生物技術(shù)分析方法：生物制造過(guò)程中基于風(fēng)險(xiǎn)考慮的微生物快速檢測(cè)方法選擇與確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)報(bào)告EnglishTitle:BiotechnologyAnalyticalMethods:SelectionandValidationofRapidMicrobiologicalTestingMethodsBasedonRiskConsiderationsinBiomanufacturingProcesses摘要隨著細(xì)胞治療技術(shù)的快速發(fā)展，相關(guān)產(chǎn)品的臨床應(yīng)用日益廣泛，患者安全成為行業(yè)關(guān)注的核心問(wèn)題。微生物污染是影響細(xì)胞治療產(chǎn)品質(zhì)量和安全性的關(guān)鍵風(fēng)險(xiǎn)因素之一。傳統(tǒng)的基于培養(yǎng)的微生物檢測(cè)方法（如藥典方法）雖然成熟可靠，但檢測(cè)周期較長(zhǎng)（通常需數(shù)天至數(shù)周），難以滿足細(xì)胞治療產(chǎn)品短保質(zhì)期、快速應(yīng)用的臨床需求。因此，開(kāi)發(fā)和應(yīng)用快速、靈敏、準(zhǔn)確的微生物檢測(cè)方法（RapidMicrobiologicalTestingMethods,RMTM）成為行業(yè)迫切需求。本報(bào)告圍繞《生物制造過(guò)程中基于風(fēng)險(xiǎn)考慮的微生物快速檢測(cè)方法選擇與確認(rèn)》標(biāo)準(zhǔn)的立項(xiàng)背景、目的意義、適用范圍及主要技術(shù)內(nèi)容展開(kāi)系統(tǒng)闡述。報(bào)告指出，該標(biāo)準(zhǔn)旨在為細(xì)胞治療產(chǎn)品及其他細(xì)胞衍生治療產(chǎn)品的微生物快速檢測(cè)提供科學(xué)、靈活、基于風(fēng)險(xiǎn)的方法選擇與驗(yàn)證框架，涵蓋從細(xì)胞庫(kù)、中間體到最終產(chǎn)品的全過(guò)程微生物監(jiān)控。通過(guò)引入風(fēng)險(xiǎn)分析理念，該標(biāo)準(zhǔn)可幫助生產(chǎn)企業(yè)根據(jù)產(chǎn)品特性和工藝差異，合理選擇并驗(yàn)證適用的快速檢測(cè)方法，提升檢測(cè)效率與可靠性，最終保障患者用藥安全。該標(biāo)準(zhǔn)的制定將填補(bǔ)我國(guó)在細(xì)胞治療領(lǐng)域快速微生物檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)方面的空白，推動(dòng)行業(yè)技術(shù)升級(jí)與規(guī)范化發(fā)展，并為監(jiān)管審評(píng)提供科學(xué)依據(jù)。關(guān)鍵詞-快速微生物檢測(cè)方法（RapidMicrobiologicalTestingMethods,RMTM）-細(xì)胞治療產(chǎn)品（CellTherapyProducts）-風(fēng)險(xiǎn)分析（RiskAnalysis）-方法驗(yàn)證（MethodValidation）-生物制造（Biomanufacturing）-微生物污染（MicrobiologicalContamination）-質(zhì)量控制（QualityControl）-藥典方法（PharmacopoeialMethods）正文一、立項(xiàng)背景與目的意義細(xì)胞治療作為一種前沿醫(yī)療技術(shù)，在腫瘤、遺傳病及免疫性疾病治療中展現(xiàn)出巨大潛力。然而，由于其活細(xì)胞特性、短保質(zhì)期及個(gè)體化制備模式，細(xì)胞治療產(chǎn)品在生產(chǎn)與質(zhì)量控制方面面臨諸多挑戰(zhàn)，尤其是微生物污染的控制與檢測(cè)。根據(jù)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心（CDE）數(shù)據(jù)，截至2022年3月9日，共受理135個(gè)細(xì)胞治療產(chǎn)品申請(qǐng)，其中88個(gè)品種獲批臨床，標(biāo)志著細(xì)胞治療市場(chǎng)進(jìn)入快速發(fā)展階段。在此背景下，患者安全成為首要考量。許多細(xì)胞治療產(chǎn)品在配制后需在數(shù)小時(shí)內(nèi)施用，傳統(tǒng)基于培養(yǎng)的微生物檢測(cè)方法（如《中國(guó)藥典》收錄的微生物限度檢查法）雖廣泛應(yīng)用，但其長(zhǎng)檢測(cè)周期無(wú)法滿足實(shí)時(shí)放行需求。此外，細(xì)胞治療產(chǎn)品需對(duì)細(xì)胞庫(kù)、中間體及終產(chǎn)品進(jìn)行多環(huán)節(jié)微生物監(jiān)控，涵蓋細(xì)菌、真菌、支原體及病毒等外源因子，進(jìn)一步增加了檢測(cè)復(fù)雜性。因此，推動(dòng)快速微生物檢測(cè)方法（RMTM）的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用成為行業(yè)共識(shí)。該類方法具有檢測(cè)時(shí)間短（可縮短至數(shù)小時(shí)）、靈敏度高、自動(dòng)化程度高等優(yōu)勢(shì)，能夠有效支持生產(chǎn)過(guò)程控制與最終產(chǎn)品放行。2023年10月31日，國(guó)家藥監(jiān)局發(fā)布《細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量管理指南（試行）》，明確提出應(yīng)加強(qiáng)生產(chǎn)過(guò)程微生物控制，為本標(biāo)準(zhǔn)的制定提供了政策依據(jù)。本標(biāo)準(zhǔn)旨在系統(tǒng)規(guī)范RMTM在細(xì)胞治療產(chǎn)品中的應(yīng)用，包括方法選擇、驗(yàn)證要求和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估框架，為企業(yè)提供技術(shù)指導(dǎo)，也為監(jiān)管部門(mén)提供審評(píng)依據(jù)，最終提升行業(yè)整體質(zhì)量水平與患者安全保障能力。二、范圍與主要技術(shù)內(nèi)容本標(biāo)準(zhǔn)聚焦于細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中的微生物快速檢測(cè)，涵蓋從細(xì)胞采集、培養(yǎng)、中間體處理到最終制劑的全鏈條質(zhì)量控制。其適用范圍包括自體及異體細(xì)胞治療產(chǎn)品、基因修飾細(xì)胞產(chǎn)品以及其他細(xì)胞衍生治療產(chǎn)品（如組織工程產(chǎn)品）。值得注意的是，本標(biāo)準(zhǔn)不包括病毒檢測(cè)部分，因病毒檢測(cè)通常涉及更復(fù)雜的特異性方法與驗(yàn)證要求。主要技術(shù)內(nèi)容包含以下方面：1.快速微生物檢測(cè)方法的選擇原則：基于產(chǎn)品類型、工藝特點(diǎn)及污染風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)，推薦適用的RMTM技術(shù)，如基于核酸擴(kuò)增（PCR、qPCR）、酶促反應(yīng)（ATP生物發(fā)光）、流式細(xì)胞術(shù)或微流控技術(shù)的檢測(cè)方法。強(qiáng)調(diào)方法應(yīng)具備高靈敏度、特異性及可靠性，并能適應(yīng)細(xì)胞基質(zhì)干擾。2.基于風(fēng)險(xiǎn)的分析框架：引入ICHQ9（質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理）理念，指導(dǎo)企業(yè)根據(jù)工藝環(huán)節(jié)、產(chǎn)品用途及患者風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)，制定差異化的檢測(cè)策略。例如，對(duì)于終產(chǎn)品或直接注入中樞神經(jīng)系統(tǒng)的產(chǎn)品，應(yīng)采用靈敏度更高的檢測(cè)方法并增加采樣頻次。3.方法驗(yàn)證要求：規(guī)定RMTM的驗(yàn)證參數(shù)，包括專屬性、準(zhǔn)確性、精密度、檢測(cè)限（LOD）、定量限（LOQ）、線性范圍、穩(wěn)健性等。要求驗(yàn)證數(shù)據(jù)需與藥典方法進(jìn)行比對(duì)研究，以證明其等效性或優(yōu)越性。4.生產(chǎn)過(guò)程應(yīng)用指南：明確RMTM在細(xì)胞庫(kù)、中間體及終產(chǎn)品檢測(cè)中的實(shí)施要點(diǎn)，包括采樣方法、樣品前處理、結(jié)果解讀及偏差調(diào)查流程。強(qiáng)調(diào)過(guò)程中檢測(cè)（in-processtesting）的重要性，以實(shí)現(xiàn)在線監(jiān)控與實(shí)時(shí)決策。5.數(shù)據(jù)管理與合規(guī)性要求：依據(jù)《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（GMP）和《細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量管理指南》，規(guī)范檢測(cè)數(shù)據(jù)的記錄、保存與報(bào)告格式，確保數(shù)據(jù)完整性與可追溯性。通過(guò)上述內(nèi)容，本標(biāo)準(zhǔn)為企業(yè)提供了一個(gè)科學(xué)、靈活且可操作的實(shí)施框架，有助于推動(dòng)快速檢測(cè)技術(shù)在細(xì)胞治療領(lǐng)域的規(guī)范化應(yīng)用。介紹修訂的企事業(yè)單位或標(biāo)委會(huì)主要參與單位：中國(guó)食品藥品檢定研究院（NIFDC）中國(guó)食品藥品檢定研究院是國(guó)家藥品監(jiān)督管理局直屬事業(yè)單位，承擔(dān)藥品、醫(yī)療器械、化妝品等的檢驗(yàn)、科研、標(biāo)準(zhǔn)制定及技術(shù)審評(píng)工作，在生物技術(shù)領(lǐng)域具有權(quán)威地位。該院下設(shè)生物制品檢定所，長(zhǎng)期致力于細(xì)胞治療產(chǎn)品、基因治療產(chǎn)品等先進(jìn)療法的質(zhì)量研究與標(biāo)準(zhǔn)制定，具備豐富的技術(shù)積累和行業(yè)影響力。在本次標(biāo)準(zhǔn)制定中，NIFDC牽頭組織多家企業(yè)、科研院所及臨床機(jī)構(gòu)參與討論與試驗(yàn)驗(yàn)證，確保標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容的科學(xué)性與實(shí)用性。其近年來(lái)在快速微生物檢測(cè)技術(shù)方面的研究成果（如基于數(shù)字PCR的支原體檢測(cè)方法開(kāi)發(fā)）為本標(biāo)準(zhǔn)提供了重要技術(shù)支撐。此外，NIFDC積極參與國(guó)際協(xié)調(diào)，借鑒USP、EP等國(guó)際藥典相關(guān)指南，推動(dòng)我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)際接軌。結(jié)論《生物制造過(guò)程中基于風(fēng)險(xiǎn)考慮的微生物快速檢測(cè)方法選擇與確認(rèn)》標(biāo)準(zhǔn)的制定，是響應(yīng)細(xì)胞治療行業(yè)快速發(fā)展與質(zhì)量控制需求的重要舉措。通過(guò)建立科學(xué)、系統(tǒng)的快速檢測(cè)方法選擇與驗(yàn)證框架，本標(biāo)準(zhǔn)將有效提升微生物檢測(cè)的效率與可靠性，縮短產(chǎn)品放行時(shí)間，降低患者用藥風(fēng)險(xiǎn)。未來(lái)，隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷創(chuàng)新與監(jiān)管政策的完善，本標(biāo)準(zhǔn)將持續(xù)修訂與擴(kuò)展，有望覆蓋更多產(chǎn)品類型（如病毒載體治療產(chǎn)品）及新興檢測(cè)技術(shù)（如單細(xì)胞測(cè)序、人工智能輔助分析）。同時(shí)，推動(dòng)與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)互認(rèn)，將助力我國(guó)細(xì)胞治療產(chǎn)品走向全球市場(chǎng)。本標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施將為生產(chǎn)企業(yè)、檢測(cè)機(jī)構(gòu)及監(jiān)管部門(mén)提供統(tǒng)一的技術(shù)依據(jù)，促進(jìn)細(xì)胞治療行業(yè)的高質(zhì)量、可持續(xù)發(fā)展。參考文獻(xiàn)1.《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版2.《細(xì)胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量管理指南（試行）》（國(guó)家藥監(jiān)局，2023年）3.ICHQ9:QualityRiskManagement4.USP〈1223〉V