2025年醫(yī)衛(wèi)類病理學(xué)技術(shù)(士)相關(guān)專業(yè)知識-專業(yè)知識參考題庫含答案解析一、單選題（共35題）1.病理組織處理過程中，最常用的常規(guī)固定液是？【選項】A.10%中性緩沖甲醛B.4%多聚甲醛C.95%乙醇D.Carnoy固定液【參考答案】A【解析】10%中性緩沖甲醛是病理學(xué)最常用的常規(guī)固定液。優(yōu)點包括：穩(wěn)定細(xì)胞結(jié)構(gòu)、保持抗原性較佳且減少組織收縮。B選項4%多聚甲醛多用于電鏡或特殊免疫組化；C選項95%乙醇常用于細(xì)胞學(xué)涂片固定；D選項Carnoy固定液含冰醋酸，適用于快速固定但會溶解紅細(xì)胞。2.組織脫水透明后浸蠟時，透蠟的最佳溫度控制范圍是？【選項】A.45-50℃B.56-60℃C.65-68℃D.70-75℃【參考答案】B【解析】透蠟溫度需略高于石蠟熔點（通常56-58℃），56-60℃是標(biāo)準(zhǔn)操作溫度。A選項溫度過低導(dǎo)致石蠟無法完全滲透；C、D選項溫度過高使組織變脆且抗原破壞。3.下列特殊染色中，用于顯示糖原的是？【選項】A.剛果紅染色B.PAS染色C.蘇丹III染色D.抗酸染色【參考答案】B【解析】PAS（過碘酸-Schiff）染色特異性識別多糖和糖蛋白，糖原呈紫紅色。A選項剛果紅染淀粉樣物；C選項蘇丹III染中性脂肪；D選項抗酸染色用于結(jié)核桿菌。4.免疫組化技術(shù)中，阻斷內(nèi)源性過氧化物酶最常用的試劑是？【選項】A.正常血清B.3%過氧化氫C.疊氮鈉D.牛血清白蛋白【參考答案】B【解析】3%過氧化氫可有效滅活組織內(nèi)的過氧化物酶，避免假陽性。A選項用于減少非特異性結(jié)合；C選項用于阻斷內(nèi)源性堿性磷酸酶；D選項為封閉劑。5.淀粉樣變的剛果紅染色在偏振光顯微鏡下呈？【選項】A.橘紅色無折光性B.蘋果綠色雙折光C.藍(lán)色顆粒狀D.黃色絮狀【參考答案】B【解析】剛果紅染色后的淀粉樣物質(zhì)在偏振光下顯示特征性蘋果綠色雙折光現(xiàn)象，是確診標(biāo)志。A為普通光鏡下表現(xiàn)；C、D為其他染色特征。6.冰凍切片時出現(xiàn)冰晶偽影，最主要原因是？【選項】A.組織固定時間過長B.冷凍速度過慢C.切片厚度不足D.刀片角度不正【參考答案】B【解析】冷凍速度過慢會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)水分形成大冰晶，破壞組織結(jié)構(gòu)。A選項會導(dǎo)致抗原損失；C選項影響觀察但非冰晶成因；D選項導(dǎo)致切片不平整。7.骨組織脫鈣后最佳包埋介質(zhì)是？【選項】A.石蠟B.火棉膠C.樹脂D.OCT膠【參考答案】C【解析】樹脂包埋能保持骨組織硬度并實現(xiàn)超薄切片（1-2μm）。A選項石蠟無法支撐硬組織；B選項火棉膠用于大塊組織；D選項OCT膠適用于冰凍切片。8.電子顯微鏡標(biāo)本的常用固定劑組合是？【選項】A.戊二醛+鋨酸B.甲醛+乙醇C.丙酮+二甲苯D.苦味酸+甲醛【參考答案】A【解析】戊二醛初步固定蛋白，鋨酸后固定脂類并增加電子密度，是電鏡超微結(jié)構(gòu)保存的金標(biāo)準(zhǔn)。B、C、D均為光鏡固定劑。9.甲狀腺乳頭狀癌的特異性免疫組化標(biāo)志物是？【選項】A.CK7B.TTF-1C.BRAFV600ED.Galectin-3【參考答案】C【解析】BRAFV600E突變在甲狀腺乳頭狀癌中陽性率＞80%，特異性最高。A為廣譜上皮標(biāo)志；B在肺腺癌與甲狀腺癌均表達(dá)；D在良惡性病變均可陽性。10.冰凍切片保存的長期穩(wěn)定性要求溫度必須低于？【選項】A.-4℃B.-20℃C.-40℃D.-80℃【參考答案】D【解析】-80℃可最大限度抑制酶活性及RNA/DNA降解，滿足分子病理學(xué)研究需求。-20℃僅適合短期保存；-40℃仍有部分酶活性。11.關(guān)于HE染色中細(xì)胞核被染成藍(lán)色的原理，下列敘述正確的是：【選項】A.細(xì)胞核內(nèi)DNA帶有正電荷，與帶負(fù)電荷的蘇木素堿性染料結(jié)合B.細(xì)胞核內(nèi)DNA帶有負(fù)電荷，與帶正電荷的伊紅酸性染料結(jié)合C.細(xì)胞核內(nèi)DNA帶有負(fù)電荷，與帶正電荷的蘇木素堿性染料結(jié)合D.細(xì)胞核內(nèi)DNA帶有正電荷，與帶負(fù)電荷的伊紅酸性染料結(jié)合【參考答案】C【解析】HE染色中，蘇木素為堿性染料，帶正電荷，主要與細(xì)胞內(nèi)帶負(fù)電荷的物質(zhì)（如DNA的磷酸基團(tuán)）結(jié)合，使細(xì)胞核染成藍(lán)色；伊紅為酸性染料，帶負(fù)電荷，與帶正電荷的蛋白質(zhì)結(jié)合，使細(xì)胞質(zhì)染成紅色。選項C正確描述了DNA負(fù)電荷與蘇木素的結(jié)合機(jī)制。12.PAS染色（過碘酸雪夫反應(yīng)）主要用于檢測以下哪種物質(zhì)？【選項】A.膠原纖維B.中性黏液物質(zhì)和糖原C.黑色素顆粒D.含鐵血黃素【參考答案】B【解析】PAS染色通過過碘酸氧化多糖的鄰二醇基生成醛基，與雪夫試劑結(jié)合形成紫紅色復(fù)合物，特異性顯示中性黏液物質(zhì)、糖原及基底膜等。膠原纖維常用Masson三色染色，黑色素用Fontana-Masson法，含鐵血黃素用普魯士藍(lán)反應(yīng)，故B為正確答案。13.Masson三色染色中，膠原纖維的染色結(jié)果為：【選項】A.綠色B.紅色C.藍(lán)色D.黑色【參考答案】C【解析】Masson三色染色中，肌纖維呈紅色，膠原纖維呈藍(lán)色或綠色（不同配方結(jié)果略有差異），細(xì)胞核呈藍(lán)黑色。當(dāng)前通用配方中，膠原纖維多被亮綠或苯胺藍(lán)染為藍(lán)色，故選項C正確。14.革蘭氏染色的關(guān)鍵步驟是：【選項】A.碘液媒染B.乙醇脫色C.結(jié)晶紫初染D.番紅復(fù)染【參考答案】B【解析】革蘭氏染色中，乙醇脫色是關(guān)鍵步驟：革蘭氏陽性菌因細(xì)胞壁肽聚糖層厚且交聯(lián)致密，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物不易脫出而保持紫色；革蘭氏陰性菌因肽聚糖層薄，脫色后紫色脫落，經(jīng)復(fù)染呈紅色。選項B正確。15.下列染色法可用于網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的是：【選項】A.瑞氏染色B.煌焦油藍(lán)活體染色C.吉姆薩染色D.巴氏染色【參考答案】B【解析】網(wǎng)織紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含殘留的核糖體RNA，煌焦油藍(lán)活體染色可與其結(jié)合呈藍(lán)色顆?；蚓W(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，是專用計數(shù)方法。瑞氏、吉姆薩染色用于血細(xì)胞常規(guī)觀察，巴氏染色用于脫落細(xì)胞學(xué)檢查，故B正確。16.阿爾辛藍(lán)染色（AB染色）主要用于顯示：【選項】A.中性黏液物質(zhì)B.酸性黏液物質(zhì)C.淀粉樣物質(zhì)D.脂褐素【參考答案】B【解析】阿爾辛藍(lán)為含銅的堿性染料，可與酸性黏液物質(zhì)中帶負(fù)電荷的硫酸基或羧基結(jié)合，使其呈藍(lán)色。中性黏液物質(zhì)需PAS染色，淀粉樣物質(zhì)用剛果紅，脂褐素用Schmorl反應(yīng)，故B正確。17.蘇丹Ⅲ染色顯示脂肪的原理是：【選項】A.染料與脂肪發(fā)生化學(xué)反應(yīng)B.染料溶解于脂肪中C.染料與脂肪共價結(jié)合D.脂肪吸附染料形成復(fù)合物【參考答案】B【解析】蘇丹Ⅲ為脂溶性染料，可溶解于脂肪內(nèi)使其呈橙紅色，屬物理性溶解作用，而非化學(xué)反應(yīng)或吸附。選項B正確描述其原理。18.免疫組織化學(xué)技術(shù)中，抗原修復(fù)最常用的方法是：【選項】A.蛋白酶消化法B.微波加熱法C.高壓蒸汽法D.酸水解處理法【參考答案】B【解析】抗原修復(fù)通過破壞甲醛固定形成的交聯(lián)以暴露抗原表位。微波加熱法因操作簡便、效果穩(wěn)定成為最常用方法，高壓蒸汽法次之。蛋白酶消化適用于部分特定抗原，酸水解較少用，故選B。19.診斷隱球菌感染的首選特殊染色法是：【選項】A.六胺銀染色（GMS）B.抗酸染色C.墨汁負(fù)染D.PAS染色【參考答案】C【解析】墨汁負(fù)染可清晰顯示隱球菌的厚莢膜（透明暈圈環(huán)繞菌體），是快速診斷隱球菌腦膜炎的金標(biāo)準(zhǔn)。GMS用于檢測肺孢子菌，抗酸染色用于結(jié)核桿菌，PAS染色對隱球菌無特異性，故C正確。20.巴氏染色中，角化前細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)顏色為：【選項】A.藍(lán)色B.綠色C.粉紅色D.橘黃色【參考答案】A【解析】巴氏染色中，角化前細(xì)胞胞質(zhì)因含較多RNA，可被堿性染料蘇木素染成藍(lán)色；角化細(xì)胞胞質(zhì)含角蛋白，被伊紅、橘黃G染為粉紅或橘黃色。選項A正確。21.使用PAS染色法可特異性顯示組織內(nèi)的哪種物質(zhì)？【選項】A.中性脂肪B.彈力纖維C.糖原D.黑色素【參考答案】C【解析】PAS染色（過碘酸-希夫反應(yīng)）通過氧化糖分子中的鄰二羥基生成醛基，與希夫試劑結(jié)合形成紫紅色沉淀，主要用于顯示糖原、黏液物質(zhì)等含多糖或糖蛋白的結(jié)構(gòu)。選項A中性脂肪常用蘇丹染色；選項B彈力纖維需用醛品紅等特殊染色；選項D黑色素常用Fontana-Masson法染色。22.組織固定時，中性緩沖甲醛的主要作用是？【選項】A.增強(qiáng)抗原性B.防止組織收縮C.保護(hù)核酸完整性D.抑制微生物生長【參考答案】C【解析】中性緩沖甲醛能減少酸性環(huán)境對DNA和RNA的降解，保護(hù)核酸完整性。選項A錯誤，甲醛固定可能降低抗原性；選項B需通過固定液滲透壓調(diào)節(jié)減少收縮；選項D是其輔助作用，但非主要目的。23.冰凍切片的優(yōu)勢不包括下列哪項？【選項】A.快速獲取診斷結(jié)果B.保留脂類物質(zhì)C.減少組織收縮變形D.適用于骨組織【參考答案】D【解析】冰凍切片適用于快速病理診斷且能保留脂類（如脂肪染色），但骨組織需脫鈣處理無法直接冰凍切片。選項C正確，因不經(jīng)脫水步驟，組織收縮較輕。24.免疫組化染色中，抗原修復(fù)的常用方法是？【選項】A.微波加熱法B.酸性水解C.酶消化法D.以上均是【參考答案】D【解析】抗原修復(fù)可通過熱修復(fù)（微波/高壓）、酶消化（胰蛋白酶）或化學(xué)法（酸性緩沖液）實現(xiàn)，以暴露因甲醛固定掩蔽的抗原表位。25.顯微鏡的數(shù)值孔徑（NA）與分辨率的關(guān)系是？【選項】A.NA越大，分辨率越低B.NA與分辨率無關(guān)C.NA越大，分辨率越高D.NA僅影響放大倍數(shù)【參考答案】C【解析】分辨率=0.61λ/NA，波長λ固定時，NA越大分辨率越高。數(shù)值孔徑由物鏡和聚光鏡決定，直接影響分辨微小結(jié)構(gòu)的能力。26.脫鈣液中EDTA的作用機(jī)制是？【選項】A.酸溶解鈣鹽B.整合鈣離子C.酶解膠原D.氧化脫鈣【參考答案】B【解析】EDTA通過螯合作用結(jié)合鈣離子，緩慢脫鈣且不破壞組織蛋白。選項A為強(qiáng)酸（如硝酸）脫鈣機(jī)制；選項C適用于特殊酶解法；選項D不存在此方法。27.石蠟包埋時，組織透明劑通常選用？【選項】A.乙醇B.甲醛C.二甲苯D.乙酸【參考答案】C【解析】脫水后的組織需經(jīng)透明劑（如二甲苯）置換乙醇，因其與石蠟相容性好。選項A為脫水劑，選項B為固定劑，選項D用于特定染色步驟。28.革蘭染色中碘液的主要功能是？【選項】A.初染細(xì)菌B.媒染劑增強(qiáng)結(jié)合C.脫色分化D.復(fù)染對比【參考答案】B【解析】碘液作為媒染劑與結(jié)晶紫形成復(fù)合物，增強(qiáng)染料與細(xì)菌的結(jié)合。選項A由結(jié)晶紫完成；選項C使用酒精/丙酮；選項D為沙黃或復(fù)紅。29.HE染色中，細(xì)胞質(zhì)被染成紅色的成分是？【選項】A.蘇木素B.伊紅C.鹽酸酒精D.氨水【參考答案】B【解析】伊紅為酸性染料，使細(xì)胞質(zhì)、膠原等堿性成分呈紅色。蘇木素（選項A）為堿性染料，染細(xì)胞核藍(lán)色；選項C/D為分化與返藍(lán)試劑。30.原位雜交技術(shù)檢測的目標(biāo)物質(zhì)是？【選項】A.蛋白質(zhì)B.DNA/RNAC.酶活性D.糖類【參考答案】B【解析】原位雜交利用核酸互補(bǔ)原理，以標(biāo)記探針檢測細(xì)胞內(nèi)的DNA或RNA。選項A為免疫組化檢測目標(biāo)；選項C為酶組織化學(xué)檢測物。31.關(guān)于組織固定液的選用原則，下列說法錯誤的是：【選項】A.福爾馬林是最常用的固定液，適用于大多數(shù)組織B.B-5固定液對富含血液的組織（如脾臟）效果更佳C.乙醇固定液適用于糖原保存，但易導(dǎo)致組織收縮變硬D.冷凍切片通常使用10%中性緩沖福爾馬林固定【參考答案】D【解析】1.A正確：福爾馬林滲透性強(qiáng)、成本低，是常規(guī)病理檢查的首選固定液。2.B正確：B-5固定液含汞鹽，能更好固定細(xì)胞核和紅細(xì)胞，適合造血器官組織。3.C正確：乙醇固定糖原效果好，但會引起蛋白質(zhì)凝固收縮。4.D錯誤：冷凍切片采用速凍后直接切片，無需福爾馬林固定，固定會破壞酶活性及抗原性。32.HE染色中，分化環(huán)節(jié)的關(guān)鍵作用是：【選項】A.增強(qiáng)細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)的對比度B.去除細(xì)胞質(zhì)過量染液，保證核質(zhì)著色差異C.促進(jìn)蘇木素與DNA結(jié)合D.維持染色液的pH穩(wěn)定性【參考答案】B【解析】1.分化是HE染色關(guān)鍵步驟，用酸性乙醇（如1%鹽酸乙醇）選擇性脫去細(xì)胞質(zhì)中多余蘇木素。2.A選項描述的是染色整體效果，非分化環(huán)節(jié)的直接作用。3.C錯誤：蘇木素與DNA結(jié)合發(fā)生在染色環(huán)節(jié)，分化是后續(xù)處理。4.D錯誤：pH穩(wěn)定性由緩沖液維持，與分化無關(guān)。33.PAS（過碘酸-雪夫）染色主要用于檢測：【選項】A.膠原纖維B.糖原和中性黏液物質(zhì)C.黑色素顆粒D.淀粉樣物質(zhì)【參考答案】B【解析】1.PAS染色原理：過碘酸氧化多糖→醛基+雪夫試劑→形成紫紅色復(fù)合物。2.B正確：主要標(biāo)記糖原、中性黏液、基底膜等含多糖物質(zhì)。3.A錯誤：膠原纖維常用Masson三色或VanGieson染色。4.C/D錯誤：黑色素用Fontana-Masson，淀粉樣物用剛果紅。34.糖原染色中，經(jīng)淀粉酶消化后應(yīng)出現(xiàn)的陰性反應(yīng)是：【選項】A.腎小管上皮細(xì)胞刷狀緣B.肝細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)顆粒C.胃黏膜腺體黏液D.中性粒細(xì)胞胞質(zhì)顆?！緟⒖即鸢浮緽【解析】1.淀粉酶可特異性分解糖原，消化后原糖原陽性部位（如肝細(xì)胞）應(yīng)轉(zhuǎn)陰。2.A錯誤：腎小管刷狀緣含葡萄糖苷酶，非糖原，故PAS陽性且抗淀粉酶消化。3.C/D錯誤：胃黏液含黏蛋白、中性粒細(xì)胞含溶菌酶，均非糖原，不受淀粉酶影響。35.免疫組織化學(xué)染色中，CK（細(xì)胞角蛋白）陽性表達(dá)提示病變起源是：【選項】A.間葉組織B.上皮組織C.神經(jīng)組織D.淋巴造血組織【參考答案】B【解析】1.CK是上皮源性標(biāo)記物，廣泛存在于角質(zhì)細(xì)胞及腺上皮細(xì)胞。2.A錯誤：間葉組織標(biāo)記為Vimentin（波形蛋白）。3.C錯誤：神經(jīng)組織標(biāo)記如GFAP（膠質(zhì)纖維酸性蛋白）。4.D錯誤：淋巴造血標(biāo)記如CD45、CD20等。二、多選題（共35題）1.以下關(guān)于組織固定目的的敘述，正確的是：【選項】A.防止組織自溶和腐敗B.使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固C.增強(qiáng)組織對染料的親和力D.完全保持細(xì)胞生活狀態(tài)下的形態(tài)E.提高組織硬度和彈性，便于切片【參考答案】ABE【解析】A正確：固定可阻止酶活性，防止組織自溶或細(xì)菌腐敗。B正確：固定劑使蛋白質(zhì)交聯(lián)凝固，保存細(xì)胞結(jié)構(gòu)。C錯誤：固定可能降低某些染料的親和力（如核染色需后處理）。D錯誤：固定會使細(xì)胞失活，無法完全保持生活狀態(tài)形態(tài)。E正確：固定增加組織硬度，便于后續(xù)切片操作。2.下列特殊染色技術(shù)與其主要應(yīng)用匹配正確的是：【選項】A.PAS染色——顯示基底膜B.剛果紅染色——淀粉樣物質(zhì)C.維多利亞藍(lán)染色——網(wǎng)狀纖維D.蘇丹Ⅲ染色——中性脂肪E.Masson三色染色——膠原纖維【參考答案】ABDE【解析】A正確：PAS染色可顯示基底膜、糖原及黏多糖。B正確：剛果紅與淀粉樣物質(zhì)結(jié)合呈磚紅色。C錯誤：維多利亞藍(lán)用于顯示彈性纖維，網(wǎng)狀纖維常用銀染。D正確：蘇丹Ⅲ與中性脂肪結(jié)合呈橙紅色。E正確：Masson染色中膠原纖維呈藍(lán)色或綠色。3.免疫組化技術(shù)中，可有效封閉內(nèi)源性過氧化物酶的是：【選項】A.3%過氧化氫甲醇溶液B.正常山羊血清C.牛血清白蛋白（BSA）D.疊氮鈉溶液E.檸檬酸鹽緩沖液【參考答案】AD【解析】A正確：3%H?O?能滅活內(nèi)源性過氧化物酶。D正確：疊氮鈉可抑制酶活性。B/C錯誤：山羊血清和BSA用于封閉非特異性位點，與酶活性無關(guān)。E錯誤：檸檬酸鹽用于抗原修復(fù)。4.關(guān)于顯微鏡的使用，正確的操作包括：【選項】A.油鏡使用后需用二甲苯擦拭鏡頭B.調(diào)節(jié)聚光鏡高度可改變視野亮度C.高倍鏡觀察時應(yīng)先粗調(diào)后細(xì)調(diào)焦距D.觀察無色標(biāo)本時需關(guān)閉光圈增強(qiáng)對比度E.顯微鏡存放時應(yīng)將物鏡轉(zhuǎn)至最低位置【參考答案】ABD【解析】A正確：油鏡需用二甲苯清除香柏油。B正確：聚光鏡升降直接影響照明強(qiáng)度。C錯誤：高倍鏡需用細(xì)調(diào)避免鏡頭撞玻片。D正確：縮小光圈可提高無色標(biāo)本對比度。E錯誤：存放時應(yīng)將物鏡轉(zhuǎn)離載物臺（如“安全位”），而非最低位。5.HE染色中，關(guān)于分化操作的正確描述是：【選項】A.分化指脫去細(xì)胞核過染的蘇木素B.常用1%鹽酸乙醇作為分化液C.分化時間過長會導(dǎo)致細(xì)胞核染色淺淡D.分化后需流水沖洗終止反應(yīng)E.分化僅針對細(xì)胞核染色步驟【參考答案】ABCD【解析】A正確：分化作用為去除核染色過度部分。B正確：1%鹽酸乙醇是經(jīng)典分化液。C正確：分化時間延長將脫色過度。D正確：流水沖洗可中和酸性分化液。E錯誤：分化也用于部分胞漿染色（如伊紅）的調(diào)整。6.組織脫水過程中，二甲苯的作用包括：【選項】A.徹底脫除組織內(nèi)水分B.溶解石蠟便于浸透C.使組織透明化D.增強(qiáng)組織韌性E.替代酒精作為中間試劑【參考答案】CE【解析】A錯誤：脫水主要由酒精完成，二甲苯不溶于水。B錯誤：二甲苯不溶解石蠟，而是作為透明劑使石蠟易滲入。C正確：透明化是二甲苯的核心作用。D錯誤：二甲苯可能使組織變脆。E正確：脫水流程為酒精→二甲苯→石蠟，二甲苯為過渡試劑。7.酶組織化學(xué)技術(shù)中，顯示堿性磷酸酶常用的方法是：【選項】A.Gomori鈣鈷法B.偶氮偶聯(lián)法C.磷酸鉛法D.硝基藍(lán)四唑（NBT）法E.硫化鉛法【參考答案】AB【解析】A正確：鈣鈷法是經(jīng)典方法，生成黑色硫化鈷沉淀。B正確：偶氮偶聯(lián)法使用底物α-萘酚磷酸鈉，與重氮鹽生成有色產(chǎn)物。C/D/E錯誤：磷酸鉛法用于酸性磷酸酶，NBT法多用于脫氫酶，硫化鉛法用于其他酶類。8.細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測方法包括：【選項】A.TUNEL法B.透射電鏡觀察核碎裂C.流式細(xì)胞術(shù)測亞G1峰D.瓊脂糖凝膠電泳測DNA梯狀條帶E.HE染色觀察凋亡小體【參考答案】BE【解析】B正確：電鏡可直接觀察凋亡特有的核碎裂、胞膜出泡。E正確：HE染色中凋亡小體呈圓形的嗜酸性小體。A/C/D錯誤：TUNEL法檢測DNA斷裂（生化層面），流式測亞G1峰為細(xì)胞周期分析，電泳為分子生物學(xué)方法，三者均非形態(tài)學(xué)觀察。9.免疫熒光技術(shù)中，可能引起非特異性染色的因素有：【選項】A.抗體濃度過高B.未封閉內(nèi)源性生物素C.標(biāo)本自發(fā)熒光D.交叉反應(yīng)性抗體E.使用伊文思藍(lán)復(fù)染【參考答案】ABCD【解析】A正確：高濃度抗體導(dǎo)致非特異結(jié)合。B正確：組織內(nèi)源性生物素與熒光探針結(jié)合產(chǎn)生假信號。C正確：自發(fā)熒光（如膠原、脂褐素）干擾結(jié)果。D正確：抗體與非靶抗原結(jié)合產(chǎn)生假陽性。E錯誤：伊文思藍(lán)用于減弱自發(fā)熒光，減少非特異性。10.關(guān)于冰凍切片的描述，正確的是：【選項】A.組織無需脫水透明可直接切片B.適用于脂肪組織染色C.可較好保存抗原免疫活性D.切片厚度通常為4-6μmE.應(yīng)立即固定防止冰晶形成【參考答案】AC【解析】A正確：冰凍切片跳過脫水透明步驟，靠冷凍支撐組織。B錯誤：脂肪組織冷凍后易碎裂，常選用石蠟切片。C正確：避免固定和高溫處理，抗原保存好。D錯誤：冰凍切片厚度多為8-15μm。E錯誤：冰晶在冷凍時已形成，固定應(yīng)在切片后進(jìn)行。11.關(guān)于組織固定的目的，下列描述正確的是：【選項】A.防止組織自溶和腐敗B.使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固C.增強(qiáng)組織對染料的親和力D.完全保存組織中的核酸結(jié)構(gòu)E.消除組織中的微生物污染【參考答案】ABCE【解析】A正確：固定首要目的是終止細(xì)胞代謝，防止自溶和腐敗。B正確：固定劑如甲醛可使蛋白質(zhì)交聯(lián)凝固，穩(wěn)定細(xì)胞結(jié)構(gòu)。C正確：固定能改變組織通透性，增強(qiáng)染色效果。D錯誤：固定會破壞核酸完整性，尤其是甲醛可導(dǎo)致DNA交聯(lián)。E正確：部分固定劑（如中性緩沖甲醛）兼具抑菌作用。12.下列哪種固定液常用于電鏡樣本制備？【選項】A.10%中性緩沖甲醛B.Bouin固定液C.戊二醛D.Zenker固定液E.丙酮【參考答案】C【解析】A為常規(guī)光鏡固定液；B含苦味酸，穿透慢，不適合電鏡；C（戊二醛）能更好保存超微結(jié)構(gòu)，是電鏡常用預(yù)固定劑；D含升汞，主要用于特殊染色；E為冰凍切片或快速固定用。13.HE染色中，分色過度的可能后果包括：【選項】A.細(xì)胞核染色過深B.細(xì)胞質(zhì)與核顏色反差降低C.組織切片褪色D.膠原纖維染色不清E.紅細(xì)胞顯色異?！緟⒖即鸢浮緽CE【解析】分色（脫分化）過度會導(dǎo)致：B正確：蘇木素（核染料）被過度移除，核質(zhì)對比減弱；C正確：伊紅（胞質(zhì)染料）也可能被部分洗脫；E正確：紅細(xì)胞因含血紅蛋白易受影響。A錯誤：分色不足才會導(dǎo)致核深染；D與分化無關(guān)，主要取決于染色步驟。14.PAS反應(yīng)（過碘酸-雪夫反應(yīng)）可用于顯示：【選項】A.糖原B.中性黏液物質(zhì)C.軟骨基質(zhì)D.真菌細(xì)胞壁E.膠原纖維【參考答案】ABD【解析】PAS特異性檢測多糖類物質(zhì)：A（糖原）、B（中性黏液）和D（真菌壁含幾丁質(zhì)多糖）。C由阿爾辛藍(lán)顯示酸性黏液，E由VanGieson染色顯示膠原。15.免疫組化中，抗原熱修復(fù)的常用方法包括：【選項】A.高壓鍋熱修復(fù)法B.微波爐酸性修復(fù)法C.蛋白酶K消化法D.EDTA堿性修復(fù)液水浴法E.超聲波處理法【參考答案】AD【解析】A和D為熱修復(fù)標(biāo)準(zhǔn)方法：高壓鍋（121℃）和EDTA堿性液（98℃）最常用。B錯誤：修復(fù)液需中性或堿性；C為酶消化法，非熱處理；E不用于常規(guī)抗原修復(fù)。16.下列染色組合中，用于區(qū)分黏液類型的正確方法是：【選項】A.PAS+阿爾辛藍(lán)（AB）B.蘇丹III+油紅OC.剛果紅+結(jié)晶紫D.Masson三色+VerhoeffE.普魯士藍(lán)+銀染【參考答案】A【解析】A正確：PAS染中性黏液（紫紅色），AB染酸性黏液（藍(lán)色），聯(lián)合可區(qū)分類型；B為脂質(zhì)染色；C為淀粉樣物質(zhì)染色；D為結(jié)締組織染色；E為鐵離子和網(wǎng)狀纖維染色。17.關(guān)于冰凍切片的操作要點，錯誤的是：【選項】A.組織需快速冷凍至-20℃以下B.切片厚度通常為4-6μmC.切前需用OCT包埋劑D.可直接用甲醛固定后切片E.染色后需快速脫水透明【參考答案】D【解析】D錯誤：甲醛固定會使組織變硬，無法切薄片，冰凍切片需新鮮未固定組織。其他均正確：A（防冰晶）、B（標(biāo)準(zhǔn)厚度）、C（OCT保護(hù)組織）、E（防切片溶解）。18.下列哪種屬于特殊染色技術(shù)？【選項】A.抗酸染色B.革蘭染色C.網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)D.尼氏小體染色E.Giemsa染色【參考答案】ABDE【解析】AB為細(xì)菌染色，D（神經(jīng)元尼氏體）和E（寄生蟲/細(xì)胞）均屬特殊染色。C為血液學(xué)常規(guī)技術(shù)，不歸類于病理特殊染色。19.實驗室生物安全中，處理結(jié)核桿菌標(biāo)本應(yīng)達(dá)到的防護(hù)級別為：【選項】A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-4E.普通實驗室即可【參考答案】B【解析】結(jié)核桿菌屬于第三類病原體（中風(fēng)險），需BSL-2標(biāo)準(zhǔn)（生物安全柜、負(fù)壓環(huán)境）。BSL-1用于無害微生物，BSL-3/4用于高致病性病原體如SARS病毒、埃博拉病毒。20.熒光顯微鏡觀察時，下列說法正確的是：【選項】A.需使用汞燈或LED光源B.激發(fā)濾光片位于物鏡和目鏡之間C.標(biāo)本需自發(fā)熒光或標(biāo)記熒光染料D.DAPI染色顯示藍(lán)色熒光E.觀察后標(biāo)本可長期保存【參考答案】ACD【解析】A正確：熒光需特定波長光源；B錯誤：激發(fā)濾光片位于光源前；C正確；D正確：DAPI結(jié)合DNA發(fā)藍(lán)光；E錯誤：熒光染料易淬滅，需避光且盡快觀察。21.關(guān)于組織固定劑的選擇，下列哪些說法正確？【選項】A.10%中性緩沖甲醛是最常用的常規(guī)固定液B.戊二醛固定液能更好地保存細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)C.Bouin液含有苦味酸和冰醋酸，對胚胎組織固定效果好D.Zenker液中含汞成分，對肌組織固定效果顯著E.Carnoy液含乙醇和冰醋酸，適合固定糖原【參考答案】ABCDE【解析】1.A正確：10%中性緩沖甲醛因滲透性好、成本低，是病理科最常用的常規(guī)固定劑。2.B正確：戊二醛能穩(wěn)定蛋白質(zhì)交聯(lián)，電鏡樣本首選此固定劑以保存超微結(jié)構(gòu)。3.C正確：Bouin液（苦味酸+甲醛+冰醋酸）滲透快，減少胚胎組織收縮變形。4.D正確：Zenker液（重鉻酸鉀+升汞）能增強(qiáng)肌纖維著色，常用于特殊染色。5.E正確：Carnoy液（乙醇+氯仿+冰醋酸）快速固定糖原并抑制水解酶活性。22.下列特殊染色技術(shù)與其顯示物質(zhì)的對應(yīng)，正確的是？【選項】A.PAS染色——中性黏液和基底膜B.油紅O染色——脂質(zhì)C.Masson三色染色——膠原纖維呈藍(lán)色D.維多利亞藍(lán)染色——網(wǎng)狀纖維E.剛果紅染色——淀粉樣物質(zhì)【參考答案】ABE【解析】1.A正確：PAS染色通過高碘酸氧化多糖，雪夫試劑顯色，可標(biāo)記糖原和黏蛋白。2.B正確：油紅O為脂溶性染料，冰凍切片中脂質(zhì)被染成橙紅色。3.C錯誤：Masson染色中膠原纖維呈藍(lán)色（使用苯胺藍(lán)）或綠色（使用亮綠）。4.D錯誤：維多利亞藍(lán)染色顯示彈性纖維，網(wǎng)狀纖維需用銀染（如Gomori法）。5.E正確：剛果紅與淀粉樣物質(zhì)結(jié)合后呈橘紅色，偏振光下可見蘋果綠雙折光。23.免疫組織化學(xué)技術(shù)中，必要對照實驗包括？【選項】A.陽性組織對照B.陰性試劑對照（一抗替代對照）C.內(nèi)源性過氧化物酶阻斷對照D.空白對照（不加一抗和二抗）E.自身組織對照（已知陰陽性區(qū)域并存）【參考答案】ABCD【解析】1.A正確：陽性對照用于驗證抗體有效性及實驗系統(tǒng)正常。2.B正確：陰性試劑對照需用PBS替代一抗，排除二抗非特異結(jié)合。3.C正確：過氧化物酶阻斷（如3%H?O?）可消除內(nèi)源酶導(dǎo)致的假陽性。4.D正確：空白對照僅加顯色底物，檢測內(nèi)源性顯色物質(zhì)干擾。5.E錯誤：自身對照適用于特定組織（如正常與病變并存），但非常規(guī)必需。24.原位雜交技術(shù)的關(guān)鍵步驟包括？【選項】A.蛋白酶K消化以增加探針滲透性B.探針與靶序列需高溫（95°C）變性C.雜交后高嚴(yán)謹(jǐn)度洗脫減少非特異結(jié)合D.石蠟切片需先脫蠟至水化E.用地高辛標(biāo)記探針時需用抗地高辛抗體檢測【參考答案】ACDE【解析】1.A正確：蛋白酶K消化暴露靶核酸并降低背景染色。2.B錯誤：探針與靶DNA需變性解鏈（通常80°C），但RNA靶標(biāo)需避免高溫降解。3.C正確：嚴(yán)謹(jǐn)洗脫（如65°C低鹽緩沖液）可去除非互補(bǔ)探針。4.D正確：石蠟切片必須經(jīng)脫蠟（二甲苯）和梯度乙醇水化后才能處理。5.E正確：地高辛標(biāo)記系統(tǒng)通過酶標(biāo)抗體與探針結(jié)合，BCIP/NBT顯色。25.下列哪些酶可通過組織化學(xué)法定位檢測？【選項】A.堿性磷酸酶（ALP）B.酸性磷酸酶（ACP）C.三磷酸腺苷酶（ATPase）D.乳酸脫氫酶（LDH）E.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）【參考答案】ABCD【解析】1.A正確：ALP通過鈣鈷法檢測，黑色硫化鈷沉淀示活性部位。2.B正確：ACP在酸性環(huán)境下催化底物（如β-甘油磷酸鈉），鉛離子捕獲磷酸根。3.C正確：ATPase分解ATP釋放磷酸根，鉛離子捕獲形成黑色硫化鉛顆粒。4.D正確：LDH用四唑鹽反應(yīng)（如NBT），甲臜沉淀顯示酶活性部位。5.E錯誤：G6PD屬于氧化還原酶，需輔酶NADPH參與，難用常規(guī)組織化學(xué)法定位。26.電子顯微鏡樣本制備中，正確的是？【選項】A.鋨酸（四氧化鋨）可固定脂質(zhì)并增強(qiáng)電子反差B.戊二醛單獨固定可保存細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)C.脫水需用乙醇或丙酮梯度替代水分D.環(huán)氧樹脂包埋劑需60°C高溫聚合E.超薄切片厚度通常為50-100納米【參考答案】ACDE【解析】1.A正確：鋨酸與不飽和脂肪酸結(jié)合，固定生物膜并賦予高電子密度。2.B錯誤：戊二醛需與鋨酸雙重固定，單獨使用無法充分交聯(lián)蛋白質(zhì)。3.C正確：梯度脫水（50%-100%乙醇）防止樣本收縮，丙酮常用作替代溶劑。4.D正確：環(huán)氧樹脂（如Epon812）需60°C烘箱聚合24小時形成硬塊。5.E正確：超薄切片機(jī)切出50-100nm切片，厚度適合電子束穿透。27.影響免疫組化染色結(jié)果的關(guān)鍵因素有？【選項】A.抗原修復(fù)方法（熱修復(fù)/酶消化）B.抗體稀釋度及孵育時間C.非離子去污劑（如TritonX-100）增強(qiáng)通透性D.血清封閉減少非特異性結(jié)合E.顯色底物濃度及反應(yīng)時間【參考答案】ABCDE【解析】1.A正確：甲醛固定易遮蔽抗原表位，熱修復(fù)（高壓/微波）或蛋白酶K消化可暴露抗原。2.B正確：抗體過高濃度導(dǎo)致背景著色，過低濃度減弱信號，孵育超時增加非特異結(jié)合。3.C正確：0.1%-0.3%TritonX-100溶解細(xì)胞膜脂質(zhì)，促進(jìn)抗體滲透至胞內(nèi)抗原。4.D正確：5%-10%正常血清封閉Fc受體，降低抗體非特異性吸附。5.E正確：DAB濃度過高或顯色過久易產(chǎn)生沉淀背景，需顯微鏡下控制反應(yīng)終點。28.關(guān)于PCR技術(shù)，下列說法正確的是？【選項】A.TaqDNA聚合酶的最適溫度為72°CB.引物退火溫度取決于GC含量及長度C.循環(huán)次數(shù)超過40次可能增加非特異產(chǎn)物D.Mg2?濃度影響引物與模板結(jié)合強(qiáng)度E.陽性對照管可監(jiān)測反應(yīng)體系有效性【參考答案】ABCDE【解析】1.A正確：Taq酶在72°C時延伸速率最快（約2000bp/min）。2.B正確：退火溫度計算公式為Tm=4(G+C)+2(A+T)，通常設(shè)在Tm-5°C。3.C正確：超過35循環(huán)后酶活性下降，引物耗盡，非特異擴(kuò)增增加。4.D正確：Mg2?濃度過高降低特異性，過低抑制聚合酶活性（常用1.5-2.5mM）。5.E正確：陽性對照含已知靶序列，排除假陰性（如試劑失效或操作失誤）。29.下列哪些是細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)特征？【選項】A.細(xì)胞核固縮碎裂B.胞膜完整形成凋亡小體C.線粒體腫脹破碎D.嗜酸性增強(qiáng)E.周圍組織炎性細(xì)胞浸潤【參考答案】ABD【解析】1.A正確：凋亡特征性改變?yōu)楹巳旧|(zhì)邊集、裂解成新月形或碎片狀。2.B正確：凋亡細(xì)胞膜內(nèi)陷包裹胞質(zhì)碎片形成凋亡小體，被鄰近細(xì)胞吞噬。3.C錯誤：線粒體腫脹是壞死標(biāo)志，凋亡中線粒體膜電位改變釋放細(xì)胞色素C。4.D正確：凋亡細(xì)胞胞質(zhì)脫水濃縮，HE染色呈深紅色（嗜酸性增強(qiáng)）。5.E錯誤：炎性浸潤是壞死繼發(fā)反應(yīng)，凋亡不引發(fā)炎癥。30.病理檔案管理要求包括？【選項】A.石蠟塊常溫保存需防潮避光B.玻片存檔溫度應(yīng)≤25°CC.電子檔案需雙硬盤異地備份D.組織標(biāo)本保存期至少15年E.借閱檔案需登記借用人及歸還時間【參考答案】ABCE【解析】1.A正確：石蠟塊需密封于干燥盒，濕度＞60%易致組織降解。2.B正確：高溫加速HE切片褪色，25°C以下可保存10年以上。3.C正確：《病理科建設(shè)指南》要求重要數(shù)據(jù)實時備份+離線異地存儲。4.D錯誤：根據(jù)《醫(yī)療事故處理條例》，常規(guī)標(biāo)本保存期≥手術(shù)后1年。5.E正確：借閱需記錄借閱人、目的、數(shù)量及歸還時間，防止檔案丟失。31.關(guān)于冰凍切片操作，錯誤的是？【選項】A.樣本需用OCT包埋劑包裹B.切片厚度通常為4-6微米C.速凍時避免異戊烷直接接觸液氮D.組織冷凍后可反復(fù)復(fù)溫修正E.-20°C恒溫切片減少冰晶形成【參考答案】D【解析】1.A正確：OCT（組織冷凍介質(zhì)）包埋減少切片裂隙并保護(hù)樣本。2.B錯誤：標(biāo)準(zhǔn)冰凍切片厚度應(yīng)為5-10μm（如乳腺前哨淋巴結(jié)需6-8μm）。3.C正確：異戊烷經(jīng)液氮預(yù)冷至-150°C速凍，直接浸入液氮易致組織脆裂。4.D錯誤：復(fù)溫會造成冰晶破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，應(yīng)避免反復(fù)凍融。5.E正確：-20°C是最佳切片溫度溫差過大會形成冰晶偽影。32.下列關(guān)于組織固定液的表述，正確的是：【選項】A.10%中性福爾馬林的緩沖液可減少福爾馬林色素沉淀B.95%乙醇常用于糖原固定，但會導(dǎo)致組織收縮C.丙酮固定的組織需避免高溫以防蛋白質(zhì)變性D.苦味酸固定液不適合長期保存組織【參考答案】ABD【解析】A正確：中性福爾馬林緩沖液（pH7.2~7.4）可抑制酸性環(huán)境引發(fā)的福爾馬林色素沉淀。B正確：95%乙醇是糖原固定常用試劑，但滲透慢且收縮組織明顯，需控制時間。C錯誤：丙酮為可揮發(fā)性快速固定劑且耐高溫，常用于冷凍切片固定。D正確：苦味酸固定液的穿透力弱，易致組織變黃，不適合長期保存。33.關(guān)于HE染色操作，以下說法錯誤的有：【選項】A.蘇木精染色后需流水沖洗以終止分化B.伊紅染色時間通常比蘇木精短C.分化液使用1%鹽酸乙醇可移除非特異性染色D.藍(lán)化后水洗不徹底會導(dǎo)致染色偏紅【參考答案】AD【解析】A錯誤：蘇木精染色后需用酸性乙醇分化，流水沖洗用于藍(lán)化反應(yīng)而非終止分化。B正確：伊紅染色時間多為30~60秒，短于蘇木精的5~10分鐘。C正確：1%鹽酸乙醇可特異性去除胞漿過多蘇木精著色。D錯誤：藍(lán)化不充分會導(dǎo)致染色偏藍(lán)（堿性殘留），非偏紅。34.下列屬于特殊染色技術(shù)適用范圍的是：【選項】A.Masson三色染色用于區(qū)分膠原纖維與肌纖維B.PAS染色可顯示組織中中性黏液物質(zhì)C.剛果紅染色用于檢測淀粉樣蛋白沉積D.革蘭染色主要用于細(xì)菌細(xì)胞壁分類【參考答案】ABC【解析】A正確：Masson染色中膠原纖維呈藍(lán)色，肌纖維呈紅色。B正確：PAS染色通過糖原與高碘酸反應(yīng)顯示黏液物質(zhì)。C正確：剛果紅染色后淀粉樣蛋白在偏振光下呈蘋果綠色雙折光。D錯誤：革蘭染色屬微生物學(xué)常規(guī)技術(shù)，不屬病理組織特殊染色范疇。35.關(guān)于冰凍切片制作的注意事項，正確的是：【選項】A.組織需在-20℃恒冷箱中快速冷凍以防冰晶形成B.切片厚度通常為4~6μm以保證細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整C.若出現(xiàn)切片卷曲，可調(diào)高防卷板位置改善D.切片后應(yīng)立即固定防止抗原丟失【參考答案】ACD【解析】A正確：快速冷凍（如液氮處理）可減少冰晶偽影，-20℃為常規(guī)操作溫度。B錯誤：冰凍切片標(biāo)準(zhǔn)厚度為5~8μm，4μm過薄易致破碎。C正確：防卷板位置過高可避免切片與刀片黏連導(dǎo)致的卷曲。D正確：丙酮或乙醇固定可減少細(xì)胞內(nèi)成分?jǐn)U散。三、判斷題（共30題）1.中性甲醛固定液在病理組織固定中的常用濃度為10%。【選項】A.正確B.錯誤【參考答案】A【解析】中性甲醛固定液的常規(guī)配制濃度為10%（含4%甲醛），是病理組織固定的標(biāo)準(zhǔn)濃度之一，能有效保存組織形態(tài)與抗原性，符合《病理學(xué)技術(shù)》教材規(guī)范。2.HE染色中，蘇木精染色步驟必須在伊紅染色之前進(jìn)行?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】A【解析】HE染色順序固定：先以蘇木精染細(xì)胞核，鹽酸乙醇分化，再以伊紅染細(xì)胞質(zhì)。若順序顛倒會導(dǎo)致細(xì)胞核著色淺或脫色，影響診斷準(zhǔn)確性。3.冰凍切片制作時，組織需經(jīng)過乙醇梯度脫水后方可固定?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】B【解析】冰凍切片為快速診斷技術(shù)，組織直接速凍后切片，無需脫水步驟。乙醇梯度脫水用于石蠟切片流程，二者不可混淆。4.PAS染色可用于顯示基底膜中的糖蛋白成分?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】A【解析】PAS（過碘酸-雪夫）染色特異性結(jié)合多糖與糖蛋白，基底膜含層粘連蛋白等糖蛋白，故呈陽性反應(yīng)（紫紅色），是腎病病理診斷的關(guān)鍵技術(shù)。5.免疫組化技術(shù)中，一抗的最佳保存溫度為4℃?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】B【解析】大多數(shù)一抗需長期保存于-20℃或更低溫度，4℃僅適用于短期內(nèi)（1-2周）使用，否則易失活導(dǎo)致假陰性。6.透射電鏡樣本固定時需使用戊二醛和鋨酸雙固定法?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】A【解析】戊二醛主要固定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，鋨酸固定脂質(zhì)并增強(qiáng)電子反差，雙固定法可完整保存超微結(jié)構(gòu)，是電鏡制樣的金標(biāo)準(zhǔn)。7.Masson三色染色中，膠原纖維被染成紅色?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】B【解析】Masson染色中膠原纖維呈藍(lán)色（常用苯胺藍(lán)或亮藍(lán)），肌纖維與紅細(xì)胞呈紅色，易與VanGieson染色（膠原纖維紅色）混淆。8.調(diào)節(jié)中性甲醛固定液pH值時需加入醋酸緩沖液?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】B【解析】中性甲醛采用磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)pH至6.8-7.2，醋酸緩沖液多用于特殊染色（如剛果紅染色），兩者不可混用。9.甲苯在組織脫水透明過程中僅作為透明劑使用?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】B【解析】甲苯兼具脫水與透明功能：低濃度甲苯（如70%）可脫水，高濃度（100%）用于透明，但其毒性較高，現(xiàn)多被環(huán)保試劑替代。10.石蠟包埋時，組織的最佳浸蠟溫度為70℃?！具x項】A.正確B.錯誤【參考答案】B【解析】浸蠟溫度通常為56-58℃（略高于石蠟熔點），70℃會導(dǎo)致組織蛋白變性、抗原丟失，且可能使石蠟氧化影響切片質(zhì)量。11.蘇木精-伊紅（HE）染色步驟中，分化處理應(yīng)在藍(lán)化之后進(jìn)行?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】錯誤【解析】①HE染色標(biāo)準(zhǔn)流程為：蘇木精染色→分化→藍(lán)化→伊紅染色。②分化是指用酸性溶液去除細(xì)胞核過染的蘇木精，需在藍(lán)化（堿性溶液處理）前完成。③若先藍(lán)化后分化，堿性環(huán)境會固定蘇木精染色，導(dǎo)致分化不徹底，影響染色對比度。12.石蠟切片制作過程中，包埋石蠟的熔點通常選擇56-58℃以滿足組織切割需求。【選項】正確（）錯誤（）【參考答案】正確【解析】①熔點為56-58℃的石蠟兼具適中的硬度和韌性，可保證切片連續(xù)完整。②熔點過高（＞60℃）易使切片脆裂，熔點過低（＜54℃）則易導(dǎo)致蠟帶彎曲。③該溫度范圍能適配多數(shù)組織類型，是病理技術(shù)規(guī)范中的常用標(biāo)準(zhǔn)。13.Masson三色染色可將膠原纖維染成紅色，肌纖維染成藍(lán)色?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】錯誤【解析】①M(fèi)asson三色染色的特征性結(jié)果為：膠原纖維呈藍(lán)色或綠色（不同改良法），肌纖維/胞質(zhì)呈紅色，細(xì)胞核呈黑褐色。②混淆常見于與VanGieson染色（膠原紅/肌黃）的對比，此為考核染色原理的核心鑒別點。14.冷凍切片技術(shù)中，組織無需經(jīng)固定處理可直接進(jìn)行低溫速凍?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】錯誤【解析】①冷凍切片前需用4%中性緩沖甲醛短暫預(yù)固定（5-10分鐘），以避免冰晶形成破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。②完全未固定的組織會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)水分凍結(jié)產(chǎn)生空泡，影響后續(xù)診斷。③急檢標(biāo)本雖可簡化流程，但仍需基礎(chǔ)固定步驟。15.免疫組化染色中，3%過氧化氫處理切片是為了封閉內(nèi)源性過氧化物酶活性?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】正確【解析】①內(nèi)源性過氧化物酶主要存在于紅細(xì)胞、粒細(xì)胞等，會催化DAB顯色劑產(chǎn)生非特異性棕褐色沉淀。②3%H?O?通過氧化酶活性中心抑制假陽性反應(yīng)，是免疫組化實驗的關(guān)鍵阻斷步驟。③處理時間一般為10-15分鐘，過長可能損傷抗原表位。16.EDTA脫鈣液適用于骨組織的酸性脫鈣處理，且對組織抗原保存較好?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】正確【解析】①EDTA屬于螯合劑型脫鈣液（pH7.0-7.4），通過結(jié)合鈣離子緩慢脫鈣，對膠原破壞小。②相比強(qiáng)酸脫鈣（如硝酸），能更好保存組織形態(tài)與抗原性，適合后續(xù)免疫組化/分子檢測。③缺點是脫鈣速度較慢（需數(shù)天至數(shù)周）。17.中性緩沖福爾馬林固定液的pH值應(yīng)控制在7.8-8.2之間以減少甲醛色素沉積?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】錯誤【解析】①中性緩沖福爾馬林的標(biāo)準(zhǔn)pH為6.8-7.2，接近組織內(nèi)環(huán)境pH。②pH＞7.5會促進(jìn)甲醛與血紅蛋白反應(yīng)生成褐色的酸甲醛色素。③實際配制需用磷酸鹽緩沖液將pH穩(wěn)定在7.0±0.2，本題數(shù)值屬于堿性范圍易誤導(dǎo)考生。18.原位雜交技術(shù)（ISH）可直接檢測組織細(xì)胞內(nèi)的DNA或RNA序列分布?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】正確【解析】①ISH通過標(biāo)記核酸探針與靶序列特異性雜交，在顯微鏡下定位基因表達(dá)位點。②DNA探針檢測基因擴(kuò)增/缺失（如HER2檢測），RNA探針檢測mRNA表達(dá)（如EBER）。③需注意區(qū)分與免疫組化（檢測蛋白質(zhì)）的技術(shù)原理差異。19.固定時間不足會導(dǎo)致組織自溶，但過度固定不會影響后續(xù)染色效果?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】錯誤【解析】①固定不足時，酶解作用持續(xù)引發(fā)細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞（自溶）。②過度固定（>48小時）使蛋白質(zhì)過度交聯(lián)，導(dǎo)致抗原遮蔽、染色淺淡。③最佳固定時間為12-24小時（與組織厚度相關(guān)），兩者均屬病理技術(shù)質(zhì)控