第1節(jié)細(xì)胞中化合物第2章組成細(xì)胞的分子.根據(jù)你的生活經(jīng)驗(yàn)，說說哪些植物器官的細(xì)胞中富含糖類、脂質(zhì)或蛋白質(zhì)？怎樣從植物器官中提取這些化合物？答案：植物的葉肉細(xì)胞、果實(shí)細(xì)胞和種子細(xì)胞中通常含有較多的糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)。如：禾谷類的果實(shí)、種子中含淀粉較多；甘蔗的莖和甜菜的根含蔗糖較多；花生、芝麻的種子中含脂質(zhì)較多；大豆種子中含蛋白質(zhì)較多。提取方法：設(shè)法將細(xì)胞破碎，再將這些物質(zhì)提取出來。課題導(dǎo)入目標(biāo)引領(lǐng)1.檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)2.組成細(xì)胞的物質(zhì)的特殊性獨(dú)立自學(xué)?還原糖+斐林試劑脂肪+蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑___50℃～65℃溫水浴磚紅色沉淀蘇丹Ⅲ染液橘黃色紫色1.還原糖:具有還原性的糖常見還原糖:葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖常見非還原糖:蔗糖、淀粉2.原理:

還原糖+斐林試劑磚紅色沉淀水浴加熱斐林試劑甲液:乙液:0.1g/mLNaOH0.05g/mLCuSO4等量混合，現(xiàn)配現(xiàn)用。思考:鑒定還原糖時(shí)使用的斐林試劑為何要現(xiàn)配現(xiàn)用?因?yàn)殪沉衷噭┖懿环€(wěn)定,配置好的Cu(OH)2懸濁液放置一段時(shí)間后，會形成沉淀，影響實(shí)驗(yàn)效果。其次是Cu(OH)2放置久了會發(fā)生分解反應(yīng)，形成部分黑色CuO，也會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。所以應(yīng)將甲液和乙液分別保存,使用時(shí)現(xiàn)配現(xiàn)用。常見的還原糖和非還原糖引導(dǎo)探究1.還原糖的檢測和觀察選材：含糖量較高、_____________的植物組織結(jié)論：組織樣液中含有_____________白色或近于白色可溶性還原糖磚紅色沉淀不能選綠色葉片、西瓜、血液等材料,防止顏色的干擾。選蘋果或梨勻漿:富含還原糖且沒有其他顏色干擾。2.應(yīng)用尿糖的檢測(定性)尿糖檢測對照組實(shí)驗(yàn)組正常人尿液+斐林試劑待測尿液+斐林試劑水浴加熱觀察顏色變化水浴加熱觀察顏色變化1.原理蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑紫色0.1g/mLNaOH雙縮脲試劑A液B液0.01g/mLCuSO4二、蛋白質(zhì)的檢測和觀察先加1mLA液，再加4滴B液。蛋白質(zhì)+Cu2+堿性環(huán)境紫色絡(luò)合物思考:鑒定蛋白質(zhì)時(shí),加入試劑B后,如果沒有產(chǎn)生紫色反應(yīng),可能的原因是什么?可能加入的雙縮脲試劑B過量,CuSO4在堿性溶液中生成大量的藍(lán)色Cu(OH)2絮狀沉淀,會遮蔽實(shí)驗(yàn)中所產(chǎn)生的紫色,影響觀察結(jié)果。蛋白質(zhì)的檢測和觀察選材與制備:蛋清稀釋液或豆?jié){濾液

結(jié)論：組織樣液中存在________

4滴紫色

蛋白質(zhì)蛋清(原則:富含蛋白質(zhì)且色淺)注意:組織樣液一般要稀釋，否則與雙縮脲試劑反應(yīng)后會粘固在試管壁上，不易刷洗。【拓展】雙縮脲試劑最初是用來檢測雙縮脲的。雙縮脲試劑可以檢測含有兩個(gè)及兩個(gè)以上肽鍵的化合物。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)。比較項(xiàng)目斐林試劑雙縮脲試劑作用成分使用方法原理反應(yīng)條件檢測還原糖檢測蛋白質(zhì)甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液與乙液等體積混合使用，現(xiàn)配現(xiàn)用。先加較多A液，再加少量B液。Cu(OH)2被還原糖還原成Cu2O磚紅色沉淀。蛋白質(zhì)在堿性條件下與Cu2+絡(luò)合，生成紫色絡(luò)合物。水浴加熱(50~65℃)堿性環(huán)境、常溫比較斐林試劑和雙縮脲試劑1.原理脂肪＋蘇丹Ⅲ染液→橘黃色脂肪被蘇丹Ⅲ染成橘黃色2.選材:富含脂肪且色淺花生種子:富含脂肪且沒有其他顏色干擾。三、脂肪的檢測和觀察脂肪的檢測和觀察蘇丹Ⅲ

低倍鏡

橘黃色

脂肪的檢測結(jié)果“三滴”：第一滴：2-3滴蘇丹Ⅲ第二滴：1-2滴50%的酒精（洗浮色）第三滴：1滴清水（制片）檢測脂肪的實(shí)驗(yàn)是唯一用顯微鏡觀察的實(shí)驗(yàn)？為什么用酒精洗浮色？用水可以嗎？不行，因?yàn)樘K丹Ⅲ溶于酒精，不溶于水注意事項(xiàng)：（1）、檢測還原糖時(shí)應(yīng)水浴50~65度加熱

加熱試管中的溶液時(shí),用試管夾夾住試管上部,放入盛開水的大燒杯中加熱,注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時(shí)試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者,以免試管內(nèi)溶液沸騰時(shí)沖出試管,造成燙傷。

檢測還原糖實(shí)驗(yàn)是唯一要水浴加熱的實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：（2）、檢測脂肪時(shí)，切片要薄，否則顯微鏡下可能會看到一半清楚一半模糊的物像。用蘇丹Ⅲ染色時(shí)間不宜過短（染色不充分，脂肪顆粒染色過淺，不宜觀察）；不宜過長（樣品中的脂肪可能溶解，洗浮色時(shí)被洗掉，觀察不到被染色的脂肪）

(3)唯一需要顯微鏡——

鑒定,實(shí)驗(yàn)中要用

，其作用是

。脂肪50%的酒精溶液洗去浮色（4）、斐林試劑是甲乙兩液等量混勻后立即使用，即現(xiàn)配現(xiàn)用（放置時(shí)間過長會有沉淀析出，反應(yīng)減慢或者不反應(yīng)）。顏色變化：

淺藍(lán)色→棕色

→磚紅色沉淀（5）、雙縮脲試劑是先加如A液1ml,搖勻,再加入B液4滴,搖勻.顏色變化:

無色

→

淺藍(lán)色

→

紫色1、檢測蛋白質(zhì)時(shí)，加入B液后沒有觀察到紫色反應(yīng)有可能是因?yàn)锽液過量，生成大量的藍(lán)色Cu(OH)2，遮蓋了實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的紫色2、斐林試劑的乙液可以通過用蒸餾水稀釋作為雙縮脲試劑中的B液使用（或者減少乙液用量）來檢測蛋白質(zhì)目標(biāo)升華課堂練習(xí)1、用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí)，

溶液顏色的變化過程是（）A、無色→磚紅色（沉淀）B、淺藍(lán)色→磚紅色（沉淀）C、淺藍(lán)色→藍(lán)色→磚紅色（沉淀）

D、淺藍(lán)色→棕色→磚紅色（沉淀）

D當(dāng)堂診學(xué)2、在用雙縮尿試劑鑒定蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，正確的操作是（）A、2ml蛋白質(zhì)稀釋液先加0.1g/ml的NaOH，再加3—4滴0.01g/ml

CuSO4溶液。B、2ml蛋白質(zhì)稀釋液先加3—4滴0.01g/ml

CuSO4溶液，再加0.1g/ml的NaOH

C、2ml蛋白質(zhì)稀釋液，同時(shí)加3—4滴0.01g/ml

CuSO4和0.1g/ml的NaOH混合液。D、在NaOH和CuSO4混合液中加入蛋白質(zhì)稀釋液。A3、用蘇丹Ⅲ染液對脂肪組織進(jìn)行染色時(shí)，可用來沖洗浮色的藥品是（）A、HCI；B、H2O；C、50%的酒精；D、無水酒精。4、下列哪個(gè)實(shí)驗(yàn)用到顯微鏡（）A、可溶性還原糖的鑒定；

B、蛋白質(zhì)的鑒定；C、脂肪的鑒定；D、淀粉的鑒定。CC5、下列哪種試劑在使用過程中，必須經(jīng)過加熱（）A、斐林試劑鑒定可溶性還原糖的過程中；

B、蘇丹Ⅲ

在鑒定動物組織中的脂肪時(shí)；

C、雙縮尿試劑鑒定蛋白質(zhì)時(shí)；

D、碘化鉀溶液鑒定淀粉時(shí)。6、下列糖中能與斐林試劑反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀的是（）A、淀粉；B、果糖；C、蔗糖；D、纖維素。AB7下列可用于脂肪鑒定的實(shí)驗(yàn)材料是

()

(A)蘋果(B)梨(C)卵白(D)花生種子

8花生子葉細(xì)胞內(nèi)的圓形透亮的小顆粒與蘇丹Ⅲ染液發(fā)生了顏色反應(yīng)．形成

()(A)藍(lán)色(B)橘黃色(C)紅色(D)紫色BD9下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作步驟的敘述中，正確的是()(A)用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲液和乙液，可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定(B)脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中需要用顯微鏡才能看到被染成橘黃色的脂肪粒(C)鑒定可溶性還原糖時(shí)，要加入斐林試劑甲液搖勻后，再加入乙液(D)用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑A液與B液要混合均勻后．再加入含樣品的試管中，且必須現(xiàn)配現(xiàn)用B10將面團(tuán)包在紗布中在清水中搓洗，鑒定黏留在紗布上的黏稠物質(zhì)和洗出的白漿用的試劑分別是()（A）碘液．蘇丹Ⅲ染液