組織學(xué)技術(shù)試題及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共30分）1.以下哪種方法常用于組織學(xué)標(biāo)本的固定？A.干燥法B.冷凍法C.甲醛固定法D.離心法答案：C。甲醛固定法是組織學(xué)標(biāo)本固定最常用的方法，它能使組織保持生前的形態(tài)結(jié)構(gòu)，防止組織自溶和腐敗。干燥法主要用于保存一些特殊物品，并非組織學(xué)標(biāo)本固定方法；冷凍法雖可用于某些特殊研究，但不是常規(guī)固定方法；離心法用于分離不同成分，與標(biāo)本固定無(wú)關(guān)。2.石蠟切片制作過(guò)程中，透明劑的作用是？A.使組織透明，便于石蠟浸入B.使組織脫水C.使組織染色D.使組織硬化答案：A。透明劑的作用是置換組織中的脫水劑，使組織透明，從而便于石蠟浸入組織。組織脫水是由脫水劑完成的；組織染色是后續(xù)染色步驟的操作；使組織硬化不是透明劑的主要作用。3.HE染色中，蘇木精主要使哪種物質(zhì)染色？A.細(xì)胞質(zhì)B.細(xì)胞核C.細(xì)胞外基質(zhì)D.細(xì)胞膜答案：B。蘇木精是堿性染料，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)和核糖體中的核酸等酸性物質(zhì)染色，呈現(xiàn)藍(lán)色；伊紅是酸性染料，使細(xì)胞質(zhì)等堿性物質(zhì)染色，呈粉紅色。細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞膜在HE染色中染色不具有特異性的特征性顏色。4.免疫組織化學(xué)技術(shù)的原理是？A.抗原與抗體特異性結(jié)合B.核酸雜交C.酶的催化作用D.放射性核素標(biāo)記答案：A。免疫組織化學(xué)技術(shù)是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原。核酸雜交是分子生物學(xué)技術(shù)，用于檢測(cè)核酸序列；酶的催化作用是很多實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)環(huán)節(jié)，但不是免疫組織化學(xué)的核心原理；放射性核素標(biāo)記可用于放射免疫分析等技術(shù)，并非免疫組織化學(xué)的基本原理。5.冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是？A.切片薄B.能較好保存抗原活性C.染色效果好D.操作簡(jiǎn)單答案：B。冰凍切片的主要優(yōu)點(diǎn)是能較好地保存組織內(nèi)的抗原活性，適用于免疫組織化學(xué)等對(duì)抗原活性要求較高的實(shí)驗(yàn)。一般來(lái)說(shuō)，冰凍切片較石蠟切片厚；其染色效果相對(duì)石蠟切片可能稍差；冰凍切片操作需要特定的設(shè)備和技術(shù)，并非操作簡(jiǎn)單。6.銀染色法常用于顯示？A.神經(jīng)纖維B.膠原纖維C.彈性纖維D.網(wǎng)狀纖維答案：D。銀染色法是顯示網(wǎng)狀纖維的常用方法，網(wǎng)狀纖維可被銀鹽染成黑色。神經(jīng)纖維有專門的神經(jīng)染色方法；膠原纖維常用Masson三色染色等方法顯示；彈性纖維常用地衣紅等染色方法。7.以下哪種顯微鏡可用于觀察細(xì)胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)？A.光學(xué)顯微鏡B.相差顯微鏡C.電子顯微鏡D.熒光顯微鏡答案：C。電子顯微鏡包括透射電子顯微鏡和掃描電子顯微鏡，能夠觀察到細(xì)胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞器的精細(xì)結(jié)構(gòu)等。光學(xué)顯微鏡的分辨率有限，一般只能觀察到細(xì)胞的大致結(jié)構(gòu)；相差顯微鏡主要用于觀察活細(xì)胞；熒光顯微鏡主要用于觀察熒光標(biāo)記的物質(zhì)。8.組織化學(xué)技術(shù)中，酶組織化學(xué)的關(guān)鍵是？A.保持酶的活性B.選擇合適的染色劑C.切片的厚度D.固定的時(shí)間答案：A。酶組織化學(xué)是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)顯示組織細(xì)胞內(nèi)酶的存在和分布，關(guān)鍵在于保持酶的活性，只有酶具有活性才能催化底物發(fā)生反應(yīng)而顯色。選擇合適的染色劑、切片的厚度和固定的時(shí)間也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，但保持酶的活性是最關(guān)鍵的因素。9.原位雜交技術(shù)用于檢測(cè)？A.蛋白質(zhì)B.核酸C.糖類D.脂類答案：B。原位雜交技術(shù)是核酸分子雜交技術(shù)在組織細(xì)胞水平的應(yīng)用，用于檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)特定的核酸序列，如DNA或RNA。檢測(cè)蛋白質(zhì)常用免疫組織化學(xué)等方法；檢測(cè)糖類有過(guò)碘酸雪夫反應(yīng)等方法；檢測(cè)脂類有蘇丹染色等方法。10.制作組織切片時(shí)，脫水的順序通常是？A.從高濃度到低濃度酒精B.從低濃度到高濃度酒精C.直接用無(wú)水酒精D.用丙酮脫水答案：B。制作組織切片時(shí)，脫水的順序通常是從低濃度到高濃度酒精，這樣可以使組織逐步脫水，避免組織因脫水過(guò)快而收縮變形。不能直接用無(wú)水酒精，否則會(huì)使組織收縮嚴(yán)重；丙酮也可作為脫水劑，但不是常規(guī)的脫水順序中的選擇。11.用于觀察活細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化的顯微鏡是？A.暗視野顯微鏡B.倒置顯微鏡C.偏光顯微鏡D.共聚焦顯微鏡答案：B。倒置顯微鏡的物鏡位于載物臺(tái)下方，便于觀察培養(yǎng)皿中的活細(xì)胞，可用于觀察活細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化。暗視野顯微鏡主要用于觀察微小顆粒的運(yùn)動(dòng)；偏光顯微鏡用于觀察具有雙折射性的物質(zhì)；共聚焦顯微鏡可用于對(duì)細(xì)胞內(nèi)熒光標(biāo)記的結(jié)構(gòu)進(jìn)行三維成像，但不是專門用于觀察活細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化的首選。12.以下哪種固定劑對(duì)糖原保存較好？A.乙醇B.甲醛C.戊二醛D.苦味酸答案：A。乙醇對(duì)糖原保存較好，它可以使糖原沉淀，從而較好地保存糖原的結(jié)構(gòu)。甲醛、戊二醛主要用于固定蛋白質(zhì)等成分；苦味酸常用于固定組織，但對(duì)糖原保存效果不如乙醇。13.免疫熒光技術(shù)中，常用的熒光素是？A.伊紅B.蘇木精C.羅丹明D.美藍(lán)答案：C。免疫熒光技術(shù)中常用的熒光素有異硫氰酸熒光素（FITC）、羅丹明等，它們可以與抗體結(jié)合，在熒光顯微鏡下發(fā)出特定顏色的熒光。伊紅和蘇木精是HE染色的染料；美藍(lán)常用于細(xì)菌染色等。14.組織學(xué)標(biāo)本封片常用的封片劑是？A.石蠟B.甘油C.樹膠D.生理鹽水答案：C。組織學(xué)標(biāo)本封片常用的封片劑是樹膠，它具有良好的透明度和粘性，能使蓋玻片牢固地固定在載玻片上，保護(hù)切片并便于觀察。石蠟用于包埋組織；甘油可用于臨時(shí)封片，但不是常規(guī)的永久封片劑；生理鹽水不能用于封片。15.以下哪種技術(shù)可用于細(xì)胞內(nèi)離子濃度的測(cè)定？A.膜片鉗技術(shù)B.流式細(xì)胞術(shù)C.熒光探針技術(shù)D.基因敲除技術(shù)答案：C。熒光探針技術(shù)可用于細(xì)胞內(nèi)離子濃度的測(cè)定，通過(guò)特定的熒光探針與離子結(jié)合后熒光信號(hào)的變化來(lái)檢測(cè)離子濃度。膜片鉗技術(shù)主要用于研究細(xì)胞膜離子通道的電活動(dòng)；流式細(xì)胞術(shù)主要用于對(duì)細(xì)胞進(jìn)行定量分析和分選；基因敲除技術(shù)用于研究基因的功能。二、多項(xiàng)選擇題（每題3分，共15分）1.組織學(xué)技術(shù)中常用的固定劑有？A.甲醛B.乙醇C.戊二醛D.苦味酸答案：ABCD。甲醛是最常用的固定劑之一，能較好地保存組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)；乙醇可用于固定一些對(duì)保存糖原等有要求的組織；戊二醛常用于電鏡標(biāo)本的固定，能較好地保存細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)；苦味酸也可作為固定劑，與其他固定劑混合使用效果較好。2.以下屬于組織化學(xué)技術(shù)的有？A.酶組織化學(xué)B.免疫組織化學(xué)C.原位雜交D.過(guò)碘酸雪夫反應(yīng)答案：ABCD。酶組織化學(xué)通過(guò)化學(xué)反應(yīng)顯示組織細(xì)胞內(nèi)酶的存在和分布；免疫組織化學(xué)利用抗原抗體反應(yīng)檢測(cè)組織內(nèi)的蛋白質(zhì)等抗原；原位雜交用于檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)的核酸；過(guò)碘酸雪夫反應(yīng)用于顯示糖類。它們都屬于組織化學(xué)技術(shù)的范疇。3.光學(xué)顯微鏡的組成部分包括？A.目鏡B.物鏡C.聚光器D.光源答案：ABCD。光學(xué)顯微鏡主要由目鏡、物鏡、聚光器和光源等部分組成。目鏡用于放大物鏡所成的像；物鏡是放大標(biāo)本的關(guān)鍵部件；聚光器用于調(diào)節(jié)光線的強(qiáng)度和均勻度；光源為顯微鏡提供照明。4.冰凍切片的缺點(diǎn)有？A.切片厚度不易控制B.容易產(chǎn)生冰晶C.抗原保存效果差D.染色效果可能不佳答案：ABD。冰凍切片的切片厚度相對(duì)較厚且不易精確控制；在冷凍過(guò)程中容易產(chǎn)生冰晶，影響組織的結(jié)構(gòu)觀察；其染色效果相對(duì)石蠟切片可能不佳。而冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能較好地保存組織內(nèi)的抗原活性。5.用于組織化學(xué)染色的顯色劑有？A.二氨基聯(lián)苯胺（DAB）B.蘇木精C.伊紅D.四唑鹽答案：AD。二氨基聯(lián)苯胺（DAB）是免疫組織化學(xué)等技術(shù)中常用的顯色劑，它在酶的作用下可形成棕色沉淀；四唑鹽可用于酶組織化學(xué)等實(shí)驗(yàn)中，在酶的作用下還原成有色的甲臜沉淀。蘇木精和伊紅是HE染色的染料，不屬于組織化學(xué)染色中的顯色劑范疇。三、判斷題（每題2分，共20分）1.組織學(xué)標(biāo)本固定的目的是防止組織自溶和腐敗，保持組織生前的形態(tài)結(jié)構(gòu)。（）答案：正確。固定是組織學(xué)標(biāo)本制作的重要步驟，其主要目的就是防止組織自溶和腐敗，使組織保持生前的形態(tài)結(jié)構(gòu)，便于后續(xù)的處理和觀察。2.石蠟切片的厚度一般比冰凍切片厚。（）答案：錯(cuò)誤。一般來(lái)說(shuō)，石蠟切片的厚度可以控制得較薄，通常在46μm，而冰凍切片相對(duì)較厚，一般在820μm。3.HE染色中，細(xì)胞核被伊紅染成粉紅色。（）答案：錯(cuò)誤。HE染色中，蘇木精使細(xì)胞核染成藍(lán)色，伊紅使細(xì)胞質(zhì)等染成粉紅色。4.免疫組織化學(xué)技術(shù)只能檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。（）答案：錯(cuò)誤。免疫組織化學(xué)技術(shù)主要用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)或組織內(nèi)的抗原，除了蛋白質(zhì)外，還可以檢測(cè)多糖、多肽等具有抗原性的物質(zhì)。5.電子顯微鏡觀察的標(biāo)本必須經(jīng)過(guò)超薄切片。（）答案：正確。電子顯微鏡的分辨率很高，為了能清晰觀察細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，標(biāo)本必須經(jīng)過(guò)超薄切片，一般厚度在50100nm。6.組織脫水時(shí)，脫水劑的濃度越高越好。（）答案：錯(cuò)誤。組織脫水時(shí)，應(yīng)從低濃度到高濃度酒精逐步脫水，若直接用高濃度脫水劑，會(huì)使組織收縮嚴(yán)重，影響組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。7.原位雜交技術(shù)可以在組織細(xì)胞原位檢測(cè)核酸序列。（）答案：正確。原位雜交技術(shù)的特點(diǎn)就是在組織細(xì)胞原位進(jìn)行核酸分子雜交，從而檢測(cè)特定的DNA或RNA序列。8.用于觀察熒光標(biāo)記細(xì)胞的顯微鏡是相差顯微鏡。（）答案：錯(cuò)誤。用于觀察熒光標(biāo)記細(xì)胞的顯微鏡是熒光顯微鏡，相差顯微鏡主要用于觀察活細(xì)胞。9.制作組織切片時(shí)，透明劑可以用酒精代替。（）答案：錯(cuò)誤。透明劑和酒精的作用不同，透明劑的作用是置換脫水劑使組織透明，便于石蠟浸入，酒精不能起到透明劑的作用。10.組織化學(xué)技術(shù)可以對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位和定量分析。（）答案：正確。組織化學(xué)技術(shù)通過(guò)化學(xué)反應(yīng)等方法，可以確定組織細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分的存在位置（定位），判斷其種類（定性），在一定程度上還可以進(jìn)行定量分析。四、簡(jiǎn)答題（每題10分，共20分）1.簡(jiǎn)述石蠟切片制作的基本步驟。答：石蠟切片制作的基本步驟如下：（1）固定：將新鮮組織放入合適的固定劑中，如甲醛，使組織保持生前的形態(tài)結(jié)構(gòu)，防止組織自溶和腐敗。固定時(shí)間根據(jù)組織大小而定，一般數(shù)小時(shí)至數(shù)天。（2）脫水：用從低濃度到高濃度的酒精逐步脫水，使組織中的水分被酒精取代。通常從70%酒精開始，依次經(jīng)過(guò)80%、90%、95%酒精，最后用無(wú)水酒精處理，每次處理時(shí)間根據(jù)組織大小和質(zhì)地而定。（3）透明：用透明劑置換組織中的酒精，使組織透明，便于石蠟浸入。常用的透明劑有二甲苯等，處理時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，以免組織變脆。（4）浸蠟：將透明后的組織放入熔化的石蠟中，使石蠟逐漸浸入組織。一般先放入低熔點(diǎn)石蠟，再放入高熔點(diǎn)石蠟，以保證石蠟充分浸入組織。（5）包埋：將浸蠟后的組織放入包埋模具中，加入熔化的石蠟，待石蠟?zāi)毯?，組織被包埋在石蠟塊中。（6）切片：用切片機(jī)將石蠟塊切成薄片，一般厚度為46μm。切片時(shí)要注意切片的連續(xù)性和完整性。（7）貼片：將切好的切片放在載玻片上，用溫水展平，然后烤片，使切片牢固地附著在載玻片上。（8）脫蠟：將貼片后的載玻片放入二甲苯中，使石蠟溶解，然后用酒精梯度復(fù)水，以便進(jìn)行后續(xù)的染色。（9）染色：常用HE染色，先用蘇木精染色細(xì)胞核，水洗后用鹽酸酒精分化，再水洗，然后用伊紅染色細(xì)胞質(zhì)，最后水洗。（10）脫水、透明、封片：染色后的切片依次經(jīng)過(guò)從低濃度到高濃度酒精脫水，再用透明劑透明，最后用樹膠封片，以便在顯微鏡下觀察。2.比較免疫組織化學(xué)技術(shù)和原位雜交技術(shù)的異同點(diǎn)。答：相同點(diǎn)：（1）都是在組織細(xì)胞水平進(jìn)行檢測(cè)的技術(shù)，能夠?qū)M織細(xì)胞內(nèi)的特定物質(zhì)進(jìn)行定位分析，直觀地顯示其在組織細(xì)胞中的分布情況。（2）都需要一定的標(biāo)記物來(lái)顯示檢測(cè)結(jié)果。免疫組織化學(xué)技術(shù)用標(biāo)記的抗體，原位雜交技術(shù)用標(biāo)記的核酸探針。不同點(diǎn)：（1）檢測(cè)對(duì)象不同：免疫組織化學(xué)技術(shù)主要檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)的抗原，如蛋白質(zhì)、多糖、多肽等具有抗原性的物質(zhì)；原位雜交技術(shù)主要檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)的核酸，包括DNA和RNA。（2）原理不同：免疫組織化學(xué)技術(shù)基于抗原抗體特異性結(jié)合的原理，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色來(lái)檢測(cè)抗原；原位雜交技術(shù)基于核酸分子雜交的原理，即互補(bǔ)的核酸單鏈在一定條件下可以結(jié)合形成雙鏈。（3）標(biāo)記物不同：免疫組織化學(xué)技術(shù)常用的標(biāo)記物有酶（如辣根過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶等）、熒光素（如異硫氰酸熒光素、羅丹明等）等；原位雜交技術(shù)常用的標(biāo)記物有放射性核素（如32P、35S等）、生物素、地高辛等。（4）應(yīng)用范圍不同：免疫組織化學(xué)技術(shù)在腫瘤診斷、細(xì)胞分化研究等方面應(yīng)用廣泛，可用于檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物等；原位雜交技術(shù)在基因表達(dá)研究、病毒感染檢測(cè)等方面應(yīng)用較多，如檢測(cè)病毒核酸、細(xì)胞內(nèi)特定基因的轉(zhuǎn)錄情況等。五、論述題（15分）論述組織學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中的應(yīng)用。答：組織學(xué)技術(shù)是醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中不可或缺的重要手段，具有廣泛的應(yīng)用。在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用（1）細(xì)胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)研究：通過(guò)石蠟切片、冰凍切片等技術(shù)制作組織標(biāo)本，并用HE染色等方法進(jìn)行染色，可以清晰地觀察細(xì)胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)，了解正常組織的組成和細(xì)胞的排列方式。例如，在研究器官發(fā)育過(guò)程中，觀察不同發(fā)育階段組織細(xì)胞的形態(tài)變化，有助于揭示器官發(fā)育的機(jī)制。（2）細(xì)胞和分子水平的研究：免疫組織化學(xué)技術(shù)可用于檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)特定蛋白質(zhì)的表達(dá)和分布情況。例如，在腫瘤研究中，檢測(cè)腫瘤組織中某些腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)，有助于了解腫瘤的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制，為腫瘤的分子分型和預(yù)后評(píng)估提供依據(jù)。原位雜交技術(shù)可以檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)特定核酸的存在和分布，研究基因的表達(dá)和調(diào)控。如檢測(cè)病毒感染組織中病毒核酸的存在，有助于了解病毒的感染機(jī)制和傳播途徑。組織化學(xué)技術(shù)可以對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位和定量分析。例如，過(guò)碘酸雪夫反應(yīng)可顯示糖類，酶組織化學(xué)可顯示酶的活性，有助于研究細(xì)胞