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15本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定I黑土區(qū)甜葉菊組織培養(yǎng)育苗移栽技術(shù)規(guī)程本文件適用于內(nèi)蒙古自治區(qū)呼倫貝爾市、興安盟、至0.05Mpa以下時,出氣閥和安全閥打開排氣,冷卻無菌操作器械采用灼燒滅菌。灼燒滅菌可采用接種用電熱滅菌器或酒精燈灼燒1桌面、墻面、雙手、植物材料表面用藥劑涂接種室、培養(yǎng)室定期用紫外燈滅菌。打開室內(nèi)及超凈工作臺,用紫外燈殺菌20min~30min,關(guān)取甜葉菊種子,每10粒1份,在超凈工作臺內(nèi)將種子裝入無菌離心管中消毒。75%酒精消毒10s→0.1%HgCl2消毒6min,每隔5s~10s搖動1次離心管,無菌水沖洗4~5次,后置于無菌濾紙下吸干。將播種后的三角瓶在25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)暗培養(yǎng)至發(fā)芽后,繼續(xù)保持光照10h/d~16h/d培養(yǎng)至苗取40gMS粉,溶于1L蒸餾水,調(diào)pH為取20gMS粉,溶于1L蒸餾水,調(diào)p2MS+1.0mg/L6-BA+O.1mg/LNA1/2MS+0.1mg/L6-BA+0.1洗5次,消毒處理后的外植體,接種在MS培養(yǎng)基中,約30d后腋芽長成芽苗。無菌苗可作為組織培養(yǎng)外植體,在超凈工作臺中將無菌苗切下1cm左右小段,轉(zhuǎn)移至誘導(dǎo)培養(yǎng)培養(yǎng)溫度為24℃~28℃,光照時間為16h/d,光照強度為2000lx。選取生長狀態(tài)基本一致的試管苗,并將苗切成單株,接將試管苗根部培養(yǎng)基清洗干凈移栽于苗盤,以濕潤河沙為栽培基質(zhì),覆蓋塑料薄膜,溫度控制在20℃~30℃,中午適當(dāng)遮蔭,20d后統(tǒng)計試管苗成活率。塑當(dāng)?shù)厝掌骄鶜鉁胤€(wěn)定在
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