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擬征求意見的食品添加劑名單一、食品工業(yè)用酶制劑新品種序號酶來源供體1.乳糖酶Lactase黑曲霉Aspergillusniger米曲霉Aspergillusoryzae食品工業(yè)用酶制劑的質量規(guī)格要求應符合《食品安全國家標準食品添加劑食品工業(yè)用酶制劑》（GB1886.174）的規(guī)定。二、食品營養(yǎng)強化劑新品種中文名稱：2’-巖藻糖基乳糖英文名稱：2’-fucosyllactose，2’-FL功能分類：食品營養(yǎng)強化劑（一）用量及使用范圍食品分類號食品名稱使用量備注01.03.02調制乳粉(僅限兒童用乳粉)0.7-2.4g/L以即食狀態(tài)計，粉狀產(chǎn)品按沖調倍數(shù)增加使用量13.01.01嬰兒配方食品13.01.02較大嬰兒和幼兒配方食品13.01.03特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品（二）質量規(guī)格要求1范圍本質量規(guī)格適用于以乳糖等為原料，經(jīng)發(fā)酵、提純、干燥等工藝制得的營養(yǎng)強化劑2'-巖藻糖基乳糖。2’-巖藻糖基乳糖的生產(chǎn)菌應經(jīng)過安全性評估并符合附錄D的要求。化學名稱、分子式、結構式和相對分子質量化學名稱α-L-吡喃巖藻糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-D-吡喃葡萄糖分子式C18H32O15結構式相對分子質量488.44（按2020年國際相對原子質量）技術要求感官要求1

表1感官要求指 標要 求檢驗方法色澤白色至類白色取適量試樣置于清潔、干燥的白瓷盤或燒杯中，在自然光線下，觀察其色澤和狀態(tài)。狀態(tài)粉末理化指標2

表2理化指標項 目指標檢驗方法2'-巖藻糖基乳糖（以干基計），w/%≥94.0附錄A中的A.2D-乳糖，w/%≤3.0附錄A中的A.3二巖藻糖基乳糖，w/%≤2.0附錄A中的A.3水分，w/%≤9.0GB5009.3卡爾?費休法殘留蛋白含量/（mg/kg）≤100附錄B灰分，w/%≤0.5GB5009.4總砷（以As計）/（mg/kg）≤0.2GB5009.11鉛（Pb）/（mg/kg）≤0.05GB5009.12微生物指標微生物指標應符合表3的規(guī)定。表3微生物指標項 目指 標檢驗方法菌落總數(shù)/(CFU/g) ≤500GB4789.2腸桿菌科/(CFU/g) ＜10GB4789.41沙門氏菌/(25g)不得檢出GB4789.4PAGEPAGE4附錄A 檢驗方法一般規(guī)定GB/T6682規(guī)定GB/T601GB/T602GB/T6032’-巖藻糖基乳糖（以干基計）的測定方法提要2’-巖藻糖基乳糖溶于水或溶劑，在親水保留色譜柱或酰胺鍵合色譜柱的液相色譜條件下分離，示差折光檢測器檢測，用面積歸一化法或外標法定量。試劑和材料2'-巖藻糖基乳糖對照品：純度≥95%。水：GB/T6682規(guī)定的一級水。乙腈：色譜純。三乙胺：色譜純。A.2.2.5溶劑：乙腈:水=50:50（v/v）。儀器和設備高效液相色譜儀：配備示差折光檢測器。參考色譜條件親水保留色譜柱色譜條件如下：色譜柱：親水保留色譜柱，250mm×4.6mm,3.5μm或等效色譜柱。582.8g857.2g10mL的三乙胺。柱溫：25。示差折光檢測器溫度：35。流速：1mL/min。進樣量：5μL。運行時間：45min。酰胺鍵合柱色譜條件如下：色譜柱：酰胺鍵合色譜柱，150mm×4.6mm,3μm或等效色譜柱。流動相：乙腈:水=64:36(v/v)。柱溫：25℃。示差折光檢測器溫度：37℃。流速：1.1mL/min。進樣量：5μL。運行時間：8min。分析步驟標準溶液配制親水保留色譜柱色譜條件標準溶液的配制2’-巖藻糖基乳糖對照品，轉移到合適的容量瓶中，用水溶解對照品。2’5.0g/100mL的標準溶液。該溶4℃~8℃4酰胺鍵合柱色譜條件標準溶液的配制2’-巖藻糖基乳糖對照品，用溶劑溶解，容量瓶中定容，得到1232’-巖藻糖基乳糖標準溶液的濃度分別約為4.2mg/mL、5.0mg/mL和6.0mg/mL。該溶液在冰箱中4℃~8℃保存，有效期4周。試樣溶液配制親水保留色譜柱色譜條件試樣溶液的配制5g±0.51100mL2cm50mg/mL的試樣溶液。相同試樣做三個平行實驗。5g，可相應按照比例折算所需精確稱取的樣品量，配置成濃度50mg/mL的試樣溶液。酰胺鍵合柱色譜條件試樣溶液的配制47.0mg~54.0mg10mL容量瓶中，用溶劑溶解并定容至刻度。相同試樣做三個平行實驗。系統(tǒng)適用性試驗親水保留色譜柱色譜條件的系統(tǒng)適用性試驗3——化合物保留時間重復性的相對標準偏差＜1.0%（n＝3）；——化合物響應值重復性的相對標準偏差＜1.0%（n＝3）；——洗脫液的色譜圖應為純基線。親水保留色譜柱色譜條件下2’-巖藻糖基乳糖對照品的參考色譜圖譜見附錄C.1。酰胺鍵合柱色譜條件的系統(tǒng)適用性試驗當滿足以下條件時，可進行試樣溶液的測定：——連續(xù)進樣溶劑5次。最后一次進樣在色譜圖4min~7min保留時間段內未發(fā)現(xiàn)色譜峰；——進樣對照品溶液2時，計算得到的2’-巖藻糖基乳糖信噪比≥100，保留時間約為5min~6min；——連續(xù)3次進樣試樣溶液獲得的峰面積的相對標準偏差應＜1.0%?！凑障盗袠藴嗜芤?，試樣測試溶液，系列標準溶液序列測試。試樣溶液前后測得系列標準溶液中相同濃度的2’-巖藻糖基乳糖峰面積的相對偏差需小于2.0%。如不滿足偏差要求，需復測。酰胺鍵合柱色譜條件下2’-巖藻糖基乳糖對照品的參考色譜圖譜見附錄C.2。2’-巖藻糖基乳糖含量測定面積歸一化法在親水保留色譜柱參考色譜條件下，2’-巖藻糖基乳糖含量以面積歸一化法定量。2'）1按式（A.1計算。式中：

（A.1）A1——試樣溶液中2'-巖藻糖基乳糖的峰面積；S1——試樣溶液中除溶劑峰外所有成分峰面積的和。外標法在酰胺鍵合柱參考色譜條件下，2’-巖藻糖基乳糖含量以外標法定量。以系列標準溶液中2’-巖藻糖基乳糖的濃度為橫坐標，相應的峰面積為縱坐標繪制過零點的線性標準曲線，依試樣溶液的峰面積在標準曲線上確定其中2’-巖藻糖基乳糖的濃度。22按式（A.2計算。（A.2）式中：C1——由標準曲線得到的試樣溶液中2’-巖藻糖基乳糖的濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；V1——試樣的定容體積，單位為毫升（mL）；m1——試樣的質量，單位為毫克（mg）?！?按式（A.3計算。（A.3）式中：ω——產(chǎn)品水分含量的實測值，%。精密度在重復性測定條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不超過其算術平均值的1%。D-乳糖和二巖藻糖基乳糖的測定方法提要2’-巖藻糖基乳糖溶于水或溶劑，在親水保留色譜柱或氨基聚合物柱的液相色譜條件下D-乳糖和二巖藻糖基乳糖對照品的保留時間定性，外標法或面積歸一化法定量。試劑和材料2’-巖藻糖基乳糖對照品：純度≥95%。D-D-乳糖含量≥95%或標明含量的等同物。二巖藻糖基乳糖對照品：純度≥84%或標明含量的等同物。水：GB/T6682規(guī)定的一級水。乙腈：色譜純。三乙胺：色譜純。A.3.2.7溶劑：乙腈:水=50:50（v/v）。儀器和設備高效液相色譜儀:配備示差折光檢測器或電霧式檢測器。參考色譜條件液相色譜-示差折光檢測器條件如下：色譜柱：親水保留色譜柱，250mm×4.6mm,3.5μm或等效色譜柱。582.8g857.2g10mL的三乙胺。柱溫：25。示差折光檢測器溫度：35。流速：1mL/min。進樣量：5μL。運行時間：45min。液相色譜-電霧式檢測器條件如下：色譜柱：氨基聚合物柱，250mm×4.6mm,5μm或等效色譜柱。流動相：乙腈:水=72:28v/v)。柱溫：25。流速：1.1mL/min。電霧式檢測器：霧化器溫度：35℃；數(shù)據(jù)采集速率：20Hz；功率功能：1；過濾器：5。進樣量：10μL。運行時間：25min。分析步驟標準溶液配制用于示差折光檢測的標準溶液D-乳糖一水合物對照品到適宜的容量瓶中，用0.5mg/mL4℃~8℃4周。二巖藻糖基乳糖標準溶液的配制：準確稱取適量的二巖藻糖基乳糖對照品到適宜的容0.5mg/mL4℃~8℃4周。用于電霧式檢測的標準溶液2'-D-乳糖一水合物對照2'-巖藻糖基乳糖濃2.5mg/mL2.5mg/mL的儲備液，D-3.0mg/mL的儲備液。D-5個不同濃度的系123455μg/mL10μg/mL20μg/mL37.5μg/mL55μg/mL；D-15μg/mL、30μg/mL、60μg/mL、120μg/mL150μg/mL。2'-巖藻糖基乳糖2020μg/mLD-60μg/mL的標62'-2'-巖藻糖基5μg/mL7。試樣溶液制備用于示差折光檢測的試樣溶液5g±0.5g（1mg）100mL的容量瓶中，加水至約容量2cm50mg/mL的試樣溶液。同時準備三份平行試樣溶液。5g，可相應按照比例折算所需精確稱取的樣品量，配置成濃度50mg/mL的試樣溶液。用于電霧式檢測的試樣溶液49.0mg~52.0mg10mLD-乳糖或二巖藻糖基乳糖含量在工作曲線的范圍內。系統(tǒng)適用性試驗示差折光檢測器色譜條件的系統(tǒng)適用性試驗滿足以下條件時，可進行樣品測試：——化合物保留時間重復性的相對標準偏差＜1.0%（n＝3）；——化合物響應值重復性的相對標準偏差＜1.0%（n＝3）；——洗脫液的色譜圖應為純基線。依據(jù)前述分析條件測定，D-乳糖和二巖藻糖基乳糖對照品的參考色譜圖譜見附錄C.1。電霧式檢測器色譜條件的系統(tǒng)適用性試驗系統(tǒng)適用性應同時滿足以下條件：——2'-巖藻糖基乳糖的保留時間在12min14min之間；——標準溶液62'-巖藻糖基乳糖峰的不對稱度不小于0.751.25；——標準溶液6的色譜圖中，D-乳糖與2'-巖藻糖基乳糖之間的分離度大于3.0；——6D-乳糖、2'-巖藻糖基乳糖和二巖藻糖基乳糖峰2.5%；——7的色譜圖中，2'-巖藻糖基乳糖峰的信噪比≥10。如果檢測器不能到達D-乳糖、二巖藻糖基乳糖標準溶液濃度和試樣溶液的濃度?！?’-巖藻糖基乳糖峰面積的相對偏差或D-乳糖峰面積的相對偏差10.0%。如不滿足相對偏差要求，需復測。依據(jù)前述分析條件測定，D-乳糖、二巖藻糖基乳糖標準品的參考色譜圖譜見附錄C.3。D-乳糖和二巖藻糖基乳糖含量測定面積歸一化法在液相色譜-示差折光檢測器參考色譜條件下，D-乳糖和二巖藻糖基乳糖含量以面積歸一化法定量。D-4按式A.4計算。（A.4）式中：A2——試樣溶液中D-乳糖或二巖藻糖基乳糖的峰面積；S2——試樣溶液中除溶劑峰之外的所有成分峰面積的總和。測定結果保留小數(shù)點后兩位。外標法在液相色譜-電霧式檢測器參考色譜條件下，D-乳糖和二巖藻糖基乳糖含量以外標法定量。以系列標準溶液中各物質的濃度為橫坐標，相應的峰面積為縱坐標計算過零點的二次D-乳糖和二巖藻糖基乳糖濃度。D-5按式A.5計算。式中：

（A.5）C2——由標準曲線得到的待測樣品溶液中D-乳糖或二巖藻糖基乳糖的濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；V2——試樣的定容體積，單位為毫升（mL）；f ——稀釋因子；m2——試樣的質量，單位為毫克（mg）。上述結果計算方法測定的D-乳糖或二巖藻糖基乳糖結果保留至小數(shù)點后面兩位。本方法的檢測限為0.03%。如結果低于檢測限，則結果表示為＜0.03%。PAGEPAGE15附錄B殘留蛋白含量的測定方法提要595nm試劑和材料牛血清白蛋白對照品：純度≥99%或標明含量的等同物。0.1mg/mL1.4mg/mL蛋白含量的測定。水：GB/T6682規(guī)定的一級水。儀器和設備紫外-可見分光光度計。分析步驟牛血清白蛋白儲備溶液的制備稱取20.0mg牛血清白蛋白對照品于10mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混勻。牛血清白蛋白標準溶液的制備取100μL上述儲備溶液于10mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混勻。試樣溶液的制備稱取200mg樣品于5mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混勻。測定B.110min595nm波長下依次測定混合溶液的吸光值。表B.1試樣溶液制備蛋白濃度（mg/L）試樣溶液水牛血清白蛋白標準溶液考馬斯藍試劑空白溶液100μL800μL0μL200μL空白溶液200μL800μL0μL200μL混合溶液00600μL200μL0μL200μL混合溶液11600μL150μL50μL200μL混合溶液22600μL100μL100μL200μL混合溶液34600μL0μL200μL200μL結果計算以混合溶液的吸光值減去空白吸光值的平均值得到校準吸光值。以校準吸光值為縱坐B.1。圖B.16按式（.1m/g。式中：

（B.1）C3 ——（g/mL）；-1C3——通過標準曲線求得的測定混合溶液中蛋白的濃度，單位為微克每毫升（g/mL）；V3 ——試樣溶液的定容體積，單位為毫升（mL）；f ——稀釋因子；m3 ——試樣的重量，單位毫克（mg）；0.6 ——1mL0.6mL。該方法的檢測限為17mg/kg。若結果低于檢測限，則結果表示為＜17mg/kg。附錄C2’-巖藻糖基乳糖、D-乳糖和二巖藻糖基乳糖的參考高效液相色譜圖譜D圖C.1 親水保留色譜柱色譜條件下D-乳糖、2’-巖藻糖基乳糖和二巖藻糖基乳糖對照品的色譜圖表C.1 親水保留色譜柱色譜條件下各物質的保留時間化合物保留時間（min）系統(tǒng)溶劑（水）23D-乳糖14.82’-巖藻糖基乳糖20.4二巖藻糖基乳糖30.82’-巖藻糖基乳糖對照品的色譜圖圖C.2 酰胺鍵合柱色譜條件下2’-巖藻糖基乳糖對照品的色譜圖D-乳糖、2’-巖藻糖基乳糖和二巖藻糖基乳糖對照品的色譜圖圖C.3 液相色譜-電霧式檢測器色譜條件下D-乳糖2’-巖藻糖基乳糖和二巖藻糖基乳糖對照品的色譜圖表C.2 液相色譜-電霧式檢測器色譜條件下各物質的