ICS11.020CCSC05IT/CEAC105—2025前言 12規(guī)范性引用文件 13術語和定義 14患者選擇與評估 1 1 2 5治療流程 2 .2TIL細胞分離與擴增 .4監(jiān)測與評估 6質(zhì)量控制 4 .2細胞分離與純化 .細胞擴增與培養(yǎng) .4細胞回輸與監(jiān)測 7療效評估與隨訪 5 57.2評估標準 5 參考文獻 7T/CEAC105—2025本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由森普瑞斯（北京）細胞技術有限公司提出。本文件由中國商業(yè)經(jīng)濟學會歸口。本文件起草單位：森普瑞斯（北京）細胞技術有限公司、常州南京大學高新技術研究院、吉林省醫(yī)菲尼迪生物醫(yī)藥有限公司、廈門諾康得生物科技有限公司、新疆西部賽澳生物科技有限責任公司、賽爾托馬斯生物科技(成都)有限公司、西安初源賽爾生物科技有限責任公司、南京吉芮康生物科技研究院有限公司、人體自身免疫病診療技術國家地方聯(lián)合工程研究中心、替爾斯(湖南)生物科技有限公司、湖南省腫瘤醫(yī)院、中南大學湘雅醫(yī)院、湖南省人民醫(yī)院、湖南省胸科醫(yī)院、中南大學湘雅口腔醫(yī)院、生物角（廈門）科技股份有限公司。本文件主要起草人：王清明、李娟、鄧東凱、華子春、盛春華、劉翔、潘琦、張黎敏、許一丹、張華、鐘文英、晁曉東、張燕、房勇、魏玲、陳攀、成舒喬、范莎莎、龍飛華、曹瓊、仝彩玲。1T/CEAC105—2025TIL細胞治療臨床應用指南本文件規(guī)定了TIL細胞治療臨床應用的患者選擇與評估、治療流程、質(zhì)量控制、療效評估與隨訪。本文件適用于TIL細胞治療臨床的應用。2規(guī)范性引用文件本文件沒有規(guī)范性引用文件。3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1腫瘤浸潤淋巴細胞tumor-infiltratinglymphocyte；TIL在腫瘤組織中存在的一類免疫細胞，能夠特異性地識別并攻擊腫瘤細胞。3.2TIL細胞治療TILcelltherapy一種利用患者自身的腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）進行體外擴增和激活后，再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)以攻擊腫瘤細胞的治療方法。3.3體外擴增invitroamplification將患者體內(nèi)的TIL細胞取出后，在實驗室條件下進行培養(yǎng)和擴增的過程。3.4細胞回輸cellreinfusion將經(jīng)過體外擴增和激活的TIL細胞重新注入到患者體內(nèi)的過程。4患者選擇與評估4,1患者選擇4.1.1疾病適應癥TIL細胞治療適用于多種實體瘤的治療，包括但不限于：a)黑色素瘤；b)肺癌（如非小細胞肺癌）；c)乳腺癌；d)食道癌；e)肝膽癌；g)卵巢癌；h)結直腸癌；2T/CEAC105—20254.1.2患者身體狀況患者身體狀況需滿足以下要求：a)患者年齡在18周歲至周75歲之間，具體年齡上下限可根據(jù)研究或臨床實踐確定；b)患者需具備良好的身體狀況，主要組織器官功能良好，具備良好的心肺功能、肝腎功能等，能夠耐受TIL細胞治療及其相關的預處理和支持治療；c)患者無自身免疫性疾病、器官移植、慢性感染等可能影響TIL細胞治療安全性的疾??；d)患者自身免疫系統(tǒng)功能正常；e)患者腫瘤負荷在可控范圍，對于腫瘤負荷過大的患者，TIL細胞治療可能無法有效控制病情，需先進行其他治療以減小腫瘤體積，再考慮接受TIL細胞療法；f)患者需對TIL細胞療法有充分了解，并對治療過程中可能出現(xiàn)的風險和不良反應有心理準備。4.1.3實驗室檢查結果患者的實驗室檢查結果需符合TIL細胞治療的要求，包括但不限于：a)血常規(guī)：白細胞、血小板、血紅蛋白等指標在正常范圍內(nèi)；b)肝腎功能：轉氨酶、膽紅素、肌酐等指標在正常范圍內(nèi)或輕度升高但可接受；c)凝血功能：凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間等指標在正常范圍內(nèi)；d)電解質(zhì)和血糖水平：電解質(zhì)和血糖水平保持在正常范圍內(nèi)；e)腫瘤標志物檢測：對于特定類型的腫瘤，需檢測特定的腫瘤標志物水平，如甲胎球蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、組織多肽抗原(TPA)、糖鏈抗原(CA-125，CA199)等，以評估疾病的嚴重程度和治療效果；f)其他相關檢查：根據(jù)患者的具體情況和醫(yī)生的判斷，進行其他相關的實驗室檢查，以確?；颊叩纳眢w狀況適合接受TIL細胞治療。4.2患者評估4.2.1根據(jù)患者的病史、體格檢查、影像學檢查和實驗室檢查結果，初步判斷患者是否符合TIL細胞治療的適應癥。4.2.2對初步篩選合格的患者進行詳細評估，包括但不限于：a)腫瘤組織活檢：通過手術切除或穿刺活檢等方式獲取腫瘤組織樣本，用于TIL的分離與擴增；b)免疫功能評估：評估患者的免疫功能狀態(tài)，包括T細胞亞群、免疫球蛋白水平等指標；c)腫瘤負荷評估：通過影像學檢查評估患者的腫瘤負荷和轉移情況。4.2.3組織多學科會診，包括腫瘤科、免疫科、外科、放療科等相關科室的專家，共同討論患者的治療方案和預后評估。4.2.4在患者接受TIL細胞治療前，需詳細告知患者治療的目的、方法、可能的風險和副作用，確認患者是否愿意接受TIL細胞治療以及其心理狀態(tài)是否穩(wěn)定，并取得患者的書面知情同意。4.3患者排除標準以下情況的患者不適合接受TIL細胞治療：a)合并其他嚴重疾病或感染，無法耐受治療；b)妊娠或哺乳期婦女；c)預期生存期過短，無法完成治療周期；d)對治療相關藥物過敏或存在其他禁忌癥；e)有嚴重心肺功能障礙或肝腎功能不全的患者；f)有嚴重出血傾向的患者；g)正在接受其他免疫抑制治療患者；h)不能積極配合和遵循醫(yī)囑的患者。5治療流程5.1腫瘤組織采集3T/CEAC105—20255.1.1通過手術切除患者的腫瘤組織塊或采用穿刺方法獲取腫瘤組織，手術過程需由外科醫(yī)生進行。腫瘤采集過程中需無菌操作，使用一次性器具，做好器具消毒工作。5.1.2腫瘤組織采集部位：血管豐富且避開壞死區(qū)和黏液區(qū)的腫瘤組織，采集的腫瘤組織體積不小于0.15cm3或者重量不小于0.01g。得到的組織樣本需立即將其表面的血液、黏液以及污物清理干凈。5.1.3手術切除的腫瘤組織需立即送往符合GMP要求的細胞生產(chǎn)車間進行處理。在運輸過程中，腫瘤組織采用低溫或液氮冷凍保存，以保持其活性和完整性。獲取的腫瘤組織需立即放入裝有樣品穩(wěn)定液的標本采集瓶中，在腫瘤組織采集后72h內(nèi)開啟生產(chǎn)，全程需在2～8℃條件下保存與運輸。需注意組織塊在運輸過程中不得通過具有輻射的檢查裝置，可開具證明進行人工檢查。在樣本送達時，需附上細胞制備申請單，其中包括患者的基本信息(如姓名、性別、年齡、身份證號等)、臨床醫(yī)學信息(如既往史、HCV、HBV、梅毒和EB病毒)、肝腎功能、腫瘤標記物（依照不同癌種，如CEA，CA125，CA199，AFP測定等）、檢查結果（如CT平掃及增強、MRI、PET-CT等）、治療方案(如細胞的種類、治療次數(shù)、回輸方式等)以及知情同意書。5.2TIL細胞分離與擴增5.2.1TIL細胞的分離和純化需建立明確的過程控制參數(shù)，操作過程按照經(jīng)過驗證的標準操作程序進行。在GMP細胞生產(chǎn)車間，由相關專業(yè)人員會對腫瘤組織進行分解和消化，以分離出浸潤在腫瘤組織中的淋巴細胞。分離過程需要在無菌條件下進行，以防止微生物污染。5.2.2將分離出的TIL細胞轉移到特定的培養(yǎng)基中，通過加入IL-2（白細胞介素2）等細胞因子刺激其增殖。擴增過程期間需細心調(diào)整培養(yǎng)條件，如溫度、氣體組成和培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)，以優(yōu)化TIL細胞的生長和活性。5.2.3擴增后的TIL細胞會需嚴格的篩選和質(zhì)量控制測試，以確保它們的安全性和有效性。通過測試的細胞才會被用于后續(xù)的治療過程。收獲TIL細胞前需經(jīng)過檢測，包括但不限于以下指標：a)活細胞數(shù)量及細胞活率；b)細胞亞型及比例；c)安全性指標：如無菌、支原體、內(nèi)毒素等。5.3細胞回輸5.3.1在TIL細胞回輸前，患者需進行一段時間的預處理治療，包括化療等清髓性治療，旨在清除患者體內(nèi)的部分免疫細胞，為TIL細胞提供更多的生長空間，并減少腫瘤的體積，從而增加TIL療法的有效性。5.3.2經(jīng)過篩選和質(zhì)控的TIL細胞通過靜脈輸注的方式返回患者體內(nèi)。輸注過程中有專人看護，確保及時處理可能出現(xiàn)的問題，需密切監(jiān)控患者的生命體征和健康狀態(tài)，包括體溫、血壓、心率等，以及可能出現(xiàn)的過敏反應或不良反應，以確保治療的安全性。5.3.3為支持患者體內(nèi)TIL細胞的生長和激活，回輸后患者可接受IL-2等免疫調(diào)節(jié)因子的治療。5.3.4輸注前準備：a)輸注前一天，醫(yī)生制定臨床方案及醫(yī)囑；b)輸注當天，護理人員對患者進行全面的體格檢查、生命體征等監(jiān)測，確認患者生命體征平穩(wěn)，無發(fā)熱、出血及出血傾向等癥狀、體征出現(xiàn)；在原始病歷及《細胞治療操作記錄》中如實記錄呼吸、血壓、心率、脈搏等；c)根據(jù)GCP相關要求，檢查急救藥品及儀器在近細胞治療處，藥品在使用效期內(nèi)，急救儀器可以正常使用；d)輸注地點：建議在層流病房、專門細胞治療室或急救室進行；條件不允許時，可在患者病房床旁進行操作；e)護理人員與方艙質(zhì)量控制員領取細胞，核對《細胞運輸交接記錄》及細胞袋標簽相關的患者信息和細胞條形碼，包括患者姓名、細胞生產(chǎn)日期及時間、使用途徑等。5.3.5細胞靜脈輸注步驟和注意事項：a)置于室內(nèi)復溫15min，緩慢顛倒細胞袋，將細胞懸液混勻，確保細胞混懸液沒有絮狀物和渾濁；采用一次性使用輸血器，防止堵塞（使用適當?shù)妮斠浩骱蜑V網(wǎng)，確保輸注過程的安全）,選取相對較粗的靜脈，如肘正中靜脈進行輸注；原則上細胞輸注前可以不使用激素預防過敏反應，4T/CEAC105—2025但臨床醫(yī)生可根據(jù)患者個體情況，在細胞輸注前使用小劑量甲強龍或地塞米松。將穿刺針一端插入生理鹽水瓶中，并將100mL0.9%生理鹽水全部加入細胞袋中，與細胞袋內(nèi)液體充分混合。如細胞袋內(nèi)有細胞結團，輕柔按壓減少結團，也可適當加熱使細胞盡量分散，接通輸液泵按25～30滴/分鐘速度靜脈滴注（開始時以慢速輸注，觀察患者反應，確認無不良反應后可逐漸加快速度）。護理人員在《細胞治療操作記錄單》記錄細胞的具體使用時間(采用24hr制，具體到分鐘)。b)輸注時，質(zhì)量控制員在臨床科室配合和監(jiān)督護士操作人員工作,密切關注患者精神、體溫、血壓、脈搏等，詢問其是否有不適；細胞輸注完畢，觀察穿刺部位有無藥外滲以及患者是否有寒顫、發(fā)熱、心慌、胸悶、氣急、食欲不振、疲乏無力、惡心、嘔吐等不良反應，并及時處理，叮囑患者平臥休息1h～2h；c)如有發(fā)生不良事件(AE)/嚴重不良事件(SAE)，護理人員在原始病歷、《免疫細胞輸注觀察記錄表》中如實記錄，按《免疫細胞輸注AE及SAE處理標準操作規(guī)程》進行處理；d)相關記錄的完成與核對：護理人員完成原始病歷、《細胞治療操作記錄單》等文件的記錄，主管醫(yī)生需對涉及上述信息的文件進行審核簽名，確保無誤。5.3.6細胞包裝的保存及銷毀流程：輸注完成，細胞外包裝袋保存48hr，按照醫(yī)療垃圾流程銷毀；如發(fā)生可疑AE需檢測，將細胞外包裝袋移交中心人員，送回實驗室質(zhì)控人員，進行復檢。5.4監(jiān)測與評估在TIL細胞治療結束后，需定期對患者進行隨訪和檢查，以評估治療效果和患者的生存質(zhì)量，包括：a)影像學檢查：如CT、MRI等，用于評估腫瘤的大小、位置和形態(tài)變化；b)實驗室檢查：如血常規(guī)、生化指標等，用于監(jiān)測患者的身體狀況和藥物副作用；c)臨床癥狀評估：定期詢問患者的身體狀況和癥狀變化，如疼痛、疲勞、惡心等，以評估治療對患者生活質(zhì)量的影響；d)不良反應監(jiān)測：密切關注患者可能出現(xiàn)的發(fā)熱、寒戰(zhàn)、惡心、嘔吐等不良反應，并及時處理；e)心理健康狀態(tài)：注意患者的心理健康，提供必要的心理支持和輔導，患者需保持良好的心態(tài)和生活習慣，積極配合醫(yī)生的治療建議，以獲得最佳的治療效果；f)細胞因子水平：檢測血液中的細胞因子水平，如IL-2、IFN-γ等，其可以反映免疫反應的活躍程度。6質(zhì)量控制6.1細胞來源與采集確保TIL細胞來源于患者自身的新鮮腫瘤組織，采集過程中需嚴格遵守無菌操作原則，防止污染。通過手術切除或穿刺活檢等方式獲取腫瘤組織樣本，樣本需在規(guī)定時間內(nèi)送至實驗室進行處理。此外，對于不能取到新鮮腫瘤組織的患者，也可從血液中分離TIL，通過特殊的富集工藝和擴增工藝等技術手段，可獲得和擴增相當數(shù)量的TIL細胞，血液來源的TIL具有同等的抗腫瘤活性。從血液中分離TIL的過程包括以下步驟：a)血液采集：從患者體內(nèi)抽取一定量的血液；b)單個核細胞（PBMC）的分離：使用密度梯度離心法等技術，從血液中分離出單個核細胞，該類細胞中包含TIL；c)TIL的富集和擴增：通過特定的培養(yǎng)條件和生物標志物的選擇，從PBMC中富集、擴增和分離TIL，并且使用特定的培養(yǎng)基、生長因子和抗體等；d)TIL的鑒定和質(zhì)量控制：對擴增后的TIL進行鑒定，確保其具有抗腫瘤活性，并進行質(zhì)量控制測試。6.2細胞分離與純化采用有效的分離與純化技術，確保TIL細胞的純度和活性。利用密度梯度離心、免疫磁珠分選等技術分離TIL細胞，并通過流式細胞術等方法檢測細胞的純度和活性。6.3細胞擴增與培養(yǎng)5T/CEAC105—2025在無菌條件下進行細胞擴增與培養(yǎng)，確保細胞數(shù)量和質(zhì)量滿足治療需求。在含有適宜生長因子和細胞因子的培養(yǎng)基中進行TIL細胞擴增，定期監(jiān)測細胞數(shù)量、形態(tài)和活性等指標。6.4細胞回輸與監(jiān)測確保TIL細胞回輸過程的安全性和有效性，回輸后需密切監(jiān)測患者的反應。通過靜脈注射等方式將TIL細胞回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，回輸前后需進行細胞計數(shù)和活性檢測。同時，需密切關注患者的生命體征和可能出現(xiàn)的不良反應。7療效評估與隨訪7.1.1評估目的療效評估旨在客觀、準確地評價TIL細胞治療在惡性實體瘤患者中的治療效果，為臨床決策提供科學依據(jù)。7.1.2評估指標及方法7.1.2.1評估指標包括：a)腫瘤緩解率：完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、穩(wěn)定（SD）和進展（PD）等，通過影像學檢查（如CT、MRI等）評估腫瘤大小的變化；b)客觀緩解率（ORR）：ORR指接受治療后腫瘤縮小達到一定量或完全消失的患者比例，包括完全緩解（CR）和部分緩解（PR），是衡量治療效果的重要指標之一；c)疾病控制率（DCR）：DCR指接受治療后病情得到控制的患者比例，反映了治療對疾病進展的控制能力；d)無進展生存期（PFS）：從治療開始到腫瘤出現(xiàn)進展或患者死亡的時間；e)總生存期（OS）：從治療開始到患者死亡的時間；f)中位總生存期（mOSmOS指所有患者中位生存時間的統(tǒng)計值，即當累積生存率為50%時所對應的生存時間，表示有且只有50%的生病個體可以活過這個時間，對于評估整體療效具有重要g)治療失敗時間（TTF由治療開始至退出試驗的時間，退出原因可能是患者拒絕、疾病進展、患者死亡、不良事件等；h)生活質(zhì)量評分：通過問卷調(diào)查等方式評估患者的生活質(zhì)量，包括身體功能、心理狀態(tài)、社會功能等方面。7.1.2.2評估方法包括：a)影像學檢查：定期進行CT、MRI等影像學檢查，評估腫瘤大小的變化；b)實驗室檢查：監(jiān)測腫瘤標志物水平的變化，如CEA、CA19-9等，作為療效評估的輔助指標；c)臨床評估：結合患者的臨床癥狀、體征等，綜合評估治療效果；d)病理學檢查：對治療后的腫瘤組織進行病理學檢查，觀察腫瘤細胞的形態(tài)和結構變化，以及免疫細胞浸潤情況，以評估TIL細胞治療的效果；e)生存分析：通過觀察患者的OS、PFS等指標，評估TIL細胞治療對患者生存時間的影響；f)免疫指標檢測：檢測患者外周血中免疫細胞的數(shù)量和功能變化，如T淋巴細胞亞群、NK細胞活性等，以評估TIL細胞治療對患者免疫功能的影響。7.2評估標準參照國際公認的實體瘤療效評估標準（如RECIST標準）進行評估，確保評估結果的客觀性和可比性。7.3隨訪7.3.1隨訪目的隨訪旨在了解患者的生存情況、疾病復發(fā)情況以及治療后的長期安全性，為臨床治療和預后判斷提供重要信息。6T/CEAC105—20257.3.2隨訪內(nèi)容隨訪內(nèi)容包括：a)疾病復發(fā)情況：定期進行影像學檢查，評估腫瘤是否復發(fā)或轉移，同時，結合病理學檢查、免疫指標檢測等手段，全面了解治療對患者的影響；b)相關不良反應：記錄患者治療后可能出現(xiàn)的不良反應，如發(fā)熱、寒戰(zhàn)、惡心、嘔吐等，并評估其嚴重程度和持續(xù)時間；c)生活質(zhì)量評估：通過問卷調(diào)查等方式評估患者的生活質(zhì)量，了解患者的身體功能、心理狀態(tài)、社會功能等方面的情況；d)生存情況：記錄患者的生存時間、死亡原因等；e)定期復診與溝通：安排患者定期回醫(yī)院復診，與醫(yī)生進行面對面的溝通和交流。醫(yī)生根據(jù)患者的病情變化和治療效果，及時調(diào)整治療方案，并提供相應的建議和指導。7.3.3隨訪時間隨訪時間需根據(jù)患者的具體情況和治療方案而定，包括：a)短期隨訪：在治療結束后的最初幾個月內(nèi)，通常每2至4周進行一次隨訪，以便及時發(fā)現(xiàn)并處理可能出現(xiàn)的早期不良反應；b)中期隨訪：隨著時間的推移，隨訪間隔可以逐漸延長，如每3個月或6個月進行一次；c)長期隨訪：對于某些具體患者可進行長期隨訪，以監(jiān)測疾病的長期控制情況和可能的復發(fā)。對于沒有外源基因表達、且體外操作不改變細胞存活時間及分化潛能的TIL治療產(chǎn)品，長期隨訪的持續(xù)時間不應短于細胞在體內(nèi)的自然存活時間，建議對受試者進行1年或以上的隨訪。對于有外源基因表達、但不存在基因整合或基因重組風險，或載體的基因整合或重組風險較低的免疫細胞治療產(chǎn)品，建議對受試者進行不少于5年的隨訪。對于有外源基因表達、而且表達載體存在基因整合或有基因重組風險的免疫細胞治療產(chǎn)品，建議對受試者觀察不少于15年。7.3.4隨訪方式隨訪方式包括電話隨訪、門診隨訪、郵件隨訪等，具體方式可根據(jù)患者的實際情況和醫(yī)院的要求而7T/CEAC105—2025參考文獻[1]國家藥品監(jiān)督管理局、國家衛(wèi)生健康委員會.干細胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導原則（試行），2015[2]國家衛(wèi)生健康委員會.體細胞治療臨床研究和轉化應用管理辦法（試行征求意見稿2019[3]國家市場監(jiān)督管理總局令.生物制品批簽發(fā)管理辦法，2020[4]國家藥品監(jiān)督管理局、國家衛(wèi)生健康委員會.藥物臨床試驗質(zhì)量管理規(guī)范，2020[5]國家藥品監(jiān)督管理局.免疫細胞治療產(chǎn)品臨床試驗技術指導原則（試行），2021[6]國家藥品監(jiān)督管理局.藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范-細胞治療產(chǎn)品附錄（征求意見稿2022[7]YossefR,KrishnaS,SindiriS,etal.Phenotypicsignaturesofcirculatingneoantig