ICS67.050

CCSB04

2204

遼源市地方標準

DB22/T6-2022

雞蛋粉中8種喹諾酮類藥物殘留的測定

液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

Determinationofeightquinolonesresiduesineggpowderbyliquidchromatography-

massspectrometry/massspectrometry

2022-12-26發(fā)布2023-01-26實施

遼源市市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB2204/T6—2022

雞蛋粉中8種喹諾酮類藥物殘留的測定

液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

1范圍

本文件規(guī)定了雞蛋粉中8種喹諾酮類藥物殘留液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定方法的原理、試劑和材料、

儀器設備、試驗步驟、試驗數(shù)據(jù)處理、精密度。

本文件適用于雞蛋粉中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、沙拉沙

星、依諾沙星等8種喹諾酮藥物的測定。

本方法雞蛋粉中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、沙拉沙星、依

諾沙星等8種喹諾酮藥物的檢出限為1.0μg/kg。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。凡是注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義。

4檢驗原理

試樣中的喹諾酮類藥物用2%甲酸-乙腈提取，經(jīng)QuEChERSSPE凈化管凈化，液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜

儀測定，外標法定量。

5試劑和材料

除另有規(guī)定，僅用分析純試劑。

5.1水，符合GB/T6682規(guī)定的一級水。

5.28種喹諾酮類藥物混合標準物質(zhì):恩諾沙星CAS號:93106-60-6、環(huán)丙沙星CAS號:85721-33-1、諾

氟沙星CAS號:70458-96-7、培氟沙星CAS號:6159-55-3、沙拉沙星CAS號:98105-99-8、洛美沙星CAS

號:98079-51-7、依諾沙星CAS號:74011-58-8、氧氟沙星CAS號:82419-36-1。（純度≥95%）

5.3乙腈（CH3CN）:色譜純。

5.4甲酸（HCOOH）:優(yōu)級純。

5.5甲醇（CH3OH）:色譜純。

5.62%甲酸-乙腈溶液:量取2mL甲酸（5.4）和98mL乙腈（5.3），混勻備用。

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DB2204/T6—2022

5.70.1%甲酸-水溶液:量取1mL甲酸（5.4）和999mL水（5.1），混勻備用。

5.80.1%甲酸-乙腈溶液:量取1mL甲酸（5.4）和999mL乙腈（5.3），混勻備用。

5.90.1%甲酸-水溶液+0.1%甲酸-乙腈溶液（9+1）:量取90mL0.1%甲酸-水溶液（5.7）和10mL

0.1%甲酸-乙腈溶液（5.8），混勻備用。

5.10混合標準儲備液:準確量取8種喹諾酮類藥物混合標準品（5.2）1.0mL，用乙腈（5.3）溶解并

定容于100mL棕色容量瓶中，配制成濃度為1.0μg/mL的混合標準儲備液，4℃條件下可使用3個

月。

5.11混合標準工作液:將8種喹諾酮類藥物混合標準儲備液（5.10）用乙腈（5.3）稀釋，配置適用濃

度的混合標準工作液。現(xiàn)用現(xiàn)配。

5.12濾膜:0.22μm，有機系。

5.13QuEChERSSPE凈化管。

6儀器設備

6.1液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀:配備電噴霧離子源（ESI）。

6.2天平:感量為0.01g和0.0001g。

6.3高速離心機:6000r/min。

6.4超聲波清洗機。

6.5渦旋混合器。

6.6氮吹儀。

7試驗步驟

7.1提取

稱取2g（精確至0.01g）雞蛋粉樣品于50mL具塞離心管中，加入10mL2%甲酸-乙腈溶液

（5.6）渦旋30s，超聲提取10min后，于6000r/min離心10min，上清液待凈化。

7.2凈化

取上清液2mL于QuEChERSSPE凈化管（5.13）中，渦旋30s，于6000r/min離心5min，取

上清液1mL，于40℃水浴氮氣吹至近干，加入1mL0.1%甲酸-水溶液+0.1%甲酸-乙腈溶液（9+1）

（5.9）定容，超聲波震蕩5min,過0.22μm微孔濾膜，供HPLC-MS/MS測定。

7.3空白試驗

除不加樣品外，采用完全相同的測定步驟進行平行操作。

7.4測定

7.4.1色譜參考條件

色譜參考條件如下：

a)色譜柱:C18色譜柱，100mm×2.1mm，2μm;

b)流動相:A:0.1%甲酸-水溶液；B：0.1%甲酸-乙腈；梯度洗脫條件參見表1;

c)流速:0.1mL/min;

d)進樣量:20μL;

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DB2204/T6—2022

e)柱溫:40℃。

表1梯度洗脫條件

時間（min）A%B%

0.19010

29010

307030

357030

407030

459010

7.4.2質(zhì)譜參考條件

本標準所使用的質(zhì)譜參考條件如下:

a)電離方式:電噴霧離子源（ESI）;

b)掃描方式:正離子掃描，多反應監(jiān)測（MRM）;

c)電離電壓:5.5kV;

d)離子源溫度:550℃;

e)氣簾氣壓力（CUR）:10psi;

f)霧化氣壓力:50psi;

g)輔助氣壓力:50psi;

h)定性離子、定量離子、去簇電壓、碰撞能量、保留時間見表2。

表28種喹諾酮類藥物定性離子、定量離子、去簇電壓、碰撞能量、保留時間

母離子子離子碰撞能量去簇電壓保留時間

化合物分子式分子量

m/zm/zVVmin

316.1*2580

恩諾沙星CHFNO359.35360.020.04

192233245.13580

245.1*3380

環(huán)丙沙星CHFNO331.34332.117.58

171833288.12580

318.3*2654

氧氟沙星CHFNO361.37362.316.59

182034261.33848

302.3*2648

諾氟沙星CHFNO319.33320.216.60

161833276.32566

290.4*2570

培氟沙星CHFNO333.36334.317.08

172033233.22755

CHFNO265.2*3170

洛美沙星171923351.35352.318.79

3308.22355

CHFNO342.3*2460

沙拉沙星201723385.36386.422.91

3299.23560

303.3*2450

依諾沙星CHFNO320.32321.415.20

151743234.13050

*:定量離子注：對不同質(zhì)譜儀器，儀器參數(shù)可能存在差異，測定前應將質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化到最佳

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7.4.3標準工作曲線的制備

將混合標準儲備液（5.10）用初始流動相逐級稀釋成濃度為2.5μg/L～100.0μg/L的標準系列工

作溶液，參考色譜和質(zhì)譜條件測定。分別以8種喹諾酮類藥物質(zhì)量濃度為橫坐標，相應的峰面積響應值

為縱坐標，進行線性回歸分析。

7.4.4定性分析

在同一色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜條件下進行標準溶液和樣品溶液的測定，如果樣品溶液中檢出的色譜峰的保

留時間與標準物質(zhì)色譜峰的保留時間一致，所選擇的兩對子離子的質(zhì)荷比也一致，而且樣品定性離子的

相對豐度與濃度相當標準工作溶液的定性離子的相對豐度相比較，相對偏差不超過表3規(guī)定的范圍，則

可判定樣品中存在該物質(zhì)。

表3定性時相對離子豐度的最大允許偏差

相對離子豐度>50%>20%-50%>10%-20%≦10%

允許的相對誤差±20%±25%±30%±50%

7.4.5定量測定

混合標準工作液和樣液中被測組分的響應值均應在儀器線性響應范圍內(nèi)。外標法定量。

8試驗數(shù)據(jù)處理

按公式（1）計算樣品中8種喹諾酮類藥物殘留含量，計算結(jié)果需扣除空白值。

?×?

X=

?

式中：X-樣品中被測組分含量，單位為微克每千克（μg/kg）;

c-被測組分溶液濃度，單位為微克每升（μg/L）;

V-樣液最終定容體積，單位為毫升（mL）;

m-樣液所代表的最終樣品的質(zhì)量，單位為克（g）;

計算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。

9精密度

9.1重復性

在同一實驗室，由同一操作者使用相同設備，按相同的測試方法，并在短時間內(nèi)對同一被測對象相

互獨立進行測試獲得的兩次獨立測試結(jié)果的絕對差值不大于這兩個測定值的算術平均值的15%，以大于

這兩個測定值的算術平均值的95%的情況不超過5%為前提。

9.2再現(xiàn)性

在不同的實驗室，由不同的操作者使用不同的設備，按相同的測試方法，對同一被測對象相互獨立

進行測試獲得的兩次獨立測試結(jié)果的絕對差值不大于這兩個測定值的算術平均值的20%，以大于這兩個

測定值的算術平均值的95%的情況不超過5%為前提。

4

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。

本文件由遼源市食品質(zhì)量安全檢測中心提出，由遼源市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局歸口。

本文件起草單位:遼源市食品質(zhì)量安全檢測中心、長春海關技術中心、長春市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院。

本文件主要起草人:張威、胡婷婷、秦培余、陳露、隋佳琪、王銀月。

本文件主要參編人:王振雷、姜珊、孫舒、宋清蓮、李燕鷺、王巖、陸鳴、宮世平、張鳳棟、姚心

茹、姜爽。

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雞蛋粉中8種喹諾酮類藥物殘留的測定

液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

1范圍

本文件規(guī)定了雞蛋粉中8種喹諾酮類藥物殘留液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定方法的原理、試劑和材料、

儀器設備、試驗步驟、試驗數(shù)據(jù)處理、精密度。

本文件適用于雞蛋粉中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、沙拉沙

星、依諾沙星等8種喹諾酮藥物的測定。

本方法雞蛋粉中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、沙拉沙星、依

諾沙星等8種喹諾酮藥物的檢出限為1.0μg/kg。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。凡是注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義。

4檢驗原理

試樣中的喹諾酮類藥物用2%甲酸-乙腈提取，經(jīng)QuEChERSSPE凈化管凈化，液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜

儀測定，外標法定量。

5試劑和材料

除另有規(guī)定，僅用分析純試劑。

5.1水，符合GB/T6682規(guī)定的一級水。

5.28種喹諾酮類藥物混合標準物質(zhì):恩諾沙星CAS號:93106-60-6、環(huán)丙沙星CAS號:85721-33-1、諾

氟沙星CAS號:70458-96-7、培氟沙星CAS號:6159-55-3、沙拉沙星CAS號:98105-99-8、洛美沙星CAS

號:98079-51-7、依諾沙星CAS號:74011-58-8、氧氟沙星CAS號:82419-36-1。（純度≥95%）

5.3乙腈（CH3CN）:色譜純。

5.4甲酸（HCOOH）:優(yōu)級純。

5.5甲醇（CH3OH）:色譜純。

5.62%甲酸-乙腈溶液:量取2mL甲酸（5.4）和98mL乙腈（5.3），混勻備用。

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5.70.1%甲酸-水溶液:量取1mL甲酸（5.4）和999mL水（5.1），混勻備用。

5.80.1%甲酸-乙腈溶液:量取1mL甲酸（5.4）和999mL乙腈（5.3），混勻備用。

5.90.1%甲酸-水溶液+0.1%甲酸-乙腈溶液（9+1）:量