備案號(hào)：34644-2012水體中甲基睪丸酮的測(cè)定2012-06-04發(fā)布2012-09-15實(shí)施本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009的規(guī)定進(jìn)行起草。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為資料性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由廣東省海洋與漁業(yè)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由廣東省水產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所、中山市漁農(nóng)養(yǎng)殖科技開發(fā)加工園。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：楊賢慶、鄧建朝、岑劍偉、吳燕燕、魏涯、黃卉、陳曼華。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法以二氯甲烷提取水體中殘留的甲基睪丸酮，提取液蒸發(fā)至近干后，用流動(dòng)相溶解定容，經(jīng)微孔濾4試劑4.2二氯甲烷。4.30.5%乙酸溶液：取0.5mL冰乙酸于100mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻。4.4甲基睪丸酮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(200μg/mL):準(zhǔn)確稱取甲基睪丸酮標(biāo)準(zhǔn)品(含量≥98%)10.0mg,用甲醇(4.1)溶解，定容于50mL容量瓶中，-18℃避光保存。4.5甲基睪丸酮標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確吸取適量甲基睪丸酮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(4.4),用甲醇(4.1)逐級(jí)稀釋5.2電子分析天平：感量0.0001g。5.3萃取振蕩儀。5.4旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。6.2流動(dòng)相組成：甲醇(4.1)+0.5%乙酸溶液(4.3)=77+23(V?+V?)。6.3流速：1.0mL/min。26.4柱溫：30℃。6.5檢測(cè)器：檢測(cè)波長254nm。7操作方法7.1樣品制備將水樣混合均勻，12h內(nèi)測(cè)定；如不能立即測(cè)定，應(yīng)放置于0℃~4℃冰箱中，48h內(nèi)測(cè)定。7.2提取和凈化先將水樣用0.45μm膜過濾，除去固體雜質(zhì)。準(zhǔn)確移取100mL二氯甲烷，震搖5min,靜置分層，將二氯甲烷層移至100mL的梨形瓶。向分液漏斗加入30mL二氯甲烷重復(fù)上述步驟一次，靜置分層后，將二氯甲烷層并入同一梨形瓶，于45℃條件下減壓蒸發(fā)至近干。殘留物用1.0mL流動(dòng)相溶解，取溶解液過0.45μm微孔濾膜，供液相色譜測(cè)定。7.3色譜分析將標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品提取液置于液相色譜儀進(jìn)樣器中，按上述色譜條件進(jìn)行色譜分析，記錄峰面積，響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍之內(nèi)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。標(biāo)準(zhǔn)色譜圖參見附錄A中圖A.1。試樣中甲基睪丸酮的殘留量按照公式(1)計(jì)算，計(jì)算結(jié)果需扣除空白值，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。式中：X——試樣中甲基睪丸酮含量，單位為微克每升(μg/L);Cs——標(biāo)準(zhǔn)溶液中甲基睪丸酮含量，單位為微克每毫升(μg/mL);A——試液峰面積響應(yīng)值；As——標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積響應(yīng)值；V——試液定容體積，單位為毫升(mL);V?——試樣體積，單位為毫升(mL)。9線性范圍10檢測(cè)限、精密度和回收率10.1檢測(cè)限3本方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤10%。本方法甲基睪丸酮在1μg/L～25μg/L添加濃度范圍內(nèi)，回收率≥70%。4(資料性附錄)