2025年分子生物學(xué)分子生物學(xué)實驗技術(shù)操作答案及解析一、單項選擇題1.PCR技術(shù)的關(guān)鍵步驟是（）A.變性B.退火C.延伸D.以上都是2.DNA聚合酶在PCR反應(yīng)中起什么作用？（）A.解旋DNAB.合成DNAC.切割DNAD.連接DNA3.基因克隆中最常用的載體是（）A.病毒載體B.質(zhì)粒載體C.噬菌體載體D.以上都是4.聚丙烯酰胺凝膠電泳主要用于（）A.蛋白質(zhì)分離B.DNA分離C.RNA分離D.以上都是5.Westernblotting技術(shù)主要用于（）A.DNA檢測B.RNA檢測C.蛋白質(zhì)檢測D.以上都不是6.ELISA技術(shù)主要用于（）A.DNA檢測B.RNA檢測C.蛋白質(zhì)檢測D.以上都不是7.基因芯片技術(shù)主要用于（）A.DNA檢測B.RNA檢測C.蛋白質(zhì)檢測D.以上都不是8.原位雜交技術(shù)主要用于（）A.DNA檢測B.RNA檢測C.蛋白質(zhì)檢測D.以上都不是9.RT-PCR技術(shù)主要用于（）A.DNA檢測B.RNA檢測C.蛋白質(zhì)檢測D.以上都不是10.亞克隆是指（）A.將PCR產(chǎn)物克隆到新的載體中B.將質(zhì)?？寺〉剿拗骷?xì)胞中C.將基因片段克隆到表達(dá)載體中D.以上都是11.基因編輯技術(shù)CRISPR-Cas9主要用于（）A.DNA檢測B.RNA檢測C.蛋白質(zhì)檢測D.基因修飾12.細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的細(xì)胞培養(yǎng)基是（）A.DMEMB.RPMI1640C.F12D.以上都是13.流式細(xì)胞術(shù)主要用于（）A.DNA定量B.蛋白質(zhì)定量C.細(xì)胞周期分析D.以上都是14.蛋白質(zhì)印跡技術(shù)（Blotting）是指（）A.將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上B.將DNA轉(zhuǎn)移到膜上C.將RNA轉(zhuǎn)移到膜上D.以上都不是15.基因測序技術(shù)中，Sanger測序法主要用于（）A.第二代測序B.第三代測序C.第一代測序D.以上都不是二、多項選擇題1.PCR反應(yīng)體系通常包含哪些成分？（）A.DNA模板B.引物C.DNA聚合酶D.dNTPsE.緩沖液2.質(zhì)粒載體的基本結(jié)構(gòu)包括哪些部分？（）A.多克隆位點B.抗生素抗性基因C.啟動子D.終止子E.標(biāo)記基因3.聚丙烯酰胺凝膠電泳的優(yōu)點包括哪些？（）A.分辨率高B.重復(fù)性好C.操作簡便D.成本低E.適用于大規(guī)模分離4.Westernblotting技術(shù)的步驟包括哪些？（）A.蛋白質(zhì)樣品制備B.蛋白質(zhì)電泳C.轉(zhuǎn)膜D.封閉E.一抗二抗孵育5.ELISA技術(shù)的類型包括哪些？（）A.直接法B.間接法C.雙抗體夾心法D.競爭法E.標(biāo)記酶法6.基因芯片技術(shù)的應(yīng)用包括哪些？（）A.基因表達(dá)分析B.SNP檢測C.藥物篩選D.病原體檢測E.親子鑒定7.原位雜交技術(shù)的類型包括哪些？（）A.RNA原位雜交B.DNA原位雜交C.蛋白質(zhì)原位雜交D.FISH（熒光原位雜交）E.CHIPS（原位芯片雜交）8.RT-PCR技術(shù)的步驟包括哪些？（）A.RNA提取B.RNA反轉(zhuǎn)錄C.PCR擴(kuò)增D.電泳檢測E.數(shù)據(jù)分析9.亞克隆的步驟包括哪些？（）A.PCR擴(kuò)增目標(biāo)基因B.連接PCR產(chǎn)物到載體C.轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞D.篩選陽性克隆E.驗證重組質(zhì)粒10.基因編輯技術(shù)CRISPR-Cas9的步驟包括哪些？（）A.設(shè)計gRNAB.遞送Cas9和gRNA到細(xì)胞C.修復(fù)DNA雙鏈斷裂D.觀察編輯效果E.鑒定編輯位點三、填空題1.PCR的全稱是_________________________。2.質(zhì)粒載體通常包含_________________________和_________________________。3.聚丙烯酰胺凝膠電泳的原理是_________________________。4.Westernblotting技術(shù)中，_________________________用于檢測目標(biāo)蛋白。5.ELISA技術(shù)中，_________________________是一種常用的檢測方法。6.基因芯片技術(shù)通過_________________________來實現(xiàn)高通量檢測。7.原位雜交技術(shù)可以在_________________________水平上檢測基因表達(dá)。8.RT-PCR技術(shù)是將_________________________轉(zhuǎn)換為_________________________。9.亞克隆是將PCR產(chǎn)物克隆到_________________________中。10.基因編輯技術(shù)CRISPR-Cas9通過_________________________實現(xiàn)基因修飾。四、判斷題（√/×）1.PCR技術(shù)可以在室溫下進(jìn)行。2.質(zhì)粒載體是細(xì)菌的主要遺傳物質(zhì)。3.聚丙烯酰胺凝膠電泳適用于蛋白質(zhì)和DNA的分離。4.Westernblotting技術(shù)可以檢測DNA。5.ELISA技術(shù)是一種酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)。6.基因芯片技術(shù)可以檢測基因表達(dá)譜。7.原位雜交技術(shù)可以在細(xì)胞水平上檢測基因表達(dá)。8.RT-PCR技術(shù)可以檢測RNA。9.亞克隆是將質(zhì)?？寺〉剿拗骷?xì)胞中。10.基因編輯技術(shù)CRISPR-Cas9可以精確修飾基因。五、簡答題1.簡述PCR技術(shù)的原理和步驟。2.簡述Westernblotting技術(shù)的原理和步驟。六、案例分析1.患者主訴：近期出現(xiàn)咳嗽、發(fā)熱等癥狀，懷疑感染流感病毒。現(xiàn)病史：患者體溫38.5℃，咳嗽，咽痛，乏力。體征：咽部充血，肺部聽診有濕啰音。關(guān)鍵輔助檢查結(jié)果：血常規(guī)顯示白細(xì)胞計數(shù)升高，淋巴細(xì)胞比例增加。問題1：初步診斷是什么？問題2：需要進(jìn)一步做哪些檢查？試卷答案一、單項選擇題（答案）1.D2.B3.B4.D5.C6.C7.A8.A9.B10.D11.D12.D13.D14.A15.C二、多項選擇題（答案）1.A,B,C,D,E2.A,B,C,D,E3.A,B,C,D,E4.A,B,C,D,E5.A,B,C,D,E6.A,B,C,D,E7.A,B,C,D,E8.A,B,C,D,E9.A,B,C,D,E10.A,B,C,D,E三、填空題（答案）1.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)2.多克隆位點，抗生素抗性基因3.電荷分離和分子篩分4.抗體5.雙抗體夾心法6.探針陣列7.細(xì)胞8.RNA，DNA9.新的載體10.gRNA和Cas9蛋白四、判斷題（答案）1.×2.×3.√4.×5.√6.√7.√8.√9.×10.√五、簡答題（答案）1.PCR技術(shù)的原理是利用DNA聚合酶在高溫變性、低溫退火、中溫延伸的條件下，特異性地擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段。步驟包括：變性（95℃），退火（55-65℃），延伸（72℃），重復(fù)循環(huán)30-40次。2.Westernblotting技術(shù)的原理是將蛋白質(zhì)通過SDS分離后，轉(zhuǎn)移到