2025年分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作技能檢測(cè)答案及解析一、單項(xiàng)選擇題1.下列哪種酶可用于DNA的切割？（）A.DNA聚合酶B.限制性內(nèi)切酶C.連接酶D.逆轉(zhuǎn)錄酶2.以下哪種技術(shù)常用于分離和鑒定DNA片段？（）A.瓊脂糖凝膠電泳B.蛋白質(zhì)印跡C.免疫組化D.流式細(xì)胞術(shù)3.進(jìn)行PCR反應(yīng)時(shí)，需要的引物是（）。A.DNA單鏈B.RNA單鏈C.雙鏈DNAD.雙鏈RNA4.反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是（）。A.DNAB.RNAC.蛋白質(zhì)D.多糖5.基因表達(dá)調(diào)控主要發(fā)生在（）。A.轉(zhuǎn)錄水平B.翻譯水平C.轉(zhuǎn)錄后水平D.以上都有6.以下哪種物質(zhì)可作為核酸雜交的探針？（）A.單鏈DNAB.雙鏈DNAC.RNAD.以上都可以7.常用于檢測(cè)DNA甲基化的方法是（）。A.亞硫酸氫鹽測(cè)序B.實(shí)時(shí)定量PCRC.WesternblotD.免疫熒光8.蛋白質(zhì)與DNA相互作用的研究方法不包括（）。A.凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)B.染色質(zhì)免疫沉淀C.酵母雙雜交D.基因敲除9.以下哪種技術(shù)可用于基因的定點(diǎn)突變？（）A.重疊延伸PCRB.反向PCRC.巢式PCRD.熒光定量PCR10.基因克隆的基本步驟不包括（）。A.目的基因的獲取B.載體的選擇和構(gòu)建C.重組DNA的轉(zhuǎn)化D.蛋白質(zhì)的表達(dá)和純化二、多項(xiàng)選擇題1.以下屬于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的工具酶有（）。A.限制性內(nèi)切酶B.DNA連接酶C.DNA聚合酶D.逆轉(zhuǎn)錄酶E.堿性磷酸酶2.下列哪些是核酸電泳的指示劑？（）A.溴酚藍(lán)B.二甲苯青C.考馬斯亮藍(lán)D.伊紅E.美藍(lán)3.PCR反應(yīng)體系中包含的成分有（）。A.模板DNAB.引物C.dNTPD.Taq酶E.Mg2+4.基因表達(dá)調(diào)控的方式包括（）。A.轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控B.轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控C.翻譯水平調(diào)控D.翻譯后水平調(diào)控E.以上都是5.核酸雜交的類型有（）。A.SouthernblotB.NorthernblotC.WesternblotD.原位雜交E.斑點(diǎn)雜交6.以下可用于蛋白質(zhì)分析的技術(shù)有（）。A.WesternblotB.免疫組化C.質(zhì)譜分析D.蛋白質(zhì)芯片E.酵母雙雜交7.基因編輯技術(shù)包括（）。A.ZFNsB.TALENsC.CRISPR/Cas9D.RNAiE.同源重組8.以下哪些是真核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)？（）A.多層次調(diào)控B.正調(diào)控為主C.調(diào)控元件多樣化D.受環(huán)境影響E.轉(zhuǎn)錄和翻譯偶聯(lián)三、填空題1.限制性內(nèi)切酶識(shí)別的DNA序列通常具有_____性。2.DNA測(cè)序的方法主要有_____和_____。3.基因表達(dá)的最終產(chǎn)物是_____。4.蛋白質(zhì)的翻譯后修飾包括_____、_____、_____等。5.核酸雜交的原理是_____。6.基因克隆中常用的載體有_____、_____、_____等。7.實(shí)時(shí)定量PCR常用的熒光染料有_____和_____。8.基因沉默的機(jī)制主要包括_____和_____。四、判斷題（√/×）1.所有的限制性內(nèi)切酶都能產(chǎn)生粘性末端。（）2.瓊脂糖凝膠電泳中，DNA分子的遷移速度與分子量成正比。（）3.PCR反應(yīng)的特異性主要取決于引物的設(shè)計(jì)。（）4.反轉(zhuǎn)錄酶只能以RNA為模板合成DNA。（）5.基因表達(dá)調(diào)控只發(fā)生在真核生物中。（）6.Southernblot可用于檢測(cè)DNA的表達(dá)水平。（）7.蛋白質(zhì)與DNA的相互作用是基因表達(dá)調(diào)控的重要方式之一。（）8.基因敲除是指將特定基因從基因組中完全刪除。（）五、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的基本原理和主要應(yīng)用。六、案例分析患者，男，35歲，因“反復(fù)咳嗽、咳痰伴發(fā)熱1個(gè)月”入院?；颊?個(gè)月前無(wú)明顯誘因出現(xiàn)咳嗽、咳痰，為白色黏痰，量不多，伴有發(fā)熱，體溫最高達(dá)38.5℃，無(wú)畏寒、寒戰(zhàn)，無(wú)咯血、胸痛等不適。自行服用“感冒藥”（具體不詳）后癥狀無(wú)明顯緩解。入院查體：T38.2℃，P88次/分，R20次/分，BP120/80mmHg。神志清楚，精神可，全身皮膚黏膜無(wú)黃染，淺表淋巴結(jié)未觸及腫大。雙肺呼吸音粗，可聞及散在濕啰音，未聞及哮鳴音。心率88次/分，律齊，各瓣膜聽(tīng)診區(qū)未聞及雜音。腹平軟，無(wú)壓痛及反跳痛，肝脾肋下未觸及。血常規(guī)：WBC12.0×10?/L，N0.80，L0.20。胸部X線片示：雙肺紋理增多、增粗，可見(jiàn)散在斑片狀陰影。問(wèn)題1：該患者最可能的診斷是什么？問(wèn)題2：為明確診斷，還需要進(jìn)一步做哪些檢查？試卷答案一、單項(xiàng)選擇題（答案）1.B解析：限制性內(nèi)切酶能識(shí)別特定的DNA序列并切割。2.A解析：瓊脂糖凝膠電泳可分離鑒定DNA片段。3.A解析：PCR引物是DNA單鏈。4.A解析：反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是DNA。5.D解析：基因表達(dá)調(diào)控在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后、翻譯、翻譯后水平都有。6.D解析：?jiǎn)捂淒NA、雙鏈DNA、RNA都可作核酸雜交探針。7.A解析：亞硫酸氫鹽測(cè)序用于檢測(cè)DNA甲基化。8.D解析：基因敲除不是研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的方法。9.A解析：重疊延伸PCR可用于基因定點(diǎn)突變。10.D解析：基因克隆不包括蛋白質(zhì)表達(dá)純化。二、多項(xiàng)選擇題（答案）1.ABCDE解析：這些都是分子生物學(xué)常用工具酶。2.AB解析：溴酚藍(lán)和二甲苯青是核酸電泳指示劑。3.ABCDE解析：PCR反應(yīng)體系包含這些成分。4.E解析：基因表達(dá)調(diào)控方式包括轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后、翻譯、翻譯后水平。5.ABDE解析：Westernblot是檢測(cè)蛋白質(zhì)的，不是核酸雜交類型。6.ABCDE解析：這些技術(shù)都可用于蛋白質(zhì)分析。7.ABC解析：RNAi是基因沉默技術(shù)，同源重組不是基因編輯技術(shù)。8.ABCD解析：真核生物基因表達(dá)調(diào)控有多層次、正調(diào)控為主等特點(diǎn)，轉(zhuǎn)錄和翻譯不偶聯(lián)。三、填空題（答案）1.回文序列解析：限制性內(nèi)切酶識(shí)別的序列多為回文序列。2.Sanger測(cè)序法；新一代測(cè)序技術(shù)解析：這是兩種主要的DNA測(cè)序方法。3.蛋白質(zhì)解析：基因表達(dá)最終產(chǎn)物是蛋白質(zhì)。4.磷酸化；糖基化；甲基化解析：蛋白質(zhì)翻譯后修飾有多種類型。5.堿基互補(bǔ)配對(duì)解析：核酸雜交基于堿基互補(bǔ)配對(duì)原理。6.質(zhì)粒；噬菌體；病毒載體解析：這些是基因克隆常用載體。7.SYBRGreenI；TaqMan探針解析：這是實(shí)時(shí)定量PCR常用的熒光染料。8.RNA干擾；基因沉默復(fù)合體解析：基因沉默主要通過(guò)這兩種機(jī)制。四、判斷題（答案）1.×解析：有些限制性內(nèi)切酶產(chǎn)生平末端。2.×解析：DNA分子遷移速度與分子量成反比。3.√解析：引物設(shè)計(jì)決定PCR特異性。4.×解析：反轉(zhuǎn)錄酶也能以DNA為模板合成DNA。5.×解析：原核生物也有基因表達(dá)調(diào)控。6.×解析：Southernblot檢測(cè)DNA的存在和結(jié)構(gòu)。7.√解析：蛋白質(zhì)與DNA相互作用對(duì)基因表達(dá)調(diào)控很重要。8.×解析：基因敲除也可以是使基因功能喪失。五、簡(jiǎn)答題（答案）1.答：PCR技術(shù)的基本原理是在體外模擬體內(nèi)DNA復(fù)制的過(guò)程，通過(guò)高溫變性、低溫退火和適溫延伸三個(gè)步驟的循環(huán)，使目的DNA片段得到大量擴(kuò)增。主要應(yīng)用包括基因克隆、基因診斷、基因表達(dá)分析、遺傳病診斷、法醫(yī)鑒