ICS 65.020.0154CCSB0554西 藏 自 治 區(qū) 地 方 標 準DB54/T0513—2025鳥類種質(zhì)資源采集保存技術(shù)規(guī)范2025-09-15發(fā)布 2025-10-15實施西藏自治區(qū)市場監(jiān)督管理局??發(fā)布DB54/T0513DB54/T0513—2025PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范圍 3規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 3采樣前準備 3采集方法 4樣品采集和保存 4采集樣本數(shù)量 5采集點環(huán)境數(shù)據(jù)記錄 5采集個體的后處理 5采集注意事項 5樣品質(zhì)量檢測 6附錄A（規(guī)范性） 鳥類特征采集信息表 7附錄B（規(guī)范性） 環(huán)境信息采集表 8附錄C（規(guī)范性） 入庫登記表 9附錄D（資料性） 常用設(shè)備、裝備、耗材、試劑清單 10前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則 第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由西藏自治區(qū)科學(xué)技術(shù)廳提出。本文件由西藏自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村標準化技術(shù)委員會歸口。本文件起草單位：西藏自治區(qū)高原生物研究所。本文件主要起草人：周生靈、楊樂、楊永炳、王蕊、范丹丹。DB54/T0513DB54/T0513—2025PAGEPAGE10鳥類種質(zhì)資源采集保存技術(shù)規(guī)范范圍本文件適用于西藏常見鳥類的種質(zhì)資源采集保存。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB/T35892 實驗動物福利倫理審查指南。HJ628 生物遺傳資源采集技術(shù)規(guī)范（試行）。術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。鳥類體表被覆羽毛、有翼、恒溫和卵生的高等脊椎動物。注：西藏常見鳥類如樹麻雀、灰背伯勞、巖鴿、赤麻鴨、藏雞等。鳥類種質(zhì)資源采樣前準備文獻查閱采集前應(yīng)進行文獻查閱，掌握采集對象的種群數(shù)量、分布位點、生活習(xí)性等基本信息。樣品采集和運輸設(shè)備樣品采集過程中的所有操作人員必須嚴格遵循本文件的設(shè)備與工具使用要求開展采集工作，見附錄D。采集人員培訓(xùn)對于初次參與采集工作的人員，在開展采集保存工作前進行理論知識和實操培訓(xùn)。采集方法非損傷性采集非傷害性采集利用網(wǎng)捕法、誘捕法、陷阱法等方法對鳥類進行捕捉，之后通過采集翅下靜脈或跗趾靜脈的血液、指甲、新鮮羽毛（帶毛囊）等方法進行采樣；采集前用75%酒精對采集部位進行擦拭消毒處理。傷害性采集利用網(wǎng)捕法、誘捕法、陷阱法等方法對鳥類進行捕捉，之后進行處死、解剖，采集其心、肝、脾、肺、腦、眼、睪丸、卵巢等器官的組織樣品。樣品采集和保存DNA1（管綠豆大小52℃-8℃條件下；快速運輸至保藏單位，在-80℃或-150℃條件下保存。RNA（采集2份組織材料，每份約1g置于凍存管內(nèi)，添加至少5倍體積RNAlater保存劑完全浸泡或立刻保存在液氮中；用干冰或-80℃車載冰箱運輸至保藏單位，在-80℃或-150℃條件下保存。注：各器官包括：心、肝、脾、肺、腎等，樣品裝在凍存管保存在液氮環(huán)境時先用封口膜封口，再用錫箔紙包裹。血液樣品的采集采集樣本翅下靜脈或跗跖靜脈的血液0.5ml-1ml，存儲在抗凝采血管中，上下緩慢顛倒混勻后暫存在2℃-8℃條件下；干冰或-20℃條件下運輸至保藏單位，在-80℃或-150℃條件下保存。注：避免因反復(fù)凍融造成血液樣品降解。細胞樣品的采集（采集2g-3g組織材料，75%乙醇中浸泡5s-10s后用磷酸鹽緩沖液清洗3細胞培養(yǎng)基的50ml-80℃或-150℃條件下保存。糞便樣品的采集在排便20分鐘內(nèi)完成糞便樣品采集。以采集個體遺傳材料為目的時用干凈的采樣拭子/棉簽蘸取表面糞便；以采集個體腸道微生物為目的時用干凈的采樣拭子/棉簽撥去表面糞便，采集內(nèi)部糞便，采集后添加不少于5倍體積的糞便保存液或952℃-8-20℃條件下運輸至保藏單位，在-20℃條件保存。注：避免因反復(fù)凍融造成糞便樣品降解，按照HJ628的規(guī)定執(zhí)行。羽毛樣品的采集取樣前用棉棒蘸取3%的次氯酸鈉溶液，擦拭取樣部位，清潔皮膚表面的污漬后直接拔取2根-3根翼2℃-5℃條件下保存。注：要連羽根（毛囊）一起拔出。樣品保存流程采集→分裝（長期保存、備份）→入庫登記→信息錄入→打印、粘貼標簽→存入→錄入存儲位置。注：C。采集樣本數(shù)量小型鳥類（如樹麻雀）同一采樣地同一物種宜采集3只-5只個體；中型鳥類（如灰背伯勞）同一采樣地同一物種宜采集1只-3只個體；大型鳥類（如黑頸鶴）同一采樣地同一物種宜采集1只。采集點環(huán)境數(shù)據(jù)記錄（精確到點位注：樣地（精確到自然村）、樣點（精確到點位）采集個體的后處理35892的規(guī)定執(zhí)行。采集注意事項為確保鳥類樣品采集的科學(xué)性、安全性與倫理合規(guī)性，所有操作需遵循以下注意事項：使用專業(yè)的采樣工具，如捕鳥網(wǎng)、陷阱或遠程采樣設(shè)備等，確保采樣過程中對鳥類的傷害最小化。選擇在鳥類活動頻繁且不易受到驚嚇的時間段進行采樣，如清晨或黃昏；盡量避免在惡劣天氣、繁殖期進行采樣。（必要時戴護目鏡RNA75%乙醇清潔臺面和身體表面，31000RNA10RNA1EP長期低溫保存的樣品管內(nèi)做好編號備份，保存在液氮罐的樣品用專用液氮筆標記。采集完的廢料，做無害化處理。樣品質(zhì)量檢測每6個月對備份樣品進行檢測，動態(tài)監(jiān)測存入樣品的活性，及時處理失效樣品。附 錄 A（規(guī)范性）鳥類特征采集信息表樣本號物種名性別體長體重嘴峰長翅長尾長跗跖長嘴峰顏色虹膜顏色跗跖顏色脂肪度成幼情況備注必填。必填。中文名名必填雌 性♂必填。統(tǒng)一單（m0.1）（1）（mm0.1）必填。統(tǒng)一單（m0.1）必填。統(tǒng)一單（m0.1）（mm0.1）必填必填必填非必填必填大型鳥類的測量單位可做相應(yīng)調(diào)整附 錄 B（規(guī)范性）樣本號物種名間點點海拔生境類型采集人采集方式組織類型數(shù)量保存方式備注與鳥類信息對應(yīng)中文名+拉丁名/日自然村GPS位點單草原、森非傷害性采集/非損傷性采集/損傷性采集（脾、肺、腎、肌肉羽毛、糞便等單位：ml酒精、超低溫、低溫等附 錄 C（規(guī)范性）入庫登記表編號位置類型條件處理源時間時間人單位名名縣地點GPS點海拔性別份數(shù)部位情況備注必填必填必填必填必填必填必填必填必填必填必填必填必填必填必填必填必填必填必填必填DNARNA血液、糞便等；保存條件，溫度、保存方式（酒精、液氮等；保存前預(yù)處理，物理或化學(xué)處理；可共享資源，可共享月/月/（m；性別，雌雄（♀/♂；采樣份數(shù)，容積大小+份數(shù)；采樣部位，填寫采樣部位（肝臟、肌肉、血液等；成幼情況，年齡（成鳥、幼鳥、亞成、卵。附 錄 D（資料性）分類名稱分類名稱必要性備注樣本存儲設(shè)備液氮罐必要液氮補給罐必要液氮自動化存儲系統(tǒng)非必要-80℃超低溫冰箱必要-80℃超低溫自動化存儲系統(tǒng)必要-20℃冷凍冰箱必要4℃冷藏冰箱必要-20℃車載冰箱必要-80℃車載冰箱非必要樣本信息管理系統(tǒng)非必要防護裝備硅膠手套必要防護服必要護目鏡非必要硅膠手套必要頭套必要腳套必要采集和保存耗材鳥網(wǎng)必要鳥袋必要解