DB42DeterminationofaflatoxinB1,zearalenone,ochratoxinAandcitrinininf湖北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I II 1 1 1 1 2 3 3 3 3 3 5 5 5 5 5 6 6請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。1飼料中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A和桔霉素的測定高效液相色譜法原理、試劑與材料、儀器與設(shè)備、采樣、試驗本標(biāo)準(zhǔn)的方法檢測限：黃曲霉毒素B1為8μg/kg，玉米赤霉烯酮為260μg/kg，赭曲霉毒素A為10GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和GB/T20195動物飼料試4試劑與材料4.2磷酸：85%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）。4.3冰乙酸。4.5無水硫酸鎂。4.6氯化鈉。4.8黃曲霉毒素B1標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥4.9玉米赤霉烯酮標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥98%。4.10赭曲霉毒素A標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥98%。4.11桔霉素標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥98%。24.13玉米赤霉烯酮標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：準(zhǔn)確稱取適量的），的赭曲霉毒素A標(biāo)準(zhǔn)儲備液，避光保存于4℃冰箱備用。4.15桔霉素標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱取適量的桔霉素標(biāo)準(zhǔn)品（4.11），用乙腈（4.14.16混合標(biāo)準(zhǔn)溶液工作液取適量四種標(biāo)準(zhǔn)儲備液至10mL容量瓶（5.表1真菌毒素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（單位為克2.0×10-44.0×10-42.0×10-34.0×10-32.0×10-44.0×10-42.5×10-47.5×10-42.0×10-34.17酸性提取液），4.20次氯酸鈉溶液5.3粉碎機(jī)。5.4漩渦混合器。5.6旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。35.130.45μm微孔濾膜（適用于有機(jī)溶劑）。5.14離心機(jī)，配有50mL離心管適配器，最大轉(zhuǎn)速為4000r/min。5.15氮吹儀。），旋緊管蓋，在漩渦混合器（5.4）上劇烈振蕩2min，置于搖床（5.5），），并用移液器（5.7）取出各管中的上層乙腈層，合并于250mL圓底磨口燒瓶（5.10）中（操作時注意不要取到水相）。殘留液再用15mL乙腈（4.1）重復(fù)提取一次，合并后，即為樣品提取將上述樣品提取液置于40℃下減壓濃縮至干，加入4mL正己烷（4.4）和1mL乙腈（4.1）充分洗滌殘渣，靜置分層后，用移液器（5.7）取出上層正己烷，棄去。收集乙腈提取液于2mL離心管（5.11）mL，在漩渦混合器（5.4）上混勻后，用0.45μm微孔濾膜（5.13）過濾，待NO5020-04646）1)；），1)色譜柱是由島津-GL(上海)商貿(mào)有限公司提供的產(chǎn)品。給出4黃曲霉毒素B1：激發(fā)波長（Ex）=360nm，發(fā)射波長（Em）=4玉米赤霉烯酮：激發(fā)波長（Ex）=274nm，發(fā)射波長（Em）=4赭曲霉毒素A：激發(fā)波長（Ex）=333nm，發(fā)射波長（Em）=桔霉素：激發(fā)波長（Ex）=330nm，發(fā)射波長（Em）=50向基線平穩(wěn)的液相色譜分析儀連續(xù)注入各濃度混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，濃度由高到低，以峰面積-濃度行分析。依據(jù)峰面積，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到待測樣液中待測物的濃度（C），附錄A和附錄B給出了相關(guān)按式（1）計算試樣中檢測目標(biāo)物的含量(μg/kgX............................................................................(1)X............................................................................(1)X——試樣中檢測目標(biāo)物的含量，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示，單位為微克每千克(μg/kgC——由標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得到的上機(jī)試樣溶液中目標(biāo)物濃度，單位為納克5黃曲霉毒素B1、桔霉素、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮色譜圖(四通道熒光檢測器)品分鐘圖A.1黃曲霉毒素B1標(biāo)準(zhǔn)工作液的色譜圖(激發(fā)波長=360nm,發(fā)射波長=440nm,0.5ng)品分鐘圖A.2玉米赤霉烯酮標(biāo)準(zhǔn)工作液的色譜圖(激發(fā)波長=274nm,發(fā)射波長=440nm,125ng)品分鐘圖A.3赭曲霉毒素A標(biāo)準(zhǔn)工作液的色譜圖(激發(fā)波長=333nm,發(fā)射波長=477nm,0.5ng)品分鐘圖A.4桔霉素標(biāo)準(zhǔn)工作液的色譜圖(激發(fā)波長=330nm,發(fā)射波長=500nm,12.5ng)6(資料性附錄)黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A和桔霉素色譜圖(程序波長熒光檢測器)0圖B.1黃曲霉毒素B1(AFB1),玉米赤霉烯酮(ZEN),赭曲霉毒素(OTA)和桔霉素(CIT)標(biāo)準(zhǔn)工作液的色譜圖熒光檢測器程序波長參數(shù)如下：0～10min:激發(fā)波長(Ex)=360nm,發(fā)射波長(Em)=440nm;10~17min:激發(fā)波長(Ex)=330n