DB15Preventiontechnicalspecificationsforpullorum2020-07-30發(fā)布內(nèi)蒙古自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)代替了DB15/T99—1993《雞白痢病防制技術(shù)規(guī)程》，與D——?jiǎng)h除了撲滅標(biāo)準(zhǔn)及消滅標(biāo)準(zhǔn)（見1993版的4.1）；——增加了凈化標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)內(nèi)容（見4.2.2）；——DB15/T99—1993。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了雞白痢的診斷技術(shù)、防制措施和潛伏期一般為4d～7d。病雛表現(xiàn)為怕冷、精神沉郁、昏睡、羽毛逆淡綠色稀便，羽毛與肛門周圍不潔。少數(shù)出現(xiàn)呼吸困難、關(guān)節(jié)腫脹、失明等癥狀，最后12無(wú)菌采集被檢雞的肝、脾、肺、卵巢等臟器，取臟器組織5g～將研磨的病料分別接種在亞硒酸鹽煌綠增菌培養(yǎng)基、四硫磺酸鈉煌綠增菌培養(yǎng)基、SS瓊脂或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平皿上，37℃培養(yǎng)24h～48h，在SS瓊脂或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平皿上若出現(xiàn)白色或半透明、圓形的光滑菌落，判定為可疑菌落。若在鑒別培養(yǎng)基上無(wú)可疑菌落出現(xiàn)時(shí)，應(yīng)從增菌培菌液在鑒別培養(yǎng)基上劃線分離，37℃培養(yǎng)24h～48h，若有可疑菌落將可疑菌落穿刺接種在三糖鐵瓊脂斜面，并在斜面上劃線，同時(shí)接種在半固體培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)在20℃~25℃環(huán)境條件下，用移液器吸取抗原30μL，垂直滴于玻璃板上，然后取被檢雞的全血75%凝集（+++紫色凝集塊較明顯，反應(yīng)液有輕度渾濁；1.5mL滅菌離心管、恒溫水浴鍋、離心機(jī)34.75μL5μL4μL1μL1μL0.25μL2μL3用TAE（配制方法見附錄A）制備1.5%～2.0%的瓊脂糖凝膠，加樣6μL～8μL，在電壓80V~3.1.1.1制定生物安全制度，對(duì)進(jìn)入雞場(chǎng)的人員、物品等進(jìn)行嚴(yán)格3.1.1.2雞舍、雞籠、墻面、地面、運(yùn)輸工具等3.1.1.3孵化設(shè)施在使用前用福爾馬林密閉3.2.2肉用種雞場(chǎng)須在45日齡至開產(chǎn)之間，通過全血或血清平板凝集試驗(yàn)每月檢疫1次，相3.2.3商品代飼養(yǎng)場(chǎng)戶以預(yù)防為主，引入的雞只應(yīng)選自檢疫雞白痢沙門菌且為陰性的雞44.1.2制定完善的生物安全制度，嚴(yán)格管控進(jìn)入雞場(chǎng)的人員、設(shè)備、車輛、物品4.1.3對(duì)進(jìn)入雞場(chǎng)的人員、設(shè)備、車輛、物品等進(jìn)行徹底清理及消4.1.4對(duì)出現(xiàn)全血或血清平板凝集試驗(yàn)陽(yáng)性的雞只及時(shí)淘汰，并對(duì)病雞所在雞籠、飼料槽、飲水槽等進(jìn)行徹底清理及消毒，同群雞只隔離觀察兩周后，無(wú)異常連續(xù)兩年每個(gè)月抽檢存欄數(shù)的1%～2%，用全血或血清平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)，抽檢陽(yáng)性率在0.5%以5TAE電泳緩沖液（pH約8.5）的配制要求如下：50×TAE電泳緩沖儲(chǔ)存液三羥甲基氨基甲烷（Tris堿）乙二胺四乙酸二鈉（Na2EDTA）雙蒸水待上述混合物完全溶解后，加入57.1mL的醋酸充分?jǐn)嚢枞芙?，加雙蒸水至1L后，置室溫保存。應(yīng)67檢測(cè)目的基因speC上游引物speC下游引物speC基因bp