霉的種子應(yīng)及時(shí)取出洗滌去霉。當(dāng)發(fā)霉種子超過5%時(shí),應(yīng)更換發(fā)芽床,以免霉菌因

素影響測(cè)定結(jié)果。如發(fā)現(xiàn)腐爛無生活力的種子,應(yīng)及時(shí)去除并做好相應(yīng)記載。

8.1.5數(shù)據(jù)記錄

4

DB37/T4485—2021

按照GB/T3543.4中正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實(shí)、不正常幼苗和死種子的鑒定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行數(shù)據(jù)

統(tǒng)計(jì),根據(jù)正常幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

8.2抗冷法

8.2.1試樣準(zhǔn)備

啟封后,隨機(jī)數(shù)取試樣凈種子100粒,4次重復(fù),共400粒。種子低溫發(fā)芽前用1.0%的次氯酸鈉溶液

浸泡消毒10min,消毒后用無菌蒸餾水沖洗3遍,拭去種子表面浮水后,備用。包衣種子可先柔性清洗

表面包衣后消毒,或無須消毒處理。

8.2.2試驗(yàn)材料準(zhǔn)備

發(fā)芽紙:將發(fā)芽紙121℃±1℃高壓蒸汽滅菌20min后,烘干備用。

發(fā)芽盒(盤):將發(fā)芽盒(盤)清洗干凈后,用75%的酒精溶液擦拭消毒,風(fēng)干備用。

砂子:砂子清洗后,平鋪于搪瓷盤內(nèi)放入電熱鼓風(fēng)干燥箱130℃±3℃高溫烘干滅菌4h,冷卻后用

孔徑2.0mm篩子過篩,除雜質(zhì),備用。

8.2.3抗冷測(cè)定

按采取卷紙、紙砂上或紙砂間置床方式對(duì)玉米種子進(jìn)行抗冷測(cè)定。

卷紙發(fā)芽:用75%的酒精溶液消毒操作臺(tái),將2張發(fā)芽紙(380mm×255mm)疊放好,用油性記號(hào)筆

在發(fā)芽紙一角較小區(qū)域標(biāo)識(shí)樣品信息(或備樣品信息防水條),如:樣品名稱、重復(fù)編號(hào)等。用蒸餾水

充分潤(rùn)濕,用無菌紗布輕拭床面,除去余液和紙間氣泡后,置種板輔助交錯(cuò)置種,種孔朝向一致,紙邊

距5cm。種子置床后加蓋1張潤(rùn)濕的發(fā)芽紙,將紙床(或夾樣品信息防水條)疏松卷起,紙卷兩端整平,

并用皮筋扣住。將紙卷放入自封袋密封好(朝向一致),在自封袋上粘貼標(biāo)簽紙或用油性記號(hào)筆標(biāo)識(shí)相

關(guān)信息后,垂直放入人工氣候箱中(紙卷種孔端朝下),10℃±0.5℃避光發(fā)芽7d后,轉(zhuǎn)25℃±0.5℃

發(fā)芽4d(12h光暗交替)統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

紙砂上:取2張發(fā)芽紙(380mm×255mm),疊放入發(fā)芽盒(盤)(450mm×300mm×90mm)內(nèi),加

入蒸餾水,充分潤(rùn)濕,用無菌紗布輕拭床面,除去余液和紙間氣泡后,塑料框架輔助砂床鋪設(shè)(取濕砂

置塑料框架內(nèi),整平床面),床厚5mm,置種板輔助平行置種,種胚與砂床緊密接觸,種孔朝向一致,

紙邊距5cm,種子置床后加蓋濕砂,整平床面,蓋上發(fā)芽盒(盤)蓋,放入人工氣候箱,10℃±0.5℃

避光發(fā)芽7d后,轉(zhuǎn)25℃±0.5℃發(fā)芽4d(12h光暗交替)統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

紙砂間:用75%的酒精溶液消毒操作臺(tái),將2張發(fā)芽紙(380mm×255mm)疊放好,用油性記號(hào)筆在

發(fā)芽紙一角較小區(qū)域標(biāo)識(shí)樣品信息(或備樣品信息防水條),用蒸餾水充分潤(rùn)濕,用無菌紗布輕拭床面,

除去余液和紙間氣泡后,塑料框架輔助砂床鋪設(shè)(取濕砂置塑料框架內(nèi),整平床面),床厚5mm,置種

板輔助交錯(cuò)置種,種孔朝向一致,紙邊距5cm。種子置床后加蓋1張潤(rùn)濕的發(fā)芽紙,將紙床(或夾樣品

信息防水條)疏松卷起,紙卷兩端整平,并用皮筋扣住。將紙卷放入自封袋密封好(朝向一致),在自

封袋上粘貼標(biāo)簽紙或用油性記號(hào)筆標(biāo)識(shí)相關(guān)信息后,垂直放入人工氣候箱中(紙卷種孔端朝下),10℃

±0.5℃避光發(fā)芽7d后,轉(zhuǎn)25℃±0.5℃發(fā)芽4d(12h光暗交替)統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

8.2.4檢查管理

在種子發(fā)芽期間,應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)臋z查管理,以維持原有發(fā)芽條件。10℃±0.5℃發(fā)芽4d和25℃±

0.5℃發(fā)芽2d分別檢查1次發(fā)芽環(huán)境,若有問題及時(shí)進(jìn)行相應(yīng)維護(hù)。

發(fā)芽床檢查:發(fā)芽床始終保持發(fā)芽床濕潤(rùn)。

發(fā)芽溫度檢查:低溫發(fā)芽溫度保持在10℃±0.5℃范圍內(nèi),適溫發(fā)芽溫度保持在25℃±0.5℃范圍

內(nèi)。

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種子檢查:適溫發(fā)芽期間發(fā)霉的種子應(yīng)及時(shí)取出洗滌去霉。當(dāng)發(fā)霉種子超過5%時(shí),應(yīng)更換發(fā)芽床,

以免霉菌因素影響檢測(cè)結(jié)果。如發(fā)現(xiàn)腐爛死亡種子,應(yīng)及時(shí)去除并做好相應(yīng)記載。

8.2.5數(shù)據(jù)記錄

按照GB/T3543.4中正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實(shí)、不正常幼苗和死種子的鑒定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行數(shù)據(jù)

統(tǒng)計(jì),根據(jù)正常幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

8.3冷浸法

8.3.1試樣準(zhǔn)備

啟封后,隨機(jī)數(shù)取試樣凈種子100粒,4次重復(fù),共400粒。種子冷浸處理前用1.0%的次氯酸鈉溶液

浸泡消毒10min,消毒后用無菌蒸餾水沖洗3遍,拭去種子表面浮水后,備用。包衣種子可先柔性清洗

表面包衣然后消毒,或無須消毒處理。

8.3.2試驗(yàn)材料準(zhǔn)備

發(fā)芽紙:將發(fā)芽紙121℃±1℃高壓蒸汽滅菌20min后,烘干備用。

發(fā)芽盒(盤):將發(fā)芽盒(盤)清洗干凈后,用75%的酒精溶液擦拭消毒,風(fēng)干備用。

8.3.3冷浸測(cè)定

采取紙間(卷紙)置床方式對(duì)玉米種子進(jìn)行冷浸測(cè)定??梢赃x擇置床前冷浸或置床后冷浸。

置床前冷浸處理:將試樣裝入尼龍網(wǎng)袋,并在信息牌上用油性記號(hào)筆標(biāo)識(shí)信息后,放入恒溫循環(huán)槽

或塑料箱(加入足量蒸餾水提前放入人工氣候箱)在4℃±0.5℃冷浸處理3d。處理結(jié)束后取出,拭去

種子表面浮水后,備用。將2張發(fā)芽紙(380mm×255mm)疊放好,用油性記號(hào)筆在發(fā)芽紙一角較小區(qū)域

標(biāo)識(shí)樣品信息(或備樣品信息防水條),用蒸餾水充分潤(rùn)濕,用無菌紗布輕拭床面,除去余液和紙間氣

泡后,置種板輔助交錯(cuò)置種,種孔朝向一致,紙邊距5cm。種子置床后加蓋1張潤(rùn)濕的發(fā)芽紙,將紙床

(或夾樣品信息防水條)疏松卷起,紙卷兩端整平,并用皮筋扣住。將紙卷放入自封袋密封好(朝向一

致),在自封袋上粘貼標(biāo)簽紙或用油性記號(hào)筆標(biāo)識(shí)相關(guān)信息后,垂直放入人工氣候箱(紙卷種孔端朝下),

25℃±0.5℃發(fā)芽7d(12h光暗交替)統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

置床后冷浸處理:將2張發(fā)芽紙(380mm×255mm)疊放好,用油性記號(hào)筆在發(fā)芽紙一角較小區(qū)域標(biāo)

識(shí)樣品信息(或備樣品信息防水條),用蒸餾水充分潤(rùn)濕,用無菌紗布輕拭床面,除去余液和紙間氣泡

后,置種板輔助交錯(cuò)置種,種孔朝向一致,紙邊距5cm。種子置床后加蓋1張潤(rùn)濕的發(fā)芽紙,將紙床(或

夾樣品信息防水條)疏松卷起,紙卷兩端整平,并用皮筋扣住,放入尼龍網(wǎng)袋中,封口放入恒溫循環(huán)槽

或塑料箱(加入足量蒸餾水提前放入人工氣候箱)內(nèi)4℃±0.5℃冷浸處理3d。處理結(jié)束后,將紙卷除

去余液后放入自封袋密封好(朝向一致),在自封袋上粘貼標(biāo)簽紙或用油性記號(hào)筆標(biāo)識(shí)相關(guān)信息后,垂

直放入人工氣候箱(紙卷種孔端朝下),25℃±0.5℃發(fā)芽7d(12h光暗交替)統(tǒng)計(jì)正常幼苗數(shù),計(jì)算

發(fā)芽率。

8.3.4檢查管理

在種子冷浸和發(fā)芽期間,應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)臋z查管理,以維持原有冷浸和發(fā)芽條件。冷浸1d和發(fā)芽4d

分別檢查1次冷浸和發(fā)芽環(huán)境,若有問題及時(shí)進(jìn)行相應(yīng)維護(hù)。

發(fā)芽床檢查:發(fā)芽床始終保持濕潤(rùn)。

發(fā)芽溫度檢查:冷浸溫度保持在4℃±0.5℃范圍內(nèi),發(fā)芽溫度保持在25℃±0.5℃范圍內(nèi)。

種子檢查:發(fā)霉的種子應(yīng)及時(shí)取出洗滌去霉。當(dāng)發(fā)霉種子超過5%時(shí),應(yīng)更換發(fā)芽床,以免霉菌因

素影響測(cè)定結(jié)果。如發(fā)現(xiàn)腐爛無生活力的種子,應(yīng)及時(shí)去除并做好相應(yīng)記載。

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8.3.5數(shù)據(jù)記錄

按照GB/T3543.4中正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實(shí)、不正常幼苗和死種子的鑒定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行數(shù)據(jù)

統(tǒng)計(jì),根據(jù)正常幼苗數(shù),計(jì)算發(fā)芽率。

8.4破裂法

8.4.1試樣準(zhǔn)備

啟封后,隨機(jī)數(shù)取試樣凈種子100粒,4次重復(fù),共400粒。種子低溫發(fā)芽前用1.0%的次氯酸鈉溶液

浸泡消毒10min,消毒后用無菌蒸餾水沖洗3遍,拭去種子表面浮水后,備用。包衣種子可先柔性清洗

表面包衣然后消毒,或無須消毒處理。

8.4.2試驗(yàn)材料準(zhǔn)備

發(fā)芽紙:將發(fā)芽紙121℃±1℃高壓蒸汽滅菌20min后,烘干備用;

發(fā)芽盒(盤):將發(fā)芽盒(盤)清洗干凈后,用75%的酒精溶液擦拭消毒,風(fēng)干備用。

8.4.3破裂測(cè)定

采取紙間(蓋紙和卷紙)置床方式對(duì)玉米種子進(jìn)行破裂測(cè)定。破裂測(cè)定發(fā)芽溫度:15℃±0.5℃或

20℃±0.5℃。

15℃:置床120h±15min(5d±15min)統(tǒng)計(jì)果種皮破裂種子數(shù)、胚根鞘破裂種子數(shù)和果種皮未

破裂種子數(shù)。

20℃:置床72h±15min(3d±15min)統(tǒng)計(jì)果種皮破裂種子數(shù)、胚根鞘破裂種子數(shù)和果種皮未破

裂種子數(shù)。

蓋紙發(fā)芽:取2張發(fā)芽紙(380mm×255mm),疊放入發(fā)芽盒(盤)(450mm×300mm×90mm)內(nèi),

加入蒸餾水,充分潤(rùn)濕,用無菌紗布輕拭床面,除去余液和紙間氣泡后,置種板輔助平行置種,紙邊距

2cm~2.5cm。種子置床后加蓋1張潤(rùn)濕的發(fā)芽紙,蓋上發(fā)芽盒(盤)蓋,貼好標(biāo)簽并標(biāo)注品種名稱、樣

品編號(hào)、重復(fù)次數(shù)、置床時(shí)間等基本信息,放入人工氣候箱,根據(jù)所選發(fā)芽溫度,定時(shí)統(tǒng)計(jì)各重復(fù)果種

皮破裂種子數(shù)、胚根鞘破裂種子數(shù)和果種皮未破裂種子數(shù),計(jì)算果種皮破裂率、胚根鞘破裂率和果種皮

胚根鞘破裂率。

卷紙發(fā)芽:用75%的酒精溶液消毒操作臺(tái),將2張發(fā)芽紙(380mm×255mm)疊放好,用油性記號(hào)筆

在發(fā)芽紙一角較小區(qū)域標(biāo)識(shí)樣品信息(或備樣品信息防水條),用蒸餾水充分潤(rùn)濕,用無菌紗布輕拭床

面,除去余液和紙間氣泡后,置種板輔助交錯(cuò)置種,種孔朝向一致,紙邊距5cm。種子置床后加蓋1張

潤(rùn)濕的發(fā)芽紙,將紙床(或夾樣品信息防水條)疏松卷起,紙卷兩端整平,并用皮筋扣住。將紙卷放入

自封袋密封好(朝向一致),在自封袋上粘貼標(biāo)簽紙或用油性記號(hào)筆標(biāo)識(shí)相關(guān)信息后,垂直放入人工氣

候箱(紙卷種孔端朝下),根據(jù)所選發(fā)芽溫度,定時(shí)統(tǒng)計(jì)各重復(fù)果種皮破裂種子數(shù)、胚根鞘破裂種子數(shù)

和果種皮未破裂種子數(shù),計(jì)算果種皮破裂率、胚根鞘破裂率、果種皮胚根鞘破裂率和果種皮未破裂率。

8.4.4檢查管理

在種子發(fā)芽期間,應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)臋z查管理,以維持原有發(fā)芽條件。發(fā)芽2d檢查1次發(fā)芽環(huán)境,若有

問題及時(shí)進(jìn)行相應(yīng)維護(hù)。

發(fā)芽床檢查:發(fā)芽床始終保持濕潤(rùn)。

發(fā)芽溫度檢查:發(fā)芽溫度保持在選定測(cè)定溫度(15℃±0.5℃或20℃±0.5℃)范圍內(nèi)。

種子檢查:發(fā)霉的種子應(yīng)及時(shí)取出洗滌去霉。當(dāng)發(fā)霉種子超過5%時(shí),應(yīng)更換發(fā)芽床,以免霉菌因

素影響測(cè)定結(jié)果。如發(fā)現(xiàn)腐爛無生活力的種子,應(yīng)及時(shí)去除并做好相應(yīng)記載。

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8.4.5數(shù)據(jù)記錄

按照表1玉米種子活力測(cè)定破裂法鑒定標(biāo)準(zhǔn)對(duì)果種皮破裂、胚根鞘破裂和果種皮未破裂事件進(jìn)行鑒

定,定時(shí)統(tǒng)計(jì)各重復(fù)果種皮破裂種子數(shù)、胚根鞘破裂種子數(shù)和果種皮未破裂種子數(shù),計(jì)算果種皮破裂率、

胚根鞘破裂率、果種皮胚根鞘破裂率和果種皮未破裂率。

表1玉米種子活力測(cè)定破裂法鑒定標(biāo)準(zhǔn)

萌發(fā)事件類型表型

果種皮破裂果種皮發(fā)生破裂(主要?dú)w因于胚根鞘膨脹伸長(zhǎng)生長(zhǎng),突破果種皮束縛)。

胚根鞘破裂胚根鞘破裂和胚根伸出(主要?dú)w因于胚根鞘弱化或胚根伸長(zhǎng)生長(zhǎng);胚根鞘側(cè)面有明顯V型開裂)。

果種皮未破裂種子吸脹,伴隨覆胚果種皮凸起,但果種皮未發(fā)生破裂。

9試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理

9.1加速老化法

分別計(jì)算加速老化測(cè)定各重復(fù)(100粒種子)的發(fā)芽率,按照GB/T8170,求得四次重復(fù)的平均值,

記為加速老化發(fā)芽率;標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽條件下未老化處理試樣四次重復(fù)發(fā)芽率的平均值記為標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率;加速

老化發(fā)芽率與標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率的比值記為加速老化相對(duì)發(fā)芽率。

加速老化發(fā)芽率=(正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù))×100%

標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率=(正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù))×100%

加速老化相對(duì)發(fā)芽率=(加速老化發(fā)芽率/標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率)×100%

種子批的標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽率和加速老化相對(duì)發(fā)芽率均較高時(shí),表明種子批的種子活力較高,耐貯藏能力強(qiáng),

反之則弱。依照加速老化相對(duì)發(fā)芽率大小可將玉米種子耐貯藏性分為耐(A)、中耐(B)、弱(C)、

不耐(D)4個(gè)等級(jí)。

玉米種子批耐貯藏性評(píng)價(jià)見表2。

表2玉米種子批耐貯藏性評(píng)價(jià)

加速老化相對(duì)發(fā)芽率

耐貯藏性分級(jí)耐貯藏性等級(jí)

%

85~100耐A級(jí)

65~84中耐B級(jí)

30~64弱C級(jí)

0~29不耐D級(jí)

9.2抗冷法

分別計(jì)算抗冷測(cè)定各重復(fù)(100粒種子)的發(fā)芽率,按照GB/T8170,求得四次重復(fù)的平均值,記為

抗冷測(cè)定發(fā)芽率。

抗冷測(cè)定發(fā)芽率=(正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù))×100%

9.3冷浸法

分別計(jì)算冷浸測(cè)定各重復(fù)(100粒種子)的發(fā)芽率,按照GB/T8170,求得四次重復(fù)的平均值,記為

冷浸發(fā)芽率。

冷浸發(fā)芽率=(正常幼苗數(shù)/供檢種子粒數(shù))×100%

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9.4破裂法

分別計(jì)算破裂測(cè)定各重復(fù)(100粒種子)的果種皮破裂率(TRP)、胚根鞘破裂率(CRP)、(果種

皮胚根鞘破裂率(TRCRP)和果種皮未破裂率(TUP),按照GB/T8170,求得四次重復(fù)的平均值,通過

CRP和TRCRP指標(biāo)評(píng)價(jià)種子活力。

果種皮破裂率=(果種皮破裂種子數(shù)/供檢種子粒數(shù))×100%

胚根鞘破裂率=(胚根鞘破裂種子數(shù)/供檢種子粒數(shù))×100%

果種皮胚根鞘破裂率=[(果種皮破裂種子數(shù)+胚根鞘破裂種子數(shù))/供檢種子總數(shù)]×100%

果種皮未破裂率=(果種皮未破裂種子數(shù)/供檢種子粒數(shù))×100%

9.5重新試驗(yàn)

參考GB/T3543.4,當(dāng)試驗(yàn)出現(xiàn)下列情況時(shí),應(yīng)重新試驗(yàn)。

由于真菌或細(xì)菌的蔓延而使試驗(yàn)結(jié)果不一定可靠時(shí),可選擇上述其他種子活力測(cè)定方法采用紙砂上

或紙砂間進(jìn)行重新試驗(yàn)。如有必要,應(yīng)增加種子之間的距離。

當(dāng)正確鑒定幼苗數(shù)有困難時(shí),可選擇上述其他種子活力測(cè)定方法采用紙砂上或紙砂間進(jìn)行重新試驗(yàn)。

當(dāng)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)條件、幼苗鑒定或計(jì)數(shù)有差錯(cuò)時(shí),應(yīng)采用同樣方法進(jìn)行重新試驗(yàn)。

當(dāng)一次試驗(yàn)的四次重復(fù)間的差距超過表3最大容許差距時(shí),應(yīng)采用同樣的方法進(jìn)行重新試驗(yàn)。如果

第二次結(jié)果與第一次結(jié)果相一致,即其差異不超過表4中所示的容許差距,則將兩次試驗(yàn)的平均數(shù)填報(bào)

在結(jié)果單上。如果第二次結(jié)果與第一次結(jié)果不相符合,其差異超過表4所示的容許差距,則采用同樣的

方法進(jìn)行第三次試驗(yàn),填報(bào)符合要求的結(jié)果平均數(shù)。

表3同一發(fā)芽試驗(yàn)四次重復(fù)間的最大容許差距(2.5%顯著水平的兩尾測(cè)定)

平均發(fā)芽率

最大容許差距

50%以上50%以下

9925

9836

9747

9658

9569

93~947~810

91~929~1011

89~9011~1212

87~8813~1413

84~8615~1714

81~8318~2015

78~8021~2316

73~7724~2817

67~7229~3418

56~6635~4519

51~5546~5020

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表4同一或不同實(shí)驗(yàn)室來自相同或不同送驗(yàn)樣品間發(fā)芽試驗(yàn)的容許差距(2.5%顯著水平的兩尾測(cè)定)

平均發(fā)芽率

最大容許差距

50%以上50%以下

98~992~32

95~974~63

91~947~104

85~9011~165

77~8417~246

60~7625~417

51~5942~508

10結(jié)果計(jì)算和表示

10.1加速老化法、抗冷法、冷浸法

按照GB/T3543.4,對(duì)試樣的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行填報(bào)。正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實(shí)、不正常幼苗、

和死種子的百分率按四次重復(fù)平均數(shù)計(jì)算。正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實(shí)、不正常幼苗、和死種子

的百分率總和必須為100(玉米種子活力測(cè)定種苗鑒定標(biāo)準(zhǔn)見表5),平均數(shù)百分率修約到最近似的整數(shù),

修約0.5進(jìn)入最大值中。

表5玉米種子活力測(cè)定種苗鑒定標(biāo)準(zhǔn)(簡(jiǎn)化版)

類型組織器官表型

初生根完整或帶有輕微缺陷,如褪色、有壞死斑點(diǎn)、開

1、根系裂已愈合;若初生根有缺陷,則次生根正常并有足夠的

數(shù)目。

完整或帶有輕微缺陷,如褪色、有壞死斑點(diǎn)、開裂已愈

2、中胚軸

正常幼苗合、稍有彎曲。

完整或帶有輕微缺陷,如褪色、有壞死斑點(diǎn)、稍有彎曲、

3、芽鞘

從頂端開裂少于或等于總長(zhǎng)度的1/3。

完整、近芽鞘頂端伸出,至少達(dá)長(zhǎng)度的1/2,或帶有輕

4、第一片葉

微缺陷,如褪色、有壞死斑點(diǎn)、輕微損傷。

初生根有缺陷,如停滯、缺失、收縮、由初生感染引起

1、根系

的腐爛。

2、中胚軸形成環(huán)狀、螺旋形、嚴(yán)重卷曲,由初生感染引起的腐爛。

頂端損傷、缺失,形成環(huán)狀或螺旋形,嚴(yán)重卷曲或彎曲,

3、芽鞘

不正常幼苗纖細(xì)、基部開裂,從頂端開裂并超過總長(zhǎng)度的1/3。

葉片缺失,延伸長(zhǎng)度不及芽鞘長(zhǎng)度的1/2,撕裂或其他

4、第一片葉

畸形。

兩株連生在一起,先長(zhǎng)芽鞘后長(zhǎng)根,由初生感染引起的

5、幼苗

腐爛。

新鮮不發(fā)芽種子、硬實(shí)和

在測(cè)定末期,未產(chǎn)生發(fā)芽跡象的種子。

死種子

10

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10.2破裂法

參考GB/T3543.4,對(duì)試樣的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行填報(bào)。果種皮破裂種子、胚根鞘破裂種子和果種皮未破

裂種子的百分率按四次重復(fù)平均數(shù)計(jì)算?;诠N皮破裂種子和胚根鞘破裂種子的百分率計(jì)算果種皮胚

根鞘破裂種子的百分率。果種皮破裂種子、胚根鞘破裂種子和果種皮未破裂種子的百分率總和必須為100

(玉米種子活力測(cè)定破裂法鑒定標(biāo)準(zhǔn)見表1),平均數(shù)百分率修約到最近似的整數(shù),修約0.5進(jìn)入最大值

中。

11結(jié)果報(bào)告

11.1種子活力測(cè)定結(jié)果報(bào)告應(yīng)包含以下信息:

——標(biāo)題;

——測(cè)定機(jī)構(gòu)的名稱與地址,進(jìn)行測(cè)定的地點(diǎn);

——測(cè)定證書或報(bào)告的唯一性標(biāo)識(shí)和每頁及總頁數(shù)的標(biāo)識(shí);

——委托方的名稱和地址;

——被測(cè)定種子樣品的說明和明確標(biāo)識(shí);

——測(cè)定種子樣品的特性和狀態(tài);

——測(cè)定種子樣品的接收和進(jìn)行測(cè)定的日期;

——對(duì)所采用測(cè)定方法的標(biāo)識(shí)的明確說明;

——涉及的扦樣程序;

——對(duì)測(cè)定方法的任何偏離、增加或減少以及其他任何與特定的檢驗(yàn)有關(guān)的信息;

——測(cè)定、檢查和導(dǎo)出的結(jié)果,以及對(duì)結(jié)果失效的證明;

——對(duì)估算的測(cè)定結(jié)果不確定度的說明;

——對(duì)測(cè)定證書或報(bào)告內(nèi)容負(fù)責(zé)人員的簽字、職務(wù)或等效標(biāo)識(shí),以及簽發(fā)日期;

——委托測(cè)定,作出本結(jié)果僅對(duì)所測(cè)定樣品有效的聲明;

——未經(jīng)測(cè)定機(jī)構(gòu)書面批準(zhǔn),不得復(fù)制測(cè)定證書或報(bào)告(完整復(fù)制除外)的聲明。

11.2玉米種子活力測(cè)定(加速老化法、抗冷法、冷浸法)發(fā)芽試驗(yàn)原始記錄表編寫格式可參考附錄A。

填報(bào)測(cè)定結(jié)果時(shí),須填報(bào)正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實(shí)、不正常幼苗和死種子的百分率。假如

其中任何一項(xiàng)結(jié)果為零,則將符號(hào)“0.0”填入該格中。

同時(shí)還須填報(bào)采用的標(biāo)準(zhǔn)和發(fā)芽前處理和方法。

11.3玉米種子活力測(cè)定(破裂法)發(fā)芽試驗(yàn)原始記錄表編寫格式可參考附錄B。

填報(bào)測(cè)定結(jié)果時(shí),須填報(bào)果種皮破裂種子、胚根鞘破裂種子、果種皮胚根鞘破裂種子和果種皮未破

裂種子的百分率。假如其中任何一項(xiàng)結(jié)果為零,則將符號(hào)“0.0”填入該格中。

同時(shí)還須填報(bào)采用的標(biāo)準(zhǔn)和發(fā)芽前處理和方法。

11.4玉米種子活力測(cè)定結(jié)果報(bào)告單編寫格式可參考附錄C。

同時(shí)還須填報(bào)采用的種子活力測(cè)定方法及發(fā)芽方式和條件。

11

DB37/T4485—2021

A

A

附錄A

(資料性)

玉米種子活力測(cè)定(加速老化法、抗冷法、冷浸法)發(fā)芽試驗(yàn)原始記錄表

玉米種子活力測(cè)定(加速老化法、抗冷法、冷浸法)發(fā)芽試驗(yàn)原始記錄表可參考表A.1進(jìn)行編寫。

表A.1玉米種子活力測(cè)定(加速老化法、抗冷法、冷浸法)發(fā)芽試驗(yàn)原始記錄表

編號(hào):

樣品編號(hào)檢驗(yàn)日期年月日

作物種類品種名稱

采用標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)地點(diǎn)發(fā)芽實(shí)驗(yàn)室()

儀器、編號(hào)發(fā)芽箱號(hào),分樣器號(hào)。

發(fā)芽前處理和方法

重復(fù)ⅠⅡⅢⅣ

日期正不死正不死正不死正不死

結(jié)果

/%

正常幼苗

新鮮不發(fā)芽

硬實(shí)

不正常幼苗

死種子

發(fā)芽床:實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間:天不正常幼苗種類:

溫度:℃容許誤差:

置床日期:實(shí)際誤差:

備注

檢驗(yàn)員:日期:校核人:日期:審核人:日期:

12

DB37/T4485—2021

B

B

附錄B

(資料性)

玉米種子活力測(cè)定(破裂法)發(fā)芽試驗(yàn)原始記錄表

玉米種子活力測(cè)定(破裂法)發(fā)芽試驗(yàn)原始記錄表可參考表B.1進(jìn)行編寫。

表B.1玉米種子活力測(cè)定(破裂法)發(fā)芽試驗(yàn)原始記錄表

編號(hào):

樣品編號(hào)檢驗(yàn)日期年月日

作物種類品種名稱

采用標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)地點(diǎn)發(fā)芽實(shí)驗(yàn)室()

儀器、編號(hào)發(fā)芽箱號(hào),分樣器號(hào)。

發(fā)芽前處理和方法

重復(fù)ⅠⅡⅢⅣ

日期果胚未果胚未果胚未果胚未

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