農(nóng)藥檢測(cè)儀器操作與維護(hù)手冊(cè)前言農(nóng)藥殘留檢測(cè)是保障食品安全、環(huán)境安全及農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。準(zhǔn)確、可靠的檢測(cè)結(jié)果依賴于儀器的正確操作與規(guī)范維護(hù)。本手冊(cè)旨在為實(shí)驗(yàn)室操作人員提供專業(yè)、嚴(yán)謹(jǐn)、實(shí)用的農(nóng)藥檢測(cè)儀器操作指南，涵蓋常見儀器的工作原理、操作步驟、維護(hù)保養(yǎng)及故障排查，確保儀器性能穩(wěn)定，延長使用壽命，提升檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與重復(fù)性。1適用范圍本手冊(cè)適用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用儀器的操作與維護(hù)，包括但不限于：氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）高效液相色譜儀（HPLC）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC-MS/MS）氣相色譜儀（GC）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定儀（ELISA）2儀器分類及工作原理2.1氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）2.1.1工作原理GC-MS結(jié)合氣相色譜（GC）的高分離能力與質(zhì)譜（MS）的高鑒別能力，實(shí)現(xiàn)復(fù)雜混合物的定性與定量分析。樣品經(jīng)GC分離為單一組分，依次進(jìn)入MS離子源（如電子轟擊離子源EI），電離為帶電離子，經(jīng)質(zhì)量分析器（如四極桿）分離后，由檢測(cè)器（如電子倍增器）檢測(cè)離子信號(hào)，通過軟件處理得到總離子流色譜圖（TIC）與質(zhì)譜圖，通過譜庫匹配（如NIST庫）確定農(nóng)藥種類，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量。2.1.2主要部件GC單元：進(jìn)樣口（分流/不分流）、色譜柱（毛細(xì)管柱，如DB-5MS）、柱溫箱；MS單元：離子源、質(zhì)量分析器、檢測(cè)器；氣體系統(tǒng)：載氣（氮?dú)?氦氣）、輔助氣（氫氣、空氣，用于FID檢測(cè)器）；數(shù)據(jù)系統(tǒng)：色譜-質(zhì)譜聯(lián)用軟件、計(jì)算機(jī)。2.2高效液相色譜儀（HPLC）2.2.1工作原理HPLC以液體為流動(dòng)相，樣品隨流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱，通過固定相（如C18硅膠）與樣品組分的親和力差異實(shí)現(xiàn)分離，分離后的組分依次進(jìn)入檢測(cè)器（如紫外檢測(cè)器UV、熒光檢測(cè)器FLD），產(chǎn)生電信號(hào)，經(jīng)數(shù)據(jù)系統(tǒng)處理得到色譜圖，實(shí)現(xiàn)定性（保留時(shí)間）與定量（峰面積）分析。2.2.2主要部件輸液系統(tǒng)：高壓泵（二元/三元泵）、流動(dòng)相瓶、過濾裝置（0.45μm濾膜）；進(jìn)樣系統(tǒng)：自動(dòng)進(jìn)樣器（樣品盤、進(jìn)樣針）、手動(dòng)進(jìn)樣閥；分離系統(tǒng)：色譜柱（C18、C8等）、柱溫箱；檢測(cè)系統(tǒng)：UV/FLD檢測(cè)器、信號(hào)放大器；數(shù)據(jù)系統(tǒng)：色譜軟件、計(jì)算機(jī)。2.3液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC-MS/MS）2.3.1工作原理LC-MS/MS結(jié)合HPLC的分離能力與MS/MS的高靈敏度、高選擇性，用于痕量農(nóng)藥殘留檢測(cè)。樣品經(jīng)HPLC分離后，進(jìn)入MS離子源（如電噴霧離子源ESI、大氣壓化學(xué)電離源APCI），電離為帶電離子，經(jīng)一級(jí)質(zhì)量分析器（Q1）選擇目標(biāo)離子，進(jìn)入碰撞室（Q2）與惰性氣體（如氬氣）碰撞碎裂，產(chǎn)生碎片離子，經(jīng)二級(jí)質(zhì)量分析器（Q3）分離后，由檢測(cè)器檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM），提高檢測(cè)靈敏度與特異性。2.3.2主要部件HPLC單元：同2.2.2；MS/MS單元：離子源（ESI/APCI）、一級(jí)質(zhì)量分析器（Q1）、碰撞室（Q2）、二級(jí)質(zhì)量分析器（Q3）、檢測(cè)器；氣體系統(tǒng)：霧化氣（氮?dú)猓?、干燥氣（氮?dú)猓?、碰撞氣（氬氣）；?shù)據(jù)系統(tǒng)：質(zhì)譜軟件、計(jì)算機(jī)。2.4氣相色譜儀（GC）2.4.1工作原理GC以氣體為流動(dòng)相（載氣），樣品經(jīng)進(jìn)樣口進(jìn)入色譜柱，通過固定相（如聚硅氧烷）與樣品組分的沸點(diǎn)、極性差異實(shí)現(xiàn)分離，分離后的組分依次進(jìn)入檢測(cè)器（如火焰離子化檢測(cè)器FID、電子捕獲檢測(cè)器ECD），產(chǎn)生電信號(hào)，經(jīng)數(shù)據(jù)系統(tǒng)處理得到色譜圖，實(shí)現(xiàn)定性與定量分析。2.4.2主要部件進(jìn)樣系統(tǒng)：分流/不分流進(jìn)樣口、自動(dòng)/手動(dòng)進(jìn)樣器；分離系統(tǒng)：色譜柱（毛細(xì)管柱、填充柱）、柱溫箱；檢測(cè)系統(tǒng)：FID/ECD檢測(cè)器、信號(hào)放大器；氣體系統(tǒng)：載氣（氮?dú)?氦氣）、燃?xì)猓錃猓現(xiàn)ID用）、助燃?xì)猓諝猓現(xiàn)ID用）；數(shù)據(jù)系統(tǒng)：色譜軟件、計(jì)算機(jī)。2.5酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定儀（ELISA）2.5.1工作原理ELISA基于抗原-抗體特異性結(jié)合與酶催化顯色反應(yīng)，用于快速篩查農(nóng)藥殘留。將抗原（或抗體）固定在微孔板上，加入樣品（含待測(cè)抗原/抗體），孵育后洗去未結(jié)合物質(zhì)，加入酶標(biāo)記抗體（如HRP標(biāo)記），再次孵育洗去未結(jié)合物質(zhì)，加入底物（如TMB），酶催化底物顯色，通過酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度（OD值），與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比計(jì)算待測(cè)農(nóng)藥濃度。2.5.2主要部件反應(yīng)系統(tǒng)：微孔板（包被抗原/抗體）、移液器（多通道/單通道）；孵育系統(tǒng)：恒溫孵育箱（37℃）、振蕩器；洗板系統(tǒng)：自動(dòng)洗板機(jī)（洗液瓶、廢液瓶）；檢測(cè)系統(tǒng)：酶標(biāo)儀（吸光度檢測(cè)）；數(shù)據(jù)系統(tǒng)：ELISA軟件、計(jì)算機(jī)。3操作步驟3.1氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）操作步驟3.1.1開機(jī)準(zhǔn)備檢查載氣（氮?dú)?氦氣）、輔助氣（氫氣、空氣）鋼瓶壓力（正常范圍：載氣≥0.5MPa，氫氣≥0.3MPa，空氣≥0.4MPa），打開氣體閥門，調(diào)節(jié)減壓閥壓力（載氣0.2-0.3MPa，氫氣0.1-0.2MPa，空氣0.2-0.3MPa）；檢查儀器電源線路，確保接地良好；啟動(dòng)計(jì)算機(jī)，打開GC-MS軟件（如Xcalibur）。3.1.2儀器預(yù)熱打開GC電源，設(shè)置進(jìn)樣口溫度（如250℃）、柱溫箱初始溫度（如50℃），待溫度穩(wěn)定；打開MS電源，啟動(dòng)質(zhì)譜硬件，等待離子源溫度（如200℃）、質(zhì)量分析器溫度（如150℃）達(dá)到設(shè)定值；開啟MS檢測(cè)器（如電子倍增器），等待基線穩(wěn)定（噪聲≤100counts）。3.1.3方法編輯在軟件中創(chuàng)建新方法，設(shè)置以下參數(shù)：GC參數(shù)：進(jìn)樣方式（手動(dòng)/自動(dòng)）、進(jìn)樣量（如1μL）、分流比（如10:1）、柱溫程序（如初始50℃保持2min，10℃/min升溫至280℃保持5min）、色譜柱型號(hào)（如DB-5MS，30m×0.25mm×0.25μm）；MS參數(shù)：離子源類型（EI）、電子能量（70eV）、質(zhì)量范圍（____m/z）、掃描方式（全掃描/選擇離子掃描）；數(shù)據(jù)采集參數(shù)：采集時(shí)間（如30min）、數(shù)據(jù)存儲(chǔ)路徑。3.1.4進(jìn)樣與數(shù)據(jù)采集手動(dòng)進(jìn)樣：用微量注射器吸取樣品（如1μL），快速插入進(jìn)樣口（深度至針柄標(biāo)記處），注入樣品后立即拔出注射器，同時(shí)按下軟件“開始”鍵；自動(dòng)進(jìn)樣：將樣品瓶放入自動(dòng)進(jìn)樣器樣品盤，設(shè)置樣品位置（如瓶號(hào)1），啟動(dòng)進(jìn)樣程序，軟件自動(dòng)完成進(jìn)樣與數(shù)據(jù)采集。3.1.5數(shù)據(jù)處理采集完成后，軟件自動(dòng)生成總離子流色譜圖（TIC）與質(zhì)譜圖；定性分析：選取色譜峰頂點(diǎn)的質(zhì)譜圖，與NIST譜庫對(duì)比（匹配度≥80%），確定農(nóng)藥種類；定量分析：用標(biāo)準(zhǔn)品繪制校準(zhǔn)曲線（峰面積vs濃度），代入樣品峰面積計(jì)算農(nóng)藥含量（如用外標(biāo)法）。3.1.6關(guān)機(jī)流程關(guān)閉MS檢測(cè)器，等待離子源溫度降至100℃以下；關(guān)閉GC電源，待柱溫箱溫度降至室溫；關(guān)閉氣體閥門，調(diào)節(jié)減壓閥至關(guān)閉狀態(tài)；退出GC-MS軟件，關(guān)閉計(jì)算機(jī)；記錄儀器使用情況（如進(jìn)樣次數(shù)、色譜柱使用時(shí)間）。3.2高效液相色譜儀（HPLC）操作步驟3.2.1開機(jī)準(zhǔn)備檢查流動(dòng)相（如甲醇-水=60:40）是否過濾（0.45μm濾膜）、脫氣（超聲10min）；檢查高壓泵、進(jìn)樣器、檢測(cè)器電源線路；啟動(dòng)計(jì)算機(jī)，打開HPLC軟件（如Empower）。3.2.2儀器預(yù)熱打開高壓泵電源，設(shè)置流速（如1mL/min），啟動(dòng)泵，沖洗色譜柱（用甲醇-水=50:50沖洗30min）；打開柱溫箱電源，設(shè)置柱溫（如30℃）；打開檢測(cè)器電源（如UV檢測(cè)器），設(shè)置波長（如254nm），等待基線穩(wěn)定（噪聲≤0.001AU）。3.2.3方法編輯在軟件中創(chuàng)建新方法，設(shè)置以下參數(shù)：輸液參數(shù)：流動(dòng)相組成（如甲醇-水=60:40）、流速（1mL/min）、運(yùn)行時(shí)間（如20min）；進(jìn)樣參數(shù)：進(jìn)樣方式（自動(dòng)/手動(dòng)）、進(jìn)樣量（如10μL）；分離參數(shù)：色譜柱型號(hào)（如C18，250mm×4.6mm×5μm）、柱溫（30℃）；檢測(cè)參數(shù)：檢測(cè)器類型（UV）、波長（254nm）、量程（0.1AUFS）。3.2.4進(jìn)樣與數(shù)據(jù)采集手動(dòng)進(jìn)樣：用手動(dòng)進(jìn)樣閥（如20μL定量環(huán)）吸取樣品，切換閥至“進(jìn)樣”位置，同時(shí)按下軟件“開始”鍵；自動(dòng)進(jìn)樣：將樣品瓶放入自動(dòng)進(jìn)樣器，設(shè)置樣品位置，啟動(dòng)進(jìn)樣程序，軟件自動(dòng)完成進(jìn)樣與數(shù)據(jù)采集。3.2.5數(shù)據(jù)處理采集完成后，軟件生成色譜圖；定性分析：通過保留時(shí)間（與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比，偏差≤2%）確定農(nóng)藥種類；定量分析：用標(biāo)準(zhǔn)品繪制校準(zhǔn)曲線（峰面積vs濃度），代入樣品峰面積計(jì)算農(nóng)藥含量（如用外標(biāo)法）。3.2.6關(guān)機(jī)流程用甲醇沖洗色譜柱（流速1mL/min，沖洗30min），避免流動(dòng)相殘留；關(guān)閉高壓泵、柱溫箱、檢測(cè)器電源；關(guān)閉計(jì)算機(jī)，退出軟件；記錄儀器使用情況（如流動(dòng)相消耗、色譜柱壓力）。3.3液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC-MS/MS）操作步驟（注：LC部分同3.2，MS/MS部分如下）3.3.1儀器預(yù)熱打開MS/MS電源，啟動(dòng)離子源（如ESI），設(shè)置離子源參數(shù)（如ESI電壓4.5kV，霧化氣壓力30psi，干燥氣溫度350℃）；等待離子源溫度、質(zhì)量分析器溫度達(dá)到設(shè)定值，開啟檢測(cè)器（如電子倍增器），等待基線穩(wěn)定。3.3.2方法編輯在軟件中設(shè)置MS/MS參數(shù)：離子源參數(shù)：ESI正/負(fù)模式、霧化氣（氮?dú)猓┝髁浚ㄈ?0L/min）、干燥氣（氮?dú)猓┝髁浚ㄈ?2L/min）；MRM參數(shù)：目標(biāo)離子對(duì)（如農(nóng)藥A的母離子m/z250，子離子m/z150）、碰撞能量（如20eV）、駐留時(shí)間（如100ms）；數(shù)據(jù)采集參數(shù)：采集時(shí)間（如20min）、數(shù)據(jù)存儲(chǔ)路徑。3.3.3進(jìn)樣與數(shù)據(jù)處理進(jìn)樣方式同3.2.4；數(shù)據(jù)處理：通過MRM色譜峰的保留時(shí)間與離子對(duì)定性，通過峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線定量（靈敏度可達(dá)ng/mL級(jí)）。3.3.4關(guān)機(jī)流程關(guān)閉MS/MS檢測(cè)器，等待離子源溫度降至100℃以下；關(guān)閉LC、MS/MS電源，關(guān)閉氣體閥門；退出軟件，關(guān)閉計(jì)算機(jī)。3.4氣相色譜儀（GC）操作步驟（注：同3.1，無MS部分，檢測(cè)器為FID/ECD）3.4.1方法編輯設(shè)置檢測(cè)器參數(shù)：FID溫度（如250℃）、氫氣流量（如30mL/min）、空氣流量（如300mL/min）、尾吹氣（氮?dú)猓┝髁浚ㄈ?5mL/min）；ECD檢測(cè)器需設(shè)置電子捕獲參數(shù)（如電流0.5nA）。3.4.2數(shù)據(jù)處理用FID檢測(cè)時(shí)，通過峰面積定量（響應(yīng)值與濃度成正比）；用ECD檢測(cè)時(shí)，通過峰高定量（對(duì)電負(fù)性化合物靈敏度高）。3.5酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定儀（ELISA）操作步驟3.5.1實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備將試劑（標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)試劑、底物、終止液）從冰箱（4℃）取出，平衡至室溫（20-25℃）；準(zhǔn)備樣品（如蔬菜汁），按照方法要求提?。ㄈ缬靡译嫣崛。?、稀釋（如10倍稀釋）；檢查微孔板（包被農(nóng)藥抗體）是否完好，無裂紋。3.5.2加樣用移液器吸取標(biāo)準(zhǔn)品（不同濃度，如0、0.1、0.3、1、3、10ng/mL）和樣品，加入微孔板的相應(yīng)孔中，每孔加樣量（如100μL），記錄孔位（如標(biāo)準(zhǔn)品列1-6，樣品列7-12）。3.5.3孵育將微孔板放入恒溫孵育箱（37℃），孵育時(shí)間（如30min），使抗原-抗體充分結(jié)合。3.5.4洗板取出微孔板，用自動(dòng)洗板機(jī)加入洗液（如PBS-T，含0.05%Tween-20），每孔洗3-5次，每次停留10秒，洗板后用吸水紙拍干（避免孔內(nèi)有液體殘留）。3.5.5加酶標(biāo)試劑用移液器吸取酶標(biāo)試劑（如HRP標(biāo)記的農(nóng)藥抗原），每孔加樣量（如100μL），輕輕振蕩混勻。3.5.6孵育與洗板再次放入孵育箱（37℃），孵育時(shí)間（如30min）；取出后用洗板機(jī)洗板（5次），拍干。3.5.7加底物與終止用移液器吸取底物溶液（如TMB，3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺），每孔加樣量（如100μL），避光孵育（如15min），待顏色變化（藍(lán)色）；用移液器吸取終止液（如2MH2SO4），每孔加樣量（如50μL），輕輕振蕩混勻，顏色變?yōu)辄S色。3.5.8讀數(shù)與數(shù)據(jù)處理將微孔板放入酶標(biāo)儀，設(shè)置波長（如450nm），讀取每孔的吸光度（OD值）；用軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（OD值vs標(biāo)準(zhǔn)品濃度，對(duì)數(shù)擬合），計(jì)算樣品中農(nóng)藥濃度（如樣品OD值代入曲線，乘以稀釋倍數(shù)）。4維護(hù)保養(yǎng)4.1日常維護(hù)（每日）4.1.1GC-MS日常維護(hù)清理進(jìn)樣口襯管：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取出進(jìn)樣口襯管，用丙酮浸泡10min，晾干后安裝（避免襯管內(nèi)殘留樣品）；更換進(jìn)樣口隔墊：每進(jìn)樣50次更換一次，避免隔墊老化導(dǎo)致漏氣；清理自動(dòng)進(jìn)樣器：用甲醇沖洗樣品針（如自動(dòng)進(jìn)樣器的進(jìn)樣針），去除樣品殘留；記錄儀器狀態(tài)：記錄進(jìn)樣次數(shù)、色譜柱壓力、MS基線噪聲。4.1.2HPLC日常維護(hù)沖洗泵頭：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用甲醇沖洗泵頭（流速1mL/min，沖洗10min），避免流動(dòng)相（如緩沖鹽）殘留結(jié)晶；更換過濾白頭：每2周更換一次，若泵壓突然升高，立即更換；清理進(jìn)樣器：用甲醇沖洗手動(dòng)進(jìn)樣閥或自動(dòng)進(jìn)樣器的樣品針，去除樣品殘留；檢查流動(dòng)相：實(shí)驗(yàn)前檢查流動(dòng)相是否渾濁，若有渾濁，重新過濾（0.45μm濾膜）。4.1.3LC-MS/MS日常維護(hù)清理ESI離子源：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取下噴霧針，用甲醇超聲清洗10min，晾干后安裝；檢查毛細(xì)管：用甲醇沖洗毛細(xì)管（如ESI的毛細(xì)管），避免堵塞；更換霧化氣過濾芯：每1個(gè)月更換一次，確保霧化氣純度。4.1.4GC日常維護(hù)清理FID噴嘴：每進(jìn)樣100次，取下FID噴嘴，用甲醇超聲清洗10min，去除積碳；檢查載氣流量：用皂膜流量計(jì)校準(zhǔn)載氣流量（如2mL/min），確保流量穩(wěn)定；更換進(jìn)樣口隔墊：同4.1.1。4.1.5ELISA日常維護(hù)清理酶標(biāo)儀：用酒精棉擦拭酶標(biāo)儀的讀數(shù)窗口，避免指紋或灰塵影響讀數(shù)；清理洗板機(jī)：用蒸餾水沖洗洗板機(jī)管路（如洗液管、廢液管），避免洗液殘留；檢查試劑：實(shí)驗(yàn)前檢查試劑保質(zhì)期（如酶標(biāo)試劑有效期6個(gè)月），避免使用過期試劑。4.2每周維護(hù)4.2.1GC-MS每周維護(hù)檢查色譜柱連接：用檢漏液（如異丙醇）檢查色譜柱與GC、MS的連接口，避免漏氣；清理離子源：取下離子源，用甲醇超聲清洗10min，晾干后安裝（每2周一次）；檢查真空泵油位：若油位低于最低刻度，添加真空泵油（同一型號(hào)，如Shimadzu真空泵油）。4.2.2HPLC每周維護(hù)沖洗色譜柱：用強(qiáng)溶劑（如乙腈）沖洗色譜柱（流速1mL/min，沖洗60min），去除柱內(nèi)殘留的污染物；檢查柱溫箱：清理柱溫箱內(nèi)的灰塵，確保溫度均勻（如30℃±0.5℃）；校準(zhǔn)檢測(cè)器：用標(biāo)準(zhǔn)溶液（如萘的甲醇溶液）校準(zhǔn)UV檢測(cè)器的波長（如254nm），確保波長準(zhǔn)確。4.2.3ELISA每周維護(hù)校準(zhǔn)酶標(biāo)儀：用標(biāo)準(zhǔn)吸光度溶液（如0.5AU、1.0AU）校準(zhǔn)酶標(biāo)儀的吸光度，確保讀數(shù)準(zhǔn)確；檢查孵育箱溫度：用溫度計(jì)校準(zhǔn)孵育箱溫度（如37℃±0.5℃），避免溫度偏差影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；更換洗板機(jī)洗液：每周更換一次洗液（如PBS-T），避免洗液變質(zhì)。4.3每月維護(hù)4.3.1GC-MS每月維護(hù)校準(zhǔn)質(zhì)量分析器：用全氟三丁胺（PFTBA）作為校準(zhǔn)物質(zhì)，在軟件中執(zhí)行校準(zhǔn)程序（如Xcalibur的“AutoTune”），確保質(zhì)量數(shù)準(zhǔn)確（誤差≤0.1m/z）；檢查氣體純度：用氣體純度檢測(cè)儀檢測(cè)載氣（氮?dú)狻?9.999%）、氫氣（≥99.999%）、空氣（≥99.99%）的純度，若純度不足，更換鋼瓶；更換色譜柱：每使用6個(gè)月或柱效下降（如理論塔板數(shù)減少50%），更換新的色譜柱（如DB-5MS）。4.3.2HPLC每月維護(hù)校準(zhǔn)泵流速：用皂膜流量計(jì)校準(zhǔn)泵流速（如1mL/min±0.05mL/min），確保流速穩(wěn)定；檢查密封件：檢查泵的密封件（如柱塞桿密封），若有泄漏，更換密封件；沖洗檢測(cè)器：用甲醇沖洗UV檢測(cè)器的流動(dòng)池（流速1mL/min，沖洗30min），去除污染物。4.4季度維護(hù)4.4.1GC-MS季度維護(hù)維護(hù)真空泵：打開真空泵，放出舊油，用新油沖洗泵腔（如Shimadzu真空泵油），加入新油（至油位刻度中間）；檢查MS檢測(cè)器：取下檢測(cè)器（如電子倍增器），用甲醇超聲清洗10min，晾干后安裝；校準(zhǔn)GC溫度：用溫度計(jì)校準(zhǔn)柱溫箱溫度（如50℃±0.5℃），確保溫度準(zhǔn)確。4.4.2HPLC季度維護(hù)更換泵密封件：每6個(gè)月更換一次泵的柱塞桿密封，避免泵泄漏；維護(hù)柱溫箱：清理柱溫箱內(nèi)的灰塵，檢查加熱元件，確保溫度穩(wěn)定；校準(zhǔn)進(jìn)樣量：用標(biāo)準(zhǔn)溶液（如咖啡因的甲醇溶液）校準(zhǔn)自動(dòng)進(jìn)樣器的進(jìn)樣量（如10μL±0.5μL），確保進(jìn)樣準(zhǔn)確。5常見故障排查5.1GC-MS常見故障及解決方法故障現(xiàn)象可能原因解決方法無信號(hào)離子源未通電檢查離子源電源線路，重新連接檢測(cè)器故障更換檢測(cè)器，聯(lián)系廠家維修氣體未通入檢查氣體鋼瓶閥門，調(diào)節(jié)減壓閥壓力峰型差（拖尾）襯管污染更換襯管色譜柱老化更換色譜柱進(jìn)樣量過大減少進(jìn)樣量（如從2μL減少到1μL）基線噪聲大離子源污染清理離子源氣體純度不足更換高純度氣體（≥99.999%）檢測(cè)器增益過高降低檢測(cè)器增益（如從1.0降低到0.8）5.2HPLC常見故障及解決方法故障現(xiàn)象可能原因解決方法泵壓過高流動(dòng)相有顆粒用0.45μm濾膜過濾流動(dòng)相色譜柱堵塞用強(qiáng)溶劑（如乙腈）沖洗色譜柱泵頭堵塞拆下泵頭，用甲醇超聲清洗峰面積重現(xiàn)性差進(jìn)樣量不一致校準(zhǔn)自動(dòng)進(jìn)樣器的進(jìn)樣量流動(dòng)相比例變化檢查流動(dòng)相混合器，確保比例準(zhǔn)確檢測(cè)器不穩(wěn)定校準(zhǔn)檢測(cè)器（如UV的波長）無峰檢出進(jìn)樣器故障檢查進(jìn)樣器是否堵塞，更換進(jìn)樣針色譜柱未連接檢查色譜柱與泵、檢測(cè)器的連接檢測(cè)器未開啟打開檢測(cè)器電源，等待基線穩(wěn)定5.3ELISA常見故障及解決方法故障現(xiàn)象可能原因解決方法空白值高試劑污染更換新的試劑，檢查試劑瓶是否密封洗板不徹底增加洗板次數(shù)（如從3次增加到5次）酶標(biāo)儀波長錯(cuò)誤校準(zhǔn)酶標(biāo)儀波長（如450nm）回收率低抗原抗體結(jié)合不充分延長孵育時(shí)間（如從30min增加到60min）孵育溫度不夠校準(zhǔn)孵育箱溫度（如37℃±0.5℃）試劑過期更換過期試劑（如酶標(biāo)試劑有效期6個(gè)月）孔間差異大加樣不均勻用多通道移液器加樣，確保每孔加樣量一致微孔板未拍干洗板后用吸水紙拍干，避免孔內(nèi)有液體殘留6注意事項(xiàng)6.1安全操作使用有機(jī)溶劑（如甲醇、乙腈）時(shí)，要在通風(fēng)櫥內(nèi)操作，避免吸入揮發(fā)氣體；高壓氣體鋼瓶要固定在墻上，避免傾倒，定期檢查鋼瓶壓力（如每月檢查一次）；儀器通電時(shí)，不要打開機(jī)蓋，防止觸電（如GC-MS的MS單元帶有高壓）；酶標(biāo)試劑（如HRP）要避免接觸皮膚，若接觸，立即用清水沖洗。6.2規(guī)范操作嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)方法（如GB/T____《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法》）操作，不要隨意更改參數(shù)（如進(jìn)樣量、柱溫程序）；使用合格的耗材（如色譜柱、微孔板），避免使用過期或劣質(zhì)耗材（如劣質(zhì)色譜柱會(huì)導(dǎo)致峰型差）；實(shí)驗(yàn)前要做空白實(shí)驗(yàn)（如用溶劑代替樣品），