2025年細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞培養(yǎng)基本操作考試卷答案及解析一、單項選題1.細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的天然培養(yǎng)基是（）A.血清B.氨基酸C.維生素D.葡萄糖2.細(xì)胞傳代時，常用的消化液是（）A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.纖維素酶3.細(xì)胞培養(yǎng)的最適pH值一般為（）A.6.5-7.0B.7.0-7.2C.7.2-7.4D.7.4-7.64.培養(yǎng)細(xì)胞時，一般使用的培養(yǎng)箱溫度是（）A.35℃B.36℃C.37℃D.38℃5.細(xì)胞培養(yǎng)中，防止微生物污染的關(guān)鍵是（）A.無菌操作B.合適的培養(yǎng)基C.適宜的溫度D.定期更換培養(yǎng)液6.細(xì)胞凍存時，常用的保護劑是（）A.DMSOB.甘油C.乙醇D.丙酮7.原代細(xì)胞培養(yǎng)是指（）A.從體內(nèi)取出細(xì)胞進行的首次培養(yǎng)B.細(xì)胞傳代至10代以內(nèi)的培養(yǎng)C.細(xì)胞傳代至50代以內(nèi)的培養(yǎng)D.無限傳代的細(xì)胞培養(yǎng)8.細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的細(xì)胞計數(shù)方法是（）A.血球計數(shù)板計數(shù)法B.流式細(xì)胞術(shù)C.MTT法D.臺盼藍染色法9.細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的緩沖液是（）A.PBSB.Tris-HClC.HEPESD.以上都是10.細(xì)胞培養(yǎng)中，支原體污染的檢測方法不包括（）A.相差顯微鏡觀察B.培養(yǎng)法C.PCR法D.革蘭氏染色法二、多項選題1.細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件包括（）A.合適的培養(yǎng)基B.適宜的溫度C.合適的氣體環(huán)境D.無菌操作2.以下屬于細(xì)胞培養(yǎng)中常用的合成培養(yǎng)基的有（）A.RPMI1640B.DMEMC.MEMD.McCoy's5A3.細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則包括（）A.慢凍快融B.快凍慢融C.凍存時加入保護劑D.復(fù)蘇時迅速將細(xì)胞從液氮中取出放入37℃水浴中4.細(xì)胞培養(yǎng)中，可能導(dǎo)致細(xì)胞污染的因素有（）A.操作不當(dāng)B.培養(yǎng)器皿未徹底清洗和消毒C.培養(yǎng)基和血清質(zhì)量不佳D.實驗環(huán)境不清潔5.原代細(xì)胞培養(yǎng)的方法包括（）A.組織塊培養(yǎng)法B.消化培養(yǎng)法C.懸浮培養(yǎng)法D.克隆培養(yǎng)法6.細(xì)胞培養(yǎng)中，用于細(xì)胞活力檢測的方法有（）A.臺盼藍染色法B.MTT法C.流式細(xì)胞術(shù)D.細(xì)胞計數(shù)法三、填空題1.細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的氣體是_____和_____。2.細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的抗生素有_____和_____。3.細(xì)胞傳代的方式有_____和_____。4.細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的離心方法有_____和_____。5.細(xì)胞凍存時，一般將細(xì)胞凍存于_____中。6.細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的細(xì)胞固定劑有_____和_____。四、判斷題（√/×）1.細(xì)胞培養(yǎng)中，血清可以提供細(xì)胞生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子。（）2.細(xì)胞培養(yǎng)中，pH值過高或過低都會影響細(xì)胞的生長和代謝。（）3.細(xì)胞傳代時，消化時間越長越好。（）4.細(xì)胞培養(yǎng)中，只要操作規(guī)范，就不會發(fā)生細(xì)胞污染。（）5.原代細(xì)胞培養(yǎng)的成功率通常比細(xì)胞系培養(yǎng)低。（）6.細(xì)胞凍存和復(fù)蘇過程中，細(xì)胞的存活率可能會受到影響。（）五、簡答題1.簡述細(xì)胞培養(yǎng)的基本流程。六、案例分析1.患者，男，45歲，因胃癌入院。醫(yī)生擬對其進行手術(shù)治療，并在手術(shù)前取腫瘤組織進行細(xì)胞培養(yǎng)，以進行藥敏試驗，選擇合適的化療藥物。問題1：請簡述腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟。問題2：在腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否生長良好？試卷答案一、單項選題（答案）1.答案：A解析：血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基，含有多種營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子。2.答案：A解析：胰蛋白酶是細(xì)胞傳代時常用的消化液，可將細(xì)胞從培養(yǎng)器皿表面消化下來。3.答案：C解析：細(xì)胞培養(yǎng)的最適pH值一般為7.2-7.4，在此范圍內(nèi)細(xì)胞生長良好。4.答案：C解析：培養(yǎng)細(xì)胞時，一般使用的培養(yǎng)箱溫度是37℃，這是人體細(xì)胞的最適生長溫度。5.答案：A解析：無菌操作是防止微生物污染的關(guān)鍵，包括操作前的消毒、操作過程中的無菌操作等。6.答案：A解析：DMSO是細(xì)胞凍存時常用的保護劑，可降低細(xì)胞在凍存過程中的損傷。7.答案：A解析：原代細(xì)胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)取出細(xì)胞進行的首次培養(yǎng)，細(xì)胞傳代至10代以內(nèi)的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。8.答案：A解析：血球計數(shù)板計數(shù)法是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的細(xì)胞計數(shù)方法，操作簡單、快速。9.答案：D解析：PBS、Tris-HCl、HEPES等都是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的緩沖液，可維持培養(yǎng)液的pH值穩(wěn)定。10.答案：D解析：革蘭氏染色法主要用于細(xì)菌的檢測，支原體無細(xì)胞壁，不能用革蘭氏染色法檢測。二、多項選題（答案）1.答案：ABCD解析：細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件包括合適的培養(yǎng)基、適宜的溫度、合適的氣體環(huán)境和無菌操作。2.答案：ABCD解析：RPMI1640、DMEM、MEM、McCoy's5A等都是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的合成培養(yǎng)基。3.答案：ACD解析：細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是慢凍快融，凍存時加入保護劑，復(fù)蘇時迅速將細(xì)胞從液氮中取出放入37℃水浴中。4.答案：ABCD解析：操作不當(dāng)、培養(yǎng)器皿未徹底清洗和消毒、培養(yǎng)基和血清質(zhì)量不佳、實驗環(huán)境不清潔等都可能導(dǎo)致細(xì)胞污染。5.答案：AB解析：原代細(xì)胞培養(yǎng)的方法包括組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法，懸浮培養(yǎng)法和克隆培養(yǎng)法一般用于細(xì)胞系的培養(yǎng)。6.答案：ABC解析：臺盼藍染色法、MTT法、流式細(xì)胞術(shù)等都可用于細(xì)胞活力檢測，細(xì)胞計數(shù)法主要用于細(xì)胞數(shù)量的測定。三、填空題（答案）1.答案：氧氣、二氧化碳解析：細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的氣體是氧氣和二氧化碳，氧氣是細(xì)胞呼吸所必需的，二氧化碳可維持培養(yǎng)液的pH值穩(wěn)定。2.答案：青霉素、鏈霉素解析：青霉素和鏈霉素是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的抗生素，可抑制細(xì)菌的生長。3.答案：貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)解析：細(xì)胞傳代的方式有貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)，貼壁細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)器皿表面生長，懸浮細(xì)胞則可在培養(yǎng)液中懸浮生長。4.答案：離心沉淀法、密度梯度離心法解析：細(xì)胞培養(yǎng)中，常用的離心方法有離心沉淀法和密度梯度離心法，離心沉淀法可用于細(xì)胞的收集和分離，密度梯度離心法可用于細(xì)胞的純化。5.答案：液氮解析：細(xì)胞凍存時，一般將細(xì)胞凍存于液氮中，液氮的溫度極低，可使細(xì)胞處于休眠狀態(tài)，從而長期保存。6.答案：甲醛、戊二醛解析：甲醛和戊二醛是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的細(xì)胞固定劑，可使細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)保持穩(wěn)定，便于觀察和分析。四、判斷題（答案）1.答案：√解析：血清中含有多種營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子，可提供細(xì)胞生長所需的營養(yǎng)和促進細(xì)胞的生長和增殖。2.答案：√解析：pH值過高或過低都會影響細(xì)胞的生長和代謝，細(xì)胞培養(yǎng)的最適pH值一般為7.2-7.4。3.答案：×解析：細(xì)胞傳代時，消化時間過長會導(dǎo)致細(xì)胞損傷和死亡，應(yīng)根據(jù)細(xì)胞的類型和生長狀態(tài)選擇合適的消化時間。4.答案：×解析：細(xì)胞培養(yǎng)中，即使操作規(guī)范，也可能會發(fā)生細(xì)胞污染，因此需要采取嚴(yán)格的無菌操作措施和定期檢測細(xì)胞是否污染。5.答案：√解析：原代細(xì)胞培養(yǎng)的成功率通常比細(xì)胞系培養(yǎng)低，因為原代細(xì)胞的生長和增殖能力較弱，對培養(yǎng)條件的要求較高。6.答案：√解析：細(xì)胞凍存和復(fù)蘇過程中，細(xì)胞的存活率可能會受到影響，因此需要采取合適的凍存和復(fù)蘇方法，以提高細(xì)胞的存活率。五、簡答題（答案）1.答：細(xì)胞培養(yǎng)的基本流程包括：（1）準(zhǔn)備工作：包括培養(yǎng)器皿的清洗、消毒，培養(yǎng)基的配制、滅菌等。（2）細(xì)胞的獲取：可以通過組織塊培養(yǎng)法、消化培養(yǎng)法等方法獲取細(xì)胞。（3）細(xì)胞的接種：將獲取的細(xì)胞接種到培養(yǎng)器皿中，加入適量的培養(yǎng)基。（4）細(xì)胞的培養(yǎng)：將培養(yǎng)器皿放入培養(yǎng)箱中，在適宜的溫度、氣體環(huán)境等條件下培養(yǎng)細(xì)胞。（5）細(xì)胞的觀察和檢測：定期觀察細(xì)胞的生長狀態(tài)，檢測細(xì)胞的數(shù)量、活力、形態(tài)等指標(biāo)。（6）細(xì)胞的傳代：當(dāng)細(xì)胞生長到一定密度時，需要進行傳代培養(yǎng)，以保持細(xì)胞的生長和增殖能力。（7）細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇：如果需要長期保存細(xì)胞，可以將細(xì)胞凍存于液氮中；如果需要使用凍存的細(xì)胞，可以進行復(fù)蘇培養(yǎng)。六、案例分析（答案）1.答：問題1：腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟包括：（1）腫瘤組織的獲?。和ㄟ^手術(shù)、穿刺等方法獲取腫瘤組織。（2）腫瘤組織的處理：將腫瘤組織剪成小塊，用胰蛋白酶等消化液消化，使腫瘤細(xì)胞從組織塊中分離出來。（3）腫瘤細(xì)胞的接種：將分離得到的腫瘤細(xì)胞接種到培養(yǎng)器皿中，加入適量的培養(yǎng)基。（4）腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)：將培養(yǎng)器皿放入培養(yǎng)箱中，在適宜的溫度、氣體環(huán)境等條件下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞。（5）腫瘤細(xì)胞的觀察和檢測：定期觀察腫瘤細(xì)胞的生長狀態(tài)，檢測腫瘤細(xì)胞的數(shù)量、活力、形態(tài)等指標(biāo)。（6）腫瘤細(xì)胞的傳代：當(dāng)腫瘤細(xì)胞生長到一定密度時，需要進行傳代培養(yǎng)，以保持腫瘤細(xì)胞的生長和增殖能力。（7）腫瘤細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇：如果需要長期保存腫瘤細(xì)胞，可以將腫瘤細(xì)胞凍存于液氮中；如果需要使用凍存的腫瘤細(xì)胞，可以進行復(fù)蘇培養(yǎng)。問題2：在腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)過程中，可以通過以下方法判斷細(xì)胞是否生長良好：（1）細(xì)胞形態(tài)：觀察腫瘤細(xì)胞的形態(tài)是否正常，如細(xì)胞的大小、形狀、透明度等。正常的腫瘤細(xì)胞形態(tài)規(guī)則，大小均勻，透明度高。（2）細(xì)胞數(shù)量：定期檢測腫瘤細(xì)胞的數(shù)量，如通過細(xì)胞計數(shù)法等方法。如果腫瘤細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，說明