2025-2026學(xué)年上海南洋模范生物高三第一學(xué)期期末學(xué)業(yè)質(zhì)量監(jiān)測試題注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型（B）填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2．作答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目選項(xiàng)的答案信息點(diǎn)涂黑；如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3．非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答，答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上；如需改動，先劃掉原來的答案，然后再寫上新答案；不準(zhǔn)使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4．考生必須保證答題卡的整潔?？荚嚱Y(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下表為探究一定濃度生長素對不同類型擬南芥下胚軸插條形成不定根的影響結(jié)果，其中arf57為ARF表達(dá)增強(qiáng)突變體，slr-5為IAA54蛋白功能獲得型突變體。相關(guān)分析錯(cuò)誤的是（）擬南芥類型插條不定根數(shù)/條（插條）（均值）處理方式野生型Arf57突變體Slr-5突變體不施用生長素5．055．055．78施加一定濃度的生長素55．9854．555．59A．該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明生長素的生理作用具有兩重性的特點(diǎn)B．ARF表達(dá)增強(qiáng)對內(nèi)源生長素的合成無明顯影響C．slr-5突變體內(nèi)有關(guān)色氨酸的轉(zhuǎn)化活動減弱D．IAA54蛋白可導(dǎo)致突變體對IAA的敏感性減弱2．比較生物膜和人工膜（雙層磷脂）對多種物質(zhì)的通透性，結(jié)果如圖所示。不能得出的結(jié)論是（）A．當(dāng)分子自由擴(kuò)散進(jìn)細(xì)胞時(shí)，分子越小通透性越高B．人工膜對CO2的通透性較H2O大，生物膜幾乎無差異C．在檢測通透性時(shí)，需向體系中加入ATP和ATP水解酶D．生物膜上有K+、Na+和Cl-通道，且他們的通透性不同3．下列關(guān)于免疫細(xì)胞的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．致敏B淋巴細(xì)胞表面含有抗原受體及白細(xì)胞介素-2受體B．效應(yīng)B細(xì)胞失去增殖能力，其表面不含受體分子C．同一個(gè)體的B淋巴細(xì)胞與T淋巴細(xì)胞所含MHC分子相同D．巨噬細(xì)胞、輔助性T細(xì)胞受到刺激后都能分泌蛋白質(zhì)作用于其他細(xì)胞4．關(guān)于“綠葉中色素的提取和分離”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A．該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，葉綠素b在層析液中溶解度最低B．用無水乙醇作溶劑，提取的葉綠體色素中無胡蘿卜素C．研磨葉片時(shí)，加入CaCO3的目的是使研磨充分D．加入無水乙醇越多，葉綠體色素提取液的綠色越深5．某植物長葉形對圓葉形為顯性，抗病對易感病為顯性?，F(xiàn)有長葉形抗病與質(zhì)葉形易感病植株雜交，F(xiàn)1均為長葉形抗病植株。若F2自交獲得400株，其中圓葉形易感病植株為64株，則F2中雜合圓葉形抗病植株所占的比例是（）A．16% B．8% C．32% D．10%6．某課題小組利用無菌培養(yǎng)液培養(yǎng)酵母菌，探究不同條件下酵母菌種群數(shù)量的變化規(guī)律。實(shí)驗(yàn)人員抽取每種條件下的酵母菌培養(yǎng)液各1mL，分別稀釋11倍后，用血球計(jì)數(shù)板（規(guī)格為1mm×1mm×1．1mm，計(jì)數(shù)室為25×16型）進(jìn)行計(jì)數(shù)，測得不同條件下每毫升培養(yǎng)液中酵母菌的數(shù)量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下圖（單位：×117個(gè)/mL）。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．依據(jù)21℃、24h條件下酵母菌種群數(shù)量值，可推算所用血球計(jì)數(shù)板中格中酵母菌的數(shù)量平均為31個(gè)B．溫度是該實(shí)驗(yàn)的自變量，酵母菌菌種、酵母菌數(shù)量、培養(yǎng)液成分等為無關(guān)變量C．酵母菌種群數(shù)量變化過程中出現(xiàn)了“S”型增長，達(dá)到K值后穩(wěn)定時(shí)間的長短與培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)的含量有關(guān)D．酵母菌在15℃環(huán)境中存活的時(shí)間最長，15℃是酵母菌種群數(shù)量增長的最適溫度7．關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述正確的是（）A．將允許特定種類的微生物生長的培養(yǎng)基稱作選擇培養(yǎng)基B．利用加入剛果紅的含纖維素培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌，根據(jù)透明圈大小來篩選出能分解纖維素的細(xì)菌C．可以根據(jù)伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上紅棕色菌落的數(shù)目，計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量D．用加入酚酞指示劑且以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌，若培養(yǎng)基變紅，則該細(xì)菌能夠分解尿素8．（10分）玉米的高稈（D）對矮稈（d）為顯性，抗?。≧）對易感病（r）為顯性，控制這兩對性狀的基因分別位于兩對同源染色體上?？蒲腥藛T在統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)田中成熟玉米植株的存活率時(shí)發(fā)現(xiàn)，易感病植株存活率是1/2，高稈植株存活率是2/3，其他植株的存活率是100%。若將玉米品種甲（DDRR）和乙（ddrr）雜交產(chǎn)生F1，F(xiàn)1自交產(chǎn)生F2，F(xiàn)2成熟植株表現(xiàn)型的種類和比例為（）A．2種，3：4 B．4種，12：6：2：1C．4種，1：2：2：3 D．4種，9：3：3：1二、非選擇題9．（10分）干擾素是一種抗病毒、抗腫瘤的藥物，天然干擾素的含量低、活性低、穩(wěn)定性低?？茖W(xué)家將人的干擾素中第17位的半胱氨酸變成絲氨酸，再利用大腸桿菌生產(chǎn)干擾素，從而極大地改變了天然干擾素的缺點(diǎn)?；卮鹣铝袉栴}：（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，依據(jù)的原理是______________，擴(kuò)增的前提是_______________________。（2）將人的干擾素中第17位的半胱氨酸變成絲氨酸，要對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，最終是通過改造_______________來實(shí)現(xiàn)的。用蛋白質(zhì)工程找到所需基因的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)（干擾素）功能出發(fā)→__________→____________→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（干擾素基因）。（3）在導(dǎo)人大腸桿菌之前，首先要構(gòu)建其____________中，啟動子的作用是_______________________。（4）在檢測干擾素基因在大腸桿菌體內(nèi)是否翻譯時(shí)，采用的方法是_______________________________。10．（14分）2019年底爆發(fā)的新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）是由SARS-CoV-2病毒引起的，能否快速、準(zhǔn)確地檢測出病原體成為疾病防控的關(guān)鍵。請回答：（1）下圖表示SARS-CoV-2病毒檢測的部分流程?？茖W(xué)家以病毒的RNA為模板通過①____________過程合成cDNA，再對cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，這項(xiàng)技術(shù)稱為RT-PCR。（2）進(jìn)行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要從cDNA中擴(kuò)增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系。（3）RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強(qiáng)度來檢測產(chǎn)物濃度，原理如下：Taqman熒光探針為一段與_____________互補(bǔ)的核苷酸單鏈，兩端分別連接一個(gè)熒光基團(tuán)R和一個(gè)淬滅基團(tuán)Q。探針結(jié)構(gòu)完整時(shí)，R發(fā)射的熒光被Q吸收；而PCR擴(kuò)增時(shí)結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷，使R和Q分離，R基團(tuán)發(fā)射的熒光不被淬滅，這樣通過對熒光信號強(qiáng)弱的監(jiān)測就可實(shí)現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí)，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明含有病毒的概率越____________。（4）一次核酸檢測歷時(shí)需16小時(shí)，為快速檢測可采用抗原-抗體雜交技術(shù)，這一技術(shù)的關(guān)鍵是要生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體.請寫出生產(chǎn)這種抗體的思路：__________________。11．（14分）探針是指以放射性同位素、生物素或熒光染料等進(jìn)行標(biāo)記的已知核苷酸序列的核酸片段，可用于核酸分子雜交以檢測目標(biāo)核苷酸序列是否存在。如圖（1）所是某實(shí)驗(yàn)小組制備的兩種探針，圖（2）是探針與目的基因雜交的示意圖。請回答下列有關(guān)問題：（1）核酸探針與目標(biāo)核苷酸序列間的分子雜交遵循________________。設(shè)計(jì)核苷酸序列是核酸探針技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。圖（1）所示的兩種核酸探針（探針2只標(biāo)注了部分堿基序列）都不合理，請分別說明理由_________________、_________________________。（2）cDNA探針是目前應(yīng)用最為廣泛的一種探針。制備cDNA探針時(shí)，首先需提取、分離獲得____________作為模板，在_______________的催化下合成cDNA探針。利用制備好的β-珠蛋白基因的cDNA探針與β-珠蛋白基因雜交后，出現(xiàn)了如圖（2）中甲、乙、丙、丁等所示的“發(fā)夾結(jié)構(gòu)”，原因是____________________。（3）基因工程中利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)α-抗胰蛋白酶，應(yīng)將構(gòu)建好的重組DNA導(dǎo)入___________中，再利用SRY基因（某一條性染色體上的某性別決定基因）探針進(jìn)行檢測，將檢測反應(yīng)呈____________（填陽或陰）性的胚胎進(jìn)行移植培養(yǎng)。12．有些細(xì)菌可將原油分解為無機(jī)物，從而消除原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲分離能高效降解原油的菌株?；卮饐栴}：（1）在分離過程中，應(yīng)從________的土壤中采集樣品，并土集樣品稀釋液接種于以____（“原油”“葡萄糖”“原油＋葡萄糖”）為碳源的固體培養(yǎng)基上，不選擇其他兩組的原因是_________（2）培養(yǎng)得到的單菌落，有些單菌落周圍出現(xiàn)較大的分解圈，有些單菌落周圍不出現(xiàn)分解圈，說明細(xì)菌降解原油的酶可以存在于_________________（3）為了提高分解原油的效率，研究人員嘗試將分離得到的分解菌通過固定化技術(shù)，制成原油污染水體的去污處理裝里，該裝置的優(yōu)點(diǎn)是____。為了達(dá)到較好的去污效果．處理過程中除了控制溫度，PH值外還可以采取____等措施（答出一點(diǎn)），說明理由____

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】

由表可知，添加生長素后促進(jìn)不同類型擬南芥下胚軸插條形成不定根，IAA54蛋白功能獲得型突變體明顯導(dǎo)致不定根形成數(shù)目減少。【詳解】A、該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明生長素具有促進(jìn)作用，未體現(xiàn)出抑制作用，不能體現(xiàn)兩重性，A錯(cuò)誤；B、表中野生型和Arf57突變體不施用生長素時(shí)插條不定根數(shù)接近相同，說明ARF表達(dá)增強(qiáng)對內(nèi)源生長素的合成無明顯影響，B正確；C、施加一定濃度的生長素時(shí)slr-5突變體插條不定根數(shù)最少，因色氨酸是植物體內(nèi)生長素生物合成重要的前體物質(zhì)，所以slr-5突變體內(nèi)有內(nèi)有關(guān)色氨酸的轉(zhuǎn)化活動減弱，C正確；D、施加一定濃度的生長素時(shí)，Slr-5突變體的插條不定根數(shù)比野生型少，說明IAA54蛋白可導(dǎo)致突變體對IAA的敏感性減弱，D正確。故選A。2、C【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示是對生物膜和人工膜（雙層磷脂）對多種物質(zhì)的通透性進(jìn)行比較，人工膜對不同離子的通透性相同，而生物膜對不同離子的通透性不同，且大于人工膜，說明生物膜對K+、Na+、Cl-的通透具有選擇性，且離子的跨膜運(yùn)輸需要載體的協(xié)助。【詳解】A、從圖示中可以看出，以甘油、CO2和O2三者相比，得出當(dāng)分子自由擴(kuò)散進(jìn)細(xì)胞時(shí)，分子越小通透性越高，A正確；B、從圖示中可以看出，人工膜對CO2的通透性較H2O大（通過橫坐標(biāo)），生物膜幾乎無差異（通過縱坐標(biāo)），B正確；C、由甘油、CO2、O2和H2O信息可知，此題測的是膜對被動運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)的通透性，不需要能量，C錯(cuò)誤；D、生物膜對K+、Na+和Cl-的通透性不同（縱坐標(biāo)不同），D正確。故選C。本題結(jié)合圖解，考查物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞郊捌洚愅?，要求考生識記小分子物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)娜N方式及其特點(diǎn)，能列表進(jìn)行比較，再結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識記和理解層次的考查。3、B【解析】

免疫細(xì)胞包括吞噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，淋巴細(xì)胞分為T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞，T淋巴細(xì)胞的功能是分泌淋巴因子、呈遞抗原、和接受抗原刺激分化細(xì)胞效應(yīng)T細(xì)胞和記憶細(xì)胞，效應(yīng)T細(xì)胞的功能作用于靶細(xì)胞使靶細(xì)胞裂解、死亡釋放其中的抗原；B淋巴細(xì)胞的功能是接受抗原刺激分化成漿細(xì)胞和記憶細(xì)胞，漿細(xì)胞的功能是產(chǎn)生抗體?！驹斀狻緼、致敏B淋巴細(xì)胞表面含有抗原受體及白細(xì)胞介素-2受體，A正確；B、效應(yīng)B細(xì)胞已經(jīng)高度分化，失去了增殖能力，其表面不含抗原的受體分子，但是還含有其他的受體分子，B錯(cuò)誤；C、同一個(gè)體的B淋巴細(xì)胞與T淋巴細(xì)胞所含MHC分子相同，C正確；D、巨噬細(xì)胞、輔助性T細(xì)胞受到刺激后都能分泌蛋白質(zhì)作用于其他細(xì)胞，D正確。故選B。4、A【解析】

葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)：①提取色素原理：色素能溶解在酒精或丙酮等有機(jī)溶劑中，所以可用無水酒精等提取色素。②分離色素原理：各色素隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同，從而分離色素．溶解度大，擴(kuò)散速度快；溶解度小，擴(kuò)散速度慢。③各物質(zhì)作用：無水乙醇或丙酮：提取色素；層析液：分離色素；二氧化硅：使研磨得充分；碳酸鈣：防止研磨中色素被破壞。④結(jié)果：濾紙條從上到下依次是：胡蘿卜素（最窄）、葉黃素、葉綠素a（最寬）、葉綠素b（第2寬），色素帶的寬窄與色素含量相關(guān)?！驹斀狻緼、紙層析法分離葉綠體色素，葉綠素b在濾紙條的最下面，說明葉綠素b在層析液中溶解度最低，A正確；B、用丙酮、無水乙醇等有機(jī)溶劑溶解和提取葉綠體中色素，提取的葉綠體色素含有胡蘿卜素，B錯(cuò)誤；C、加入SiO2的目的是為了研磨充分，加入CaCO3的目的是防止葉綠素受到破壞，C錯(cuò)誤；D、加入無水乙醇過多，溶液濃度減小，故提取液的綠色越淺，D錯(cuò)誤。故選A。本題考查課本基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的原理和選材，要求學(xué)生掌握提取和分離葉綠體中色素的方法，理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃?、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用；并對實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析、處理。5、B【解析】

長葉形對圓葉形為顯性，用Aa表示，抗病對易感病為顯性用Bb表示，長葉形抗病與質(zhì)葉形易感病植株雜交，F(xiàn)1均為長葉形抗病植株，說明親本基因型是AABB和aabb，F(xiàn)1全是AaBb，F(xiàn)2中圓葉形易感病植株aabb為64株，比例為4/25，說明ab的比例為2/5，說明兩對基因不遵循自由組合定律?！驹斀狻扛鶕?jù)分析，兩對基因不遵循自由組合定律，因此這兩對基因位于一對同源染色體上，并且發(fā)生了交叉互換，ab的比例為2/5=0.4，AB的比例和ab相等為0.4，Ab=aB=（1-0.4×2）/2=0.1，因此雜合圓形抗病植株aaBb的比例為2×0.1×0.4=0.08=8%。故選B。本題關(guān)鍵是從F2中圓葉形易感病植株的比例分析出ab配子的比例，結(jié)合連鎖互換定律進(jìn)行計(jì)算。6、C【解析】

1、通過柱形圖可知，實(shí)驗(yàn)的自變量是不同時(shí)間和溫度，因變量為酵母菌的數(shù)量。2、據(jù)圖可知，血球計(jì)數(shù)板有25個(gè)中方格，每1個(gè)中方格中有16個(gè)小方格，即總共有16×25=411個(gè)小方格，計(jì)數(shù)室的容積為1.1mm3（1mL=1111mm3）。【詳解】A、據(jù)圖表可知，21℃、24h條件下酵母菌總數(shù)量為5×117個(gè)/mL，因計(jì)數(shù)板共有25個(gè)中格，又因1mL=1cm3=113mm3，可設(shè)每個(gè)中格中的酵母菌數(shù)量為x，則有25×x×114×11（稀釋11倍）=5×117個(gè)/mL，推知x=21個(gè)，A錯(cuò)誤；B、溫度和培養(yǎng)時(shí)間是該實(shí)驗(yàn)的自變量，酵母菌菌種、酵母菌數(shù)量、培養(yǎng)液成分等為無關(guān)變量，B錯(cuò)誤；C、酵母菌種群數(shù)量變化過程中出現(xiàn)了“S”型增長，達(dá)到K值后穩(wěn)定時(shí)間的長短與培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)的含量有關(guān)，C正確；D、通過柱形圖可知，酵母菌在15℃環(huán)境中存活的時(shí)間最長，25℃是酵母菌種群數(shù)量增長的最適溫度，D錯(cuò)誤。故選C。7、A【解析】

1、選擇培養(yǎng)基是指在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。使用選擇培養(yǎng)基可以富集篩選目的微生物。2、鑒別培養(yǎng)基是依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)?！驹斀狻緼、允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基，A正確；B、篩選分解纖維素的細(xì)菌是根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈，B錯(cuò)誤；C、大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上生長時(shí)菌落呈黑色，C錯(cuò)誤；D、鑒定尿素分解菌的試劑是酚紅指示劑，D錯(cuò)誤。故選A。本題考查常見的選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，考生根據(jù)微生物的生長習(xí)性，在熟記教材的基礎(chǔ)上識記常見的選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。8、B【解析】

將玉米品種甲（DDRR）和乙（ddrr）雜交產(chǎn)生F1，F(xiàn)1的基因型是DdRr，F(xiàn)1自交產(chǎn)生F2?！驹斀狻堪凑栈蚍蛛x定律分析，F(xiàn)2代高稈：矮稈應(yīng)為3：1，但由于高稈植株存活率是2/3，因此F2成熟植株中的高稈：矮稈就為2：1；同理，F(xiàn)2代抗病：感病也應(yīng)為3：1，但由于易感病植株存活率是1/2，所以F2成熟植株中的抗?。焊胁【蜑?：1。再根據(jù)自由組合定律分析，F(xiàn)2代的表現(xiàn)型的種類是4種，比例為（2：1）×（6：1）=12：6：2：1，B正確。故選B。此題考查自由組合定律的應(yīng)用，側(cè)重考查理解能力和綜合運(yùn)用能力。二、非選擇題9、DNA雙鏈復(fù)制要有一段已知目的基因（干擾素基因）的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物基因設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)（干擾素）結(jié)構(gòu)推測應(yīng)有的氨基酸序列基因表達(dá)載體RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA把提取的蛋白質(zhì)用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交（或抗原-抗體雜交技術(shù)）【解析】

1、蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的原理是DNA雙鏈復(fù)制；擴(kuò)增的前提是要有一段已知目的基因（干擾素基因）的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。（2）蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)最終是由基因決定的，因此，對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，必須通過基因來完成；用蛋白質(zhì)工程找到所需基因的基本途徑即蛋白質(zhì)工程的基本途徑，從預(yù)期的蛋白質(zhì)（干擾素）功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)（干擾素）結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（干擾素基因）。（3）目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞之前，首先要構(gòu)建基因表達(dá)載體；其中啟動子位于目的基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。（4）翻譯的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，在檢測是否翻譯時(shí)，可以利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，把提取的蛋白質(zhì)用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交進(jìn)行鑒定。本題考查基因工程和蛋白質(zhì)工程，考查理解能力、獲取信息的能力及綜合運(yùn)用能力，考查生命觀念和科學(xué)思維核心素養(yǎng)。10、逆轉(zhuǎn)錄（或：反轉(zhuǎn)錄）逆轉(zhuǎn)錄酶Taq酶（ORF1ab和核殼蛋自基因N）的特異性引物目的基因大①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白（或滅活的新冠病毒）：②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體【解析】

1.將標(biāo)記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性、低溫復(fù)性、適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)規(guī)律，與模板DNA互補(bǔ)配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應(yīng)體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴(kuò)增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長，通過實(shí)時(shí)檢測與之對應(yīng)的隨擴(kuò)增而變化熒光信號強(qiáng)度，求得Ct值，同時(shí)利用數(shù)個(gè)已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對照，即可得出待測標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。2.單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用單克隆抗體技術(shù)來制備，單克隆抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群，可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。【詳解】（1）以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄或反轉(zhuǎn)錄，故題圖中以病毒的RNA為模板合成cDNA的過程為①逆轉(zhuǎn)錄，再對cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，這項(xiàng)技術(shù)稱為RT-PCR。（2）RT-PCR是擴(kuò)增DNA的過程，因?yàn)榧尤氲哪０迨荝NA，故需要加入的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶。要從cDNA中擴(kuò)增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入（ORF1ab和核殼蛋自基因N）的特異性引物、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系，從而實(shí)現(xiàn)了相關(guān)基因的擴(kuò)增。（3）RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強(qiáng)度來檢測產(chǎn)物濃度，原理如下：Taqman熒光探針為一段與目的基因互補(bǔ)的核苷酸單鏈，兩端分別連接一個(gè)熒光基團(tuán)R和一個(gè)淬滅基團(tuán)Q。探針結(jié)構(gòu)完整時(shí)，R發(fā)射的熒光被Q吸收；而PCR擴(kuò)增時(shí)結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷，使R和Q分離，R基團(tuán)發(fā)射的熒光不被淬滅，這樣通過對熒光信號強(qiáng)弱的監(jiān)測就可實(shí)現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。若熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí)，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明擴(kuò)增次數(shù)少，說明更多的熒光探針與目的基因進(jìn)行了堿基互補(bǔ)配對，可推測獲得的核酸產(chǎn)物中含有病毒的概率越大。（4）若采用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行病毒檢測，需要制備能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高且能夠大量制備的優(yōu)勢，故設(shè)計(jì)的思路是設(shè)法獲得能產(chǎn)生該特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，步驟如下：①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白（或滅活的新冠病毒），目的是要獲得能能產(chǎn)生特異性抗體的效應(yīng)B細(xì)胞；②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從培養(yǎng)液或小鼠腹水中可以提取大量的單克隆抗體。熟知逆轉(zhuǎn)錄、PCR擴(kuò)增和單克隆抗體的相關(guān)知識是解答本題的關(guān)鍵！能夠理解題目中關(guān)于熒光檢測的關(guān)鍵信息是解答本題的難點(diǎn)，獲取信息能力是本題考查的重要能力。11、堿基互補(bǔ)配對原則探針1堿基序列過短，特異性差探針2自身會出現(xiàn)部分堿基互補(bǔ)配對而失效mRNA逆轉(zhuǎn)錄酶β-珠蛋白基因中含有內(nèi)含子（或不表達(dá)序列）受精卵陰【解析】

分析圖（1）：探針一序列為-CAGG-，該序列過短，特異性差；探針二序列為-CGACT--AGTCG-，該序列有自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對而失效。

分析圖（2）：探針與目的基因雜交后，出現(xiàn)甲、乙、丙、丁等所示的“發(fā)夾結(jié)構(gòu)”?！驹斀狻浚?）核酸探針是單鏈DNA分子，其與目標(biāo)