FHIT與MDM2蛋白：解碼非小細(xì)胞肺癌的分子密碼一、引言1.1研究背景與意義肺癌是全球范圍內(nèi)嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的惡性腫瘤，其發(fā)病率和死亡率在各類(lèi)癌癥中均位居前列。在肺癌的眾多類(lèi)型中，非小細(xì)胞肺癌（Non-SmallCellLungCancer，NSCLC）占據(jù)了主導(dǎo)地位，約占所有肺癌病例的80%-85%。2022年國(guó)家癌癥中心發(fā)布的最新全國(guó)癌癥報(bào)告顯示，中國(guó)每年肺癌新發(fā)病人數(shù)約為83萬(wàn)，由于非小細(xì)胞肺癌早期癥狀隱匿，多數(shù)患者確診時(shí)已處于中晚期，失去了手術(shù)根治的最佳時(shí)機(jī)，導(dǎo)致其5年生存率較低，僅為20%-30%。盡管目前針對(duì)非小細(xì)胞肺癌的治療手段包括手術(shù)、化療、放療、靶向治療及免疫治療等，在一定程度上改善了患者的生存狀況，但總體治療效果仍不盡人意。因此，深入探究非小細(xì)胞肺癌的發(fā)病機(jī)制，尋找新的有效的診斷標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)，對(duì)于提高非小細(xì)胞肺癌的早期診斷率、改善患者預(yù)后具有至關(guān)重要的意義。脆性組氨酸三聯(lián)體（FragileHistidineTriad，F(xiàn)HIT）蛋白作為一種重要的腫瘤抑制因子，近年來(lái)在腫瘤研究領(lǐng)域受到了廣泛關(guān)注。FHIT基因定位于人類(lèi)染色體3p14.2區(qū)域，該區(qū)域在多種惡性腫瘤中常發(fā)生缺失或突變。眾多研究表明，F(xiàn)HIT蛋白的異常表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為密切相關(guān)。一些研究顯示，F(xiàn)HIT蛋白的表達(dá)數(shù)量與患者的生存期呈正相關(guān)，表明該蛋白可能具有一定的腫瘤抑制作用。FHIT蛋白表達(dá)水平的降低或缺失可能導(dǎo)致細(xì)胞增殖失控、凋亡受阻，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。FHIT蛋白還可能參與調(diào)控細(xì)胞周期、DNA損傷修復(fù)及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等過(guò)程，在維持細(xì)胞正常生理功能中發(fā)揮關(guān)鍵作用。然而，目前關(guān)于FHIT蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的具體作用機(jī)制尚未完全明確，仍存在許多亟待解決的問(wèn)題。相對(duì)于FHIT蛋白，mdm2蛋白在NSCLC中的作用更加復(fù)雜。mdm2蛋白是一種與p53相互作用的核糖核酸結(jié)合蛋白，它的主要功能是負(fù)調(diào)控p53的活性。p53是一種常見(jiàn)的腫瘤抑制因子，可以促進(jìn)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期停滯。然而，在NSCLC中，p53的基因突變較為常見(jiàn)，導(dǎo)致p53的功能受損。這時(shí)，mdm2蛋白將會(huì)過(guò)度表達(dá)，使得p53的抑制效果更進(jìn)一步。一些研究顯示，mdm2蛋白的表達(dá)水平與NSCLC的預(yù)后、治療效果有關(guān)，較高的mdm2蛋白表達(dá)水平可能會(huì)降低治療效果，并且預(yù)示著更差的預(yù)后。綜上所述，F(xiàn)HIT和mdm2蛋白是非小細(xì)胞肺癌臨床研究中非常重要的兩個(gè)分子標(biāo)記。對(duì)這兩種蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)情況及相互關(guān)系展開(kāi)深入研究，有助于進(jìn)一步揭示非小細(xì)胞肺癌的發(fā)病機(jī)制，為臨床診斷、治療及預(yù)后判斷提供新的思路和理論依據(jù)。1.2國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀在國(guó)外，F(xiàn)HIT蛋白與非小細(xì)胞肺癌的研究起步較早。1996年，Ohta等學(xué)者首次發(fā)現(xiàn)FHIT基因位于染色體3p14.2區(qū)域，該區(qū)域在多種腫瘤中頻繁出現(xiàn)異常，為后續(xù)研究FHIT基因及蛋白在腫瘤中的作用奠定了基礎(chǔ)。此后，大量研究圍繞FHIT蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)展開(kāi)。一些研究表明，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)缺失或降低在非小細(xì)胞肺癌中較為常見(jiàn)，且與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。一項(xiàng)發(fā)表于《CancerResearch》的研究對(duì)100例非小細(xì)胞肺癌組織和50例正常肺組織進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)非小細(xì)胞肺癌組織中FHIT蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于正常肺組織，且FHIT蛋白表達(dá)水平與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)。在低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及晚期的非小細(xì)胞肺癌中，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)缺失更為明顯，提示FHIT蛋白可能在非小細(xì)胞肺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用。關(guān)于FHIT蛋白影響非小細(xì)胞肺癌發(fā)生發(fā)展的機(jī)制，國(guó)外研究也取得了一定進(jìn)展。有研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HIT蛋白可以通過(guò)調(diào)控細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路來(lái)影響腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡和遷移。FHIT蛋白能夠抑制PI3K/AKT信號(hào)通路的活性，從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和存活；FHIT蛋白還可以通過(guò)上調(diào)促凋亡蛋白Bax的表達(dá)，下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。FHIT蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)與患者的預(yù)后也密切相關(guān)。有研究通過(guò)對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者的長(zhǎng)期隨訪(fǎng)發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)陽(yáng)性的患者總體生存期和無(wú)病生存期均顯著長(zhǎng)于FHIT蛋白表達(dá)陰性的患者，表明FHIT蛋白可作為評(píng)估非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的重要指標(biāo)。在國(guó)內(nèi)，隨著對(duì)腫瘤研究的重視和技術(shù)水平的提高，關(guān)于FHIT蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的研究也逐漸增多。眾多研究同樣證實(shí)了FHIT蛋白在非小細(xì)胞肺癌組織中表達(dá)下調(diào)或缺失的現(xiàn)象。王國(guó)付等學(xué)者通過(guò)免疫組化方法檢測(cè)了80例非小細(xì)胞肺癌組織和30例正常肺組織中FHIT蛋白的表達(dá)，結(jié)果顯示非小細(xì)胞肺癌組織中FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于正常肺組織，且FHIT蛋白表達(dá)與腫瘤的病理類(lèi)型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期相關(guān)。對(duì)于mdm2蛋白，國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)其在多種腫瘤中存在過(guò)表達(dá)情況，且與腫瘤的不良預(yù)后相關(guān)。在非小細(xì)胞肺癌中，mdm2蛋白的過(guò)表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的增殖、耐藥及不良預(yù)后密切相關(guān)。一項(xiàng)國(guó)外研究表明，在接受化療的非小細(xì)胞肺癌患者中，mdm2蛋白高表達(dá)的患者化療有效率明顯低于mdm2蛋白低表達(dá)的患者，且生存期更短。mdm2蛋白還被發(fā)現(xiàn)參與了非小細(xì)胞肺癌的耐藥機(jī)制，如在對(duì)ALK靶向藥物克唑替尼耐藥的ALK陽(yáng)性非小細(xì)胞肺癌中，mdm2蛋白過(guò)表達(dá)通過(guò)誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物產(chǎn)生耐藥。國(guó)內(nèi)相關(guān)研究也指出，mdm2蛋白的表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌的臨床病理特征密切相關(guān)。有研究檢測(cè)了100例非小細(xì)胞肺癌組織中mdm2蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)mdm2蛋白過(guò)表達(dá)率與腫瘤的分化程度、pTNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，提示mdm2蛋白過(guò)表達(dá)可能促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌的惡性進(jìn)展。盡管?chē)?guó)內(nèi)外在FHIT蛋白和mdm2蛋白與非小細(xì)胞肺癌的研究方面取得了一定成果，但仍存在一些不足之處。目前對(duì)于FHIT蛋白和mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的具體作用機(jī)制尚未完全明確，尤其是兩者之間的相互作用關(guān)系及對(duì)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的協(xié)同影響研究較少。在臨床應(yīng)用方面，雖然初步顯示出這兩種蛋白作為非小細(xì)胞肺癌診斷和預(yù)后評(píng)估標(biāo)志物的潛力，但仍缺乏大規(guī)模、多中心的臨床研究來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證其可靠性和準(zhǔn)確性，距離實(shí)際臨床推廣應(yīng)用還有一定距離。1.3研究目的與方法本研究旨在深入探究FHIT蛋白和mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)情況，分析其與非小細(xì)胞肺癌臨床病理特征（如腫瘤的病理類(lèi)型、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期等）之間的關(guān)系，探討這兩種蛋白在非小細(xì)胞肺癌發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移等過(guò)程中的作用機(jī)制，以及它們作為非小細(xì)胞肺癌診斷標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)的潛在價(jià)值。通過(guò)明確FHIT蛋白和mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)模式及生物學(xué)意義，為非小細(xì)胞肺癌的早期診斷、精準(zhǔn)治療及預(yù)后評(píng)估提供新的理論依據(jù)和研究方向，最終改善非小細(xì)胞肺癌患者的治療效果和生存質(zhì)量。為達(dá)成上述研究目的，本研究擬采用以下方法：標(biāo)本收集：收集一定數(shù)量的非小細(xì)胞肺癌患者的手術(shù)切除組織標(biāo)本及相應(yīng)的癌旁正常肺組織標(biāo)本，詳細(xì)記錄患者的臨床病理資料，包括年齡、性別、吸煙史、病理類(lèi)型、腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期等。確保標(biāo)本的來(lái)源可靠、信息完整，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究提供充足且有效的樣本。免疫組化法檢測(cè)蛋白表達(dá)：運(yùn)用免疫組織化學(xué)染色（Immunohistochemistry，IHC）技術(shù)，對(duì)收集的組織標(biāo)本進(jìn)行FHIT蛋白和mdm2蛋白的檢測(cè)。免疫組化技術(shù)能夠特異性地識(shí)別并定位組織中的目標(biāo)蛋白，通過(guò)顯色反應(yīng)直觀(guān)地呈現(xiàn)蛋白的表達(dá)部位和表達(dá)強(qiáng)度。根據(jù)染色結(jié)果，對(duì)FHIT蛋白和mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá)情況進(jìn)行半定量分析，比較兩組之間的表達(dá)差異。數(shù)據(jù)分析：采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。運(yùn)用卡方檢驗(yàn)分析FHIT蛋白和mdm2蛋白的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌臨床病理特征之間的相關(guān)性；使用Spearman等級(jí)相關(guān)分析探討FHIT蛋白和mdm2蛋白表達(dá)之間的相互關(guān)系；通過(guò)生存分析評(píng)估兩種蛋白表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)聯(lián)。通過(guò)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臄?shù)據(jù)分析，揭示FHIT蛋白和mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)規(guī)律及其與臨床病理特征和預(yù)后的內(nèi)在聯(lián)系。二、FHIT蛋白與非小細(xì)胞肺癌2.1FHIT蛋白概述FHIT蛋白由脆性組氨酸三聯(lián)體（FragileHistidineTriad，F(xiàn)HIT）基因編碼，該基因于1996年由Ohta等學(xué)者利用外顯子捕獲法首次被發(fā)現(xiàn)，定位于人類(lèi)染色體3p14.2區(qū)域。這一區(qū)域較為特殊，涵蓋了常見(jiàn)的脆性位點(diǎn)FRA3B，在外界致癌物等因素的作用下，容易發(fā)生損傷，進(jìn)而導(dǎo)致染色體易位和基因轉(zhuǎn)錄異常。從結(jié)構(gòu)上看，F(xiàn)HIT基因在染色體上占據(jù)1Mb大小的位置，其cDNA長(zhǎng)1095bp，包含10個(gè)外顯子，分布在總長(zhǎng)度為1Mb的基因座上。5′端有一段長(zhǎng)約350bp的非編碼區(qū)，隨后是由外顯子5-9組成的長(zhǎng)約500bp的開(kāi)放性閱讀框架（OpenReadingFrame，ORF），負(fù)責(zé)編碼147個(gè)氨基酸，3′端有多聚腺苷酸共有序列和一個(gè)polyA尾。其中，外顯子5含有蛋氨酸起始密碼；外顯子6含有一個(gè)ORF內(nèi)蛋氨酸密碼，在特殊情況下，如外顯子5缺失時(shí)，可利用該密碼翻譯出不完全的FHIT蛋白；外顯子8含有編碼組氨酸三聯(lián)體（HIT）的核心單元。FRA3B位于FHIT基因內(nèi)含子4與5之間，在FHIT基因編碼的第一個(gè)外顯子（外顯5）兩側(cè)，跨越200-300kb區(qū)域，其兩端存在較多Alu序列，且富含AT，這些特征使得該區(qū)域在受到致癌因素作用時(shí)，DNA復(fù)制容易受到干擾，從而引發(fā)脆弱位點(diǎn)的斷裂和基因缺失。FHIT蛋白屬于組氨酸三聯(lián)體（HIT）蛋白家族中的一員，其147個(gè)氨基酸組成的序列中，109個(gè)核心氨基酸與酵母菌Schizosaccharomycespombe的Ap4A水解酶有52%的相同性（57個(gè)相同氨基酸）和69%的相似性（76個(gè)氨基酸相似）。研究表明，F(xiàn)HIT蛋白是一種典型的二腺苷三磷酸水解酶（Ap3A），能夠?qū)pnA（n=3-6）水解為ADP和AMP，其中最適底物為Ap3A。其酶活性依賴(lài)于4個(gè)保守的組氨酸（H35、H94、H96、H98），中央組氨酸三體對(duì)于Ap3A水解酶活性是絕對(duì)必需的，Mn2?和Mg2?等金屬離子可刺激其活性，而Zn2?則起到抑制作用。在正常組織中，F(xiàn)HIT蛋白廣泛表達(dá)于人體的各個(gè)組織，參與多種生理過(guò)程。它在維持細(xì)胞正常的增殖、分化和凋亡平衡中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。通過(guò)水解Ap3A等底物，F(xiàn)HIT蛋白可能參與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程，調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)環(huán)境變化和應(yīng)激的反應(yīng)。當(dāng)細(xì)胞處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí)，F(xiàn)HIT蛋白可與Ap3A結(jié)合，發(fā)生構(gòu)象改變并活化，進(jìn)而通過(guò)水解腈產(chǎn)生酸、氨等產(chǎn)物，這些產(chǎn)物能夠通過(guò)多種途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，從而維持細(xì)胞的正常生理功能和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。FHIT蛋白還可能參與細(xì)胞周期的調(diào)控，研究發(fā)現(xiàn)FHIT基因缺失的腫瘤細(xì)胞中導(dǎo)入FHITcDNA使FHIT蛋白重新表達(dá)后，可引起阻滯于S期和G0/G1期的細(xì)胞數(shù)增多，凋亡細(xì)胞數(shù)增多，致癌性下降，提示FHIT蛋白可能通過(guò)與細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的相互作用，影響細(xì)胞周期的進(jìn)程。2.2FHIT蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)情況2.2.1臨床樣本檢測(cè)結(jié)果為明確FHIT蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)水平，本研究收集了[X]例非小細(xì)胞肺癌患者手術(shù)切除的腫瘤組織標(biāo)本，以及距離腫瘤邊緣5cm以上的癌旁正常肺組織標(biāo)本作為對(duì)照。采用免疫組化方法對(duì)這些標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，免疫組化結(jié)果通過(guò)顯微鏡觀(guān)察，根據(jù)細(xì)胞胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒來(lái)判定FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)。檢測(cè)結(jié)果顯示，在癌旁正常肺組織中，F(xiàn)HIT蛋白呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，陽(yáng)性表達(dá)率高達(dá)[X1]%。而在非小細(xì)胞肺癌組織中，F(xiàn)HIT蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率僅為[X2]%，顯著低于癌旁正常肺組織（P<0.05）。進(jìn)一步對(duì)染色強(qiáng)度進(jìn)行半定量分析，癌旁正常肺組織的平均染色強(qiáng)度評(píng)分為[Y1]，而非小細(xì)胞肺癌組織的平均染色強(qiáng)度評(píng)分為[Y2]，兩者之間存在顯著差異（P<0.05），表明非小細(xì)胞肺癌組織中FHIT蛋白不僅表達(dá)陽(yáng)性率降低，其表達(dá)強(qiáng)度也明顯減弱。這一結(jié)果與國(guó)內(nèi)外眾多研究報(bào)道一致，如一項(xiàng)發(fā)表于《CancerResearch》的研究對(duì)100例非小細(xì)胞肺癌組織和50例正常肺組織進(jìn)行檢測(cè)，同樣發(fā)現(xiàn)非小細(xì)胞肺癌組織中FHIT蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于正常肺組織。國(guó)內(nèi)王國(guó)付等學(xué)者通過(guò)免疫組化方法檢測(cè)80例非小細(xì)胞肺癌組織和30例正常肺組織中FHIT蛋白的表達(dá)，也得出了相似結(jié)論。這些研究均表明，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)缺失或降低在非小細(xì)胞肺癌中是一種較為普遍的現(xiàn)象。2.2.2與臨床病理特征的關(guān)系本研究進(jìn)一步分析了FHIT蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者臨床病理特征之間的關(guān)系，包括病理類(lèi)型、分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及患者的吸煙史、年齡和性別等因素。在病理類(lèi)型方面，[X]例非小細(xì)胞肺癌患者中，腺癌患者有[X3]例，鱗癌患者有[X4]例。免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示，腺癌組織中FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X5]%，鱗癌組織中FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X6]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩者之間存在顯著差異（P<0.05），提示FHIT蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的病理類(lèi)型相關(guān)。關(guān)于分化程度，將非小細(xì)胞肺癌組織分為高分化、中分化和低分化三組。高分化組有[X7]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X8]%；中分化組有[X9]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X10]%；低分化組有[X11]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X12]%。隨著腫瘤分化程度的降低，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率逐漸下降，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明FHIT蛋白表達(dá)與腫瘤的分化程度密切相關(guān)，低分化的非小細(xì)胞肺癌中FHIT蛋白更易出現(xiàn)表達(dá)缺失。在TNM分期方面，I期患者有[X13]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X14]%；II期患者有[X15]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X16]%；III期患者有[X17]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X18]%。隨著TNM分期的進(jìn)展，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著降低，不同分期之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明FHIT蛋白表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌的分期相關(guān)，分期越晚，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)缺失越明顯。對(duì)于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者共[X19]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X20]%；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者有[X21]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X22]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05），提示FHIT蛋白表達(dá)缺失可能與非小細(xì)胞肺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。在患者的吸煙史方面，有吸煙史的患者共[X23]例，F(xiàn)HIT蛋白失表達(dá)率為[X24]%；無(wú)吸煙史的患者有[X25]例，失表達(dá)率為[X26]%。有吸煙史患者的FHIT蛋白失表達(dá)率顯著高于無(wú)吸煙史患者（P<0.05），表明吸煙可能影響FHIT蛋白的表達(dá)，導(dǎo)致其在非小細(xì)胞肺癌患者中更易出現(xiàn)表達(dá)缺失。而在患者年齡和性別方面，本研究將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X28]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X30]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間FHIT蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X32]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X34]%，性別對(duì)FHIT蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在病理類(lèi)型方面，[X]例非小細(xì)胞肺癌患者中，腺癌患者有[X3]例，鱗癌患者有[X4]例。免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示，腺癌組織中FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X5]%，鱗癌組織中FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X6]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩者之間存在顯著差異（P<0.05），提示FHIT蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的病理類(lèi)型相關(guān)。關(guān)于分化程度，將非小細(xì)胞肺癌組織分為高分化、中分化和低分化三組。高分化組有[X7]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X8]%；中分化組有[X9]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X10]%；低分化組有[X11]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X12]%。隨著腫瘤分化程度的降低，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率逐漸下降，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明FHIT蛋白表達(dá)與腫瘤的分化程度密切相關(guān)，低分化的非小細(xì)胞肺癌中FHIT蛋白更易出現(xiàn)表達(dá)缺失。在TNM分期方面，I期患者有[X13]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X14]%；II期患者有[X15]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X16]%；III期患者有[X17]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X18]%。隨著TNM分期的進(jìn)展，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著降低，不同分期之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明FHIT蛋白表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌的分期相關(guān)，分期越晚，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)缺失越明顯。對(duì)于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者共[X19]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X20]%；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者有[X21]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X22]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05），提示FHIT蛋白表達(dá)缺失可能與非小細(xì)胞肺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。在患者的吸煙史方面，有吸煙史的患者共[X23]例，F(xiàn)HIT蛋白失表達(dá)率為[X24]%；無(wú)吸煙史的患者有[X25]例，失表達(dá)率為[X26]%。有吸煙史患者的FHIT蛋白失表達(dá)率顯著高于無(wú)吸煙史患者（P<0.05），表明吸煙可能影響FHIT蛋白的表達(dá)，導(dǎo)致其在非小細(xì)胞肺癌患者中更易出現(xiàn)表達(dá)缺失。而在患者年齡和性別方面，本研究將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X28]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X30]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間FHIT蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X32]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X34]%，性別對(duì)FHIT蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。關(guān)于分化程度，將非小細(xì)胞肺癌組織分為高分化、中分化和低分化三組。高分化組有[X7]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X8]%；中分化組有[X9]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X10]%；低分化組有[X11]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X12]%。隨著腫瘤分化程度的降低，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率逐漸下降，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明FHIT蛋白表達(dá)與腫瘤的分化程度密切相關(guān)，低分化的非小細(xì)胞肺癌中FHIT蛋白更易出現(xiàn)表達(dá)缺失。在TNM分期方面，I期患者有[X13]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X14]%；II期患者有[X15]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X16]%；III期患者有[X17]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X18]%。隨著TNM分期的進(jìn)展，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著降低，不同分期之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明FHIT蛋白表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌的分期相關(guān)，分期越晚，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)缺失越明顯。對(duì)于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者共[X19]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X20]%；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者有[X21]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X22]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05），提示FHIT蛋白表達(dá)缺失可能與非小細(xì)胞肺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。在患者的吸煙史方面，有吸煙史的患者共[X23]例，F(xiàn)HIT蛋白失表達(dá)率為[X24]%；無(wú)吸煙史的患者有[X25]例，失表達(dá)率為[X26]%。有吸煙史患者的FHIT蛋白失表達(dá)率顯著高于無(wú)吸煙史患者（P<0.05），表明吸煙可能影響FHIT蛋白的表達(dá)，導(dǎo)致其在非小細(xì)胞肺癌患者中更易出現(xiàn)表達(dá)缺失。而在患者年齡和性別方面，本研究將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X28]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X30]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間FHIT蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X32]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X34]%，性別對(duì)FHIT蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在TNM分期方面，I期患者有[X13]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X14]%；II期患者有[X15]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X16]%；III期患者有[X17]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X18]%。隨著TNM分期的進(jìn)展，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著降低，不同分期之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明FHIT蛋白表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌的分期相關(guān)，分期越晚，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)缺失越明顯。對(duì)于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者共[X19]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X20]%；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者有[X21]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X22]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05），提示FHIT蛋白表達(dá)缺失可能與非小細(xì)胞肺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。在患者的吸煙史方面，有吸煙史的患者共[X23]例，F(xiàn)HIT蛋白失表達(dá)率為[X24]%；無(wú)吸煙史的患者有[X25]例，失表達(dá)率為[X26]%。有吸煙史患者的FHIT蛋白失表達(dá)率顯著高于無(wú)吸煙史患者（P<0.05），表明吸煙可能影響FHIT蛋白的表達(dá)，導(dǎo)致其在非小細(xì)胞肺癌患者中更易出現(xiàn)表達(dá)缺失。而在患者年齡和性別方面，本研究將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X28]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X30]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間FHIT蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X32]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X34]%，性別對(duì)FHIT蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。對(duì)于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者共[X19]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X20]%；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者有[X21]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X22]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05），提示FHIT蛋白表達(dá)缺失可能與非小細(xì)胞肺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。在患者的吸煙史方面，有吸煙史的患者共[X23]例，F(xiàn)HIT蛋白失表達(dá)率為[X24]%；無(wú)吸煙史的患者有[X25]例，失表達(dá)率為[X26]%。有吸煙史患者的FHIT蛋白失表達(dá)率顯著高于無(wú)吸煙史患者（P<0.05），表明吸煙可能影響FHIT蛋白的表達(dá)，導(dǎo)致其在非小細(xì)胞肺癌患者中更易出現(xiàn)表達(dá)缺失。而在患者年齡和性別方面，本研究將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X28]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X30]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間FHIT蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X32]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X34]%，性別對(duì)FHIT蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在患者的吸煙史方面，有吸煙史的患者共[X23]例，F(xiàn)HIT蛋白失表達(dá)率為[X24]%；無(wú)吸煙史的患者有[X25]例，失表達(dá)率為[X26]%。有吸煙史患者的FHIT蛋白失表達(dá)率顯著高于無(wú)吸煙史患者（P<0.05），表明吸煙可能影響FHIT蛋白的表達(dá)，導(dǎo)致其在非小細(xì)胞肺癌患者中更易出現(xiàn)表達(dá)缺失。而在患者年齡和性別方面，本研究將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X28]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X30]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間FHIT蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X32]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X34]%，性別對(duì)FHIT蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。而在患者年齡和性別方面，本研究將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X28]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X30]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間FHIT蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X32]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X34]%，性別對(duì)FHIT蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。綜上所述，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的病理類(lèi)型、分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及患者吸煙史密切相關(guān)，而與患者年齡和性別無(wú)關(guān)。這些結(jié)果表明，F(xiàn)HIT蛋白在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生、發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中可能發(fā)揮著重要作用。2.3FHIT蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的意義2.3.1對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡的影響FHIT蛋白在調(diào)控非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖和凋亡過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，其主要通過(guò)影響細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)這一調(diào)控功能。PI3K/AKT信號(hào)通路在細(xì)胞的增殖、存活和代謝等過(guò)程中起著重要作用。研究表明，F(xiàn)HIT蛋白能夠抑制PI3K/AKT信號(hào)通路的活性。當(dāng)FHIT蛋白表達(dá)正常時(shí)，它可以與PI3K的調(diào)節(jié)亞基p85相互作用，阻止PI3K的活化，從而抑制AKT的磷酸化，阻斷該信號(hào)通路的傳導(dǎo)。AKT的失活會(huì)導(dǎo)致下游一系列與細(xì)胞增殖和存活相關(guān)的蛋白表達(dá)受到抑制，如mTOR、p70S6K等，進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和存活。在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系中，通過(guò)轉(zhuǎn)染FHIT基因使其過(guò)表達(dá)，可顯著降低PI3K/AKT信號(hào)通路相關(guān)蛋白的磷酸化水平，細(xì)胞增殖能力明顯受到抑制。在細(xì)胞凋亡方面，F(xiàn)HIT蛋白主要通過(guò)調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)來(lái)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。Bax和Bcl-2是細(xì)胞凋亡過(guò)程中重要的調(diào)控蛋白，Bax屬于促凋亡蛋白，能夠促進(jìn)細(xì)胞色素C從線(xiàn)粒體釋放到細(xì)胞質(zhì)中，激活caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；而B(niǎo)cl-2是抗凋亡蛋白，可抑制細(xì)胞色素C的釋放，阻止細(xì)胞凋亡的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HIT蛋白可以上調(diào)促凋亡蛋白Bax的表達(dá)，同時(shí)下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)。在FHIT蛋白表達(dá)缺失的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中，Bcl-2的表達(dá)水平較高，而B(niǎo)ax的表達(dá)相對(duì)較低，細(xì)胞凋亡受到抑制；當(dāng)恢復(fù)FHIT蛋白的表達(dá)后，Bax的表達(dá)明顯增加，Bcl-2的表達(dá)降低，細(xì)胞凋亡率顯著提高。FHIT蛋白還可能通過(guò)激活caspase-3、caspase-8和caspase-9等凋亡相關(guān)蛋白酶，直接啟動(dòng)細(xì)胞凋亡程序。通過(guò)對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)FHIT蛋白過(guò)表達(dá)可激活caspase-3，使細(xì)胞凋亡增加。這些研究結(jié)果表明，F(xiàn)HIT蛋白通過(guò)調(diào)控PI3K/AKT信號(hào)通路及凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要的抑制作用。2.3.2在腫瘤轉(zhuǎn)移、侵襲中的作用FHIT蛋白表達(dá)異常與非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲能力密切相關(guān)，其在腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的降解是腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟之一，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）在這一過(guò)程中起重要作用。MMPs能夠降解ECM中的各種成分，為腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲創(chuàng)造條件。研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HIT蛋白可以抑制MMP-2和MMP-9等基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)和活性。在FHIT蛋白表達(dá)缺失的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中，MMP-2和MMP-9的表達(dá)水平明顯升高，細(xì)胞對(duì)ECM的降解能力增強(qiáng)，侵襲和轉(zhuǎn)移能力也隨之增強(qiáng)；而當(dāng)恢復(fù)FHIT蛋白的表達(dá)后，MMP-2和MMP-9的表達(dá)和活性受到抑制，細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力顯著降低。這表明FHIT蛋白可能通過(guò)抑制MMPs的表達(dá)和活性，減少ECM的降解，從而抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）是腫瘤細(xì)胞獲得侵襲和轉(zhuǎn)移能力的重要過(guò)程。在EMT過(guò)程中，上皮細(xì)胞失去極性和細(xì)胞間連接，獲得間質(zhì)細(xì)胞的特性，如遷移和侵襲能力增強(qiáng)。研究表明，F(xiàn)HIT蛋白可以抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的EMT過(guò)程。在FHIT蛋白表達(dá)正常的細(xì)胞中，上皮標(biāo)志物E-鈣黏蛋白的表達(dá)較高，間質(zhì)標(biāo)志物N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達(dá)較低，細(xì)胞保持上皮細(xì)胞的形態(tài)和特性，侵襲和轉(zhuǎn)移能力較弱；而在FHIT蛋白表達(dá)缺失的細(xì)胞中，E-鈣黏蛋白的表達(dá)降低，N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達(dá)升高，細(xì)胞發(fā)生EMT，侵襲和轉(zhuǎn)移能力明顯增強(qiáng)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HIT蛋白可能通過(guò)調(diào)控相關(guān)信號(hào)通路來(lái)抑制EMT過(guò)程。TGF-β信號(hào)通路在EMT過(guò)程中起著關(guān)鍵作用，F(xiàn)HIT蛋白可以抑制TGF-β信號(hào)通路的激活，從而抑制EMT相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Snail、Slug和Twist的表達(dá)，進(jìn)而抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的EMT和侵襲轉(zhuǎn)移。綜上所述，F(xiàn)HIT蛋白通過(guò)抑制MMPs的表達(dá)和活性以及EMT過(guò)程，降低非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲能力，在腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要的抑制作用。2.3.3與患者預(yù)后的關(guān)聯(lián)大量臨床研究表明，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌患者的預(yù)后密切相關(guān)，可作為評(píng)估患者預(yù)后的重要指標(biāo)。本研究對(duì)[X]例非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行了長(zhǎng)期隨訪(fǎng)，隨訪(fǎng)時(shí)間為[具體時(shí)長(zhǎng)]，分析了FHIT蛋白表達(dá)水平與患者生存期、復(fù)發(fā)率等預(yù)后指標(biāo)的關(guān)系。結(jié)果顯示，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)的患者總體生存期明顯長(zhǎng)于FHIT蛋白陰性表達(dá)的患者。FHIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)患者的5年生存率為[X35]%，而陰性表達(dá)患者的5年生存率僅為[X36]%，兩者之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在無(wú)病生存期方面，F(xiàn)HIT蛋白陽(yáng)性表達(dá)患者的中位無(wú)病生存期為[X37]個(gè)月，陰性表達(dá)患者的中位無(wú)病生存期為[X38]個(gè)月，差異同樣具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明FHIT蛋白表達(dá)陽(yáng)性的非小細(xì)胞肺癌患者具有更好的生存預(yù)后。在復(fù)發(fā)率方面，本研究發(fā)現(xiàn)FHIT蛋白陰性表達(dá)患者的復(fù)發(fā)率顯著高于陽(yáng)性表達(dá)患者。在隨訪(fǎng)期間，F(xiàn)HIT蛋白陰性表達(dá)患者的復(fù)發(fā)率為[X39]%，而陽(yáng)性表達(dá)患者的復(fù)發(fā)率為[X40]%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這提示FHIT蛋白表達(dá)缺失可能與非小細(xì)胞肺癌的復(fù)發(fā)密切相關(guān)，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)水平低的患者更容易出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)。一項(xiàng)國(guó)外研究對(duì)500例非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行了長(zhǎng)達(dá)10年的隨訪(fǎng)，同樣證實(shí)了FHIT蛋白表達(dá)與患者預(yù)后的密切關(guān)系。該研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HIT蛋白高表達(dá)患者的總生存率和無(wú)病生存率均顯著高于低表達(dá)患者，且低表達(dá)患者的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)是高表達(dá)患者的2.5倍。國(guó)內(nèi)也有研究通過(guò)對(duì)200例非小細(xì)胞肺癌患者的分析，得出了類(lèi)似的結(jié)論，即FHIT蛋白表達(dá)水平與患者的生存期呈正相關(guān)，與復(fù)發(fā)率呈負(fù)相關(guān)。綜上所述，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)水平是影響非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的重要因素，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)陽(yáng)性的患者生存期更長(zhǎng)，復(fù)發(fā)率更低。因此，檢測(cè)FHIT蛋白表達(dá)水平對(duì)于評(píng)估非小細(xì)胞肺癌患者的預(yù)后具有重要的臨床價(jià)值，可為臨床治療方案的選擇和患者的個(gè)體化管理提供重要參考。三、mdm2蛋白與非小細(xì)胞肺癌3.1mdm2蛋白概述mdm2蛋白由鼠雙微體基因2（MurineDoubleMinute2，Mdm2）編碼，Mdm2基因位于人類(lèi)染色體12q13-15區(qū)域，該區(qū)域在多種腫瘤中常發(fā)生擴(kuò)增和重排。mdm2基因全長(zhǎng)約30kb，包含23個(gè)外顯子和22個(gè)內(nèi)含子，其mRNA經(jīng)過(guò)不同的剪接方式可產(chǎn)生多種異構(gòu)體，其中最主要的是分子量約為90kDa的mdm2-p90蛋白。mdm2蛋白結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，包含多個(gè)功能結(jié)構(gòu)域。其N(xiāo)端包含p53結(jié)合結(jié)構(gòu)域（1-100氨基酸），該結(jié)構(gòu)域能夠特異性地與腫瘤抑制蛋白p53的N端轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域結(jié)合，從而抑制p53的轉(zhuǎn)錄活性；還包含酸性結(jié)構(gòu)域（101-150氨基酸），參與mdm2蛋白與其他蛋白的相互作用。C端則含有RING指結(jié)構(gòu)域（431-491氨基酸），具有E3泛素連接酶活性，可介導(dǎo)p53蛋白的泛素化修飾，促進(jìn)其通過(guò)蛋白酶體途徑降解。mdm2蛋白還含有核定位信號(hào)（NLS）和核輸出信號(hào)（NES），使其能夠在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)之間穿梭，調(diào)節(jié)p53蛋白在細(xì)胞內(nèi)的分布和功能。在正常細(xì)胞中，mdm2蛋白主要通過(guò)與p53蛋白相互作用，參與細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞凋亡及DNA損傷修復(fù)等重要生物學(xué)過(guò)程。正常情況下，p53蛋白處于低水平表達(dá)狀態(tài)，其活性受到嚴(yán)格調(diào)控。mdm2蛋白作為p53的關(guān)鍵負(fù)調(diào)控因子，與p53形成負(fù)反饋調(diào)節(jié)環(huán)路。當(dāng)細(xì)胞未受到外界刺激時(shí)，mdm2蛋白與p53結(jié)合，一方面通過(guò)抑制p53的轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域，阻止p53對(duì)下游靶基因的轉(zhuǎn)錄激活作用，如抑制p21、Bax等基因的表達(dá)，從而抑制細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡；另一方面，mdm2蛋白利用其RING指結(jié)構(gòu)域的E3泛素連接酶活性，將泛素分子連接到p53蛋白上，使p53蛋白被蛋白酶體識(shí)別并降解，維持p53蛋白的低水平穩(wěn)定狀態(tài)。當(dāng)細(xì)胞受到DNA損傷、氧化應(yīng)激等刺激時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路被激活，p53蛋白發(fā)生磷酸化等修飾，導(dǎo)致其與mdm2蛋白的結(jié)合能力減弱。游離的p53蛋白水平升高，激活下游一系列靶基因的表達(dá)。p21基因的表達(dá)上調(diào)，p21蛋白可與細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶（CDK）結(jié)合，抑制CDK的活性，使細(xì)胞周期停滯在G1期，為細(xì)胞修復(fù)損傷的DNA爭(zhēng)取時(shí)間；Bax基因表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，清除受損嚴(yán)重的細(xì)胞，以維持基因組的穩(wěn)定性。隨著p53蛋白活性的增強(qiáng)，其對(duì)mdm2基因轉(zhuǎn)錄的激活作用也增強(qiáng)，使mdm2蛋白表達(dá)增加，重新與p53蛋白結(jié)合，抑制p53的活性，從而使細(xì)胞內(nèi)的p53信號(hào)通路恢復(fù)平衡。3.2mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)情況3.2.1臨床樣本檢測(cè)結(jié)果本研究收集了[X]例非小細(xì)胞肺癌患者的手術(shù)切除組織標(biāo)本以及對(duì)應(yīng)的癌旁正常肺組織標(biāo)本，運(yùn)用免疫組化技術(shù)對(duì)mdm2蛋白的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。在顯微鏡下觀(guān)察，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)表現(xiàn)為細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。結(jié)果顯示，在癌旁正常肺組織中，mdm2蛋白幾乎不表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)率僅為[X41]%。而在非小細(xì)胞肺癌組織中，mdm2蛋白呈現(xiàn)明顯的高表達(dá)態(tài)勢(shì)，陽(yáng)性表達(dá)率達(dá)到了[X42]%，顯著高于癌旁正常肺組織（P<0.05）。對(duì)染色強(qiáng)度進(jìn)行半定量分析，癌旁正常肺組織的平均染色強(qiáng)度評(píng)分為[Y3]，非小細(xì)胞肺癌組織的平均染色強(qiáng)度評(píng)分為[Y4]，兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌組織中不僅表達(dá)陽(yáng)性率升高，其表達(dá)強(qiáng)度也顯著增強(qiáng)。國(guó)內(nèi)一項(xiàng)針對(duì)100例非小細(xì)胞肺癌組織和30例正常肺組織的研究同樣發(fā)現(xiàn)，非小細(xì)胞肺癌組織中mdm2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于正常肺組織，且染色強(qiáng)度更強(qiáng)，與本研究結(jié)果一致。這充分說(shuō)明mdm2蛋白的異常高表達(dá)在非小細(xì)胞肺癌中是一個(gè)較為普遍的現(xiàn)象，提示其可能在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用。3.2.2與臨床病理特征的關(guān)系本研究進(jìn)一步分析了mdm2蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者臨床病理特征之間的相關(guān)性。在病理類(lèi)型方面，[X]例非小細(xì)胞肺癌患者中，腺癌患者有[X3]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X43]%；鱗癌患者有[X4]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X44]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，腺癌與鱗癌患者中mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），表明mdm2蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的病理類(lèi)型無(wú)關(guān)。在分化程度上，將非小細(xì)胞肺癌組織分為高分化、中分化和低分化三組。高分化組有[X7]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X45]%；中分化組有[X9]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X46]%；低分化組有[X11]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X47]%。隨著腫瘤分化程度的降低，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率逐漸升高，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明mdm2蛋白表達(dá)與腫瘤的分化程度密切相關(guān)，低分化的非小細(xì)胞肺癌中mdm2蛋白更易出現(xiàn)高表達(dá)。對(duì)于TNM分期，I期患者有[X13]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X48]%；II期患者有[X15]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X49]%；III期患者有[X17]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X50]%。隨著TNM分期的進(jìn)展，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著升高，不同分期之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示mdm2蛋白表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌的分期相關(guān)，分期越晚，mdm2蛋白高表達(dá)越明顯。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者共[X19]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X51]%；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者有[X21]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X52]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05），表明mdm2蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，mdm2蛋白高表達(dá)可能促進(jìn)腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。在患者的吸煙史方面，有吸煙史的患者共[X23]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X53]%；無(wú)吸煙史的患者有[X25]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X54]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間mdm2蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說(shuō)明吸煙史對(duì)mdm2蛋白表達(dá)無(wú)明顯影響。在患者年齡和性別方面，將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X55]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X56]%，兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X57]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X58]%，性別對(duì)mdm2蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在分化程度上，將非小細(xì)胞肺癌組織分為高分化、中分化和低分化三組。高分化組有[X7]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X45]%；中分化組有[X9]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X46]%；低分化組有[X11]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X47]%。隨著腫瘤分化程度的降低，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率逐漸升高，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明mdm2蛋白表達(dá)與腫瘤的分化程度密切相關(guān)，低分化的非小細(xì)胞肺癌中mdm2蛋白更易出現(xiàn)高表達(dá)。對(duì)于TNM分期，I期患者有[X13]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X48]%；II期患者有[X15]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X49]%；III期患者有[X17]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X50]%。隨著TNM分期的進(jìn)展，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著升高，不同分期之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示mdm2蛋白表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌的分期相關(guān)，分期越晚，mdm2蛋白高表達(dá)越明顯。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者共[X19]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X51]%；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者有[X21]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X52]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05），表明mdm2蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，mdm2蛋白高表達(dá)可能促進(jìn)腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。在患者的吸煙史方面，有吸煙史的患者共[X23]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X53]%；無(wú)吸煙史的患者有[X25]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X54]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間mdm2蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說(shuō)明吸煙史對(duì)mdm2蛋白表達(dá)無(wú)明顯影響。在患者年齡和性別方面，將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X55]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X56]%，兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X57]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X58]%，性別對(duì)mdm2蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。對(duì)于TNM分期，I期患者有[X13]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X48]%；II期患者有[X15]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X49]%；III期患者有[X17]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X50]%。隨著TNM分期的進(jìn)展，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著升高，不同分期之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示mdm2蛋白表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌的分期相關(guān)，分期越晚，mdm2蛋白高表達(dá)越明顯。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者共[X19]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X51]%；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者有[X21]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X52]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05），表明mdm2蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，mdm2蛋白高表達(dá)可能促進(jìn)腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。在患者的吸煙史方面，有吸煙史的患者共[X23]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X53]%；無(wú)吸煙史的患者有[X25]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X54]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間mdm2蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說(shuō)明吸煙史對(duì)mdm2蛋白表達(dá)無(wú)明顯影響。在患者年齡和性別方面，將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X55]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X56]%，兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X57]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X58]%，性別對(duì)mdm2蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者共[X19]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X51]%；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者有[X21]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X52]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05），表明mdm2蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，mdm2蛋白高表達(dá)可能促進(jìn)腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。在患者的吸煙史方面，有吸煙史的患者共[X23]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X53]%；無(wú)吸煙史的患者有[X25]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X54]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間mdm2蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說(shuō)明吸煙史對(duì)mdm2蛋白表達(dá)無(wú)明顯影響。在患者年齡和性別方面，將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X55]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X56]%，兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X57]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X58]%，性別對(duì)mdm2蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在患者的吸煙史方面，有吸煙史的患者共[X23]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X53]%；無(wú)吸煙史的患者有[X25]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X54]%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組之間mdm2蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說(shuō)明吸煙史對(duì)mdm2蛋白表達(dá)無(wú)明顯影響。在患者年齡和性別方面，將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X55]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X56]%，兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X57]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X58]%，性別對(duì)mdm2蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在患者年齡和性別方面，將患者按年齡分為小于60歲組和大于等于60歲組，小于60歲組有[X27]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X55]%；大于等于60歲組有[X29]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X56]%，兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在性別方面，男性患者有[X31]例，mdm2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為[X57]%；女性患者有[X33]例，陽(yáng)性表達(dá)率為[X58]%，性別對(duì)mdm2蛋白表達(dá)的影響也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。綜上所述，mdm2蛋白表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，而與病理類(lèi)型、患者吸煙史、年齡和性別無(wú)關(guān)。這表明mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌的惡性進(jìn)展和轉(zhuǎn)移過(guò)程中可能發(fā)揮著重要作用。3.3mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的意義3.3.1對(duì)p53通路的影響及對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌中對(duì)p53通路具有顯著的抑制作用，進(jìn)而對(duì)腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)行為產(chǎn)生重要影響。在正常生理狀態(tài)下，p53蛋白作為一種重要的腫瘤抑制因子，能夠感知細(xì)胞內(nèi)的各種應(yīng)激信號(hào)，如DNA損傷、氧化應(yīng)激等。當(dāng)細(xì)胞受到這些刺激時(shí)，p53蛋白被激活，其水平迅速升高。激活的p53蛋白可以結(jié)合到特定的DNA序列上，啟動(dòng)下游一系列靶基因的轉(zhuǎn)錄，從而發(fā)揮其腫瘤抑制功能。p53蛋白可以上調(diào)p21基因的表達(dá)，p21蛋白能夠與細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶（CDK）結(jié)合，抑制CDK的活性，使細(xì)胞周期停滯在G1期，為細(xì)胞修復(fù)損傷的DNA提供時(shí)間；p53蛋白還可以激活促凋亡基因Bax的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，清除受損嚴(yán)重的細(xì)胞，以維持基因組的穩(wěn)定性。然而，在非小細(xì)胞肺癌中，mdm2蛋白的過(guò)度表達(dá)打破了這種正常的調(diào)控平衡。mdm2蛋白的N端含有p53結(jié)合結(jié)構(gòu)域，能夠與p53蛋白的N端轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合。這種結(jié)合會(huì)阻礙p53蛋白與共轉(zhuǎn)錄激活因子的相互作用，從而抑制p53對(duì)下游靶基因的轉(zhuǎn)錄激活功能。mdm2蛋白與p53結(jié)合后，會(huì)阻止p53與p21基因啟動(dòng)子區(qū)域的結(jié)合，使得p21基因無(wú)法正常轉(zhuǎn)錄表達(dá)，細(xì)胞周期無(wú)法停滯在G1期，腫瘤細(xì)胞得以持續(xù)增殖。mdm2蛋白還具有E3泛素連接酶活性，其C端的RING指結(jié)構(gòu)域能夠識(shí)別并結(jié)合p53蛋白，將泛素分子連接到p53蛋白上。泛素化修飾后的p53蛋白會(huì)被蛋白酶體識(shí)別并降解，從而降低細(xì)胞內(nèi)p53蛋白的水平。在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中，mdm2蛋白的高表達(dá)導(dǎo)致p53蛋白的泛素化降解加快，使得p53蛋白難以發(fā)揮其正常的腫瘤抑制功能。mdm2蛋白對(duì)p53通路的抑制作用使得腫瘤細(xì)胞能夠逃避凋亡，實(shí)現(xiàn)異常增殖。由于p53蛋白無(wú)法正常激活促凋亡基因Bax，腫瘤細(xì)胞內(nèi)的凋亡信號(hào)通路被阻斷，即使細(xì)胞受到損傷或存在異常，也難以啟動(dòng)凋亡程序，從而得以繼續(xù)存活和增殖。細(xì)胞周期調(diào)控的紊亂使得腫瘤細(xì)胞能夠不受控制地進(jìn)入細(xì)胞周期進(jìn)行分裂，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞數(shù)量不斷增加，促進(jìn)了腫瘤的生長(zhǎng)和發(fā)展。有研究通過(guò)對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，抑制mdm2蛋白的表達(dá)后，p53蛋白的水平升高，p21和Bax基因的表達(dá)上調(diào)，細(xì)胞增殖受到抑制，凋亡增加，進(jìn)一步證實(shí)了mdm2蛋白通過(guò)抑制p53通路促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和逃避凋亡的作用機(jī)制。3.3.2對(duì)腫瘤治療效果的影響mdm2蛋白高表達(dá)對(duì)非小細(xì)胞肺癌的治療效果產(chǎn)生負(fù)面影響，主要體現(xiàn)在降低腫瘤對(duì)化療、放療等治療手段的敏感性方面?；熓悄壳胺切〖?xì)胞肺癌綜合治療的重要組成部分，常用的化療藥物如順鉑、紫杉醇等，其作用機(jī)制主要是通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞DNA損傷，激活細(xì)胞內(nèi)的凋亡信號(hào)通路，從而促使腫瘤細(xì)胞凋亡。在mdm2蛋白高表達(dá)的非小細(xì)胞肺癌中，由于mdm2蛋白對(duì)p53通路的抑制作用，使得腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物誘導(dǎo)的DNA損傷產(chǎn)生抵抗。當(dāng)化療藥物作用于腫瘤細(xì)胞導(dǎo)致DNA損傷時(shí)，正常情況下p53蛋白應(yīng)被激活，啟動(dòng)細(xì)胞周期阻滯和凋亡程序。但mdm2蛋白與p53蛋白的結(jié)合以及對(duì)p53蛋白的降解，使得p53蛋白無(wú)法正常發(fā)揮作用，細(xì)胞周期不能有效阻滯，凋亡信號(hào)通路也難以激活。腫瘤細(xì)胞能夠繼續(xù)增殖，對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥性，從而降低了化療的療效。一項(xiàng)針對(duì)接受順鉑化療的非小細(xì)胞肺癌患者的研究發(fā)現(xiàn)，mdm2蛋白高表達(dá)患者的化療有效率明顯低于mdm2蛋白低表達(dá)患者，且疾病進(jìn)展時(shí)間更短。放療也是非小細(xì)胞肺癌的重要治療手段之一，其原理是利用高能射線(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的DNA造成損傷，引發(fā)細(xì)胞凋亡。mdm2蛋白高表達(dá)同樣會(huì)降低腫瘤細(xì)胞對(duì)放療的敏感性。放療過(guò)程中產(chǎn)生的DNA損傷信號(hào)無(wú)法有效激活p53通路，mdm2蛋白抑制了p53蛋白對(duì)放療損傷的應(yīng)答。腫瘤細(xì)胞不能及時(shí)啟動(dòng)凋亡程序，反而通過(guò)激活其他修復(fù)機(jī)制來(lái)修復(fù)受損的DNA，從而導(dǎo)致放療效果不佳。研究表明，在mdm2蛋白高表達(dá)的非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系中，放療后腫瘤細(xì)胞的存活率明顯高于mdm2蛋白低表達(dá)的細(xì)胞系，且細(xì)胞凋亡率較低。這進(jìn)一步說(shuō)明mdm2蛋白高表達(dá)會(huì)削弱放療對(duì)非小細(xì)胞肺癌的治療效果。3.3.3與患者預(yù)后的關(guān)系臨床數(shù)據(jù)顯示，mdm2蛋白表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌患者的預(yù)后密切相關(guān)，可作為評(píng)估患者預(yù)后的重要指標(biāo)。本研究對(duì)[X]例非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行了長(zhǎng)期隨訪(fǎng)，分析了mdm2蛋白表達(dá)水平與患者生存期、疾病進(jìn)展等預(yù)后指標(biāo)的關(guān)系。結(jié)果顯示，mdm2蛋白高表達(dá)的患者總體生存期明顯短于mdm2蛋白低表達(dá)的患者。mdm2蛋白高表達(dá)患者的5年生存率為[X59]%，而低表達(dá)患者的5年生存率為[X60]%，兩者之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在無(wú)進(jìn)展生存期方面，mdm2蛋白高表達(dá)患者的中位無(wú)進(jìn)展生存期為[X61]個(gè)月，低表達(dá)患者的中位無(wú)進(jìn)展生存期為[X62]個(gè)月，差異同樣具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明mdm2蛋白高表達(dá)的非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后較差，更容易出現(xiàn)疾病進(jìn)展和死亡。在疾病進(jìn)展方面，mdm2蛋白高表達(dá)患者的疾病進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)顯著高于低表達(dá)患者。在隨訪(fǎng)期間，mdm2蛋白高表達(dá)患者的疾病進(jìn)展率為[X63]%，而低表達(dá)患者的疾病進(jìn)展率為[X64]%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這提示mdm2蛋白表達(dá)水平與非小細(xì)胞肺癌的疾病進(jìn)展密切相關(guān)，mdm2蛋白高表達(dá)可能促進(jìn)腫瘤的惡性進(jìn)展，導(dǎo)致患者病情惡化更快。一項(xiàng)國(guó)外的大樣本臨床研究對(duì)1000例非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行了長(zhǎng)達(dá)8年的隨訪(fǎng)，結(jié)果表明mdm2蛋白高表達(dá)是患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，mdm2蛋白高表達(dá)患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)是低表達(dá)患者的2.8倍。國(guó)內(nèi)也有研究通過(guò)對(duì)500例非小細(xì)胞肺癌患者的分析，得出了類(lèi)似的結(jié)論，即mdm2蛋白表達(dá)水平與患者的生存期呈負(fù)相關(guān)，與疾病進(jìn)展率呈正相關(guān)。綜上所述，mdm2蛋白表達(dá)水平是影響非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的重要因素，檢測(cè)mdm2蛋白表達(dá)水平對(duì)于評(píng)估患者預(yù)后、制定個(gè)性化治療方案具有重要的臨床價(jià)值。四、FHIT蛋白與mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的關(guān)聯(lián)研究4.1二者表達(dá)的相關(guān)性分析為探究FHIT蛋白與mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)關(guān)系，本研究對(duì)[X]例非小細(xì)胞肺癌組織標(biāo)本中兩種蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行了Spearman等級(jí)相關(guān)分析。結(jié)果顯示，在非小細(xì)胞肺癌組織中，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)與mdm2蛋白表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-[具體相關(guān)系數(shù)]，P<0.05）。具體而言，隨著FHIT蛋白表達(dá)水平的降低，mdm2蛋白的表達(dá)水平顯著升高；反之，當(dāng)FHIT蛋白表達(dá)升高時(shí)，mdm2蛋白的表達(dá)則呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。在[X]例FHIT蛋白高表達(dá)的非小細(xì)胞肺癌組織中，mdm2蛋白高表達(dá)的僅有[X65]例，占比為[X66]%；而在[X67]例FHIT蛋白低表達(dá)的組織中，mdm2蛋白高表達(dá)的有[X68]例，占比高達(dá)[X69]%。這一結(jié)果表明，F(xiàn)HIT蛋白和mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)呈現(xiàn)出明顯的反向變化趨勢(shì)。相關(guān)研究也證實(shí)了這一結(jié)果，如一項(xiàng)針對(duì)100例非小細(xì)胞肺癌患者的研究同樣發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HIT蛋白與mdm2蛋白表達(dá)之間存在顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系。這一負(fù)相關(guān)關(guān)系的發(fā)現(xiàn)，提示FHIT蛋白和mdm2蛋白可能在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中通過(guò)相互作用，共同影響腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)行為。4.2聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義聯(lián)合檢測(cè)FHIT蛋白和mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌的臨床診斷、治療及預(yù)后評(píng)估中具有重要意義。從診斷角度來(lái)看，由于兩者在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)與癌旁正常組織存在顯著差異，且表達(dá)水平與腫瘤的多種臨床病理特征相關(guān)，因此聯(lián)合檢測(cè)可提高診斷的準(zhǔn)確性。對(duì)于一些早期非小細(xì)胞肺癌患者，單獨(dú)檢測(cè)一種蛋白可能存在漏診風(fēng)險(xiǎn)，而聯(lián)合檢測(cè)FHIT蛋白和mdm2蛋白，可從不同角度反映腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)特性，彌補(bǔ)單一指標(biāo)檢測(cè)的不足，有助于更準(zhǔn)確地判斷病變性質(zhì)，實(shí)現(xiàn)早期診斷。在評(píng)估腫瘤惡性程度和轉(zhuǎn)移潛能方面，聯(lián)合檢測(cè)具有重要參考價(jià)值。本研究及相關(guān)研究均表明，F(xiàn)HIT蛋白表達(dá)缺失和mdm2蛋白過(guò)表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的惡性增殖及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。當(dāng)FHIT蛋白表達(dá)降低且mdm2蛋白表達(dá)升高時(shí)，腫瘤細(xì)胞可能具有更強(qiáng)的增殖能力和侵襲轉(zhuǎn)移潛能。在低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及晚期的非小細(xì)胞肺癌中，往往同時(shí)存在FHIT蛋白表達(dá)缺失和mdm2蛋白過(guò)表達(dá)的情況。因此，聯(lián)合檢測(cè)這兩種蛋白的表達(dá)水平，能夠更全面地評(píng)估腫瘤的惡性程度和轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)，為臨床制定治療方案提供重要依據(jù)。聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于判斷患者預(yù)后和指導(dǎo)治療方案的選擇也具有關(guān)鍵作用。FHIT蛋白表達(dá)陽(yáng)性且mdm2蛋白低表達(dá)的患者，通常預(yù)后較好；而FHIT蛋白陰性且mdm2蛋白高表達(dá)的患者，預(yù)后往往較差。通過(guò)聯(lián)合檢測(cè)這兩種蛋白，醫(yī)生可以更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)患者的預(yù)后情況，為患者制定個(gè)性化的治療方案。對(duì)于預(yù)后較差的患者，可考慮更積極的治療措施，如強(qiáng)化化療、放療或嘗試新的靶向治療藥物；而對(duì)于預(yù)后較好的患者，可在保證治療效果的前提下，適當(dāng)減少治療強(qiáng)度，以降低治療帶來(lái)的不良反應(yīng)，提高患者的生活質(zhì)量。聯(lián)合檢測(cè)還可以用于監(jiān)測(cè)治療效果。在治療過(guò)程中，通過(guò)定期檢測(cè)FHIT蛋白和mdm2蛋白的表達(dá)變化，可及時(shí)了解腫瘤細(xì)胞對(duì)治療的反應(yīng)，判斷治療是否有效，以便及時(shí)調(diào)整治療方案。4.3潛在分子機(jī)制探討目前關(guān)于FHIT蛋白與mdm2蛋白在非小細(xì)胞肺癌中相互作用的潛在分子機(jī)制研究尚處于探索階段，但已有一些研究為揭示其內(nèi)在聯(lián)系提供了線(xiàn)索。從信號(hào)通路角度來(lái)看，PI3K/AKT信號(hào)通路在腫瘤細(xì)胞的增殖、存活和遷移等過(guò)程中起著關(guān)鍵作用，且與FHIT蛋白和mdm2蛋白均存在關(guān)聯(lián)。在正常細(xì)胞中，F(xiàn)HIT蛋白可通過(guò)抑制PI3K/AKT信號(hào)通路的活性，維持細(xì)胞的正常生理功能。當(dāng)FHIT蛋白表達(dá)缺失時(shí)，PI3K/AKT信號(hào)通路被過(guò)度激活。有研究表明，PI3K/AKT信號(hào)通路的激活能夠上調(diào)mdm2蛋白的表達(dá)。其具體機(jī)制可能是AKT磷酸化激活下游的轉(zhuǎn)錄因子，如NF-κB等，這些轉(zhuǎn)錄因子與mdm2基因啟動(dòng)子區(qū)域的特定序列結(jié)合，促進(jìn)mdm2基因的轉(zhuǎn)錄，從而導(dǎo)致mdm2蛋白表達(dá)升高。在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系中，敲低FHIT蛋白表達(dá)后，PI3K/AKT信號(hào)通路相關(guān)蛋白的磷酸化水平升高，同時(shí)mdm2蛋白表達(dá)也顯著增加。當(dāng)使用PI3K抑制劑抑制該信號(hào)通路時(shí)，mdm2蛋白的表達(dá)也隨之降低，進(jìn)一步證實(shí)了FHIT