備案號：52672-2017DB15RegulationofStrainManufactureforHericiumer2017-01-15發(fā)布內(nèi)蒙古自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布 1 1 1 2 2 3 7 8I本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給猴頭菇菌種制作技術(shù)規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了制作猴頭菇（Hericiumerinaceus）本標(biāo)準(zhǔn)適用于猴頭菇母種、原種和栽培種菌種凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）長在適宜基質(zhì)上具結(jié)實性的菌絲培養(yǎng)物，包括母種、原種和容器。栽培種只能用于擴大到栽培出菇袋或直接出菇，不可以再次擴大繁殖菌種。也稱為1源和無機鹽類，具一定水分含量的培養(yǎng)基培養(yǎng)的純菌絲或球狀，液體菌種可以作為原種或栽培種直接接種在2滅菌后溫度降到（65±5）℃時，在空氣清潔的室內(nèi)擺斜面培養(yǎng)基裝入300ml～500ml三角瓶至刻度的2/3處，用帶濾膜的封口膜封口后放入滅菌鍋。玻璃培養(yǎng)皿用報紙包好，同時放入滅菌鍋滅菌。在121℃~124℃（0.11MPa～0.12MPa）下滅菌25min。滅菌后溫度降到（65±5）℃時，在超凈工作臺上將三角瓶中的培養(yǎng)基分裝至培養(yǎng)皿中在超凈工作臺或接種箱內(nèi)接種。接種前用紫外滅菌燈照射30min后再用75%酒精進(jìn)行表面消毒。接菌過程嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，接種后及時貼好標(biāo)簽并做好記將3mm～5mm的菌種塊接種在培養(yǎng)皿或試管的中部。培養(yǎng)皿用石臘封口在18℃~26℃,空氣濕度在75%以下，通風(fēng)避光培養(yǎng)。原種采用850ml以下、瓶口直徑≤4cm、耐126℃栽培種采用和原種相同的菌種瓶，或選用（15～17）cm×（33～35）cm×（0.04～0.05）mm的聚丙3原種、栽培種在超凈工作臺或接種箱內(nèi)接種，接種前打開紫外燈照射30min，接種時用75%酒精對要嚴(yán)格按無菌操作接種，每批接種應(yīng)為單一品種，如中途換品種時采用7在21℃~26℃,空氣濕度在75%以下，通風(fēng)避光培養(yǎng)。原種和栽培種在0℃~4℃下貯存，貯存期不超過50d。采用150ml～500ml三角瓶，培養(yǎng)基添加至刻度的2/3處，用帶濾膜的封取3mm～5mm大小母種10塊～12塊放進(jìn)液體培養(yǎng)基中填裝培養(yǎng)基至液體菌種罐2/3處，按照液體菌種罐說明書要求，對液體菌種罐和液體培養(yǎng)基滅菌，（23±2）℃,攪拌轉(zhuǎn)速150r/min～160r/min，灌壓0.04Mpa，通風(fēng)量0.7N·m3/h。培養(yǎng)時間3d～5d。4無無無無5無無詳細(xì)記錄各生產(chǎn)環(huán)節(jié)，菌種庫溫度保持在0℃~4℃,避光，適當(dāng)通風(fēng)但應(yīng)該對空氣進(jìn)行消毒。菌種在庫中貯存時間不應(yīng)長于50d，貯存時間超出50d的母種應(yīng)進(jìn)行出菇檢驗菌種應(yīng)留樣，每批次留樣3支試管，貯存在0℃~4℃,貯存至正常生產(chǎn)條件下出第一潮菇。6A.1PDA改良培養(yǎng)基A.1.1麥麩100g加水600m葡萄糖10g、蔗糖10g、蛋白胨5g、瓊脂粉10g～15g（用少量涼水調(diào)成糊狀）定容至1000ml，pA.1.4新鮮無病去皮馬鈴薯200g加水600ml煮沸20min，取濾液500ml；100g小麥粒加水600ml煮沸15min，取濾液500ml，二者混合定容至1000ml，加入硫酸鎂（MgSO4）0.5g、磷酸二氫A.2PDA培養(yǎng)基新鮮無病去皮馬鈴薯200g加水1200ml煮沸20min，取濾液再加入硫酸鎂（MgSO4）0.5g、磷酸2PO4pH自然。A.3制作液體菌種培養(yǎng)基不加瓊脂粉。7谷粒、麥粒或玉米粒90%，檸條粉、棉籽殼、木屑、玉米芯粉或豆秸粉9%，石膏1%，水分含量（50B.2.1闊葉木屑58%、玉米芯21%、麩皮20%、石膏1%、水分含量（60±2）%、石灰水調(diào)節(jié)pB.2.2檸條粉60%、玉米芯21%、麩皮18%、石膏1%、水分含量（60±2）%、石灰水調(diào)節(jié)pHB.2.3豆秸粉60%、玉米芯21%、麩皮18%、石膏1%、水分含量（60±2