ICS01.040.65

CCSB04TB

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

T/NAIAXXX-XXXX

T/NAIA026—2021

污水中11種毒品及其代謝物和人口標(biāo)記

物可替寧的測定液相色譜-三重四極桿質(zhì)

譜法

Determinationof11illicitdrugsandtheirmetabolitesresidues&cotinineof

demographicmarkerinsewage

Liquidchromatography-tandemmassspectrometry

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施

寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會(huì)發(fā)布

發(fā)布

污水中11種毒品及代謝物和人口標(biāo)記物可替寧含量的測定

液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

1范圍

本文件規(guī)定了污水中11種化合物（O6-單乙酰嗎啡、可卡因、可待因、苯甲酰愛康寧、

嗎啡、氯胺酮、去甲氯胺酮、MDMA、MDA、甲基苯丙胺、苯丙胺）和人口標(biāo)記物可替寧

含量的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定方法。

本文件適用于污水中11種毒品（O6-單乙酰嗎啡、可卡因、可待因、苯甲酰愛康寧、嗎

啡、氯胺酮、去甲氯胺酮、MDMA、MDA、甲基苯丙胺、苯丙胺）和人口標(biāo)記物可替寧含

量的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期

的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所

有的修改單）適用于本文件。

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

3術(shù)語和定義

GA/T122界定的術(shù)語和定義適用于本文件。

4原理

本方法用工作曲線作對(duì)照，按照平行操作要求，向污水檢材樣品加入同位素內(nèi)標(biāo)，并進(jìn)

行提取、凈化、濃縮，采用液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法在多反應(yīng)監(jiān)測模式下檢測，以保留

時(shí)間和特征離子對(duì)進(jìn)行定性，內(nèi)標(biāo)法定量。

5試劑與材料

除非另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水符合GB/T6682中規(guī)定的一級(jí)水。

5.1鹽酸（HCl）。

5.2甲醇（CH3OH）：HPLC級(jí)。

5.3乙腈（C2H3N）：HPLC級(jí)。

5.4甲酸（HCOOH）：HPLC級(jí)。

5.5氨水（NH3·H2O）：HPLC級(jí)。

5.6甲酸水溶液：0.1%(CH3OH)。

移取1000μL甲酸（5.4）于1000mL水中。

1

5.7氨水-甲醇溶液：5+95

用氨水（5.5）和甲醇（5.2）按5:95體積比混合。

5.9標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液：

5.9.1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)備液：

O6-單乙酰嗎啡、可卡因、可待因、苯甲酰愛康寧、嗎啡、氯胺酮、去甲氯胺酮、

MDMA、MDA、甲基苯丙胺、苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)備溶液：分別稱取O6-單乙酰嗎啡、可卡

因、可待因、苯甲酰愛康寧、嗎啡、氯胺酮、去甲氯胺酮、MDMA、MDA、甲基苯丙胺、

苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適量，精密稱量，配制成0.1mg/mL標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)備溶液，溶劑為甲醇。密封，

置于冰箱冷凍保存，有效期12個(gè)月。

可替寧標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：稱取可替寧標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適量，精密稱量，配制成1.0mg/mL標(biāo)準(zhǔn)物

質(zhì)儲(chǔ)備溶液，溶劑為甲醇。密封，置于冰箱冷凍保存，有效期12個(gè)月。

5.9.2混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中間液：

將O6-單乙酰嗎啡、可卡因、可待因、苯甲酰愛康寧、嗎啡、氯胺酮、去甲氯胺酮、

MDMA、MDA、甲基苯丙胺、苯丙胺、可替寧標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)備溶液用甲醇稀釋得到，密封，

置于冰箱冷凍保存，有效期6個(gè)月。

5.9.3混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用液：

配制O6-單乙酰嗎啡、可卡因、可待因、苯甲酰愛康寧、嗎啡、氯胺酮、去甲氯胺酮、

MDMA、MDA、甲基苯丙胺、苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用液濃度分別為：0.5~50μg/L，對(duì)應(yīng)可替

寧標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用液溶液5~500μg/L，溶劑為甲醇。密封，置于冰箱冷藏保存，有效期1個(gè)月。

5.10氘代內(nèi)標(biāo)溶液：

5.10.1氘代內(nèi)標(biāo)混合中間液：

6

移取濃度為0.1mg/mL的O-單乙酰嗎啡-D3、可卡因-D3、可待因-D3、苯甲酰愛康寧

-D3、嗎啡-D3、氯胺酮-D4、去甲氯胺酮-D4、MDMA-D5、MDA-D5、甲基苯丙胺-D5、苯丙

胺-D5、可替寧-D3內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)甲醇溶液，配制成10μg/mL氘代內(nèi)標(biāo)混合中間液，溶劑為

甲醇。密封，置于冰箱冷凍保存，有效期12個(gè)月。

5.10.2氘代內(nèi)標(biāo)混合使用液：

將氘代內(nèi)標(biāo)混合中間液配制成250μg/L的氘代內(nèi)標(biāo)混合使用液，溶劑為甲醇。密封，

置于冰箱冷藏保存，有效期1個(gè)月。

6儀器與設(shè)備

6.1液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀：液相色譜帶有梯度洗脫功能，質(zhì)譜為帶電噴霧離子源

（ESI）的。

6.2色譜柱：填料粒徑1.8μm，柱長100mm，內(nèi)徑2.1mm的C18反向液相色譜柱，或及其

它等效柱。

6.2混合型強(qiáng)陽離子交換反相柱：MCX，30mg/3mL或等效固相萃取柱。

6.3固相萃取裝置：自動(dòng)或手動(dòng)，流速可調(diào)節(jié)。

6.4氮吹濃縮或真空濃縮裝置。

6.5一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。

2

7樣品

7.1樣品采集與保存

按照HJ/T91和HJ/T614的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行水樣的采集。

用預(yù)先洗滌干凈并干燥的樣品瓶（1000mL）采集水樣，水樣體積應(yīng)不超過樣品瓶總體

積的4/5，防止冷凍過程中由于體積膨脹造成樣品瓶破裂，裝瓶后擰緊瓶蓋，倒置搖晃3次，

檢查樣品瓶密封性，并立即用鹽酸（5.1）調(diào)pH小于2。置于-20℃冷凍保存，并于2日內(nèi)

送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析。

7.2試樣制備

7.2.1預(yù)處理

將污水樣品完全解凍后，充分搖勻。過0.45μm玻璃纖維濾膜，并量取50.0mL加入20

μL氘代內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)使用液（5.10.2）。

7.2.2固相萃取及濃縮

依次用4mL甲醇（5.2）、4mL水和4mLpH為2的水對(duì)固相萃取小柱（6.2）進(jìn)行活

化，流速不超過4mL/min；取上述樣品（7.2.1）通過活化好的固相萃取小柱，控制流速約為

2mL/min；用4mL水和4mL甲醇（5.2）淋洗固相萃取小柱，流速不超過4mL/min，并增

加固相萃取裝置（6.3）的壓力，使小柱內(nèi)的水分排干；用4mL氨水-甲醇溶液（5.7）從小

柱洗脫目標(biāo)化合物，洗脫流速小于1mL/min。

將上述淋洗液置于濃縮裝置中，濃縮至近干。用250μL0.1%甲酸溶液（5.6）復(fù)溶，混

合均勻，過0.22μm濾膜，待測。

7.3空白樣品

以自來水為空白樣品，與污水樣品平行操作，得到空白提取液。

8分析步驟

8.1儀器參考條件

8.1.1液相色譜參考條件

流動(dòng)相A：0.1%甲酸水溶液（5.6），流動(dòng)相B：乙腈（5.3），梯度程序見表1；柱溫：

35℃，流速：0.2mL/min，進(jìn)樣體積：5μL。

表1梯度洗脫條件

時(shí)間/min流動(dòng)相A/%流動(dòng)相B/%

1955

28515

87030

3

8.5595

13595

8.1.2質(zhì)譜參考條件

a）電離方式：電噴霧離子源（ESI），正離子掃描。

b）監(jiān)測方式：多反應(yīng)離子檢測（MRM）。

c）電噴霧電壓：4000V。

d）霧化器壓力：45psi。

e）離子源溫度：350℃。

f）12種檢測目標(biāo)物定性、定量離子對(duì)及碰撞能量條件見表2；

g）12種氘代內(nèi)標(biāo)定性、定量離子對(duì)及碰撞能量條件見表3；

表211種毒品及其代謝物和人口標(biāo)記物可替寧的多反應(yīng)離子監(jiān)測分析參數(shù)

碰撞能量碰撞能量碎裂電壓

目標(biāo)物母離子定量子離子定性子離子

（V）（V）（V）

O6-單乙酰嗎啡328.22112816544140

可卡因304.21821682.132120

可待因300.2199.231165.352115

苯甲酰愛康寧290.11682077.165110

嗎啡286.21654015265150

氯胺酮238.1220121253280

去甲氯胺酮224.1206.98125.22670

MDMA194.116381052490

MDA180.1163.16104.92260

甲基苯丙胺150.11198912080

苯丙胺136.11194911670

可替寧177.19820802690

表311種毒品及其代謝物和人口標(biāo)記物可替寧的多反應(yīng)離子監(jiān)測分析參數(shù)

碰撞能量碎裂電壓

目標(biāo)物母離子定量子離子定性子離子碰撞能量（V）

（V）（V）

6

O-單乙酰基嗎啡-D3331.12112616540125

可卡因-D3307.11852011134105

可待因-D3303.21655815278115

4

碰撞能量碎裂電壓

目標(biāo)物母離子定量子離子定性子離子碰撞能量（V）

（V）（V）

苯甲酰愛康寧-D3293.0171.21810536100

嗎啡-D3289.11654415270120

氯胺酮-D4242.0211121293475

去甲氯胺酮-D4228.1211.18129.12675

MDMA-D5198.0167251383375

MDA-D5185.21686138.11670

甲基苯丙胺-D5155.2124.1496.11665

苯丙胺-D5141.1124.2493.12255

可替寧-D3180.078.1691012275

8.1.3儀器調(diào)諧

不同廠家的儀器調(diào)諧參數(shù)存在一定差異，應(yīng)按照儀器使用說明書在規(guī)定時(shí)間和頻次內(nèi)對(duì)

質(zhì)譜進(jìn)行儀進(jìn)行儀器質(zhì)量數(shù)和分辨率的校正，以確保儀器處于最佳質(zhì)量狀態(tài)。

8.2校準(zhǔn)

8.2.1標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的建立

取與污水等量自來水過膜，并量取50.0mL加入20μL氘代內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)使用液（5.10.2），

添加混合標(biāo)準(zhǔn)使用液（5.10.1），使其中11中目標(biāo)物濃度為1ng/L、5ng/L、10ng/L、

50ng/L、100ng/L、500ng/L，對(duì)應(yīng)可替寧濃度為10ng/L、50ng/L、100ng/L、500ng/L、

1000ng/L、5000ng/L，按照固相萃取及濃縮（7.2.2）進(jìn)行操作，得到標(biāo)準(zhǔn)工作曲線提取液，

待測。

按照儀器參考條件（8.1），由低濃度到高濃度依次對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線提取液進(jìn)行測定，

以目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度（ng/L）為橫坐標(biāo)，以其對(duì)應(yīng)的響應(yīng)值與該化合物內(nèi)標(biāo)物的響應(yīng)值

的比值和內(nèi)標(biāo)物濃度的乘積為縱坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

8.2.1標(biāo)準(zhǔn)參考圖譜

在本標(biāo)準(zhǔn)推薦的儀器參考條件下，目標(biāo)化合物的總離子流圖見圖1（除可替寧濃度為

500ng/L，其余目標(biāo)物濃度為50ng/L，氘代內(nèi)標(biāo)物濃度均為20ng/L）。

8.3試樣測定

按照與標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的建立（8.2.1）相同的儀器條件進(jìn)行試樣（7.2）的測定。

8.4空白試驗(yàn)

按照與試樣測定（8.3）相同的儀器條件進(jìn)行空白試樣（7.2）的測定。

5

響

應(yīng)

值

時(shí)間（min）

66

1—O單乙酰嗎啡，2—O單乙酰嗎啡D3，3—苯丙胺，4—苯丙胺D5，5—苯甲酰安康寧，6—苯甲酰愛康

寧D3，7—可卡因，8—可卡因D3，9—可待因，10—可待因D3，11—可替寧，12—可替寧D3，13—氯胺

酮，14—氯胺酮D4，15—MDA，16—MDA-D5，17—MDMA，18—MDMA-D5，19—甲基苯丙胺，20—甲

基苯丙胺D5，21—嗎啡，22—嗎啡D3，23—去甲氯胺酮，24—去甲氯胺酮D4

圖111種毒品及代謝物和人口標(biāo)記物可替寧總離子流圖

9結(jié)果計(jì)算和表示

9.1定性測定

選擇1個(gè)母離子和2個(gè)子離子對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行監(jiān)測。在同樣測試條件下，試樣中的目

標(biāo)化合物的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中該目標(biāo)化合物的保留時(shí)間的相對(duì)偏差的絕對(duì)值應(yīng)小

于2.5%，且對(duì)試樣中目標(biāo)化合物定性子離子的相對(duì)離子豐度（Ksam）與濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)工

作溶液中對(duì)應(yīng)的定性子離子的相對(duì)豐度（Kstd）進(jìn)行比較，偏差不超過表4規(guī)定的范圍，則

可判定樣品中存在對(duì)應(yīng)的目標(biāo)化合物。

A2

Ksam=×100%（1）

A1

式中：Ksam——樣品中目標(biāo)化合物定性子離子的相對(duì)豐度，%；

A2——樣品中目標(biāo)化合物二級(jí)質(zhì)譜定性子離子響應(yīng)值；

A1——樣品中目標(biāo)化合物二級(jí)質(zhì)譜定量子離子響應(yīng)值。

6

Astd2

Kstd=×100%（2）

Astd1

式中：Kstd——標(biāo)準(zhǔn)樣品中目標(biāo)化合物定性子離子的相對(duì)豐度，%；

A2——標(biāo)準(zhǔn)樣品中目標(biāo)化合物二級(jí)質(zhì)譜定性子離子響應(yīng)值；

A1——標(biāo)準(zhǔn)樣品中目標(biāo)化合物二級(jí)質(zhì)譜定量子離子響應(yīng)值。

表4定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差

Kstd/%Ksam允許偏差/%

Kstd＞50±20

20＜Kstd≤50±25

10＜Kstd≤20±30

Kstd≤10±50

9.2結(jié)果計(jì)算和表達(dá)

以目標(biāo)物與對(duì)應(yīng)內(nèi)標(biāo)定量離子對(duì)的峰面積比（Y）為縱坐標(biāo)、目標(biāo)物濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行

線性擬合，得線性回歸方程。根據(jù)各樣品中目標(biāo)物及對(duì)應(yīng)內(nèi)標(biāo)定量離子對(duì)的峰面積值，按式

（3）計(jì)算待測樣品中目標(biāo)物濃度。

Y-a

C=（3）

b

式中：

C－－待測樣品中目標(biāo)物質(zhì)量濃度，ng/L；

Y－－待測樣品中目標(biāo)物與內(nèi)標(biāo)定量離子對(duì)的峰面積比；

a－－線性方程的截距；

b－－線性方程的斜率。

注：測定結(jié)果小數(shù)點(diǎn)后位數(shù)的保留與方法檢出限一致，最多保留三位有效數(shù)字。

10精密度

平行測定結(jié)果相對(duì)偏差應(yīng)≤20%。

11方法檢出限和定量限

表512種檢測目標(biāo)物的方法檢出限及定量限

目標(biāo)物檢出限（ng/L）定量限（ng/L）

嗎啡1.56.0

可待因1.56.0

苯丙胺0.52.0

甲基苯丙胺0.52.0

7

目標(biāo)物檢出限（ng/L）定量限（ng/L）

MDA1.04.0

MDMA0.52.0

O6-單乙酰嗎啡1.04.0

去甲氯胺酮0.52.0

氯胺酮0.52.0

苯甲酰愛康寧0.52.0

可卡因0.52.0

可替寧1.56.0

8

附錄A

（資料性附錄）

表A.112種檢測目標(biāo)物及對(duì)應(yīng)氘代內(nèi)標(biāo)相關(guān)信息

化合物名稱英文名或縮寫CAS號(hào)

O6-單乙酰嗎啡6-Acetylmorphine2784-73-8

可卡因Cocaine50-36-2

可待因Codeine76-57-3

苯甲酰愛康寧Benzoylecgonine519-09-5

嗎啡Morphine57-27-2

氯胺酮Ketamine1867-66-9

去甲氯胺酮Norketamine79499-59-5

3,4-亞甲基二氧甲基苯丙胺MDMA42542-10-9

3,4-亞甲二氧基苯丙胺MDA4764-17-4

甲基苯丙胺Methamphetamin