ICS13.020.01CCSZ01TechnologicalregulationsforhydrobiologiIDB13/T6059—2025前言 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語(yǔ)和定義 14調(diào)查程序 2 24.2 24 5調(diào)查點(diǎn)位布設(shè) 3 6調(diào)查頻次和時(shí)間 4 1浮游動(dòng)物底棲大型無(wú)脊椎動(dòng)物水生維管植物著生藻類魚(yú)類46 7調(diào)查內(nèi)容 4 6 7.4 8質(zhì)量控制 9調(diào)查報(bào)告 附錄A（規(guī)范性）調(diào)查記錄表 DB13/T6059—2025本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本標(biāo)準(zhǔn)由河北省水利廳提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由河北省水利廳組織實(shí)施。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河北省水文勘測(cè)研究中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：白云鵬、崔希東、李明良、時(shí)曉飛、丁二峰、張少彤、席懷平、胡健、李春燕、徐偉偉、張俊芝、張文、劉婧、王麗萍、付博超、郭洪起、孫志琢、景彥亭、程朝立、張寶海、楊婷婷、王鶴鳴、蔣波。DB13/T6059—20251水生生物調(diào)查技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了水生生物調(diào)查程序、點(diǎn)位布設(shè)、頻次和時(shí)間、質(zhì)量控制、調(diào)查報(bào)告的一般要求以及浮游動(dòng)物等不同種類水生生物凋查的技術(shù)要求。本文件適用于河北省河流、湖泊和水庫(kù)等地表水體（不包括入海河口）的水生生物調(diào)查。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。HJ710.12生物多樣性觀測(cè)技術(shù)導(dǎo)則水生維管植物HJ1295水生態(tài)監(jiān)測(cè)技術(shù)指南河流水生生物監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)（試行）HJ1296水生態(tài)監(jiān)測(cè)技術(shù)指南湖泊和水庫(kù)水生生物監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)（試行）SL219水環(huán)境監(jiān)測(cè)規(guī)范SL733內(nèi)陸水域浮游植物監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1浮游動(dòng)物zooplankton在水中營(yíng)懸浮生活、沒(méi)有或僅有微弱游動(dòng)能力的微型動(dòng)物，通常包括原生動(dòng)物、輪蟲(chóng)、枝角類和橈足類等四類。3.2底棲大型無(wú)脊椎動(dòng)物benthicmacroinvertebrate部分或全部生活史棲息于水體的水底表面或底部基質(zhì)中，個(gè)體大于500μm的無(wú)脊椎動(dòng)物。3.3水生維管植物aquaticvascularplant一年中至少數(shù)月生活于水中或漂浮于水面的維管植物。根據(jù)生活型的不同，通常分為挺水植物、浮水植物和沉水植物。[來(lái)源：HJ710.12-2016，3.2]3.4著生藻類perphyticalgae又稱周叢藻類、浮生藻、底棲藻類，附著在長(zhǎng)期浸沒(méi)于水中的各種基質(zhì)（植物、動(dòng)物、石頭、人工基質(zhì)等）表面的微藻。淡水中主要由硅藻、綠藻和藍(lán)藻組成。水鳥(niǎo)waterbirdsDB13/T6059—20252生態(tài)學(xué)上主要依賴濕地生存，且在形態(tài)結(jié)構(gòu)和行為上對(duì)濕地形成適應(yīng)特征的鳥(niǎo)類。一般包括游禽和涉禽。4調(diào)查程序4,1調(diào)查方案根據(jù)調(diào)查目的，確定調(diào)查范圍和水生生物調(diào)查對(duì)象，了解調(diào)查對(duì)象特征，提出具體調(diào)查技術(shù)要求，確定調(diào)查方案。4.2調(diào)查實(shí)施依據(jù)調(diào)查方案，開(kāi)展資料、數(shù)據(jù)收集與踏勘，組織開(kāi)展河流、湖泊和水庫(kù)的水生生物樣品采集與鑒定，并進(jìn)行全過(guò)程質(zhì)量控制。DB13/T6059—202534.3調(diào)查成果整理調(diào)查和鑒定數(shù)據(jù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，出具調(diào)查成果。調(diào)查方案調(diào)查方案質(zhì)量控制質(zhì)量控制調(diào)查實(shí)施調(diào)查成果圖1水生生物調(diào)查流程圖5調(diào)查點(diǎn)位布設(shè)5.1.1代表性原則：點(diǎn)位布設(shè)應(yīng)具有代表性，覆蓋調(diào)查范圍內(nèi)的典型生境。5.1.2可操作性原則：點(diǎn)位布設(shè)應(yīng)考慮所擁有的人力、資金和后勤保障等條件，充分利用現(xiàn)有資料和成果，立足現(xiàn)有設(shè)備和人員條件，采用效率高、成本低的調(diào)查方法。5.1.3安全性原則：點(diǎn)位應(yīng)布設(shè)在人員與設(shè)備安全的位置。5.1.4持續(xù)性原則：調(diào)查點(diǎn)位一經(jīng)確定，宜長(zhǎng)期保持不變。5.1.5一致性原則：宜與水文觀測(cè)斷面、水質(zhì)監(jiān)測(cè)斷面相結(jié)合，方便獲取水文和水質(zhì)監(jiān)測(cè)DB13/T6059—20254數(shù)據(jù)。5.2布設(shè)方法根據(jù)流域特征、水文狀況、水環(huán)境質(zhì)量、水生生物分布等因素進(jìn)行布設(shè)，結(jié)合調(diào)查目的和需求適當(dāng)調(diào)整。河流：根據(jù)自然條件和河流長(zhǎng)度劃分調(diào)查區(qū)段，河長(zhǎng)大于50km的宜分為上、中、下游三個(gè)調(diào)查區(qū)段，每個(gè)區(qū)段布設(shè)不少于1個(gè)調(diào)查點(diǎn)位；河長(zhǎng)小于等于50km的可參照?qǐng)?zhí)行。湖泊和水庫(kù)：根據(jù)湖泊和水庫(kù)面積劃分不同的調(diào)查區(qū)段，面積100km2～500km2時(shí)，宜布設(shè)10～15個(gè)調(diào)查區(qū)段；面積10km2～100km2時(shí)，宜布設(shè)3～10個(gè)調(diào)查區(qū)段；面積小于10km2時(shí)，宜布設(shè)1～3個(gè)調(diào)查區(qū)段。每個(gè)區(qū)段布設(shè)不少于1個(gè)調(diào)查點(diǎn)位。6調(diào)查頻次和時(shí)間6.1浮游動(dòng)物、底棲大型無(wú)脊椎動(dòng)物、水生維管植物、著生藻類、魚(yú)類宜選擇春、夏、秋季開(kāi)展調(diào)查，每年不少于兩次。夏季應(yīng)避開(kāi)強(qiáng)降雨期及洪水期。6.2兩棲、爬行動(dòng)物人工觀測(cè)宜每3～5年開(kāi)展一期調(diào)查，每期在夏、秋季各一次，每期調(diào)查宜持續(xù)5～7日，兩次調(diào)查時(shí)間應(yīng)間隔一個(gè)月以上。兩棲動(dòng)物宜在清晨和傍晚進(jìn)行觀測(cè)；爬行動(dòng)物宜在白天進(jìn)行觀測(cè)。自動(dòng)觀測(cè)可借助智能設(shè)備在線獲取物種活動(dòng)的影像資料。6.3水鳥(niǎo)人工觀測(cè)宜結(jié)合水鳥(niǎo)生態(tài)特征，選擇遷徙季、繁殖季、越冬季開(kāi)展各不少于一期調(diào)查，調(diào)查期不少于2日，每日調(diào)查時(shí)間宜為水鳥(niǎo)活動(dòng)活躍時(shí)段；自動(dòng)觀測(cè)利用自動(dòng)化設(shè)施長(zhǎng)期觀測(cè)。7調(diào)查內(nèi)容7.1.1試劑和器具7.1.1.1試劑包括但不限于以下：——甲醛溶液：濃度37%～40%；——魯哥氏液：稱取碘化鉀（KI）60g溶于100mL蒸餾水中，待完全溶解后加入40g碘（I2），搖動(dòng)至碘完全溶解后加蒸餾水定容至1000mL，然后存儲(chǔ)于棕色磨口試劑瓶中備用。7.1.1.2器具包含但不限于以下：——采水器：規(guī)格為1L、2.5L、5L或10L有機(jī)玻璃采水器及深水采水器；DB13/T6059—20255——采集桿：2m左右，竹制或金屬制，也可用結(jié)實(shí)的繩子代替；——13#浮游生物網(wǎng)：網(wǎng)孔直徑為0.112mm；——25#浮游生物網(wǎng)：網(wǎng)孔直徑為0.064mm；——標(biāo)本瓶：容積為50mL、100mL、1000mL或2000mL；——計(jì)數(shù)框：容積為0.1mL、1.0mL或5.0mL；——移液器：量程為100μL；——生物顯微鏡：放大倍率為40～1000倍。7.1.2樣品采集7.1.2.1定性樣品采集7.1.2.1.1采樣位置定性樣品采集位置為水面下0m～0.3m處。7.1.2.1.2采樣方法原生動(dòng)物和輪蟲(chóng)樣品采集用25#浮游生物網(wǎng)。將浮游生物網(wǎng)牢系在采集桿的一端，關(guān)閉網(wǎng)頭活塞沉入水中以排出網(wǎng)中空氣，然后在水面下繞“∞”字循回?fù)迫?；也可將浮游生物網(wǎng)半插入或全插入水體中，讓水流流入網(wǎng)內(nèi)以收集浮游生物。撈取過(guò)濾時(shí)間一般為5min～10min。從水中緩慢提出浮游生物網(wǎng)，濾去網(wǎng)中的水，使浮游生物濃縮集中到網(wǎng)底收集管內(nèi)。打開(kāi)網(wǎng)頭活塞，將樣品注入標(biāo)本瓶，立即加入魯哥氏液固定，至終濃度1%～1.5%（v/v）。另取一樣品，不加固定液，用于活體觀察。枝角類和橈足類樣品采集使用13#浮游生物網(wǎng)。采集方法與上述方法相同，將收集管內(nèi)的水樣注入標(biāo)本瓶后，立即加入甲醛溶液固定，至終濃度3%～5%（v/v）。所有樣品應(yīng)及時(shí)標(biāo)識(shí)，標(biāo)明采樣時(shí)間、地點(diǎn)、固定液名稱及濃度、監(jiān)測(cè)項(xiàng)目、采樣人員等內(nèi)容。7.1.2.2定量樣品采集7.1.2.2.1采樣位置水深小于5m，在水面下0.5m處采樣；水深5m～10m，在水面下0.5m和離底0.5m處采樣，等比例混合；水深大于10m，分別在水面下0.5m、中層和離底0.5m處采樣，等比例混合。7.1.2.2.2采樣方法定量樣品采集應(yīng)在定性樣品采集之前進(jìn)行。采集原生動(dòng)物、輪蟲(chóng)和無(wú)節(jié)幼體時(shí)，將采水器沉入到目標(biāo)水層，采集1L水樣到標(biāo)本瓶，立即加入魯哥氏液固定，至終濃度1%～1.5%（v/v）。采樣過(guò)程應(yīng)動(dòng)作輕、緩、穩(wěn)，避免其它擾動(dòng)。也可借用浮游植物定量樣品。浮游植物定量樣品采集方法按SL733執(zhí)行。采集枝角類、橈足類時(shí)，采集目標(biāo)水樣10L～50L，用25#浮游生物網(wǎng)過(guò)濾濃縮后注入標(biāo)本瓶。再將網(wǎng)放在水中（網(wǎng)口露出水面抖動(dòng)網(wǎng)衣使黏附在網(wǎng)上的浮游動(dòng)物聚集到網(wǎng)底，打開(kāi)閥門(mén)將收集到的樣本移入同一瓶中，重復(fù)3～5次。加入甲醛溶液固定，至終濃度約3%~5%（v/v）?，F(xiàn)場(chǎng)應(yīng)采集平行樣品，數(shù)量為采集樣品總數(shù)的10%～20%，每批次應(yīng)不少于1個(gè)。DB13/T6059—202567.1.3樣品鑒定樣品帶回實(shí)驗(yàn)室冷藏（4℃)保存，定性樣品在48h內(nèi)完成鑒定；定量固定樣品在一個(gè)月內(nèi)完成鑒定。根據(jù)原生動(dòng)物的大體密度，將經(jīng)48h沉降的標(biāo)本濃縮定容至20～50mL,充分搖勻，快速吸取0.1mL樣品置于0.1mL計(jì)數(shù)框內(nèi)，蓋上蓋玻片，在顯微鏡20×物鏡下全片計(jì)數(shù)。測(cè)定輪蟲(chóng)和無(wú)節(jié)幼體密度時(shí)，取上述濃縮后樣品充分搖勻，吸取1mL注入1mL計(jì)數(shù)框中，在顯微鏡10×或20×物鏡下全片計(jì)數(shù)。每個(gè)樣品計(jì)數(shù)2片（誤差不超過(guò)±15%），求出平均值。枝角類、橈足類密度測(cè)定時(shí)，將10L過(guò)濾的濃縮樣品搖勻，快速吸取1mL置于1mL計(jì)數(shù)框內(nèi)，在顯微鏡10×物鏡下計(jì)數(shù)。也可吸取適量水樣，均勻平鋪在培養(yǎng)皿中，在40×的解剖鏡下計(jì)數(shù)。每個(gè)樣品計(jì)數(shù)2片（誤差不超過(guò)±15%），求出平均值，若浮游動(dòng)物較少則需進(jìn)行全部計(jì)數(shù)。借助顯微鏡、浮游動(dòng)物分類工具書(shū)及智能分析系統(tǒng)等進(jìn)行鑒定，鑒定到屬，優(yōu)勢(shì)種群鑒定到種；計(jì)數(shù)工作在一個(gè)月內(nèi)完成。7.1.4數(shù)據(jù)分析7.1.4.1密度計(jì)算水體浮游動(dòng)物密度等于各類浮游動(dòng)物密度之和。浮游動(dòng)物密度按公式（1）計(jì)算。Ni=………（:）Ni——每升水樣中i類浮游動(dòng)物的個(gè)體數(shù)，個(gè)/L；C1——計(jì)數(shù)所得的個(gè)體數(shù)，個(gè)；V1——濃縮樣品體積，mL；V2——計(jì)算體積，mL；V——采樣量，L。7.1.4.2生物量計(jì)算7.1.4.2.1實(shí)測(cè)法。根據(jù)浮游動(dòng)物的近似幾何形狀，按對(duì)應(yīng)的體積公式計(jì)算生物體積。取適量樣品置于載玻片上，在顯微鏡下用毛細(xì)管將待測(cè)浮游動(dòng)物吸出后置于載玻片上（不加蓋玻片），用測(cè)微尺測(cè)量其長(zhǎng)、寬、厚。浮游動(dòng)物的體重（濕重）是其體積與密度（按水的密度計(jì)算）的乘積；無(wú)節(jié)幼體1個(gè)可按0.003mg濕重計(jì)算。7.1.4.2.2經(jīng)驗(yàn)公式法。根據(jù)實(shí)測(cè)法建立經(jīng)驗(yàn)公式進(jìn)行生物量計(jì)算。7.1.5資料整理記錄調(diào)查、鑒定所得數(shù)據(jù)（見(jiàn)附錄A表A.1）。7.2底棲大型無(wú)脊椎動(dòng)物7.2.1試劑和器具7.2.1.1試劑DB13/T6059—20257包含但不限于以下固定液：——乙醇溶液：濃度70%～75%；——甲醛溶液：濃度3%～5%。7.2.1.2器具包含但不限于以下：——采集器具：彼得遜采泥器、40目索伯網(wǎng)、40目D型抄網(wǎng)和40目網(wǎng)篩；——挑揀器具：圓頭鑷、眼科鑷和長(zhǎng)柄圓頭鑷；——標(biāo)本瓶：塑料廣口瓶（500mL或1000mL容量）、塑料自封袋；——顯微鏡：生物顯微鏡，體視顯微鏡；——電子天平：分度值為0.1mg；——其他：放大鏡、標(biāo)本整理箱、白瓷盤(pán)、培養(yǎng)皿、吸管和吸水紙等。7.2.2樣品采集7.2.2.1卵礫石底質(zhì)采集定性樣品時(shí)，可使用D型抄網(wǎng)，將D型抄網(wǎng)放置于準(zhǔn)備采樣的河底，使D型抄網(wǎng)的直邊緊貼河流底部，逆水流方向從河流下游向上游移動(dòng)D型抄網(wǎng)約1m，使樣品隨著攪動(dòng)和流水的沖刷進(jìn)入網(wǎng)內(nèi)，總面積約為1m2。采集定量樣品時(shí)，可使用索伯網(wǎng)進(jìn)行采集，將索伯網(wǎng)底部邊框緊貼于準(zhǔn)備采樣的河底，攪動(dòng)索伯網(wǎng)底部邊框內(nèi)的所有底質(zhì)，大型卵礫石可在網(wǎng)兜內(nèi)洗凈，小型卵礫石可直接放入網(wǎng)兜內(nèi)統(tǒng)一清洗，索伯網(wǎng)采樣次數(shù)應(yīng)不少于3次。采集的樣品用40目網(wǎng)篩過(guò)濾，直至所有底棲動(dòng)物都收集為止。用挑揀器具將篩網(wǎng)上肉眼可見(jiàn)的底棲動(dòng)物挑揀并立即放入塑料廣口瓶或塑料自封袋內(nèi)，并加入固定液浸沒(méi)樣品。7.2.2.2泥沙底質(zhì)定性樣品的采集方法同7.2.2.1的定性樣品采集。定量樣品的采集可使用1/16m2的彼得遜采泥器，采集次數(shù)不少于3次。樣品收集及處置方法同7.2.2.1。7.2.3樣品鑒定寡毛類和搖蚊幼蟲(chóng)應(yīng)制成玻片標(biāo)本后，在生物顯微鏡下借助分類工具書(shū)進(jìn)行種類鑒定；其它生物可直接用體視顯微鏡觀察，借助分類工具書(shū)進(jìn)行種類鑒定，記錄數(shù)量。7.2.4數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計(jì)各調(diào)查點(diǎn)位底棲動(dòng)物的種類和個(gè)體數(shù)，電子天平稱其濕重，計(jì)算底棲動(dòng)物的密度7.2.5資料整理記錄調(diào)查、鑒定所得數(shù)據(jù)（見(jiàn)附錄A表A.2和表A.3）。7.3水生維管植物7.3.1器具DB13/T6059—20258包含但不限于以下：——采樣工具：水草定量夾、帶柄手抄網(wǎng)、采樣耙、抓鉤和鐮刀；——天平：最大稱量500g，分度值0.001g；——樣品袋；——吸水紙；——標(biāo)本夾；——帶密封蓋的標(biāo)本瓶；——照相機(jī)。7.3.2樣品采集7.3.2.1樣線設(shè)置河流：垂直于河道按40m～100m間距設(shè)置至少3條樣線。湖泊和水庫(kù)：從湖岸到湖心方向500m范圍內(nèi)，在不同水深處按50m～100m間距設(shè)置至少3條樣線。樣線設(shè)置范圍包含所有的水生維管植物群落類型。7.3.2.2定性樣品采集在樣線內(nèi)采集不同物種大小適中的植株，選取其中具備根、莖、葉和完整生殖結(jié)構(gòu)的個(gè)體，采樣人員在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行物種識(shí)別，分類鑒定。對(duì)于不能識(shí)別的物種應(yīng)采集樣本，裝入樣品袋貼上標(biāo)簽運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室鑒定和標(biāo)本制作。如在非生殖季采樣，應(yīng)盡量使根、莖、葉齊全；如遇地下莖一并采集。7.3.2.3定量樣品采集在樣線內(nèi)設(shè)置0.25m2～1m2的方框，用水草定量夾、帶柄手抄網(wǎng)、采樣耙、抓鉤、鐮刀等工具采集方框內(nèi)的所有水生維管植物。去除枯死的枝、葉和污泥等雜質(zhì)，再去根，抹去植株表面水分，按不同物種分別統(tǒng)計(jì)干重和濕重。7.3.2.4樣品固定與保存當(dāng)需要留存標(biāo)本時(shí)，應(yīng)選取每種植物類型的代表性樣本，用吸水紙干燥、標(biāo)本夾固定，貼好標(biāo)簽。定期更換吸水紙，直到標(biāo)本完全干燥。在制作沉水植物標(biāo)本時(shí)，先使用吸水紙與紗布進(jìn)行固定，再放入標(biāo)本夾中進(jìn)行脫水干燥處理。樣品干燥平整后，存放在安全干燥的地方，長(zhǎng)期保存。7.3.3數(shù)據(jù)分析現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查時(shí)應(yīng)注意觀察、測(cè)量、記錄水體的水面面積、各類水生維管植物的分布面積，植被覆蓋率按照公式（2）計(jì)算：P=×100%...................(2)式中：P——植被覆蓋率；S1——沉水植物面積，m2；S2——浮水植物面積，m2；DB13/T6059—20259S3——漂浮植物面積，m2；S4——挺水植物面積，m2；S——水體總面積，m2。7.3.4資料整理記錄調(diào)查、鑒定所得數(shù)據(jù)（見(jiàn)附錄A表A.4和表A.5）。7,4著生藻類7.4.1試劑和器具7.4.1.1試劑包含但不限于以下：——魯哥氏液：稱取碘化鉀（KI）60g溶于100mL蒸餾水中，待完全溶解后加入40g碘（I2），搖動(dòng)至碘完全溶解后加蒸餾水定容至1000mL，然后存儲(chǔ)于棕色磨口試劑瓶中備用；——硅藻膠：一種折射率為1.73的合成樹(shù)脂，作為硅藻殼封固劑；——濃鹽酸：濃度36%～38%；——濃硝酸：濃度65%～68%；——濃硫酸：濃度98%；——乙醇：濃度95%。7.4.1.2器具包含但不限于以下：——樣品瓶：50mL、100mL聚乙烯瓶；——離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥3000r/min，配備2.5mL離心管支架；——水浴鍋；——加熱板；——硅藻計(jì)；——篩絹網(wǎng)兜：孔徑為0.064mm；——微波消解儀；——生物顯微鏡：配備10×、20×、40×、100×（油鏡）物鏡及10×或15×目鏡的光學(xué)顯微鏡；——計(jì)數(shù)框：容積為0.1mL、1.0mL、5.0mL；——其他：鑷子、刮刀、抹刀、硬質(zhì)毛刷、搪瓷盤(pán)、洗瓶和解剖刀。7.4.2樣品采集7.4.2.1樣品采集范圍應(yīng)在河流調(diào)查點(diǎn)位上下游50m范圍內(nèi)采集樣品；湖泊和水庫(kù)應(yīng)在調(diào)查點(diǎn)位沿湖（庫(kù)）岸線左右50m范圍內(nèi)的湖（庫(kù)）濱帶淺水區(qū)采集樣品。7.4.2.2采樣方法7.4.2.2.1原位基質(zhì)法DB13/T6059—2025適用于卵礫石底質(zhì)的河流、湖泊和水庫(kù)。在調(diào)查區(qū)域內(nèi)選擇卵石、礫石、巖塊、磚塊、秸稈等易于刮取的基質(zhì)，將采集獲得的基質(zhì)在水中輕輕晃動(dòng)，以清除松散附著的表面污染物（如泥沙、有機(jī)碎屑和死亡生物個(gè)體將基質(zhì)從水中取出，用蒸餾水輕微沖洗基質(zhì)表面清除松散泥沙后，置于潔凈搪瓷盤(pán)中。使用刮刀、硬質(zhì)毛刷反復(fù)刮刷并沖洗基質(zhì)表面，直至基質(zhì)表面無(wú)肉眼可見(jiàn)的著生藻類印記，總面積約為100cm2，將樣品轉(zhuǎn)入樣品瓶中，用少量蒸餾水沖洗搪瓷盤(pán)一并收于樣品瓶中。標(biāo)識(shí)并記錄（見(jiàn)附錄A表A.6）?；|(zhì)采集數(shù)量應(yīng)不少于3個(gè)，基質(zhì)表面采集樣品數(shù)量應(yīng)不少于3次。7.4.2.2.2人工基質(zhì)法適用于非卵礫石底質(zhì)的河流、湖泊和水庫(kù)。在調(diào)查區(qū)域內(nèi)使用硅藻計(jì)、磚塊等人工基質(zhì)材料采集樣品。每個(gè)調(diào)查區(qū)域投放至少3個(gè)人工基質(zhì)，浸沒(méi)深度20cm～30cm，并與水中固定物相連，放置時(shí)間至少15日。人工基質(zhì)投放應(yīng)避開(kāi)急流、漩渦、航道等，以減少被破壞風(fēng)險(xiǎn)。待滿足放置時(shí)間后，將人工基質(zhì)按照7.4.2.2.1方法收集，標(biāo)識(shí)并記錄（見(jiàn)附錄A表A.6）。7.4.2.3樣品固定與保存樣品需遮光冷藏（4℃)保存，并在24h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室處理；若時(shí)間無(wú)法滿足，添加魯哥氏液固定，至終濃度10%～15%（v/v）。7.4.3樣品鑒定樣品中多含有大量的泥沙，鑒定前應(yīng)劇烈搖勻后靜置30s，使泥沙沉淀至樣品瓶底，吸取液體中下部的樣品，定容到30mL，用于定性、定量鑒定分析。著生藻類樣品的鑒定包括硅藻和非硅藻。7.4.3.1硅藻的鑒定7.4.3.1.1預(yù)處理預(yù)處理方法按HJ1295執(zhí)行。7.4.3.1.2樣品清洗將預(yù)處理后的樣品轉(zhuǎn)移至2.5mL離心管內(nèi)，3000r/min離心5min后，去除上清液，加入蒸餾水洗滌沉淀，多次離心，直至上清液呈中性。7.4.3.1.3樣品干燥清洗后的樣品移除上清液，加入95%乙醇溶液定容至2.5mL保存。充分搖勻樣品，吸取10μL～15μL均勻涂在蓋玻片上，樣品面朝上放置于溫度不超過(guò)50℃加熱板上干燥。7.4.3.1.4制片在載玻片上滴一滴硅藻膠，將干燥后的蓋玻片有硅藻的一面朝下倒扣在載玻片上，使硅藻膠均勻覆蓋整個(gè)蓋玻片，制成封存片。如有氣泡，使用鑷子輕輕按壓將氣泡擠出。封存片應(yīng)干燥2～3日之后進(jìn)行鑒定和計(jì)數(shù)。DB13/T6059—20257.4.3.1.5種類鑒定將硅藻封存片置于光學(xué)顯微鏡10×100倍油鏡下鑒定和計(jì)數(shù)，優(yōu)勢(shì)物種鑒定到種，其他種類鑒定到屬。疑難種類保存標(biāo)本以備進(jìn)一步鑒定。定量樣品至少計(jì)數(shù)400個(gè)硅藻細(xì)胞，完整及破損面積不超過(guò)1/4的硅藻細(xì)胞均需鑒定和計(jì)數(shù)。7.4.3.2非硅藻的鑒定非硅藻的鑒定按SL733執(zhí)行。疑難種類宜保存標(biāo)本以備進(jìn)一步鑒定。7.4.4數(shù)據(jù)分析7.4.4.1密度計(jì)算著生藻類密度按照公式(3)計(jì)算。Nip=............................(3)Nip——i種密度，即單位面積個(gè)體數(shù)量，個(gè)/cm2；Ci——i種計(jì)數(shù)個(gè)體數(shù)，個(gè)；V3——樣品定容體積，mL；V4——樣品鏡檢觀察體積，mL；S5——采樣面積，cm2。7.4.4.2生物量計(jì)算著生藻類生物量計(jì)算方法按SL733執(zhí)行。7.4.5資料整理記錄調(diào)查、鑒定所得數(shù)據(jù)（見(jiàn)附錄A表A.7）。7.5魚(yú)類7.5.1試劑和器具7.5.1.1試劑包含但不限于以下固定液：——乙醇溶液：濃度70%～75%；——甲醛溶液：濃度5%～10%。7.5.1.2器具包含但不限于以下：——樣品箱、標(biāo)本瓶（箱）；——稱重工具：電子秤（量程不小于1kg，精度0.1g）、提秤、臺(tái)秤和電子天平——量魚(yú)尺：直尺、卷尺和量魚(yú)板；DB13/T6059—2025——解剖工具：解剖刀、解剖盤(pán)和鑷子；——顯微鏡：光學(xué)顯微鏡和體視顯微鏡；——鱗片袋；——網(wǎng)具：拖網(wǎng)類、刺網(wǎng)類、圍網(wǎng)類、地拉網(wǎng)類和籠壺類等；——照相機(jī)；——純藍(lán)色或白色的魚(yú)類拍攝背景板。7.5.2調(diào)查方法7.5.2.1資料收集收集水域魚(yú)類資源的有關(guān)歷史文獻(xiàn)資料，主要包括地方魚(yú)類志、公開(kāi)發(fā)表的魚(yú)類資源方面的科研論文、相關(guān)部門(mén)統(tǒng)計(jì)資料等。7.5.2.2訪談訪問(wèn)法通過(guò)對(duì)漁民及相關(guān)專家等知情人士進(jìn)行訪談訪問(wèn)，獲取相關(guān)資料或信息，并將主要內(nèi)容進(jìn)行記錄。7.5.2.3捕撈法針對(duì)水域的典型棲息環(huán)境，選擇合適的網(wǎng)具進(jìn)行捕撈，并結(jié)合漁業(yè)捕撈生產(chǎn)采集魚(yú)類樣品。常用的捕撈調(diào)查方法包括拖網(wǎng)調(diào)查法、張網(wǎng)調(diào)查法等，在同一類型調(diào)查中，應(yīng)注意保持調(diào)查船性能和調(diào)查網(wǎng)具的性能和規(guī)格的一致性。7.5.2.4自動(dòng)觀測(cè)法借助智能設(shè)備自動(dòng)獲取魚(yú)類活動(dòng)的影像資料，定期提取并統(tǒng)計(jì)觀測(cè)結(jié)果。7.5.3樣品處理漁獲樣品總質(zhì)量在20kg以下時(shí)，全部取樣分析；大于20kg時(shí)，從中挑出大型的和稀有的標(biāo)本后，再隨機(jī)取出漁獲物分析樣品20kg左右，然后把余下的漁獲物按品種和不同規(guī)格裝箱，并放入標(biāo)明采集時(shí)間、地點(diǎn)和漁具類型的標(biāo)簽，記錄該調(diào)查點(diǎn)位準(zhǔn)確漁獲總質(zhì)量(kg)。不具備現(xiàn)場(chǎng)分析條件的情況下，應(yīng)及時(shí)冷藏（4℃)保存；特殊樣品宜用紗布(袋)包裹,置于濃度為5%～10%的甲醛溶液或70%～75%的乙醇溶液的容器內(nèi)保存，并向較大的個(gè)體體腔內(nèi)注射固定液，以體腔鼓脹為宜。固定液的體積應(yīng)為動(dòng)物體積的10倍以上，應(yīng)在2～3日后更換一次。7.5.4樣品鑒定進(jìn)行鑒定的物種，每個(gè)物種取不同發(fā)育階段的個(gè)體30尾(個(gè))，不足30尾(個(gè))的全部取樣，現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行拍照、鑒定，或冷藏（4℃)保存后帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行鑒定。樣品均應(yīng)鑒定至種，計(jì)數(shù)和稱重，并測(cè)量體長(zhǎng)范圍和體重范圍。7.5.4.1魚(yú)類全長(zhǎng)的鑒定魚(yú)體最前端至尾鰭末端的水平長(zhǎng)度，測(cè)量時(shí)應(yīng)從魚(yú)的上頜前端或吻端開(kāi)始，一直測(cè)量到尾鰭末端，確保測(cè)量線與魚(yú)體保持水平。DB13/T6059—20257.5.4.2魚(yú)類體重的鑒定迅速吸去魚(yú)體表面附帶的水滴，根據(jù)魚(yú)體大小選用適用感量的量具稱重。7.5.5數(shù)據(jù)分析7.5.5.1種類組成計(jì)算統(tǒng)計(jì)所有樣品的種數(shù)，并確定各分類階元中的物種數(shù)和分布特征，按公式（4）計(jì)算。Fi——第i科魚(yú)類的種類數(shù)百分比；Ti——第i科魚(yú)類的種類數(shù)；T——總種類數(shù)。7.5.5.2群落結(jié)構(gòu)計(jì)算統(tǒng)計(jì)不同物種的漁獲物數(shù)量，計(jì)算其相對(duì)種群數(shù)量，按公式（5）計(jì)算。Cif——第i種魚(yú)類的尾數(shù)百分比或重量百分比；nif——第i種魚(yú)類的尾數(shù)或重量；Nf——漁獲物的總尾數(shù)或總重量。7.5.5.3優(yōu)勢(shì)種群分析計(jì)算魚(yú)類優(yōu)勢(shì)種群的評(píng)價(jià)按公式(6)計(jì)算，用相對(duì)重要性指標(biāo)（IRI）進(jìn)行分析。IRI=(Cn+Cw)F..........................(6)Cn——某種類的尾數(shù)占總漁獲尾數(shù)的百分比；Cw——某種類的重量占總漁獲重量的百分比；F——某種類在調(diào)查中被捕獲的點(diǎn)位數(shù)與總調(diào)查點(diǎn)位數(shù)之比或?yàn)槟撤N類在樣品中的出現(xiàn)次數(shù)與總調(diào)查次數(shù)之比。IRI≥500的物種定為優(yōu)勢(shì)種；100≤IRI＜500的物種定為常見(jiàn)種；10≤IRI＜100的物種定為一般種；IRI＜10的物種定為少見(jiàn)種。7.5.6資料整理記錄調(diào)查、鑒定所得數(shù)據(jù)（見(jiàn)附錄A表A.8和表A.9）。7.6兩棲爬行動(dòng)物DB13/T6059—20257.6.1器具包含但不限于以下：——照相機(jī)、紅外相機(jī)；——攝像機(jī)；——標(biāo)本瓶（箱）；——帶柄網(wǎng)具；——應(yīng)急燈、頭燈。7.6.2調(diào)查方法7.6.2.1資料收集法收集調(diào)查區(qū)域內(nèi)兩棲、爬行動(dòng)物的有關(guān)歷史文獻(xiàn)、調(diào)查成果、科研論文等。7.6.2.2訪談訪問(wèn)法通過(guò)對(duì)農(nóng)業(yè)、林業(yè)、生態(tài)環(huán)境等相關(guān)部門(mén)及當(dāng)?shù)鼐用?、專家等知情人士進(jìn)行訪談訪問(wèn)，獲取資料信息。7.6.2.3樣線法天然河流、湖泊和水庫(kù)，宜選擇受人類活動(dòng)影響很少的河段或湖（庫(kù)），沿岸邊水陸交匯處設(shè)置一條長(zhǎng)500m～1000m、寬5m～10m的樣線。對(duì)樣線起點(diǎn)和終點(diǎn)進(jìn)行準(zhǔn)確定位。沿樣線保持行進(jìn)速度在2km/h左右，觀測(cè)并記錄所看到的物種類型、個(gè)體數(shù)量和生境等信息，填寫(xiě)兩棲、爬行動(dòng)物樣線法調(diào)查記錄表（見(jiàn)附錄A表A.10）?，F(xiàn)場(chǎng)調(diào)查時(shí)，應(yīng)只做觀測(cè)和記錄，不宜采集標(biāo)本。調(diào)查現(xiàn)場(chǎng)需同時(shí)拍攝物種及生境照片，照片需包含天氣、經(jīng)緯度、地址和時(shí)間等信息；每個(gè)物種需拍攝3張以上照片，能準(zhǔn)確反映物種外部形態(tài)特征；生境照片3張以上，能反映物種棲息地基本情況。7.6.2.4自動(dòng)觀測(cè)法借助智能設(shè)備自動(dòng)獲取物種活動(dòng)的影像資料，定期提取并統(tǒng)計(jì)觀測(cè)結(jié)果。7.6.3樣品鑒定調(diào)查現(xiàn)場(chǎng)能鑒定的現(xiàn)場(chǎng)鑒定；不能現(xiàn)場(chǎng)鑒定的借助兩棲、爬行動(dòng)物分類工具書(shū)及智能分析系統(tǒng)等，對(duì)現(xiàn)場(chǎng)拍攝以及自動(dòng)獲取的物種影像資料進(jìn)行鑒定。7.6.4數(shù)據(jù)分析種群相對(duì)密度計(jì)算方法見(jiàn)公式（7）。D=Niar..........................(7)iLi×WiDi——樣線i的種群密度，個(gè)/m2；Niar——樣線i內(nèi)物種的個(gè)體數(shù)，個(gè)；DB13/T6059—2025Li——樣線i的長(zhǎng)度，m；Wi——樣線i種的寬度，m。7.6.5資料整理記錄調(diào)查、鑒定所得數(shù)據(jù)等（見(jiàn)附錄A表A.11）。7.7水鳥(niǎo)7.7.1器具包含但不限于以下：——野外防護(hù)裝備；——單筒望遠(yuǎn)鏡、雙筒望遠(yuǎn)鏡；——手持式全球定位系統(tǒng)；——高清相機(jī)、紅外相機(jī)；——錄音筆；——測(cè)距儀；——計(jì)數(shù)器。7.7.2調(diào)查方法7.7.2.1資料收集法收集調(diào)查地水鳥(niǎo)的影像資料、文獻(xiàn)記錄、調(diào)查成果等。7.7.2.2訪談訪問(wèn)法通過(guò)對(duì)林業(yè)、生態(tài)環(huán)境、農(nóng)業(yè)等相關(guān)部門(mén)及當(dāng)?shù)鼐用?、觀鳥(niǎo)愛(ài)好者等知情人士進(jìn)行訪談訪問(wèn)，獲取資料信息。7.7.2.3人工觀測(cè)法在水鳥(niǎo)的覓食區(qū)、棲息地、主要遷徙路徑預(yù)設(shè)固定點(diǎn)，應(yīng)覆蓋水鳥(niǎo)的主要分布區(qū)，利用利用高清相機(jī)拍攝水鳥(niǎo)的照片和生境照片，照片信息應(yīng)包括拍攝日期、時(shí)間以及拍攝點(diǎn)的地理位置信息；生境照片不少于3張,能反應(yīng)水鳥(niǎo)棲息地的基本情況。7.7.2.4自動(dòng)觀測(cè)法借助智能設(shè)備自動(dòng)獲取水鳥(niǎo)活動(dòng)的影像資料，定期提取并統(tǒng)計(jì)觀測(cè)結(jié)果。7.7.3樣品鑒定依拍攝影像資料進(jìn)行鑒定，做好季、年度統(tǒng)計(jì)，填寫(xiě)附錄A表A.13。7.7.4資料整理及時(shí)整理調(diào)查記錄表格、照片等數(shù)據(jù)。8質(zhì)量控制DB13/T6059—20258.1.1制定合理的采樣計(jì)劃，用符合質(zhì)量要求的儀器設(shè)備，準(zhǔn)確定位采樣地點(diǎn)，保證樣品的代表性、可比性。8.1.2嚴(yán)格按照方法采集樣品，樣品標(biāo)識(shí)清晰，信息完整。8.1.3采樣結(jié)束后，及時(shí)清洗采樣設(shè)備，防止污染。8.1.4底棲