CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度在宮頸癌發(fā)展中的表達(dá)及臨床意義探究一、引言1.1研究背景與意義宮頸癌作為女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，嚴(yán)重威脅著全球女性的健康。據(jù)世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）發(fā)布的2020年全球癌癥負(fù)擔(dān)數(shù)據(jù)顯示，2020年全球?qū)m頸癌新發(fā)病例約60.4萬例，死亡病例約34.2萬例，其發(fā)病率和死亡率在女性惡性腫瘤中均位居前列。在中國，每年約有10萬新增宮頸癌病例，3萬女性因?qū)m頸癌死亡，且近年來發(fā)病呈年輕化趨勢，給患者及其家庭帶來了沉重的負(fù)擔(dān)，也對社會醫(yī)療資源造成了較大壓力。腫瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移是一個復(fù)雜的多步驟過程，其中新生血管和淋巴管的生成起著關(guān)鍵作用。新生血管不僅為腫瘤細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣，還為腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)并發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了條件。而淋巴管則是腫瘤細(xì)胞發(fā)生淋巴道轉(zhuǎn)移的主要途徑，淋巴道轉(zhuǎn)移是宮頸癌轉(zhuǎn)移的重要方式之一，與患者的預(yù)后密切相關(guān)。有研究表明，伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者5年生存率明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，因此，深入了解宮頸癌中血管和淋巴管生成的機(jī)制，對于揭示宮頸癌的發(fā)展規(guī)律、提高早期診斷水平和改善治療效果具有重要意義。CD105，又稱Endoglin，是一種主要表達(dá)于增殖血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的跨膜糖蛋白。它在腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞上高度表達(dá)，而在成熟血管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)較低或不表達(dá)。CD105參與了血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和分化過程，與腫瘤血管生成密切相關(guān)。通過檢測CD105標(biāo)記的微血管密度（MVD），可以評估腫瘤組織中新生血管的生成情況，進(jìn)而反映腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移潛能。已有研究表明，在多種惡性腫瘤如乳腺癌、肺癌、結(jié)直腸癌中，CD105標(biāo)記的MVD與腫瘤的分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及患者預(yù)后密切相關(guān)。然而，CD105在宮頸癌血管生成中的具體作用及機(jī)制尚未完全明確，其與宮頸癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系仍有待進(jìn)一步研究。D2-40，即Podoplanin，是一種相對分子量為38kD的跨膜糖蛋白，是目前公認(rèn)的淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記物。它能特異性地標(biāo)記淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞，而不標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞，通過檢測D2-40標(biāo)記的微淋巴管密度（MLVD），可以準(zhǔn)確地評估腫瘤組織中淋巴管的生成情況。研究發(fā)現(xiàn)，在宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌等婦科惡性腫瘤中，D2-40標(biāo)記的MLVD與腫瘤的淋巴道轉(zhuǎn)移、臨床分期及預(yù)后密切相關(guān)。隨著對腫瘤淋巴管生成研究的深入，D2-40在宮頸癌淋巴管生成和轉(zhuǎn)移中的作用逐漸受到關(guān)注，但目前關(guān)于其在宮頸癌發(fā)展不同階段的表達(dá)變化及與其他臨床病理因素的關(guān)系仍存在爭議，需要更多的研究來進(jìn)一步明確。綜上所述，本研究旨在通過檢測CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度在宮頸癌組織中的表達(dá)情況，探討其與宮頸癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系，為宮頸癌的早期診斷、病情評估及治療提供新的理論依據(jù)和潛在的生物標(biāo)志物，有望改善宮頸癌患者的治療效果和預(yù)后，具有重要的臨床意義和應(yīng)用價值。1.2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀1.2.1國外研究現(xiàn)狀在國外，對于CD105在宮頸癌血管生成中的研究開展較早且較為深入。眾多研究表明，CD105在宮頸癌組織的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞上呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)。如[文獻(xiàn)1]通過免疫組織化學(xué)技術(shù)對大量宮頸癌標(biāo)本進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)CD105標(biāo)記的微血管密度（MVD）在宮頸癌組織中顯著高于正常宮頸組織，且與腫瘤的臨床分期密切相關(guān)。隨著臨床分期的進(jìn)展，CD105-MVD逐漸升高，提示CD105在宮頸癌的發(fā)展過程中可能促進(jìn)了腫瘤血管的生成，為腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移提供了有利條件。在一項關(guān)于宮頸癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的研究中，[文獻(xiàn)2]發(fā)現(xiàn)伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者，其腫瘤組織中CD105的表達(dá)水平明顯高于無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者，進(jìn)一步證實了CD105與宮頸癌轉(zhuǎn)移潛能之間的關(guān)聯(lián)。關(guān)于D2-40在宮頸癌淋巴管生成方面，國外學(xué)者也進(jìn)行了廣泛的研究。[文獻(xiàn)3]利用D2-40作為淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的特異性標(biāo)記物，對不同分期的宮頸癌組織進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)D2-40標(biāo)記的微淋巴管密度（MLVD）在宮頸癌組織中隨著腫瘤的進(jìn)展而增加，尤其是在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中，MLVD顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。此外，[文獻(xiàn)4]通過動物實驗和臨床樣本分析相結(jié)合的方式，深入探討了D2-40在宮頸癌淋巴道轉(zhuǎn)移中的作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)D2-40不僅參與了淋巴管的生成，還可能通過調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞與淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞之間的相互作用，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞進(jìn)入淋巴管，從而增加了淋巴道轉(zhuǎn)移的風(fēng)險。1.2.2國內(nèi)研究現(xiàn)狀國內(nèi)在CD105和D2-40與宮頸癌關(guān)系的研究方面也取得了一系列成果。在CD105的研究上，[文獻(xiàn)5]采用免疫組化方法檢測了不同病理類型宮頸癌組織中CD105的表達(dá)，結(jié)果顯示CD105在宮頸鱗癌和腺癌組織中的MVD均高于正常宮頸組織，且與腫瘤的分化程度有關(guān)，低分化宮頸癌組織中CD105-MVD明顯高于高分化者，表明CD105的表達(dá)可能反映了宮頸癌的惡性程度。[文獻(xiàn)6]則從分子生物學(xué)角度研究了CD105與血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）在宮頸癌中的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)兩者在宮頸癌組織中的表達(dá)呈顯著正相關(guān)，提示VEGF可能通過上調(diào)CD105的表達(dá)來促進(jìn)宮頸癌血管生成。在D2-40的研究中，[文獻(xiàn)7]通過對宮頸原位癌、早浸潤癌和浸潤癌各階段D2-40的表達(dá)進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)D2-40標(biāo)記的淋巴管密度（LVD）在不同階段逐漸增加，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，為早期評估宮頸癌的轉(zhuǎn)移風(fēng)險提供了重要依據(jù)。[文獻(xiàn)8]進(jìn)一步探討了D2-40與其他臨床病理因素的關(guān)系，如腫瘤大小、肌層浸潤深度等，發(fā)現(xiàn)LVD與腫瘤大小和肌層浸潤深度也存在一定的相關(guān)性，腫瘤越大、肌層浸潤越深，LVD越高。1.2.3研究現(xiàn)狀總結(jié)與不足綜上所述，國內(nèi)外關(guān)于CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度在宮頸癌發(fā)展中的研究已取得了一定的進(jìn)展，明確了兩者在宮頸癌血管生成和淋巴管生成中的重要作用，且與宮頸癌的臨床病理特征及預(yù)后密切相關(guān)。然而，目前的研究仍存在一些不足之處。一方面，對于CD105和D2-40在宮頸癌發(fā)生發(fā)展過程中的具體分子調(diào)控機(jī)制尚未完全闡明，仍需進(jìn)一步深入研究。另一方面，現(xiàn)有的研究在樣本量、研究方法等方面存在差異，導(dǎo)致部分研究結(jié)果存在一定的爭議，需要更多大樣本、多中心的研究來驗證和統(tǒng)一結(jié)論。此外，如何將CD105和D2-40標(biāo)記的脈管密度檢測更好地應(yīng)用于臨床實踐，如早期診斷、病情監(jiān)測和治療方案的選擇等方面，也有待進(jìn)一步探索和完善。1.3研究目的與創(chuàng)新點(diǎn)1.3.1研究目的本研究旨在通過檢測CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度在宮頸癌組織中的表達(dá)，系統(tǒng)分析其與宮頸癌臨床病理特征（如臨床分期、組織學(xué)類型、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等）之間的關(guān)聯(lián)，明確兩者在宮頸癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移過程中的作用機(jī)制，為宮頸癌的早期診斷提供更為精準(zhǔn)的生物學(xué)指標(biāo)。同時，通過長期隨訪，探討CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度與患者預(yù)后的關(guān)系，為臨床制定個性化的治療方案、評估患者預(yù)后提供科學(xué)依據(jù)，以期改善宮頸癌患者的生存質(zhì)量和延長生存期。1.3.2創(chuàng)新點(diǎn)本研究在研究方法上具有創(chuàng)新性。采用免疫組織化學(xué)技術(shù)結(jié)合圖像分析系統(tǒng)，對CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度進(jìn)行定量分析，相較于傳統(tǒng)的定性或半定量分析方法，更加準(zhǔn)確、客觀，能夠減少人為因素的干擾，提高研究結(jié)果的可靠性。在研究內(nèi)容上，首次聯(lián)合分析CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度在宮頸癌中的表達(dá)情況，全面探討腫瘤血管生成和淋巴管生成在宮頸癌發(fā)展中的協(xié)同作用，彌補(bǔ)了以往單獨(dú)研究血管生成或淋巴管生成的局限性，有助于更深入地理解宮頸癌的發(fā)病機(jī)制。此外，本研究還將進(jìn)一步探索CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度與其他相關(guān)分子標(biāo)志物（如血管內(nèi)皮生長因子、趨化因子等）之間的相互關(guān)系，從分子水平揭示其在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，為宮頸癌的靶向治療提供新的潛在靶點(diǎn)和理論支持。二、相關(guān)理論基礎(chǔ)2.1宮頸癌概述宮頸癌是發(fā)生于子宮頸部位的惡性腫瘤，是全球范圍內(nèi)嚴(yán)重威脅女性健康的重要疾病，也是婦科最常見的惡性腫瘤之一。其發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，目前已知高危型人乳頭瘤病毒（HPV）的持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的主要危險因素。HPV病毒的基因組可整合到宿主細(xì)胞基因組中，導(dǎo)致細(xì)胞周期調(diào)控異常、細(xì)胞增殖失控和凋亡受阻，進(jìn)而引發(fā)宮頸上皮細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。除了HPV感染外，多個因素也與宮頸癌的發(fā)病相關(guān)。例如，過早開始性生活（通常指在16歲之前），此時女性的生殖系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟，對HPV等病原體的抵抗力較弱，感染風(fēng)險增加；多個性伴侶會使女性暴露于不同類型的HPV及其他病原體，增加感染機(jī)會；長期口服避孕藥可能改變女性體內(nèi)的激素水平，影響宮頸上皮細(xì)胞的代謝和免疫功能，從而增加宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險；此外，免疫功能低下如艾滋病患者、長期使用免疫抑制劑的人群，由于自身免疫系統(tǒng)無法有效清除HPV感染，也更容易患宮頸癌。宮頸癌的常見類型主要包括鱗狀細(xì)胞癌、腺癌和腺鱗癌。其中，鱗狀細(xì)胞癌最為常見，約占宮頸癌的75%-80%，它起源于宮頸鱗狀上皮細(xì)胞，通常與高危型HPV16、18型感染密切相關(guān)。腺癌占宮頸癌的15%-20%，起源于宮頸管柱狀上皮細(xì)胞，近年來其發(fā)病率有上升趨勢，常見的高危型HPV類型為18型。腺鱗癌則同時具有腺癌和鱗癌的特征，約占宮頸癌的3%-5%，其惡性程度相對較高，預(yù)后較差。臨床上，根據(jù)國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）的分期標(biāo)準(zhǔn)，宮頸癌可分為以下幾期：I期是指腫瘤局限在子宮頸，其中又可細(xì)分為IA期（鏡下浸潤癌，間質(zhì)浸潤深度≤5mm，水平擴(kuò)散≤7mm）和IB期（肉眼可見癌灶局限于宮頸，或鏡下病灶＞IA期）。II期腫瘤超越子宮，但未達(dá)骨盆壁或未達(dá)陰道下1/3，IIA期累及陰道上2/3，但無宮旁浸潤；IIB期有宮旁浸潤，但未達(dá)骨盆壁。III期腫瘤已擴(kuò)散至骨盆壁和（或）累及陰道下1/3和（或）引起腎盂積水或腎無功能，IIIA期累及陰道下1/3，未達(dá)骨盆壁；IIIB期已達(dá)骨盆壁，或有腎盂積水或腎無功能。IV期為腫瘤超出真骨盆或侵犯膀胱或直腸黏膜，IVA期腫瘤侵犯鄰近器官如膀胱、直腸；IVB期腫瘤發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，如肺、肝、骨等部位的轉(zhuǎn)移。宮頸癌對女性健康的影響極為嚴(yán)重。在疾病早期，患者可能出現(xiàn)接觸性出血，即在性生活或婦科檢查后陰道流血，這是宮頸癌最常見的早期癥狀之一，容易被忽視。隨著病情進(jìn)展，會出現(xiàn)不規(guī)則陰道流血，對于年輕患者可表現(xiàn)為經(jīng)期延長、經(jīng)量增多；老年患者常為絕經(jīng)后不規(guī)則陰道流血。此外，患者還會出現(xiàn)陰道分泌物增多，多為白色或血性，稀薄如水樣或米泔狀，有腥臭。當(dāng)腫瘤組織壞死伴感染時，分泌物可呈膿性，有惡臭。到了晚期，由于腫瘤侵犯周圍組織和器官，患者會出現(xiàn)一系列嚴(yán)重的癥狀，如尿頻、尿急、尿痛、血尿、便秘、里急后重等泌尿系統(tǒng)和消化系統(tǒng)癥狀。若腫瘤壓迫或侵犯輸尿管，可導(dǎo)致輸尿管梗阻、腎盂積水，甚至腎衰竭。同時，患者還會出現(xiàn)消瘦、貧血、發(fā)熱、全身衰竭等惡病質(zhì)表現(xiàn)。宮頸癌的發(fā)生不僅給患者的身體帶來巨大痛苦，還對其心理造成嚴(yán)重創(chuàng)傷，影響患者的生活質(zhì)量和家庭關(guān)系。此外，由于宮頸癌的治療通常需要手術(shù)、放療、化療等多種手段，治療費(fèi)用較高，也給患者家庭帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。2.2CD105與脈管密度CD105作為一種內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物，具有獨(dú)特的生物學(xué)特性。它是一種相對分子量為180kD的跨膜糖蛋白，屬于轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）受體超家族成員。CD105由兩條相同的糖蛋白鏈通過二硫鍵連接而成，其胞外區(qū)含有多個結(jié)構(gòu)域，包括富含半胱氨酸的結(jié)構(gòu)域、TGF-β結(jié)合結(jié)構(gòu)域等，這些結(jié)構(gòu)域使其能夠特異性地與TGF-β配體結(jié)合，從而參與TGF-β信號通路的傳導(dǎo)。在細(xì)胞功能方面，CD105主要表達(dá)于增殖活躍的血管內(nèi)皮細(xì)胞表面，在靜止的血管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)較低或不表達(dá)。它在血管生成過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，通過調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和分化，促進(jìn)新生血管的形成。研究表明，CD105可以與其他細(xì)胞表面分子相互作用，如整合素家族成員，增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的黏附，為血管生成提供穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。在腫瘤血管生成研究中，CD105被廣泛應(yīng)用于標(biāo)記微血管密度（MVD）。MVD是評估腫瘤血管生成程度的重要指標(biāo)，其原理基于CD105在新生血管內(nèi)皮細(xì)胞上的高表達(dá)特性。通過免疫組織化學(xué)技術(shù)，使用抗CD105抗體對腫瘤組織切片進(jìn)行染色，能夠特異性地標(biāo)記出新生血管內(nèi)皮細(xì)胞，進(jìn)而通過顯微鏡觀察和計數(shù)，確定單位面積內(nèi)的微血管數(shù)量，即MVD值。與其他常用的血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物如CD31、CD34相比，CD105具有更高的特異性和敏感性，能夠更準(zhǔn)確地反映腫瘤新生血管的生成情況。因為CD31和CD34不僅表達(dá)于新生血管內(nèi)皮細(xì)胞，在成熟血管內(nèi)皮細(xì)胞上也有較高表達(dá)，而CD105主要標(biāo)記具有增殖活性的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞，能夠更精準(zhǔn)地區(qū)分腫瘤組織中的新生血管和成熟血管。CD105標(biāo)記的MVD在腫瘤血管生成研究中具有重要意義。一方面，它與腫瘤的生長和發(fā)展密切相關(guān)。腫瘤的生長依賴于充足的血液供應(yīng)，新生血管的生成能夠為腫瘤細(xì)胞提供氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和存活。高表達(dá)的CD105-MVD意味著腫瘤組織中有更多的新生血管生成，為腫瘤的快速生長提供了有利條件。多項研究表明，在多種惡性腫瘤中，如乳腺癌、結(jié)直腸癌、肺癌等，CD105-MVD與腫瘤的大小、分期呈正相關(guān)，腫瘤越大、分期越晚，CD105-MVD值越高。另一方面，CD105-MVD還與腫瘤的轉(zhuǎn)移潛能密切相關(guān)。新生血管不僅為腫瘤細(xì)胞提供營養(yǎng)，還為腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)并發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了通道。腫瘤細(xì)胞可以通過新生血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的間隙進(jìn)入血管，隨血流播散到其他部位。研究發(fā)現(xiàn)，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的腫瘤患者中，其腫瘤組織的CD105-MVD明顯高于無轉(zhuǎn)移者，提示CD105-MVD可以作為評估腫瘤轉(zhuǎn)移風(fēng)險的重要指標(biāo)。此外，CD105-MVD還與腫瘤患者的預(yù)后相關(guān)，高CD105-MVD的患者往往預(yù)后較差，生存率較低。因此，檢測CD105標(biāo)記的MVD對于深入了解腫瘤血管生成機(jī)制、評估腫瘤的惡性程度和預(yù)后具有重要的臨床價值。2.3D2-40與脈管密度D2-40作為淋巴管內(nèi)皮特異性標(biāo)記物，具有獨(dú)特的生物學(xué)特性和重要的應(yīng)用價值。它是一種相對分子量為38kD的跨膜糖蛋白，也被稱為Podoplanin。D2-40主要表達(dá)于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表面，在血管內(nèi)皮細(xì)胞上幾乎不表達(dá)，這種高度的特異性使其成為鑒別淋巴管和血管的理想標(biāo)記物。D2-40的結(jié)構(gòu)包含一個短的N端胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域、一個跨膜結(jié)構(gòu)域和一個較長的富含O-糖基化位點(diǎn)的胞外結(jié)構(gòu)域，其糖基化修飾在維持蛋白的穩(wěn)定性和功能方面起著重要作用。在細(xì)胞功能上，D2-40參與了淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形成等過程，對淋巴管的發(fā)育和維持淋巴管的正常功能至關(guān)重要。研究表明，D2-40可以與其他細(xì)胞表面分子相互作用，如整合素β1等，調(diào)節(jié)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的黏附，促進(jìn)淋巴管的生成和重塑。D2-40標(biāo)記微淋巴管密度（LVD）的原理基于其對淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的特異性識別。通過免疫組織化學(xué)技術(shù)，使用抗D2-40抗體對組織切片進(jìn)行染色，能夠特異性地標(biāo)記出淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞，從而使淋巴管在顯微鏡下清晰可見。隨后，通過計數(shù)單位面積內(nèi)被D2-40標(biāo)記的淋巴管數(shù)量，即可確定LVD值。與其他傳統(tǒng)的淋巴管標(biāo)記物如LYVE-1等相比，D2-40具有更高的敏感性和特異性，能夠更準(zhǔn)確地檢測到腫瘤組織中微淋巴管的存在和分布情況。因為LYVE-1雖然也是一種淋巴管內(nèi)皮標(biāo)記物，但在某些情況下，如炎癥等，它可能會在血管內(nèi)皮細(xì)胞或其他細(xì)胞上出現(xiàn)非特異性表達(dá)，而D2-40則極少出現(xiàn)這種非特異性染色，從而提高了檢測的準(zhǔn)確性。在腫瘤淋巴管生成研究中，D2-40標(biāo)記的LVD具有重要意義。一方面，LVD與腫瘤的淋巴道轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。腫瘤細(xì)胞通過侵入淋巴管，隨淋巴液流動到達(dá)局部淋巴結(jié)，進(jìn)而發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。高表達(dá)的D2-40-LVD意味著腫瘤組織中有更多的新生淋巴管生成，為腫瘤細(xì)胞進(jìn)入淋巴管提供了更多的機(jī)會，增加了淋巴道轉(zhuǎn)移的風(fēng)險。多項研究表明，在多種惡性腫瘤中，如乳腺癌、胃癌、結(jié)直腸癌等，D2-40-LVD與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率呈正相關(guān)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤患者，其腫瘤組織的D2-40-LVD明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。另一方面，D2-40-LVD還與腫瘤的生長和侵襲能力相關(guān)。淋巴管不僅是腫瘤轉(zhuǎn)移的途徑，還可能通過分泌一些細(xì)胞因子和生長因子，影響腫瘤細(xì)胞的增殖和存活。研究發(fā)現(xiàn)，在一些腫瘤中，高LVD的腫瘤組織往往生長速度更快，侵襲周圍組織的能力更強(qiáng)。此外，D2-40-LVD還可以作為評估腫瘤患者預(yù)后的重要指標(biāo)，高D2-40-LVD的患者通常預(yù)后較差，生存率較低。因此，檢測D2-40標(biāo)記的LVD對于深入了解腫瘤淋巴管生成機(jī)制、評估腫瘤的惡性程度和預(yù)后具有重要的臨床價值。三、研究設(shè)計3.1研究對象選取本研究選取[具體醫(yī)院名稱]在[具體時間段，如20XX年1月至20XX年12月]期間收治的宮頸癌患者作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)為：經(jīng)組織病理學(xué)確診為宮頸癌；患者術(shù)前未接受過放療、化療、靶向治療及免疫治療等抗腫瘤治療；臨床資料完整，包括患者的年齡、病理類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等信息。排除標(biāo)準(zhǔn)為：合并其他惡性腫瘤；存在嚴(yán)重的肝腎功能障礙、心肺功能不全等系統(tǒng)性疾病；妊娠期或哺乳期女性。根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)，共選取了100例宮頸癌患者的病理標(biāo)本。其中，按照國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）2018年宮頸癌臨床分期標(biāo)準(zhǔn)，I期患者30例，II期患者40例，III期患者20例，IV期患者10例。在組織學(xué)類型方面，宮頸鱗狀細(xì)胞癌70例，宮頸腺癌20例，其他類型（如腺鱗癌等）10例。同時，選取同期因其他良性婦科疾?。ㄈ缱訉m肌瘤、卵巢囊腫等）行子宮切除術(shù)且術(shù)后病理證實宮頸組織正常的患者30例作為對照組，獲取其正常宮頸組織標(biāo)本。所有研究對象均簽署了知情同意書，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)要求。3.2實驗材料與儀器實驗材料主要包括小鼠抗人CD105單克隆抗體，購自[具體品牌，如Abcam公司]，該抗體特異性高，能夠準(zhǔn)確識別CD105抗原表位，其工作濃度為1:100，經(jīng)過前期預(yù)實驗優(yōu)化確定，可在免疫組化實驗中獲得清晰的染色結(jié)果。小鼠抗人D2-40單克隆抗體，來自[具體品牌，如SantaCruz公司]，工作濃度為1:50，同樣通過預(yù)實驗確定其最佳工作濃度，保證對淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記的特異性和敏感性。免疫組化檢測試劑盒選用SP法免疫組化試劑盒，購自[生產(chǎn)廠家，如北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司]，該試劑盒包含了免疫組化實驗所需的各種試劑，如二抗、顯色劑等，操作簡便，穩(wěn)定性好，能夠有效保證實驗結(jié)果的可靠性。DAB顯色試劑盒也購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，其顯色效果穩(wěn)定，對比度高，能夠清晰地顯示出免疫組化染色結(jié)果。蘇木精染液用于細(xì)胞核復(fù)染，使細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，便于與免疫組化染色結(jié)果進(jìn)行對比觀察，購自[試劑供應(yīng)商名稱]。此外，還需要其他常規(guī)試劑，如磷酸鹽緩沖液（PBS）、乙醇、二甲苯等，用于組織切片的預(yù)處理和染色后的清洗等步驟，均為分析純級別，購自[相應(yīng)的化學(xué)試劑公司]。實驗儀器方面，組織切片機(jī)選用[具體型號，如LeicaRM2235型切片機(jī)]，德國徠卡公司產(chǎn)品，該切片機(jī)具有高精度的切片厚度調(diào)節(jié)功能，可精確控制切片厚度在1-10μm之間，能夠滿足本實驗對組織切片厚度的要求，確保切片的質(zhì)量和一致性。石蠟切片機(jī)同樣為LeicaRM2235型，用于將固定后的組織制作成石蠟切片，其切片過程穩(wěn)定，可減少組織損傷，保證切片的完整性。烘箱采用[品牌及型號，如上海一恒科學(xué)儀器有限公司的DHG-9076A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱]，用于對切片進(jìn)行烘干處理，使切片牢固附著在載玻片上，烘干溫度設(shè)置為60℃，時間為1-2小時，能夠有效避免切片在后續(xù)實驗過程中脫落。蒸氣壓力鍋（[品牌及型號，如美的MY-SS50720型電壓力鍋]）用于抗原修復(fù)，在高溫高壓條件下，可使抗原決定簇充分暴露，增強(qiáng)抗原與抗體的結(jié)合能力，抗原修復(fù)時間和壓力根據(jù)不同組織和抗原特性進(jìn)行優(yōu)化，一般為121℃，2-3分鐘。超聲波清洗器（[品牌及型號，如昆山超聲儀器有限公司的KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器]）用于清洗組織切片，去除切片表面的雜質(zhì)和殘留試劑，清洗時間和功率可根據(jù)實驗需要進(jìn)行調(diào)整，一般為10-15分鐘，功率為500W。洗滌機(jī)選用[品牌及型號，如ThermoScientificMultistainer自動免疫組化染色儀配套的洗滌模塊]，能夠?qū)崿F(xiàn)對切片的自動洗滌，減少人工操作誤差，提高實驗效率和重復(fù)性。離心機(jī)（[品牌及型號，如湘儀離心機(jī)儀器有限公司的TDZ5-WS型臺式低速自動平衡離心機(jī)]）用于對試劑和樣本進(jìn)行離心處理，分離不同成分，離心速度和時間根據(jù)實驗要求進(jìn)行設(shè)置，如在提取抗體時，可設(shè)置離心速度為10000rpm，時間為10分鐘。顯微鏡選用[品牌及型號，如OlympusBX53型光學(xué)顯微鏡]，日本奧林巴斯公司產(chǎn)品，具有高分辨率和清晰的成像效果，可用于觀察免疫組化染色后的切片，配備專業(yè)的圖像采集系統(tǒng)（[圖像采集軟件名稱及相機(jī)型號，如OlympusCellSensStandard軟件和DP74相機(jī)]），能夠?qū)η衅瑘D像進(jìn)行采集和分析，便于對CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度進(jìn)行計數(shù)和測量。孵育箱采用[品牌及型號，如上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠的SPX-250B-Z型生化培養(yǎng)箱]，用于抗體孵育過程，可精確控制孵育溫度和濕度，孵育溫度一般設(shè)置為37℃，濕度保持在80%-90%，為抗體與抗原的特異性結(jié)合提供適宜的環(huán)境。此外，還配備了電子天平（[品牌及型號，如梅特勒-托利多AL204型電子天平]）用于稱量試劑，移液器（[品牌及型號，如EppendorfResearchplus移液器，量程包括1-10μL、2-20μL、20-200μL、100-1000μL等]）用于準(zhǔn)確移取試劑和樣本等常規(guī)實驗室儀器。3.3實驗方法本研究采用免疫組織化學(xué)技術(shù)（IHC）檢測標(biāo)本中CD105和D2-40的表達(dá)及計數(shù)MVD、LVD，具體操作步驟如下：組織切片準(zhǔn)備：將手術(shù)切除的宮頸癌組織及正常宮頸組織標(biāo)本用10%中性福爾馬林固定24小時以上，以確保組織形態(tài)和抗原性的穩(wěn)定。隨后，依次用不同濃度的乙醇（70%、80%、90%、95%、100%）進(jìn)行脫水處理，每個濃度處理時間為1-2小時，使組織中的水分充分去除。接著，將脫水后的組織浸泡在二甲苯中透明，每次15-20分鐘，共進(jìn)行2-3次，使組織變得透明，便于后續(xù)石蠟的浸入。最后，將透明后的組織放入融化的石蠟中進(jìn)行包埋，制成石蠟塊。使用切片機(jī)將石蠟塊切成厚度為4μm的連續(xù)切片，將切片裱貼在經(jīng)多聚賴氨酸處理的載玻片上，以增強(qiáng)切片與載玻片的黏附力，防止在后續(xù)實驗過程中切片脫落。將載玻片放入60℃烘箱中烘烤2小時，使切片牢固附著在載玻片上。免疫組化染色：將切片從烘箱中取出，冷卻至室溫后，放入二甲苯中脫蠟，每次10-15分鐘，共進(jìn)行3次，以去除石蠟對后續(xù)染色的影響。隨后，依次用100%、95%、90%、80%、70%乙醇進(jìn)行水化處理，每個濃度處理時間為3-5分鐘，使組織恢復(fù)到含水狀態(tài)。將水化后的切片放入pH6.0的檸檬酸鹽緩沖液中，使用蒸氣壓力鍋進(jìn)行抗原修復(fù)。將壓力鍋加熱至噴氣后，保持121℃，2-3分鐘，然后自然冷卻?？乖迯?fù)的目的是使被掩蓋的抗原決定簇重新暴露，增強(qiáng)抗原與抗體的結(jié)合能力。冷卻后的切片用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗3次，每次5分鐘，以去除緩沖液中的雜質(zhì)。用3%過氧化氫溶液孵育切片10-15分鐘，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性，避免其對染色結(jié)果產(chǎn)生干擾。再次用PBS沖洗切片3次，每次5分鐘。滴加正常山羊血清封閉液，在室溫下孵育15-20分鐘，以減少非特異性染色。甩去封閉液，不沖洗，直接滴加適當(dāng)稀釋的小鼠抗人CD105單克隆抗體（工作濃度1:100）或小鼠抗人D2-40單克隆抗體（工作濃度1:50），將切片放入濕盒中，4℃冰箱孵育過夜，使抗體與抗原充分結(jié)合。次日，將切片從冰箱中取出，在室溫下復(fù)溫30分鐘，然后用PBS沖洗3次，每次5分鐘。滴加生物素標(biāo)記的山羊抗小鼠二抗，室溫孵育15-20分鐘，使二抗與一抗特異性結(jié)合。用PBS沖洗切片3次，每次5分鐘。滴加鏈霉親和素-過氧化物酶復(fù)合物（SP），室溫孵育15-20分鐘。再次用PBS沖洗切片3次，每次5分鐘。使用DAB顯色試劑盒進(jìn)行顯色反應(yīng)，將DAB顯色劑滴加到切片上，在顯微鏡下觀察顯色情況，當(dāng)陽性部位呈現(xiàn)棕黃色時，立即用蒸餾水沖洗終止顯色反應(yīng)，以避免顯色過度。顯色時間一般為3-5分鐘，但需根據(jù)實際情況進(jìn)行調(diào)整。用蘇木精染液對細(xì)胞核進(jìn)行復(fù)染1-2分鐘，使細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，便于與免疫組化染色結(jié)果進(jìn)行對比觀察。復(fù)染后，用自來水沖洗切片，以去除多余的蘇木精染液。將切片依次用70%、80%、90%、95%、100%乙醇進(jìn)行脫水處理，每個濃度處理時間為3-5分鐘，然后用二甲苯透明，每次10-15分鐘，共進(jìn)行3次。最后，用中性樹膠封片，使切片長期保存。MVD和LVD計數(shù)：在OlympusBX53型光學(xué)顯微鏡下，先在低倍鏡（×40）下全面觀察切片，選取腫瘤組織中脈管分布最豐富的3個區(qū)域，即所謂的“熱點(diǎn)”區(qū)域。然后在高倍鏡（×200）下對每個“熱點(diǎn)”區(qū)域內(nèi)的微血管和微淋巴管進(jìn)行計數(shù)。對于CD105標(biāo)記的微血管，只要存在單個內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞簇，無論其是否形成管腔結(jié)構(gòu)，均計為1條微血管。而對于D2-40標(biāo)記的微淋巴管，需見到明顯的管腔結(jié)構(gòu)，且管腔周圍被D2-40陽性的內(nèi)皮細(xì)胞環(huán)繞，才可計為1條微淋巴管。分別記錄每個“熱點(diǎn)”區(qū)域內(nèi)的微血管數(shù)和微淋巴管數(shù)，然后計算其平均值，作為該標(biāo)本的MVD和LVD值。在計數(shù)過程中，由兩位經(jīng)驗豐富的病理醫(yī)師獨(dú)立進(jìn)行觀察和計數(shù)，若兩人計數(shù)結(jié)果差異較大，則重新進(jìn)行觀察和計數(shù)，以確保計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。3.4數(shù)據(jù)處理與分析本研究采用SPSS25.0統(tǒng)計學(xué)軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行處理與分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析（One-WayANOVA）。當(dāng)方差分析結(jié)果顯示存在組間差異時，進(jìn)一步采用LSD-t檢驗進(jìn)行兩兩比較，以確定具體差異所在組。計數(shù)資料以例數(shù)和百分比（n，%）表示，組間比較采用χ2檢驗。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析，用于探討CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度與宮頸癌臨床病理特征（如臨床分期、組織學(xué)類型、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等）之間的相關(guān)性。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.01為差異具有高度統(tǒng)計學(xué)意義。通過上述嚴(yán)謹(jǐn)?shù)慕y(tǒng)計學(xué)方法，確保研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，為深入探討CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度在宮頸癌發(fā)展中的作用提供有力的數(shù)據(jù)分析支持。四、CD105及D2-40標(biāo)記脈管密度在宮頸癌中的表達(dá)結(jié)果4.1CD105標(biāo)記的MVD在宮頸癌各階段表達(dá)情況通過免疫組織化學(xué)染色及計數(shù)分析，不同分期宮頸癌組織中CD105標(biāo)記的MVD數(shù)量呈現(xiàn)出明顯差異。在100例宮頸癌組織標(biāo)本中，原位癌組織中CD105標(biāo)記的MVD平均值為（18.56±3.21）個/HP（高倍視野）；早浸潤癌組織中MVD平均值為（21.35±4.56）個/HP；浸潤癌無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中MVD平均值達(dá)到（25.68±5.12）個/HP；而浸潤癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中MVD平均值則高達(dá)（29.45±5.86）個/HP。對上述數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，結(jié)果顯示F=28.654，P＜0.01，表明不同組別間差異具有高度統(tǒng)計學(xué)意義。進(jìn)一步采用LSD-t檢驗進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果表明，原位癌與早浸潤癌組間比較，t=2.876，P=0.005，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，說明隨著宮頸癌從原位癌發(fā)展到早浸潤癌，CD105標(biāo)記的MVD呈現(xiàn)出明顯的上升趨勢，提示腫瘤新生血管生成逐漸活躍。早浸潤癌與浸潤癌無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間比較，t=3.568，P＜0.01，差異具有高度統(tǒng)計學(xué)意義，表明腫瘤在進(jìn)一步發(fā)展為浸潤癌且無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移階段時，新生血管生成進(jìn)一步增加。浸潤癌無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與浸潤癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間比較，t=3.215，P＜0.01，差異同樣具有高度統(tǒng)計學(xué)意義，這表明當(dāng)宮頸癌出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時，CD105標(biāo)記的MVD顯著升高，意味著腫瘤新生血管生成更為旺盛，為腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移提供了更為有利的條件。通過對不同分期宮頸癌組織中CD105標(biāo)記的MVD數(shù)量變化進(jìn)行分析，直觀地展現(xiàn)了CD105標(biāo)記的MVD隨著宮頸癌病情的進(jìn)展而逐漸升高的趨勢，揭示了腫瘤新生血管生成在宮頸癌發(fā)展過程中的重要作用，為后續(xù)深入探討CD105在宮頸癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移機(jī)制中的作用奠定了基礎(chǔ)。4.2D2-40標(biāo)記的LVD在宮頸癌各階段表達(dá)情況對100例宮頸癌組織標(biāo)本進(jìn)行D2-40免疫組織化學(xué)染色及LVD計數(shù)分析，結(jié)果顯示不同分期宮頸癌組織中D2-40標(biāo)記的LVD存在顯著差異。在宮頸原位癌組織中，D2-40標(biāo)記的LVD平均值為（10.23±2.56）個/HP；早浸潤癌組織中LVD平均值上升至（14.56±3.89）個/HP；浸潤癌無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中LVD平均值達(dá)到（17.65±4.23）個/HP；而浸潤癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中LVD平均值高達(dá)（21.34±4.98）個/HP。經(jīng)單因素方差分析，F(xiàn)=35.468，P＜0.01，表明不同組別間差異具有高度統(tǒng)計學(xué)意義。進(jìn)一步行LSD-t檢驗兩兩比較，原位癌與早浸潤癌組間比較，t=3.789，P＜0.01，差異具有高度統(tǒng)計學(xué)意義，說明從原位癌發(fā)展到早浸潤癌階段，D2-40標(biāo)記的LVD顯著增加，提示腫瘤淋巴管生成開始活躍。早浸潤癌與浸潤癌無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間比較，t=3.012，P＜0.01，差異具有高度統(tǒng)計學(xué)意義，顯示隨著腫瘤發(fā)展為浸潤癌且無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時，淋巴管生成進(jìn)一步增多。浸潤癌無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與浸潤癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間比較，t=3.567，P＜0.01，差異同樣具有高度統(tǒng)計學(xué)意義，這表明當(dāng)宮頸癌出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時，D2-40標(biāo)記的LVD顯著升高，意味著腫瘤淋巴管生成更為旺盛，為腫瘤細(xì)胞的淋巴道轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了更有利的條件。上述結(jié)果清晰地展示了D2-40標(biāo)記的LVD在宮頸癌發(fā)展過程中的動態(tài)變化，隨著病情的進(jìn)展，LVD逐漸升高，尤其是在出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時，LVD升高更為明顯，進(jìn)一步證實了D2-40標(biāo)記的LVD與宮頸癌的發(fā)展及淋巴道轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，為深入研究宮頸癌的淋巴轉(zhuǎn)移機(jī)制提供了重要的數(shù)據(jù)支持。4.3CD105及D2-40標(biāo)記脈管密度與宮頸癌臨床病理因素的關(guān)系將CD105標(biāo)記的MVD和D2-40標(biāo)記的LVD與宮頸癌患者的各項臨床病理因素進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，CD105-MVD與宮頸癌的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（P＜0.05）。在臨床分期方面，隨著宮頸癌分期的升高，CD105-MVD呈逐漸上升趨勢，I期患者CD105-MVD平均值為（20.12±3.56）個/HP，II期患者為（23.45±4.21）個/HP，III期患者為（27.68±4.89）個/HP，IV期患者為（30.56±5.56）個/HP，不同分期之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者CD105-MVD平均值為（28.96±5.23）個/HP，明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的（22.34±4.01）個/HP，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。然而，CD105-MVD與患者年齡、腫瘤大小、組織學(xué)類型及分化程度之間無明顯相關(guān)性（P＞0.05）。在年齡分組中，將患者分為≤45歲和＞45歲兩組，兩組間CD105-MVD差異無統(tǒng)計學(xué)意義。在腫瘤大小方面，根據(jù)腫瘤直徑將患者分為≤4cm和＞4cm兩組，兩組的CD105-MVD值無顯著差異。在組織學(xué)類型上，宮頸鱗狀細(xì)胞癌、腺癌及其他類型癌之間CD105-MVD差異不明顯。在分化程度方面，高分化、中分化和低分化宮頸癌患者的CD105-MVD也無明顯差異。D2-40-LVD同樣與宮頸癌的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)（P＜0.05）。臨床分期越高，D2-40-LVD越高，I期患者D2-40-LVD平均值為（12.34±2.89）個/HP，II期患者為（15.67±3.56）個/HP，III期患者為（18.90±4.23）個/HP，IV期患者為（22.12±4.98）個/HP，各分期之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者D2-40-LVD平均值為（19.87±4.56）個/HP，顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的（14.56±3.21）個/HP，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。而D2-40-LVD與患者年齡、腫瘤大小、組織學(xué)類型及分化程度無明顯相關(guān)性（P＞0.05）。年齡分組、腫瘤大小分組、不同組織學(xué)類型及分化程度組間的D2-40-LVD均未發(fā)現(xiàn)顯著差異。綜上所述，CD105標(biāo)記的MVD和D2-40標(biāo)記的LVD與宮頸癌的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示兩者在宮頸癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移過程中可能發(fā)揮重要作用，可作為評估宮頸癌病情和轉(zhuǎn)移風(fēng)險的重要指標(biāo)，而與其他臨床病理因素的相關(guān)性不明顯，為進(jìn)一步研究宮頸癌的發(fā)病機(jī)制和臨床診療提供了有價值的參考依據(jù)。五、結(jié)果討論5.1CD105標(biāo)記MVD與宮頸癌發(fā)展的關(guān)聯(lián)本研究結(jié)果顯示，CD105標(biāo)記的MVD在宮頸癌不同發(fā)展階段呈現(xiàn)出顯著的變化規(guī)律。從原位癌到早浸潤癌，再到浸潤癌且伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的過程中，MVD平均值逐漸升高，且各組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。這一結(jié)果與國內(nèi)外眾多研究結(jié)果一致，充分表明CD105標(biāo)記的MVD與宮頸癌的發(fā)展密切相關(guān)。在腫瘤生長機(jī)制方面，隨著宮頸癌的發(fā)展，腫瘤細(xì)胞的增殖速度不斷加快，對氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)的需求也日益增加。CD105作為一種主要表達(dá)于增殖血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的跨膜糖蛋白，其標(biāo)記的MVD升高意味著腫瘤組織中新生血管數(shù)量增多。這些新生血管能夠為腫瘤細(xì)胞提供充足的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)，滿足腫瘤細(xì)胞快速生長的需求，從而促進(jìn)腫瘤的生長和發(fā)展。研究表明，腫瘤細(xì)胞可以分泌多種血管生成因子，如血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）等，這些因子能夠刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和分化，誘導(dǎo)新生血管的生成。而CD105可能參與了這一過程，通過與VEGF等血管生成因子相互作用，調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能，促進(jìn)新生血管的形成。有研究發(fā)現(xiàn)，在宮頸癌組織中，CD105的表達(dá)與VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)，進(jìn)一步支持了這一觀點(diǎn)。從腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制來看，CD105標(biāo)記的MVD升高也為腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了有利條件。新生血管不僅為腫瘤細(xì)胞提供營養(yǎng)，還為腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)并發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移提供了通道。腫瘤細(xì)胞可以通過新生血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的間隙進(jìn)入血管，隨血流播散到其他部位。在本研究中，浸潤癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的CD105-MVD明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，這表明高表達(dá)的CD105-MVD可能增加了腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血管并發(fā)生轉(zhuǎn)移的機(jī)會。此外，新生血管的生成還可能改變腫瘤微環(huán)境，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT），使腫瘤細(xì)胞獲得更強(qiáng)的遷移和侵襲能力，從而更容易發(fā)生轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)，CD105可以通過激活某些信號通路，如PI3K-Akt信號通路等，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的EMT過程，進(jìn)而增強(qiáng)腫瘤的轉(zhuǎn)移潛能。綜上所述，CD105標(biāo)記的MVD在宮頸癌的發(fā)展過程中起著重要作用，其升高與腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。通過檢測CD105-MVD，可以在一定程度上評估宮頸癌的惡性程度和轉(zhuǎn)移風(fēng)險，為臨床治療提供重要的參考依據(jù)。在臨床實踐中，對于CD105-MVD高表達(dá)的宮頸癌患者，應(yīng)更加重視其轉(zhuǎn)移風(fēng)險，采取更為積極的治療策略，如加強(qiáng)術(shù)后輔助治療等，以提高患者的生存率和預(yù)后質(zhì)量。同時，CD105也有望成為宮頸癌治療的新靶點(diǎn)，通過抑制CD105的表達(dá)或其相關(guān)信號通路，阻斷腫瘤血管生成，從而達(dá)到抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的目的。未來的研究可以進(jìn)一步深入探討CD105在宮頸癌血管生成中的具體分子調(diào)控機(jī)制，為開發(fā)更加有效的治療方法提供理論支持。5.2D2-40標(biāo)記LVD與宮頸癌發(fā)展的關(guān)聯(lián)本研究結(jié)果顯示，D2-40標(biāo)記的LVD在宮頸癌不同發(fā)展階段呈現(xiàn)出顯著的變化趨勢。從原位癌到早浸潤癌，再到浸潤癌且伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，LVD平均值逐漸升高，且各組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。這一結(jié)果表明D2-40標(biāo)記的LVD與宮頸癌的發(fā)展密切相關(guān)，在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中可能發(fā)揮著重要作用。在腫瘤生長過程中，隨著宮頸癌的進(jìn)展，腫瘤細(xì)胞的增殖和代謝活動不斷增強(qiáng)，這促使腫瘤組織對營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的需求增加。D2-40標(biāo)記的LVD升高，意味著腫瘤組織中淋巴管生成增多。這些新生的淋巴管不僅能夠為腫瘤細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸通道，還可能參與了腫瘤細(xì)胞代謝產(chǎn)物的排出。有研究表明，腫瘤細(xì)胞可以分泌多種淋巴管生成因子，如血管內(nèi)皮生長因子-C（VEGF-C）等，這些因子能夠刺激淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和分化，從而誘導(dǎo)淋巴管的生成。在本研究中，D2-40標(biāo)記的LVD在宮頸癌組織中的升高，可能是由于腫瘤細(xì)胞分泌的淋巴管生成因子增加，促進(jìn)了淋巴管的生成，以滿足腫瘤生長的需求。從腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制來看，D2-40標(biāo)記的LVD升高與宮頸癌的淋巴道轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。淋巴道轉(zhuǎn)移是宮頸癌轉(zhuǎn)移的重要途徑之一，而腫瘤組織中淋巴管的生成是腫瘤細(xì)胞進(jìn)入淋巴管并發(fā)生淋巴道轉(zhuǎn)移的前提條件。高表達(dá)的D2-40-LVD使得腫瘤組織中淋巴管數(shù)量增多、管腔增大，為腫瘤細(xì)胞進(jìn)入淋巴管提供了更多的機(jī)會。腫瘤細(xì)胞可以通過與淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表面的分子相互作用，如整合素、細(xì)胞黏附分子等，實現(xiàn)對淋巴管的黏附和侵入。一旦腫瘤細(xì)胞進(jìn)入淋巴管，它們可以隨淋巴液流動到達(dá)局部淋巴結(jié)，進(jìn)而發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。在本研究中，浸潤癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的D2-40-LVD明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，這進(jìn)一步證實了D2-40標(biāo)記的LVD升高在宮頸癌淋巴道轉(zhuǎn)移中的關(guān)鍵作用。綜上所述，D2-40標(biāo)記的LVD在宮頸癌的發(fā)展過程中起著重要作用，其升高與腫瘤的生長和淋巴道轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。通過檢測D2-40-LVD，可以在一定程度上評估宮頸癌的轉(zhuǎn)移風(fēng)險，為臨床治療提供重要的參考依據(jù)。在臨床實踐中，對于D2-40-LVD高表達(dá)的宮頸癌患者，應(yīng)高度警惕其淋巴道轉(zhuǎn)移的可能性，采取更為積極的治療措施，如擴(kuò)大手術(shù)范圍、加強(qiáng)術(shù)后輔助放療或化療等，以降低患者的復(fù)發(fā)率和轉(zhuǎn)移率，提高患者的生存率。此外，D2-40也有望成為宮頸癌治療的潛在靶點(diǎn)，通過抑制D2-40的表達(dá)或其相關(guān)信號通路，阻斷腫瘤淋巴管生成，從而抑制腫瘤的淋巴道轉(zhuǎn)移。未來的研究可以進(jìn)一步深入探討D2-40在宮頸癌淋巴管生成中的具體分子調(diào)控機(jī)制，以及其與其他淋巴管生成相關(guān)因子之間的相互作用，為開發(fā)更加有效的治療方法提供理論支持。5.3CD105和D2-40聯(lián)合分析對宮頸癌診斷與治療的潛在價值CD105和D2-40聯(lián)合檢測在宮頸癌的早期診斷方面具有重要潛在價值。在腫瘤發(fā)生的早期階段，單一檢測CD105標(biāo)記的MVD或D2-40標(biāo)記的LVD，可能由于檢測指標(biāo)的局限性而出現(xiàn)漏診情況。而聯(lián)合檢測這兩個指標(biāo)，能夠從腫瘤血管生成和淋巴管生成兩個方面綜合評估腫瘤的發(fā)生發(fā)展?fàn)顟B(tài)，提高早期診斷的準(zhǔn)確性。研究表明，在宮頸癌前病變階段，部分病例中就已經(jīng)出現(xiàn)CD105和D2-40表達(dá)的異常升高。通過對這些異常表達(dá)的監(jiān)測，可以更早地發(fā)現(xiàn)宮頸癌的潛在風(fēng)險，為患者爭取更早期的治療時機(jī)。在一項針對宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）患者的研究中，發(fā)現(xiàn)CINIII級患者中，聯(lián)合檢測CD105和D2-40的陽性率明顯高于單獨(dú)檢測其中任何一個指標(biāo)，提示聯(lián)合檢測有助于更準(zhǔn)確地識別具有較高癌變風(fēng)險的CIN患者，從而及時采取干預(yù)措施，預(yù)防宮頸癌的發(fā)生。在病情評估方面，CD105和D2-40聯(lián)合分析能夠為臨床醫(yī)生提供更全面、準(zhǔn)確的信息。本研究結(jié)果顯示，CD105-MVD和D2-40-LVD均與宮頸癌的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。將兩者聯(lián)合起來分析，可以更精準(zhǔn)地判斷腫瘤的侵襲性和轉(zhuǎn)移潛能。對于CD105-MVD和D2-40-LVD同時升高的患者，往往提示腫瘤具有更強(qiáng)的生長和轉(zhuǎn)移能力，病情更為嚴(yán)重。在臨床實踐中，醫(yī)生可以根據(jù)這一信息，對患者進(jìn)行更細(xì)致的病情分層，制定更合理的治療方案。在選擇手術(shù)方式時，對于CD105和D2-40高表達(dá)的患者，可能需要擴(kuò)大手術(shù)范圍，清掃更多的淋巴結(jié)，以降低術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的風(fēng)險；在制定放化療方案時，也可以根據(jù)兩者的表達(dá)情況，調(diào)整放化療的劑量和療程，提高治療效果。從靶向治療策略制定的角度來看，CD105和D2-40為宮頸癌的靶向治療提供了新的潛在靶點(diǎn)。目前，針對腫瘤血管生成的靶向治療已成為研究熱點(diǎn)，以CD105為靶點(diǎn)的治療策略具有廣闊的應(yīng)用前景。通過抑制CD105的表達(dá)或其相關(guān)信號通路，可以阻斷腫瘤新生血管的生成，切斷腫瘤的營養(yǎng)供應(yīng)，從而抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。已有研究表明，一些針對CD105的單克隆抗體或小分子抑制劑在動物實驗中顯示出了良好的抗腫瘤效果。同樣，D2-40也有望成為宮頸癌淋巴靶向治療的靶點(diǎn)。通過抑制D2-40的表達(dá)或其相關(guān)信號通路，可以阻斷腫瘤淋巴管生成，減少腫瘤細(xì)胞的淋巴道轉(zhuǎn)移。將針對CD105和D2-40的靶向治療聯(lián)合應(yīng)用，可能會產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，進(jìn)一步提高治療效果。未來的研究可以深入探討兩者聯(lián)合靶向治療的最佳方案和療效評估指標(biāo)，為宮頸癌的臨床治療提供新的思路和方法。綜上所述，CD105和D2-40聯(lián)合分析在宮頸癌的診斷與治療中具有重要的潛在價值，為宮頸癌的早期診斷、精準(zhǔn)病情評估和靶向治療策略制定提供了新的方向和依據(jù)，有望在臨床實踐中得到廣泛應(yīng)用，改善宮頸癌患者的預(yù)后。六、研究結(jié)論與展望6.1研究主要結(jié)論本研究通過對100例宮頸癌患者及30例正常宮頸組織標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測，深入分析了CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度在宮頸癌發(fā)展中的表達(dá)情況，得出以下主要結(jié)論：CD105標(biāo)記的MVD與宮頸癌發(fā)展密切相關(guān)：隨著宮頸癌從原位癌向早浸潤癌、浸潤癌無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及浸潤癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移階段的進(jìn)展，CD105標(biāo)記的MVD平均值呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，且不同階段之間差異具有高度統(tǒng)計學(xué)意義。這表明CD105標(biāo)記的MVD在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要作用，其升高與腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。CD105可能通過參與腫瘤血管生成過程，為腫瘤細(xì)胞提供充足的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)腫瘤的生長；同時，新生血管也為腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)并發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移提供了通道，增加了腫瘤轉(zhuǎn)移的風(fēng)險。此外，CD105-MVD與宮頸癌的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可作為評估宮頸癌病情和轉(zhuǎn)移風(fēng)險的重要指標(biāo)，而與患者年齡、腫瘤大小、組織學(xué)類型及分化程度無明顯相關(guān)性。D2-40標(biāo)記的LVD與宮頸癌發(fā)展密切相關(guān)：D2-40標(biāo)記的LVD在宮頸癌不同發(fā)展階段同樣呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，從原位癌到早浸潤癌，再到浸潤癌無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及浸潤癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移階段，LVD平均值依次增加，且各組間差異具有高度統(tǒng)計學(xué)意義。這說明D2-40標(biāo)記的LVD在宮頸癌的生長和淋巴道轉(zhuǎn)移過程中起著關(guān)鍵作用。腫瘤組織中淋巴管生成增多，不僅為腫瘤細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸通道，還為腫瘤細(xì)胞進(jìn)入淋巴管并發(fā)生淋巴道轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了條件。高表達(dá)的D2-40-LVD使得腫瘤細(xì)胞更容易侵入淋巴管，隨淋巴液流動到達(dá)局部淋巴結(jié)，進(jìn)而發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。D2-40-LVD與宮頸癌的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，而與患者年齡、腫瘤大小、組織學(xué)類型及分化程度無明顯相關(guān)性，可作為評估宮頸癌淋巴道轉(zhuǎn)移風(fēng)險的重要指標(biāo)。CD105和D2-40聯(lián)合分析對宮頸癌診斷與治療具有潛在價值：聯(lián)合檢測CD105和D2-40，能夠從腫瘤血管生成和淋巴管生成兩個方面綜合評估腫瘤的發(fā)生發(fā)展?fàn)顟B(tài)，提高宮頸癌早期診斷的準(zhǔn)確性。在病情評估方面，兩者聯(lián)合分析可以更精準(zhǔn)地判斷腫瘤的侵襲性和轉(zhuǎn)移潛能，為臨床醫(yī)生制定更合理的治療方案提供依據(jù)。從靶向治療策略制定的角度來看，CD105和D2-40為宮頸癌的靶向治療提供了新的潛在靶點(diǎn)，聯(lián)合針對兩者的靶向治療可能會產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，提高治療效果。6.2研究局限性與展望本研究雖取得了一定成果，但仍存在局限性。首先，樣本量相對較小，僅納入100例宮頸癌患者及30例正常宮頸組織標(biāo)本。較小的樣本量可能導(dǎo)致研究結(jié)果存在一定的偏差，無法全面準(zhǔn)確地反映CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度在宮頸癌發(fā)展中的作用及與各種臨床病理因素的關(guān)系。未來研究可進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，納入更多不同地區(qū)、不同種族的患者，以增強(qiáng)研究結(jié)果的代表性和可靠性。其次，本研究為單中心研究，存在地域局限性，不同地區(qū)的醫(yī)療水平、生活環(huán)境及人群遺傳背景等因素可能對研究結(jié)果產(chǎn)生影響。后續(xù)可開展多中心研究，聯(lián)合不同地區(qū)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)，共同收集和分析樣本，減少地域因素帶來的干擾，使研究結(jié)果更具普遍性和推廣價值。再者，本研究僅從蛋白表達(dá)水平檢測了CD105及D2-40標(biāo)記的脈管密度，未深入探討其在基因水平的表達(dá)變化及調(diào)控機(jī)制。在分子生物學(xué)快速發(fā)展的背景下，未來研究可結(jié)合基因芯片、RNA測序等技術(shù)，從基因?qū)用嫔钊胙芯緾D105和D2-40在宮頸癌發(fā)生發(fā)展過程中的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，明確其上下游相關(guān)基因及信號通路，為宮頸癌的靶向治療提供更堅實的理論基礎(chǔ)。展望未來，隨著對CD105及D2-40在宮頸癌中作用機(jī)制研究的不斷深入，有望開發(fā)出基于這兩個靶點(diǎn)的新型診斷試劑和治療藥物。在診斷方面，可進(jìn)一步優(yōu)化檢測方法，提高檢測的靈敏度和特異性，將其應(yīng)用于宮頸癌的早期篩查和診斷，實現(xiàn)疾病的早發(fā)現(xiàn)、早治療。在治療領(lǐng)域，針對CD105和D2-40的靶向治療藥物可能成為宮頸癌綜合治療的重要組成部分，與傳統(tǒng)的手術(shù)、放療、化療相結(jié)合，提高治療效果，改善患者預(yù)后。此外，還可以探索將CD105和D2-40與其他生物標(biāo)志物聯(lián)合應(yīng)用，構(gòu)建多指標(biāo)的診斷和預(yù)后評估模型，為臨床醫(yī)生提供更全面、準(zhǔn)確的信息，實現(xiàn)宮頸癌的精準(zhǔn)診療。七、參考文獻(xiàn)[1]SungH,FerlayJ,SiegelRL,etal.GlobalCancerStatistics2020:GLOBOCANEstimatesofIncidenceandMortalityWorldwidefor36Cancersin185Countries[J].CA:acancerjournalforclinicians,2021,71(3):209-249.[2]TorreLA,BrayF,SiegelRL,etal.Globalcancerstatistics,2012[J].CA:acancerjournalforclinicians,2015,65(2):87-108.[3]ZhangY,WangX,LiX,etal.ExpressionandsignificanceofCD105incervicalcancer[J].ChineseJournalofCancerPreventionandTreatment,2009,16(13):1003-1006.[4]LiuY,ZhangH,WangY,etal.RelationshipbetweenCD105expressionandlymphnodemetastasisincervicalcancer[J].JournalofNorthChinaCoalMedicalUniversity,2011,13(1):20-21.[5]YangX,ZhangX,LiuY,etal.TheexpressionandsignificanceofD2-40incervicalcancer[J].ChineseJournalofClinicalOncology,2010,37(19):1110-1113.[6]LiJ,WangY,ZhangH,etal.CorrelationbetweenD2-40expressionandlymphaticmetastasisincervicalcancer[J].JournalofPracticalOncology,2012,26(4):342-345.[7]DengWY,WuAW.TheexpressionofCD105-MVDandD2-40-LVDinthedevelopmentofcervicalcarcinoma[D].GuangzhouMedicalUniversity,2009.[8]ZhangJY,DengWY,ChenWJ,etal.ExpressionofD2-40inthedevelopmentofcervicalcarcinoma[J].MaternalandChildHealthCareofChina,2013,28(12):1963-1965.[9]陳亞君，周徐炎華，劉功素，等.CD105和VEGF在宮頸癌的表達(dá)及臨床意義[J].長江大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)醫(yī)學(xué)卷，2007,4(1):14-15.[10]龐達(dá)，劉鋒，薛英威，等。乳腺癌組織中CD105mRNA的表達(dá)及其臨床病理意義[J].中華腫瘤雜志，2005,27(1):38-40.[2]TorreLA,BrayF,SiegelRL,etal.Globalcancerstatistics,2012[J].CA:acancerjournalforclinicians,2015,65(2):87-108.[3]ZhangY,WangX,LiX,etal.ExpressionandsignificanceofCD105incervicalcancer[J].ChineseJournalofCancerPreventionandTreatment,2009,16(13):1003-1006.[4]LiuY,ZhangH,WangY,etal.RelationshipbetweenCD105expressionandlymphnodemetastasisincervicalcancer[J].JournalofNorthChinaCoalMedicalUniversity,2011,13(1):20-21.[5]YangX,ZhangX,LiuY,etal.TheexpressionandsignificanceofD2-40incervicalcancer[J].ChineseJournalofClinicalOncology,2010,37(19):1110-1113.[6]LiJ,WangY,ZhangH,etal.CorrelationbetweenD2-40expressionandlymphaticmetastasisincervicalcancer[J].JournalofPracticalOncology,2012,26(4):342-345.[7]DengWY,WuAW.TheexpressionofCD105-MVDandD2-40-LVDinthedevelopmentofcervicalcarcinoma[D].GuangzhouMedicalUniversity,2009.[8]ZhangJY,DengWY,ChenWJ,etal.ExpressionofD2-40inthedevelopmentofcervicalcarcinoma[J].MaternalandChildHealthCareofChina,2013,28(12):1963-1965.[9]陳亞君，周徐炎華，劉功素，等.CD105和VEGF在宮頸癌的表達(dá)及臨床意義[J].長江大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)醫(yī)學(xué)卷，2007,4(1):14-15.[10]龐達(dá)，劉鋒，薛英威，等。乳腺癌組織中CD105mRNA的表達(dá)及其臨床病理意義[J].中華腫瘤雜志，2005,27(1):38-40.[3]ZhangY,WangX,LiX,etal.ExpressionandsignificanceofCD105incervicalcancer[J].ChineseJournalofCancerPreventionandTreatment,2009,16(13):1003-1006.[4]LiuY,ZhangH,WangY,etal.RelationshipbetweenCD105expressionandlymphnodemetastasisincervicalcancer[J].JournalofNorthChinaCoalMedicalUniversity,2011,13(1):20-21.[5]YangX,ZhangX,LiuY,etal.TheexpressionandsignificanceofD2-40incervicalcancer[J].ChineseJournalofClinicalOncology,2010,37(19):1110-1113.[6]LiJ,WangY,ZhangH,etal.CorrelationbetweenD2-40expressionandlymphaticmetastasisincervicalcancer[J].JournalofPracticalOncology,2012,26(4):342-345.[7]DengWY,WuAW.TheexpressionofCD105-MVDandD2-40-LVDinthedevelopmentofcervicalcarcinoma[D].GuangzhouMedicalUniversity,2009.[8]ZhangJY,DengWY,ChenWJ,etal.ExpressionofD2-40inthedevelopmentofcervicalcarcinoma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