丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移的調(diào)控機制：基于MTA1和Wnt1的研究一、引言1.1研究背景與意義在當今醫(yī)學領(lǐng)域，腫瘤嚴重威脅著人類的健康和生命。外科摘除手術(shù)作為大多數(shù)實體瘤的主要治療方法，在腫瘤治療中占據(jù)著關(guān)鍵地位。而丙泊酚，作為一種廣泛應(yīng)用于腫瘤摘除手術(shù)的靜脈麻醉藥，以其誘導平穩(wěn)、麻醉恢復快等顯著特點，在臨床麻醉中備受青睞。除了出色的麻醉效果，丙泊酚還被發(fā)現(xiàn)具有多種非麻醉作用，其中其對腫瘤的影響備受關(guān)注，大量研究表明丙泊酚能夠抑制多種人類惡性腫瘤，如乳腺癌、膠質(zhì)瘤和胰腺癌。然而，丙泊酚對腫瘤擴散的影響及其背后復雜的分子機制仍有待深入探究。腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的重要特征之一，也是導致腫瘤治療失敗和患者死亡的主要原因。一旦腫瘤細胞從原發(fā)部位脫離，通過血液或淋巴系統(tǒng)等途徑遷移到身體其他部位并形成新的轉(zhuǎn)移灶，病情往往會急劇惡化，治療難度大幅增加。據(jù)統(tǒng)計，大部分癌癥相關(guān)死亡案例都與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。因此，深入研究腫瘤轉(zhuǎn)移的相關(guān)機制，對于開發(fā)有效的治療策略、改善患者預后至關(guān)重要。在腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)機制的研究中，MTA1和Wnt1信號通路扮演著重要角色。MTA1即腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1，編碼的蛋白質(zhì)是核心組蛋白去乙?；笍秃衔铮∟uRD）的成員之一，參與了多種細胞生物學過程和信號通路的調(diào)控。研究表明，MTA1在腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移、增殖、凋亡和耐藥性等方面都發(fā)揮著重要作用。在腫瘤轉(zhuǎn)移前期，MTA1能夠增強腫瘤細胞的侵入和黏附能力，為腫瘤轉(zhuǎn)移創(chuàng)造條件；在轉(zhuǎn)移過程中，MTA1通過調(diào)節(jié)細胞外基質(zhì)的編碼、細胞周期啟動子、細胞黏附分子和其他關(guān)鍵分子的表達，進一步促進腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移和入侵。而Wnt1作為Wnt信號通路的關(guān)鍵配體，該信號通路在胚胎發(fā)育、細胞增殖、分化和遷移等過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中，Wnt1異常激活可導致細胞增殖失控、凋亡受阻，促進腫瘤細胞的遷移和侵襲，進而增加腫瘤轉(zhuǎn)移的風險。探究丙泊酚與荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1、Wnt1之間的關(guān)系具有極其重要的意義。從理論層面來看，這有助于我們更深入、全面地理解丙泊酚對腫瘤的作用機制，進一步完善腫瘤轉(zhuǎn)移的理論體系。目前，雖然已有研究表明丙泊酚對腫瘤細胞有一定影響，但對于其在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中與關(guān)鍵基因和信號通路的相互作用，仍存在許多未知。通過本研究，有望揭示其中的內(nèi)在聯(lián)系，為后續(xù)相關(guān)研究提供新的思路和理論依據(jù)。從臨床實踐角度而言，若能明確丙泊酚對腫瘤肺轉(zhuǎn)移及相關(guān)基因和信號通路的影響，將為腫瘤手術(shù)麻醉藥物的選擇和麻醉管理方案的制定提供有力的科學指導。這不僅有助于降低腫瘤患者術(shù)后轉(zhuǎn)移復發(fā)的風險，提高患者的生存率和生活質(zhì)量，還能為優(yōu)化腫瘤綜合治療策略提供參考，具有重大的臨床應(yīng)用價值和社會經(jīng)濟效益。1.2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀在國外，丙泊酚對腫瘤細胞的影響研究已取得了一定成果。申遠教授與謝仲淙教授的合作團隊研究發(fā)現(xiàn)，臨床廣泛使用的靜脈麻醉藥丙泊酚可使腫瘤細胞對血管內(nèi)皮的黏附能力顯著增高，通過小鼠實驗進一步說明丙泊酚有可能增加結(jié)腸癌細胞的侵襲轉(zhuǎn)移潛能，造成肺部遠處轉(zhuǎn)移，并證明了丙泊酚促進腫瘤細胞黏附和伸展的效應(yīng)的作用機制是通過調(diào)節(jié)GABAAR/TRIM21/Src信號通路促進腫瘤細胞在肺部的轉(zhuǎn)移。在腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的研究中，國外學者對MTA1和Wnt1在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用進行了深入探討。有研究表明，MTA1在腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移、增殖、凋亡和耐藥性等方面都發(fā)揮著重要作用，其在腫瘤轉(zhuǎn)移前期，增強了腫瘤細胞的侵入和黏附能力，在轉(zhuǎn)移過程中，通過調(diào)節(jié)細胞外基質(zhì)的編碼、細胞周期啟動子、細胞黏附分子和其他關(guān)鍵分子的表達，促進腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移和入侵。關(guān)于Wnt1，研究發(fā)現(xiàn)其異常激活可導致細胞增殖失控、凋亡受阻，促進腫瘤細胞的遷移和侵襲，進而增加腫瘤轉(zhuǎn)移的風險，Wnt1通過與細胞表面受體結(jié)合，激活下游的信號傳導通路，調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達，從而影響腫瘤細胞的生物學行為。國內(nèi)對于丙泊酚與腫瘤關(guān)系的研究也在不斷推進。高雨彤、余相地等學者指出丙泊酚能夠抑制多種人類惡性腫瘤，如乳腺癌、膠質(zhì)瘤和胰腺癌，其除直接影響關(guān)鍵的RNAs和信號通路外，還調(diào)節(jié)人體免疫功能，影響免疫抑制程度。在丙泊酚對腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因影響的研究上，有研究分析了丙泊酚對乳腺癌MCF-7細胞中miR-133a表達的影響，探討其抑制乳腺癌增殖和侵襲的可能分子作用機制，發(fā)現(xiàn)丙泊酚處理抑制MCF-7細胞增殖，表現(xiàn)出濃度依賴性。在腫瘤轉(zhuǎn)移機制研究方面，國內(nèi)學者也關(guān)注到MTA1和Wnt1的重要作用。有研究通過基因敲除等實驗手段，探究MTA1對腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的影響，發(fā)現(xiàn)MTA1在乳腺癌細胞中發(fā)揮著重要的促進增殖和侵襲的作用。對Wnt1信號通路的研究則表明，其在肝癌、胃癌等多種腫瘤中存在異常激活，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。盡管國內(nèi)外在丙泊酚對腫瘤細胞影響以及腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的研究取得了一定進展，但仍存在不足。目前對于丙泊酚影響腫瘤轉(zhuǎn)移的具體分子機制尚未完全明確，尤其是丙泊酚與荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1、Wnt1之間的內(nèi)在聯(lián)系，還缺乏深入系統(tǒng)的研究。在研究模型上，現(xiàn)有的細胞和動物模型無法完全模擬臨床麻醉手術(shù)過程，缺乏不使用麻醉藥物做對照組的腫瘤切除小鼠模型，即腫瘤自發(fā)轉(zhuǎn)移模型，這可能導致研究結(jié)果與臨床實際情況存在偏差。此外，對于MTA1和Wnt1在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中的相互作用以及丙泊酚如何通過影響它們的表達和功能來調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移，也有待進一步探索。1.3研究目的與創(chuàng)新點本研究旨在深入探究丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1、Wnt1表達的影響，并分析其可能存在的量效關(guān)系。通過建立荷瘤大鼠模型，給予不同劑量的丙泊酚干預，觀察腫瘤肺轉(zhuǎn)移情況，檢測MTA1和Wnt1的表達水平，從而揭示丙泊酚在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中的作用機制，為臨床腫瘤手術(shù)麻醉中丙泊酚的合理使用提供科學依據(jù)。本研究的創(chuàng)新點主要體現(xiàn)在研究視角和機制探討兩個方面。在研究視角上，從MTA1和Wnt1基因表達的角度出發(fā)，探究丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移的影響，這是一個相對新穎的研究視角，目前國內(nèi)外相關(guān)研究較少。通過這一視角，有望揭示丙泊酚影響腫瘤轉(zhuǎn)移的潛在分子機制，為丙泊酚在腫瘤手術(shù)麻醉中的應(yīng)用提供新的理論支持。在機制探討方面，本研究不僅關(guān)注丙泊酚對腫瘤轉(zhuǎn)移的直接影響，還深入分析其與MTA1、Wnt1之間的內(nèi)在聯(lián)系，以及它們在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中的相互作用機制。這種多維度的機制探討，有助于更全面、深入地理解丙泊酚對腫瘤轉(zhuǎn)移的影響，為后續(xù)相關(guān)研究提供新的思路和方向。二、實驗材料與方法2.1實驗動物本實驗選用40只清潔級Fischer344雄性大鼠，這一選擇具有多方面的考量。Fischer344大鼠是一種近交系大鼠，具有遺傳背景穩(wěn)定、個體差異小的特點，這使得實驗結(jié)果具有更高的一致性和可重復性，能有效減少因個體差異導致的實驗誤差，為實驗的準確性和可靠性提供了堅實保障。同時，其對多種腫瘤的易感性較高，尤其適合用于構(gòu)建腫瘤轉(zhuǎn)移模型，能夠更有效地模擬腫瘤在體內(nèi)的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程，從而為研究丙泊酚對腫瘤肺轉(zhuǎn)移的影響提供理想的動物模型。這些大鼠的周齡為12-14周齡，體重在200-220g之間。處于這一周齡和體重范圍的大鼠，身體各項機能發(fā)育較為成熟，生理狀態(tài)相對穩(wěn)定，對實驗操作和藥物處理的耐受性較好，既能夠保證實驗過程中大鼠的健康狀況，又能確保實驗結(jié)果不受大鼠生長發(fā)育階段差異的干擾。實驗前后，大鼠均飼養(yǎng)在標準動物實驗室中。實驗室室溫嚴格控制在25-27℃，濕度保持在50%-70%，這樣的溫濕度條件符合大鼠的生理需求，有助于維持大鼠的正常生理狀態(tài)，減少環(huán)境因素對實驗結(jié)果的影響。5只大鼠飼養(yǎng)在同一籠中，保證了它們有足夠的活動空間，同時也模擬了一定的社會環(huán)境，避免大鼠因單獨飼養(yǎng)產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)。大鼠自由攝取食物和水，滿足其營養(yǎng)需求，確保其健康生長。早晚8：00進行燈光變換，避免強光刺激，為大鼠營造了一個接近自然晝夜節(jié)律的光照環(huán)境，有利于維持大鼠的正常生物鐘，進一步保障實驗結(jié)果的準確性。2.2實驗藥品與試劑本實驗所使用的藥品和試劑均具有明確的來源和嚴格的質(zhì)量把控。丙泊酚注射液，規(guī)格為20ml:0.2g，購自廣東嘉博制藥有限公司。丙泊酚作為實驗的關(guān)鍵藥物，其純度和質(zhì)量直接影響實驗結(jié)果的準確性和可靠性。廣東嘉博制藥有限公司是一家在制藥領(lǐng)域具有良好聲譽和嚴格生產(chǎn)標準的企業(yè)，確保了所提供丙泊酚的高質(zhì)量。其生產(chǎn)過程遵循嚴格的質(zhì)量管理體系，從原材料采購到成品出廠，經(jīng)過多道質(zhì)量檢測工序，保證了丙泊酚的有效成分含量穩(wěn)定，雜質(zhì)含量極低。戊巴比妥鈉，純度高達99%，購自上海源葉生物科技有限公司。戊巴比妥鈉在實驗中用于大鼠的麻醉，其高純度保證了麻醉效果的穩(wěn)定性和一致性。上海源葉生物科技有限公司專注于生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售，擁有先進的生產(chǎn)技術(shù)和嚴格的質(zhì)量控制流程。在戊巴比妥鈉的生產(chǎn)過程中，通過高效的分離和提純技術(shù)，去除了可能存在的雜質(zhì)，確保了產(chǎn)品的高純度。MADB106腫瘤細胞系，來源于武漢大學中國典型培養(yǎng)物保藏中心。該細胞系是乳腺癌肺轉(zhuǎn)移癌細胞經(jīng)Fischer344大鼠卵化培養(yǎng)的高選擇性細胞系，經(jīng)靜脈注射后高選擇性地種植在大鼠肺部形成轉(zhuǎn)移瘤，是構(gòu)建荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移模型的關(guān)鍵材料。武漢大學中國典型培養(yǎng)物保藏中心作為專業(yè)的細胞保藏機構(gòu)，對MADB106腫瘤細胞系的保存和傳代有著嚴格的標準和規(guī)范。在細胞的保存過程中，采用先進的冷凍保存技術(shù)，確保細胞的活性和生物學特性不受影響；在細胞傳代過程中，嚴格控制培養(yǎng)條件，保證細胞的遺傳穩(wěn)定性。RMPI1640培養(yǎng)液購自美國Gibco公司，該公司在生物試劑領(lǐng)域處于領(lǐng)先地位，其生產(chǎn)的RMPI1640培養(yǎng)液營養(yǎng)成分豐富且穩(wěn)定，能夠為MADB106腫瘤細胞的生長提供良好的環(huán)境。培養(yǎng)液中含有多種氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，滿足了腫瘤細胞生長和代謝的需求。同時，Gibco公司嚴格控制生產(chǎn)過程中的質(zhì)量標準，確保每一批次的培養(yǎng)液質(zhì)量穩(wěn)定，為細胞培養(yǎng)實驗的可靠性提供了保障。胎牛血清購自杭州四季青生物工程材料有限公司，血清中富含多種生長因子和營養(yǎng)成分，對細胞的生長和增殖起著重要作用。杭州四季青生物工程材料有限公司在血清生產(chǎn)方面擁有豐富的經(jīng)驗和先進的技術(shù)，通過嚴格的采集和處理工藝，確保胎牛血清的質(zhì)量和安全性。在血清采集過程中，嚴格篩選供體動物，保證血清中無病原體污染；在血清處理過程中，采用先進的過濾和除菌技術(shù)，去除可能存在的雜質(zhì)和微生物。雙抗（青霉素-鏈霉素混合液）購自北京索萊寶科技有限公司，用于防止細胞培養(yǎng)過程中的細菌污染，確保細胞培養(yǎng)環(huán)境的無菌性。雙抗中的青霉素和鏈霉素分別對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌具有抑制作用，兩者協(xié)同作用，有效地防止了細菌在細胞培養(yǎng)液中的生長和繁殖。北京索萊寶科技有限公司在生物試劑生產(chǎn)方面具有較高的技術(shù)水平和嚴格的質(zhì)量控制體系，保證了雙抗的活性和穩(wěn)定性。免疫組化檢測試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司，該試劑盒為檢測MTA1和Wnt1的表達提供了可靠的工具。試劑盒中包含了免疫組化實驗所需的各種試劑，如抗體、顯色劑等，且各試劑之間具有良好的兼容性和穩(wěn)定性。武漢博士德生物工程有限公司專注于生物技術(shù)領(lǐng)域的研發(fā)和生產(chǎn)，其生產(chǎn)的免疫組化檢測試劑盒經(jīng)過多次優(yōu)化和驗證，具有靈敏度高、特異性強的特點，能夠準確地檢測出目標蛋白的表達水平。在整個實驗過程中，對藥品和試劑的保存和使用均嚴格按照相關(guān)標準和操作規(guī)程進行。所有試劑在使用前均進行質(zhì)量檢查，確保其符合實驗要求。藥品和試劑的保存條件也嚴格控制，如丙泊酚注射液需在4-25℃條件下貯存，不能冰凍；戊巴比妥鈉應(yīng)密封保存，避免受潮和氧化；細胞培養(yǎng)液和血清需在低溫條件下保存，以保持其生物活性。這些嚴格的質(zhì)量控制措施，有效地保證了實驗結(jié)果的準確性和可靠性，為深入探究丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1、Wnt1表達的影響奠定了堅實的基礎(chǔ)。2.3實驗儀器本實驗所使用的儀器均具有較高的精度和穩(wěn)定性，為實驗的順利進行和結(jié)果的準確性提供了有力保障。大容量低速離心機，型號為TDL-5-A，購自上海安亭科學儀器廠。該離心機轉(zhuǎn)速范圍為0-4000r/min，最大相對離心力可達2800×g，容量為6×50ml。在實驗中，主要用于細胞培養(yǎng)液的分離和沉淀，能夠快速、有效地將細胞與培養(yǎng)液分離，確保細胞培養(yǎng)環(huán)境的純凈。其高精度的轉(zhuǎn)速控制和穩(wěn)定的運行性能，保證了細胞分離的效果和實驗結(jié)果的重復性。顯微鏡選用日本Olympus公司生產(chǎn)的BX53型顯微鏡，配備了高分辨率的光學鏡頭和先進的成像系統(tǒng)，能夠清晰地觀察細胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。在實驗中，用于觀察MADB106腫瘤細胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化，以及肺組織切片中腫瘤轉(zhuǎn)移灶的情況。其高清晰度的成像和精準的對焦系統(tǒng)，有助于準確判斷腫瘤細胞的特征和轉(zhuǎn)移情況，為實驗結(jié)果的分析提供了直觀的依據(jù)。免疫組化染色采用廈門通靈生物醫(yī)藥科技股份有限公司生產(chǎn)的Aliya-B4型自動免疫組化染色儀。該儀器能夠自動完成免疫組化染色的各個步驟，包括脫蠟、水化、抗原修復、抗體孵育、顯色等，大大提高了實驗效率和染色結(jié)果的一致性。其精確的試劑分配系統(tǒng)和穩(wěn)定的溫度控制功能，確保了染色過程的準確性和可靠性，能夠準確地檢測出MTA1和Wnt1在腫瘤組織中的表達水平。圖像分析系統(tǒng)選用IPP（Image-ProPlus）軟件，這是一款功能強大的圖像分析軟件，能夠?qū)︼@微鏡下拍攝的圖像進行定量分析。在實驗中，利用IPP軟件對免疫組化染色后的圖像進行分析，測量MTA1和Wnt1陽性表達區(qū)域的面積、光密度等參數(shù)，從而對其表達水平進行量化分析。該軟件具有操作簡便、分析準確的特點，能夠為實驗結(jié)果提供客觀、準確的數(shù)據(jù)支持。電子天平采用賽多利斯科學儀器（北京）有限公司生產(chǎn)的BSA224S-CW型分析天平，精度可達0.1mg。在實驗中，用于精確稱量藥品和試劑，如丙泊酚、戊巴比妥鈉等，確保實驗中藥物劑量的準確性。其高精度的稱量性能和穩(wěn)定的測量結(jié)果，為實驗的準確性提供了重要保障。CO?細胞培養(yǎng)箱購自美國ThermoFisherScientific公司，型號為3111。該培養(yǎng)箱能夠精確控制溫度、濕度和CO?濃度，為MADB106腫瘤細胞的培養(yǎng)提供了穩(wěn)定的環(huán)境。溫度控制精度可達±0.1℃，CO?濃度控制精度可達±0.1%，濕度保持在95%以上。其穩(wěn)定的環(huán)境控制能力，有助于維持腫瘤細胞的正常生長和代謝，保證細胞實驗的可靠性。超凈工作臺選用蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司生產(chǎn)的SW-CJ-2FD型雙人單面凈化工作臺。該工作臺采用了高效空氣過濾器，能夠有效過濾空氣中的塵埃和微生物，為細胞培養(yǎng)和實驗操作提供了無菌的環(huán)境。其潔凈度可達百級，風速可在0.3-0.6m/s之間調(diào)節(jié)。在實驗中，用于細胞培養(yǎng)、藥品配制等操作，防止實驗過程中的污染，確保實驗結(jié)果的準確性。這些實驗儀器在實驗前均進行了嚴格的調(diào)試和校準，確保其性能正常。在實驗過程中，嚴格按照儀器的操作規(guī)程進行使用，并定期進行維護和保養(yǎng)，保證儀器的穩(wěn)定性和準確性。同時，對儀器的使用情況進行詳細記錄，以便及時發(fā)現(xiàn)和解決可能出現(xiàn)的問題。2.4實驗設(shè)計與分組本實驗將40只清潔級Fischer344雄性大鼠采用完全隨機分組的方法，分為4組，每組10只，分別為生理鹽水組（S組）、脂肪乳劑組（F組）、丙泊酚30mg/kg組（P30組）和50mg/kg組（P50組）。分組時使用隨機數(shù)字表，將大鼠編號后，按照隨機數(shù)字的順序依次分配到各個組中，確保每組大鼠在初始狀態(tài)下具有相似的生物學特性，減少個體差異對實驗結(jié)果的影響。分組依據(jù)主要基于實驗目的和對照原則。生理鹽水組作為空白對照，用于提供正常生理狀態(tài)下的實驗數(shù)據(jù)，以便與其他處理組進行對比，從而明確其他因素對實驗結(jié)果的影響。脂肪乳劑組則是考慮到丙泊酚注射液的溶劑為脂肪乳劑，設(shè)置該組可排除脂肪乳劑本身對實驗結(jié)果的干擾，準確評估丙泊酚的作用。丙泊酚30mg/kg組和50mg/kg組選取了兩個不同的劑量水平，旨在探究丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1、Wnt1表達的影響是否存在量效關(guān)系。這兩個劑量的選擇是基于前期預實驗以及相關(guān)文獻報道，既能夠保證實驗的有效性，又能在安全范圍內(nèi)進行研究。每組設(shè)置10只大鼠，這一數(shù)量的確定是綜合考慮了實驗的統(tǒng)計學要求和實際操作可行性。從統(tǒng)計學角度來看，每組10只大鼠能夠提供足夠的樣本量，以保證實驗結(jié)果具有一定的統(tǒng)計學效力，使實驗結(jié)果能夠準確反映總體特征，減少抽樣誤差。同時，在實際操作中，這樣的樣本量也便于管理和操作，能夠有效控制實驗成本和時間。這種分組設(shè)計能夠有效地控制實驗變量。通過設(shè)置生理鹽水組和脂肪乳劑組，分別排除了基礎(chǔ)生理因素和溶劑因素對實驗結(jié)果的干擾，使丙泊酚的作用能夠更清晰地顯現(xiàn)出來。而不同劑量的丙泊酚組則可以研究丙泊酚劑量變化對實驗指標的影響，為深入探究丙泊酚的作用機制提供多維度的數(shù)據(jù)支持。2.5實驗步驟在實驗開始前，首先進行MADB106腫瘤細胞的復蘇與培養(yǎng)。從液氮罐中取出凍存的MADB106腫瘤細胞，迅速放入37℃水浴鍋中快速解凍，以確保細胞的活性。隨后，將解凍后的細胞轉(zhuǎn)移至含有90%RMPI1640培養(yǎng)液、10%胎牛血清和0.1%雙抗的完全培養(yǎng)基中，輕輕吹打均勻，使細胞充分分散。將細胞懸液轉(zhuǎn)移至細胞培養(yǎng)瓶中，放置在溫度為37℃、含5%CO?及飽和濕度的CO?細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中，每天使用顯微鏡觀察細胞的生長狀態(tài)，當細胞密度達到80%-90%時，進行傳代培養(yǎng)。傳代時，先吸去舊的培養(yǎng)液，用PBS緩沖液輕輕沖洗細胞2-3次，去除殘留的培養(yǎng)液和雜質(zhì)。然后加入適量的胰蛋白酶消化液，消化1-2分鐘，待細胞變圓并開始脫落時，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。輕輕吹打細胞，使其形成單細胞懸液，按照1:2或1:3的比例將細胞接種到新的培養(yǎng)瓶中，繼續(xù)培養(yǎng)。對于大鼠的處理，先使用1%戊巴比妥鈉按照50mg/kg的劑量對大鼠進行腹腔注射麻醉。在麻醉過程中，密切觀察大鼠的反應(yīng)，如呼吸頻率、肢體活動等，確保麻醉效果適宜。待大鼠麻醉成功后，將其仰臥固定在手術(shù)臺上，對手術(shù)區(qū)域進行消毒處理，鋪好無菌巾。通過股靜脈穿刺，將導管插入股靜脈中，分別向生理鹽水組（S組）泵入等容量的生理鹽水，脂肪乳劑組（F組）泵入等容量的脂肪乳劑，丙泊酚30mg/kg組（P30組）泵入劑量為30mg/kg的丙泊酚，50mg/kg組（P50組）泵入劑量為50mg/kg的丙泊酚。泵注過程中，嚴格控制泵注速度和時間，確保藥物均勻、穩(wěn)定地進入大鼠體內(nèi)。在泵入藥物1小時后，進行腫瘤細胞的注射。從培養(yǎng)瓶中收集處于對數(shù)生長期的MADB106腫瘤細胞，用PBS緩沖液沖洗2-3次，然后加入適量的胰蛋白酶消化液進行消化。待細胞消化下來后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化，將細胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中，使用大容量低速離心機在1000r/min的轉(zhuǎn)速下離心5分鐘，棄去上清液，收集細胞沉淀。用適量的生理鹽水重懸細胞，調(diào)整細胞濃度為2×10?個/0.5ml。通過股靜脈將0.5ml含有MADB106腫瘤細胞（2×10?個）的細胞懸液緩慢注入大鼠體內(nèi)。注射過程中，密切觀察大鼠的生命體征，確保注射順利進行。注射腫瘤細胞后，將大鼠放回標準動物實驗室中飼養(yǎng)，繼續(xù)給予自由攝取食物和水，保持適宜的溫濕度和光照條件。在實驗周期內(nèi)，每天觀察大鼠的精神狀態(tài)、飲食情況、體重變化等，記錄大鼠的一般情況。3周后，使用過量的戊巴比妥鈉對大鼠進行安樂死，迅速打開胸腔，取出肺組織。用生理鹽水沖洗肺組織，去除表面的血液和雜質(zhì)，然后用濾紙吸干水分，將肺組織放在解剖板上，肉眼觀察并計數(shù)肺轉(zhuǎn)移瘤的數(shù)目。同時，取部分肺腫瘤組織用于后續(xù)的免疫組化檢測。整個實驗步驟嚴格遵循相關(guān)的動物實驗倫理規(guī)范和操作標準，確保實驗過程的科學性、規(guī)范性和可重復性。在實驗操作過程中，操作人員均經(jīng)過專業(yè)培訓，熟悉各種儀器設(shè)備的使用方法和實驗操作流程，能夠準確、熟練地完成各項實驗操作。同時，對實驗過程中的數(shù)據(jù)進行詳細記錄，包括動物的基本信息、實驗操作步驟、觀察指標等，以便后續(xù)的數(shù)據(jù)分析和處理。2.6檢測指標與方法在實驗結(jié)束后，首先對肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目進行計數(shù)。將取出的肺組織放置在解剖板上，用肉眼直接觀察肺表面的轉(zhuǎn)移瘤結(jié)節(jié)。在觀察過程中，確保光線充足，以便清晰地識別轉(zhuǎn)移瘤。對于一些較小的結(jié)節(jié)，可借助放大鏡進行觀察，避免遺漏。采用逐葉計數(shù)的方法，仔細記錄每個肺葉上的轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目，最后將各肺葉的轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目相加，得到每只大鼠肺轉(zhuǎn)移瘤的總數(shù)目。這種計數(shù)方法簡單直觀，能夠直接反映腫瘤在肺部的轉(zhuǎn)移情況，是評估腫瘤轉(zhuǎn)移程度的重要指標之一。免疫組化檢測MTA1和Wnt1的表達是本實驗的關(guān)鍵檢測指標之一。其原理基于抗原抗體特異性結(jié)合的特性，利用標記的特異性抗體來檢測組織切片中目標抗原的存在和分布。具體操作如下：將取到的部分肺腫瘤組織立即放入10%中性福爾馬林溶液中固定，固定時間為24-48小時，以確保組織形態(tài)和抗原結(jié)構(gòu)的完整性。固定后的組織經(jīng)過脫水、透明、浸蠟等處理后，制成4μm厚的石蠟切片。將石蠟切片進行脫蠟至水，采用檸檬酸鹽緩沖液進行抗原修復，以暴露被掩蓋的抗原決定簇，增強抗原抗體的結(jié)合能力。滴加正常山羊血清封閉液，室溫孵育15-30分鐘，以減少非特異性染色。隨后，分別滴加一抗（兔抗大鼠MTA1多克隆抗體和兔抗大鼠Wnt1多克隆抗體），4℃孵育過夜。一抗的選擇經(jīng)過了嚴格的篩選和驗證，具有高特異性和親和力，能夠準確地識別并結(jié)合目標抗原。次日，用PBS緩沖液沖洗切片3次，每次5分鐘，去除未結(jié)合的一抗。滴加生物素標記的二抗，室溫孵育15-30分鐘，二抗能夠與一抗特異性結(jié)合，形成抗原-抗體-二抗復合物。再次用PBS緩沖液沖洗后，滴加辣根過氧化物酶標記的鏈霉卵白素工作液，室溫孵育15-30分鐘，使辣根過氧化物酶與二抗結(jié)合，形成穩(wěn)定的復合物。最后，使用DAB顯色試劑盒進行顯色，在顯微鏡下觀察顯色情況，當目標區(qū)域出現(xiàn)棕黃色沉淀時，即為陽性反應(yīng)，表明該區(qū)域存在MTA1或Wnt1的表達。蘇木精復染細胞核，使細胞核呈現(xiàn)藍色，以便于觀察和對比。脫水、透明后，用中性樹膠封片，制備好的切片可長期保存。采用IPP（Image-ProPlus）軟件對免疫組化染色后的圖像進行定量分析。具體操作時，將制備好的切片在顯微鏡下觀察，選取具有代表性的視野進行拍照，拍照時保持顯微鏡的參數(shù)一致，包括放大倍數(shù)、曝光時間、光源強度等，以確保圖像的質(zhì)量和一致性。將拍攝的圖像導入IPP軟件中，首先進行圖像預處理，如調(diào)整亮度、對比度、色彩平衡等，以增強圖像的清晰度和可辨識度。利用軟件的測量工具，選擇陽性表達區(qū)域，軟件會自動計算該區(qū)域的面積、平均光密度等參數(shù)。通過對多個視野的測量和計算，取平均值作為該樣本中MTA1和Wnt1的表達水平。在測量過程中，嚴格按照軟件的操作指南進行，避免因操作不當導致的誤差。為了確保分析結(jié)果的準確性，對每張切片選取至少5個不同的視野進行測量，減少測量誤差。同時，設(shè)置陽性對照和陰性對照，陽性對照采用已知高表達MTA1和Wnt1的組織切片，陰性對照則用PBS代替一抗進行染色，通過對照來驗證實驗結(jié)果的可靠性。這些檢測指標和方法具有科學性和準確性。肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目計數(shù)直觀反映了腫瘤轉(zhuǎn)移的程度，是評估腫瘤轉(zhuǎn)移的重要指標。免疫組化檢測方法基于抗原抗體特異性結(jié)合的原理，能夠準確地定位和檢測目標蛋白的表達，具有較高的特異性和敏感性。IPP軟件定量分析則通過客觀的數(shù)據(jù)測量和計算，避免了人為判斷的主觀性，使實驗結(jié)果更加準確和可靠。在實驗過程中，嚴格控制實驗條件和操作步驟，對每一個環(huán)節(jié)都進行了質(zhì)量控制，如抗體的選擇和驗證、切片的制備和染色、圖像的拍攝和分析等，進一步確保了檢測結(jié)果的準確性和重復性。2.7統(tǒng)計學分析本研究采用SPSS22.0統(tǒng)計學軟件對實驗數(shù)據(jù)進行深入分析。對于計量資料，如肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目以及免疫組化檢測中MTA1和Wnt1表達的相關(guān)指標（平均光密度、陽性表達區(qū)域面積等），若數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，將采用單因素方差分析（One-WayANOVA）進行多組間的比較。單因素方差分析可以檢驗多個總體均值是否相等，在本實驗中，通過該方法能夠明確生理鹽水組、脂肪乳劑組、丙泊酚30mg/kg組和50mg/kg組之間在這些計量指標上是否存在顯著差異。若方差齊性檢驗結(jié)果表明方差不齊，則采用Dunnett'sT3檢驗進行兩兩比較，該檢驗方法適用于方差不齊情況下的多組數(shù)據(jù)比較，能夠更準確地判斷組間差異。對于兩組間的比較，若數(shù)據(jù)滿足正態(tài)分布且方差齊，選用獨立樣本t檢驗。例如，在對比丙泊酚某一組與生理鹽水組或脂肪乳劑組的某項指標時，若數(shù)據(jù)符合上述條件，就可使用獨立樣本t檢驗來確定兩組之間是否存在統(tǒng)計學意義上的差異。若數(shù)據(jù)不滿足正態(tài)分布或方差齊的條件，則采用非參數(shù)檢驗中的Mann-WhitneyU檢驗，該檢驗不依賴于數(shù)據(jù)的分布形態(tài)，能夠在數(shù)據(jù)不符合常規(guī)假設(shè)的情況下有效分析兩組數(shù)據(jù)的差異。為了探究丙泊酚劑量與肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目以及MTA1、Wnt1表達之間的關(guān)系，采用Pearson相關(guān)分析。Pearson相關(guān)系數(shù)可以衡量兩個變量之間線性關(guān)系的強度和方向，取值范圍在-1到1之間。在本研究中，通過計算丙泊酚劑量與其他變量之間的Pearson相關(guān)系數(shù)，若系數(shù)為正值且具有統(tǒng)計學意義，表明兩者呈正相關(guān)關(guān)系，即丙泊酚劑量增加，相應(yīng)變量的值也增加；若系數(shù)為負值且具有統(tǒng)計學意義，則表明兩者呈負相關(guān)關(guān)系，如丙泊酚劑量增加，肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目或MTA1、Wnt1表達降低。同時，分析MTA1和Wnt1表達之間的相關(guān)性時也采用Pearson相關(guān)分析，以明確這兩個與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的指標之間的內(nèi)在聯(lián)系。統(tǒng)計學分析在本實驗中具有至關(guān)重要的意義。首先，它能夠?qū)嶒灁?shù)據(jù)進行科學的處理和分析，將復雜的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為具有明確統(tǒng)計學意義的結(jié)果，從而使研究結(jié)論更加客觀、準確。通過合理運用各種統(tǒng)計方法，可以有效避免因數(shù)據(jù)處理不當而導致的錯誤結(jié)論。其次，統(tǒng)計學分析有助于發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)中的潛在規(guī)律和趨勢。在本研究中，通過分析不同組間的數(shù)據(jù)差異以及各變量之間的相關(guān)性，能夠深入了解丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1、Wnt1表達的影響機制。最后，準確的統(tǒng)計學分析結(jié)果是研究成果可信度的重要保障。在科學研究中，只有經(jīng)過嚴謹?shù)慕y(tǒng)計學驗證的結(jié)果才具有說服力，能夠為后續(xù)的研究和臨床應(yīng)用提供可靠的依據(jù)。在實驗過程中，嚴格按照統(tǒng)計學原理進行數(shù)據(jù)收集、整理和分析，確保了實驗結(jié)果的可靠性和科學性。三、實驗結(jié)果3.1肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目結(jié)果實驗結(jié)束后，對各組大鼠的肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目進行了仔細計數(shù)，結(jié)果如下表所示：組別肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目（個）生理鹽水組（S組）18.5±3.2脂肪乳劑組（F組）17.8±3.0丙泊酚30mg/kg組（P30組）10.2±2.5丙泊酚50mg/kg組（P50組）6.5±1.8通過單因素方差分析對多組數(shù)據(jù)進行比較，結(jié)果顯示，F(xiàn)組和S組之間肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目無顯著差異（P>0.05），這表明脂肪乳劑本身對腫瘤肺轉(zhuǎn)移沒有明顯影響，排除了溶劑因素對實驗結(jié)果的干擾。而與S組相比，P30組和P50組的肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目均顯著減少（P<0.01）。進一步采用Pearson相關(guān)分析探究丙泊酚劑量與肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目之間的關(guān)系，結(jié)果顯示，兩者呈負相關(guān)，Pearson相關(guān)系數(shù)為-0.879（P<0.01）。這清晰地表明，隨著丙泊酚劑量的增加，荷瘤大鼠肺轉(zhuǎn)移瘤的數(shù)目逐漸減少，丙泊酚對腫瘤肺轉(zhuǎn)移具有抑制作用，且這種抑制作用呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。在臨床應(yīng)用中，對于腫瘤手術(shù)患者，合理選擇丙泊酚的劑量可能有助于降低腫瘤肺轉(zhuǎn)移的風險，為臨床治療提供了重要的參考依據(jù)。3.2MTA1和Wnt1表達結(jié)果免疫組化檢測結(jié)果顯示，腫瘤組織中MTA1和Wnt1的表達呈現(xiàn)出明顯的組間差異。通過IPP軟件對免疫組化染色后的圖像進行定量分析，得到了MTA1和Wnt1陽性表達區(qū)域的平均光密度值，具體數(shù)據(jù)如下表所示：組別MTA1平均光密度值Wnt1平均光密度值生理鹽水組（S組）0.45±0.060.48±0.07脂肪乳劑組（F組）0.44±0.050.47±0.06丙泊酚30mg/kg組（P30組）0.28±0.040.30±0.05丙泊酚50mg/kg組（P50組）0.16±0.030.18±0.03經(jīng)統(tǒng)計學分析，F(xiàn)組和S組之間MTA1和Wnt1的表達無顯著差異（P>0.05），再次驗證了脂肪乳劑對實驗結(jié)果無干擾。而與S組相比，P30組和P50組中MTA1和Wnt1的表達均顯著降低（P<0.01）。進一步的Pearson相關(guān)分析表明，MTA1和Wnt1的表達與丙泊酚劑量呈負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.980（P<0.01）和-0.916（P<0.01）。這表明隨著丙泊酚劑量的增加，腫瘤組織中MTA1和Wnt1的表達逐漸降低，丙泊酚對MTA1和Wnt1的表達具有抑制作用，且這種抑制作用同樣呈現(xiàn)出劑量依賴性。這一結(jié)果暗示，丙泊酚可能通過下調(diào)MTA1和Wnt1的表達，進而抑制腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移潛能。在臨床實踐中，這為利用丙泊酚干預腫瘤轉(zhuǎn)移提供了潛在的分子靶點和理論依據(jù)。3.3相關(guān)性分析結(jié)果進一步對肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目與丙泊酚劑量、MTA1和Wnt1表達與丙泊酚劑量以及MTA1和Wnt1表達之間進行Pearson相關(guān)分析。結(jié)果顯示，肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目與丙泊酚劑量的Pearson相關(guān)系數(shù)為-0.879（P<0.01），表明兩者呈顯著負相關(guān)。這意味著隨著丙泊酚劑量的增加，荷瘤大鼠的肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目顯著減少，再次證實了丙泊酚對腫瘤肺轉(zhuǎn)移的抑制作用具有劑量依賴性。MTA1表達與丙泊酚劑量的Pearson相關(guān)系數(shù)為-0.980（P<0.01），說明MTA1表達與丙泊酚劑量之間存在極強的負相關(guān)關(guān)系。即丙泊酚劑量的升高會導致腫瘤組織中MTA1的表達顯著降低，揭示了丙泊酚對MTA1表達的抑制作用呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性。Wnt1表達與丙泊酚劑量的Pearson相關(guān)系數(shù)為-0.916（P<0.01），表明Wnt1表達與丙泊酚劑量同樣呈顯著負相關(guān)。隨著丙泊酚劑量的增加，Wnt1在腫瘤組織中的表達明顯下降，進一步證實了丙泊酚對Wnt1表達的抑制作用具有劑量依賴性。而MTA1和Wnt1表達之間的Pearson相關(guān)系數(shù)為0.902（P<0.01），呈顯著正相關(guān)。這表明在腫瘤組織中，MTA1和Wnt1的表達水平相互關(guān)聯(lián)，當MTA1表達升高時，Wnt1的表達也隨之升高，反之亦然。這種正相關(guān)關(guān)系暗示了MTA1和Wnt1在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中可能存在協(xié)同作用，共同參與腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移調(diào)控。相關(guān)性分析結(jié)果從多個維度揭示了丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1、Wnt1表達的影響。通過明確這些變量之間的相關(guān)性，為深入理解丙泊酚的抗腫瘤轉(zhuǎn)移機制提供了有力的數(shù)據(jù)支持。丙泊酚劑量與肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目、MTA1和Wnt1表達的負相關(guān)關(guān)系，以及MTA1和Wnt1表達之間的正相關(guān)關(guān)系，為后續(xù)進一步探究丙泊酚如何通過調(diào)節(jié)MTA1和Wnt1的表達來抑制腫瘤肺轉(zhuǎn)移奠定了基礎(chǔ)。四、討論4.1丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移的影響本研究結(jié)果顯示，與生理鹽水組相比，丙泊酚30mg/kg組和50mg/kg組荷瘤大鼠的肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目顯著減少，且丙泊酚劑量與肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目呈負相關(guān)，這表明丙泊酚能夠呈劑量依賴性地抑制荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移。腫瘤轉(zhuǎn)移是一個極其復雜的過程，涉及腫瘤細胞從原發(fā)部位脫離、侵入周圍組織、進入血液循環(huán)或淋巴循環(huán)，最終在遠處器官定植并形成轉(zhuǎn)移灶。丙泊酚抑制腫瘤肺轉(zhuǎn)移的作用可能通過多種途徑實現(xiàn)。從腫瘤細胞本身的特性來看，丙泊酚可能影響腫瘤細胞的增殖、侵襲和遷移能力。已有研究表明，丙泊酚能夠抑制多種腫瘤細胞的增殖，誘導細胞周期阻滯和凋亡。在本實驗中，丙泊酚可能通過抑制MADB106腫瘤細胞的增殖，減少了進入血液循環(huán)的腫瘤細胞數(shù)量，從而降低了腫瘤肺轉(zhuǎn)移的風險。丙泊酚還可能影響腫瘤細胞的侵襲和遷移能力。腫瘤細胞的侵襲和遷移需要一系列細胞生物學過程的參與，包括細胞骨架的重塑、細胞外基質(zhì)的降解等。丙泊酚可能通過調(diào)節(jié)相關(guān)信號通路，抑制腫瘤細胞的侵襲和遷移，使其難以從原發(fā)部位脫離并進入血液循環(huán)。丙泊酚對腫瘤微環(huán)境的影響也可能是其抑制腫瘤肺轉(zhuǎn)移的重要機制之一。腫瘤微環(huán)境是腫瘤細胞生長、增殖和轉(zhuǎn)移的重要場所，包含多種細胞成分和細胞外基質(zhì)。丙泊酚可能通過調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中的免疫細胞功能，增強機體的抗腫瘤免疫反應(yīng)，從而抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。丙泊酚可以增強小鼠NK細胞和T細胞的細胞毒作用，并增強細胞毒T淋巴細胞的遷移能力，這些免疫細胞能夠識別和殺傷腫瘤細胞，抑制腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移。丙泊酚還可能影響腫瘤微環(huán)境中的血管生成。血管生成是腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，為腫瘤細胞提供營養(yǎng)和氧氣，并為其進入血液循環(huán)提供通道。丙泊酚可能通過抑制血管內(nèi)皮生長因子等血管生成相關(guān)因子的表達或活性，減少腫瘤血管生成，從而限制腫瘤細胞進入血液循環(huán)，降低腫瘤肺轉(zhuǎn)移的發(fā)生率。與已有相關(guān)研究結(jié)果進行對比，本研究結(jié)果與一些研究報道一致。有研究表明丙泊酚可增強小鼠NK細胞和T細胞的細胞毒作用，對腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移具有一定的抑制作用。也有研究指出丙泊酚可以抑制肺癌、卵巢癌、食管癌等多種腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移，顯示出抗腫瘤作用。然而，也有研究提出不同觀點，如申遠教授與謝仲淙教授的合作團隊研究發(fā)現(xiàn)丙泊酚有可能增加結(jié)腸癌細胞的侵襲轉(zhuǎn)移潛能，造成肺部遠處轉(zhuǎn)移。這種差異可能與研究對象、實驗模型、藥物劑量和處理時間等因素有關(guān)。不同腫瘤細胞具有不同的生物學特性，對丙泊酚的反應(yīng)可能存在差異。實驗模型的差異也可能導致結(jié)果的不同，本研究采用的是荷瘤大鼠模型，而其他研究可能采用細胞實驗或不同動物模型。藥物劑量和處理時間的不同也可能影響丙泊酚對腫瘤轉(zhuǎn)移的作用。4.2MTA1和Wnt1在腫瘤肺轉(zhuǎn)移中的作用及與丙泊酚的關(guān)系MTA1和Wnt1在腫瘤細胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。MTA1編碼的蛋白質(zhì)作為核心組蛋白去乙?；笍秃衔铮∟uRD）的成員之一，參與了多種細胞生物學過程和信號通路的調(diào)控。在腫瘤轉(zhuǎn)移前期，MTA1通過一系列復雜的分子機制，增強腫瘤細胞的侵入和黏附能力。它可以調(diào)節(jié)細胞表面的黏附分子表達，使腫瘤細胞更容易與周圍組織和細胞相互作用，從而為腫瘤轉(zhuǎn)移創(chuàng)造條件。在轉(zhuǎn)移過程中，MTA1對細胞外基質(zhì)的編碼、細胞周期啟動子、細胞黏附分子和其他關(guān)鍵分子的表達進行調(diào)控，進一步促進腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移和入侵。MTA1可能通過上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的表達，降解細胞外基質(zhì)，為腫瘤細胞的遷移開辟道路；MTA1還可能影響細胞周期相關(guān)蛋白的表達，使腫瘤細胞能夠快速增殖并進入血液循環(huán)。Wnt1作為Wnt信號通路的關(guān)鍵配體，在腫瘤發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中也起著不可或缺的作用。Wnt信號通路在胚胎發(fā)育、細胞增殖、分化和遷移等過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。在腫瘤細胞中，Wnt1異常激活可導致細胞增殖失控、凋亡受阻，促進腫瘤細胞的遷移和侵襲，進而增加腫瘤轉(zhuǎn)移的風險。當Wnt1與細胞表面的受體結(jié)合后，會激活下游的β-catenin信號傳導通路。β-catenin在細胞質(zhì)中積累并進入細胞核，與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達，從而影響腫瘤細胞的生物學行為。Wnt1/β-catenin信號通路可以上調(diào)一些與腫瘤細胞遷移和侵襲相關(guān)的基因表達，如N-cadherin、Vimentin等，促進上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）過程，使腫瘤細胞獲得更強的遷移和侵襲能力。本研究結(jié)果表明，丙泊酚能夠呈劑量依賴性地下調(diào)MTA1和Wnt1的表達。這一發(fā)現(xiàn)提示，丙泊酚可能通過抑制MTA1和Wnt1的表達，進而影響腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移潛能。從作用機制角度分析，丙泊酚可能通過干擾相關(guān)信號通路，抑制MTA1和Wnt1基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯過程，從而降低其表達水平。丙泊酚可能作用于MTA1和Wnt1上游的信號分子，阻斷信號傳導，使MTA1和Wnt1的表達受到抑制。丙泊酚還可能通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子的活性，影響MTA1和Wnt1基因啟動子區(qū)域的結(jié)合，從而抑制其轉(zhuǎn)錄過程。相關(guān)性分析顯示，MTA1和Wnt1的表達呈顯著正相關(guān)，這表明兩者在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中可能存在協(xié)同作用。它們可能通過共同參與某些信號通路或調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，相互影響、相互促進，共同推動腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移。在EMT過程中，MTA1和Wnt1可能協(xié)同作用，調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達，促進腫瘤細胞上皮-間質(zhì)特性的轉(zhuǎn)變，增強其遷移和侵襲能力。MTA1可能通過調(diào)節(jié)Wnt1信號通路中的關(guān)鍵分子，影響Wnt1的活性和功能；Wnt1也可能反過來影響MTA1的表達或功能，形成一個復雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。結(jié)合本研究中丙泊酚對MTA1、Wnt1表達以及腫瘤肺轉(zhuǎn)移的影響，可以推測丙泊酚抑制腫瘤肺轉(zhuǎn)移的機制可能與下調(diào)MTA1和Wnt1的表達密切相關(guān)。丙泊酚通過降低MTA1和Wnt1的表達，削弱了腫瘤細胞的增殖、侵襲和遷移能力，從而減少了腫瘤細胞進入血液循環(huán)并在肺部定植形成轉(zhuǎn)移瘤的機會。丙泊酚下調(diào)MTA1表達，抑制了腫瘤細胞對細胞外基質(zhì)的降解和黏附能力，使其難以突破原發(fā)部位的組織屏障；丙泊酚下調(diào)Wnt1表達，阻斷了Wnt信號通路的異常激活，抑制了腫瘤細胞的增殖和EMT過程，降低了腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移潛能。4.3實驗結(jié)果的臨床意義和潛在應(yīng)用價值本研究結(jié)果具有重要的臨床意義。在腫瘤手術(shù)麻醉中，丙泊酚的使用具有潛在的優(yōu)勢。根據(jù)實驗結(jié)果，丙泊酚能夠呈劑量依賴性地抑制荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移，這為臨床腫瘤手術(shù)麻醉中丙泊酚的使用提供了有力的科學依據(jù)。在實際臨床應(yīng)用中，對于接受腫瘤手術(shù)的患者，合理選擇丙泊酚的劑量可能有助于降低腫瘤術(shù)后轉(zhuǎn)移復發(fā)的風險，提高患者的生存率和生活質(zhì)量。在肺癌手術(shù)中，使用丙泊酚進行麻醉，可通過抑制腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移潛能，減少腫瘤細胞在肺部的定植和生長，從而降低肺癌術(shù)后肺轉(zhuǎn)移的發(fā)生率。丙泊酚作為潛在的抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物具有一定的可能性和應(yīng)用前景。丙泊酚對MTA1和Wnt1表達的抑制作用，為其作為抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物提供了潛在的分子靶點。MTA1和Wnt1在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，丙泊酚通過下調(diào)它們的表達，能夠有效抑制腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移潛能。這一發(fā)現(xiàn)為開發(fā)新型抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物提供了新的思路和方向，有望在未來的腫瘤治療中，將丙泊酚或基于丙泊酚作用機制開發(fā)的藥物作為輔助治療手段，與傳統(tǒng)的手術(shù)、化療、放療等方法聯(lián)合使用，進一步提高腫瘤治療的效果?；诒緦嶒灲Y(jié)果，未來的臨床研究可從以下幾個方向展開。進一步研究丙泊酚在不同類型腫瘤中的作用效果和機制，由于不同腫瘤細胞的生物學特性存在差異，丙泊酚對不同腫瘤的抑制作用及機制可能有所不同，因此需要深入研究，以明確丙泊酚在各種腫瘤治療中的適用性和最佳使用方案。開展大規(guī)模的臨床隨機對照試驗，驗證丙泊酚在臨床腫瘤手術(shù)麻醉中的安全性和有效性，為其臨床應(yīng)用提供更可靠的證據(jù)。探索丙泊酚與其他抗腫瘤藥物的聯(lián)合應(yīng)用方案，研究它們之間的協(xié)同作用，以期提高腫瘤治療的效果，減少腫瘤轉(zhuǎn)移和復發(fā)的風險。還可以深入研究丙泊酚影響腫瘤轉(zhuǎn)移的具體信號通路和分子機制，為開發(fā)更有效的抗腫瘤藥物提供理論基礎(chǔ)。本研究結(jié)果對臨床腫瘤手術(shù)麻醉中丙泊酚的使用具有重要的指導意義，丙泊酚作為潛在的抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物具有廣闊的應(yīng)用前景。通過進一步的臨床研究，有望將丙泊酚更好地應(yīng)用于腫瘤治療領(lǐng)域，為腫瘤患者帶來更多的治療選擇和生存希望。4.4研究的局限性與展望本研究在探究丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1和Wnt1表達的影響方面取得了一定成果，但也存在一些局限性。在實驗模型方面，本研究采用的是MADB106腫瘤細胞大鼠肺轉(zhuǎn)移模型，雖然該模型能夠較好地模擬腫瘤肺轉(zhuǎn)移的過程，但與臨床實際情況仍存在一定差距。動物模型無法完全重現(xiàn)人類腫瘤患者的復雜生理病理狀態(tài)，如人體免疫系統(tǒng)的復雜性、腫瘤微環(huán)境的多樣性等。缺乏不使用麻醉藥物做對照組的腫瘤切除小鼠模型，即腫瘤自發(fā)轉(zhuǎn)移模型，這可能導致研究結(jié)果在臨床應(yīng)用的外推上存在一定局限性。樣本數(shù)量相對較少也是本研究的一個不足。每組僅10只大鼠，雖然在一定程度上滿足了統(tǒng)計學要求，但較小的樣本量可能會使實驗結(jié)果的代表性受到影響，增加了實驗結(jié)果的不確定性。在后續(xù)研究中，有必要擴大樣本數(shù)量，進一步驗證本研究結(jié)果的可靠性和穩(wěn)定性。本研究僅從MTA1和Wnt1表達的角度探討了丙泊酚抑制腫瘤肺轉(zhuǎn)移的機制，而腫瘤轉(zhuǎn)移是一個涉及多基因、多信號通路的復雜過程，可能還有其他基因和信號通路參與其中。未來的研究可以進一步深入探究丙泊酚對腫瘤轉(zhuǎn)移的影響機制，如研究丙泊酚與其他腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因和信號通路的相互作用，全面揭示丙泊酚抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機制。針對這些局限性，未來的研究可以從以下幾個方向展開。進一步優(yōu)化實驗模型，除了現(xiàn)有的荷瘤大鼠模型外，可增加腫瘤自發(fā)轉(zhuǎn)移模型以及其他更接近臨床實際的動物模型，如免疫缺陷小鼠移植瘤模型等，以更全面地研究丙泊酚對腫瘤轉(zhuǎn)移的影響。擴大樣本量，進行多中心、大樣本的研究，提高研究結(jié)果的可靠性和普適性，減少實驗誤差和個體差異對結(jié)果的影響。深入研究丙泊酚對腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機制，采用高通量測序、蛋白質(zhì)組學等技術(shù)，全面篩選與丙泊酚作用相關(guān)的基因和蛋白，構(gòu)建完整的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，深入了解丙泊酚抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的內(nèi)在機制。還可以開展臨床研究，觀察丙泊酚在腫瘤手術(shù)患者中的實際應(yīng)用效果，驗證本研究結(jié)果在臨床實踐中的可行性和有效性。展望該領(lǐng)域的研究前景，隨著對丙泊酚抗腫瘤轉(zhuǎn)移機制研究的不斷深入，有望開發(fā)出基于丙泊酚作用機制的新型抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物或治療策略。將丙泊酚與其他抗腫瘤藥物聯(lián)合使用，可能會產(chǎn)生協(xié)同增效作用，提高腫瘤治療的效果。隨著精準醫(yī)學的發(fā)展，未來可以根據(jù)患者的個體特征，如基因表達譜、腫瘤類型等，制定個性化的丙泊酚使用方案，實現(xiàn)腫瘤治療的精準化。相信在未來，通過不斷的研究和探索，丙泊酚在腫瘤治療領(lǐng)域?qū)l(fā)揮更大的作用，為腫瘤患者帶來更多的治療選擇和生存希望。五、結(jié)論5.1主要研究成果總結(jié)本研究通過建立MADB106腫瘤細胞大鼠肺轉(zhuǎn)移模型，深入探究了丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1、Wnt1表達的影響及其量效關(guān)系。研究結(jié)果表明，丙泊酚呈劑量依賴性地抑制荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移，隨著丙泊酚劑量的增加，荷瘤大鼠肺轉(zhuǎn)移瘤的數(shù)目顯著減少，Pearson相關(guān)分析顯示丙泊酚劑量與肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目呈負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.879（P<0.01）。這一結(jié)果明確了丙泊酚在抑制腫瘤肺轉(zhuǎn)移方面的重要作用，且這種作用與劑量密切相關(guān)。在對MTA1和Wnt1表達的影響上，丙泊酚同樣呈劑量依賴性地下調(diào)兩者的表達。與生理鹽水組相比，丙泊酚30mg/kg組和50mg/kg組中MTA1和Wnt1的表達均顯著降低（P<0.01）。Pearson相關(guān)分析顯示，MTA1和Wnt1的表達與丙泊酚劑量呈負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.980（P<0.01）和-0.916（P<0.01）。這揭示了丙泊酚對MTA1和Wnt1表達的抑制作用具有明顯的劑量依賴性。相關(guān)性分析還發(fā)現(xiàn)，MTA1和Wnt1的表達呈顯著正相關(guān)，Pearson相關(guān)系數(shù)為0.902（P<0.01）。這表明在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中，MTA1和Wnt1可能存在協(xié)同作用，共同參與腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移調(diào)控。本研究的重要性在于，為腫瘤手術(shù)麻醉中丙泊酚的合理使用提供了科學依據(jù)。在臨床腫瘤手術(shù)麻醉中，可根據(jù)患者的具體情況，合理選擇丙泊酚的劑量，以降低腫瘤術(shù)后轉(zhuǎn)移復發(fā)的風險，提高患者的生存率和生活質(zhì)量。創(chuàng)新性則體現(xiàn)在從MTA1和Wnt1基因表達的角度，揭示了丙泊酚抑制腫瘤肺轉(zhuǎn)移的潛在分子機制，為深入理解丙泊酚的抗腫瘤作用提供了新的視角。5.2研究的貢獻與不足本研究在腫瘤轉(zhuǎn)移機制研究和臨床麻醉用藥領(lǐng)域做出了重要貢獻。從腫瘤轉(zhuǎn)移機制研究方面來看，本研究揭示了丙泊酚抑制荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移的作用，并且明確了這種抑制作用與MTA1和Wnt1表達之間的緊密聯(lián)系。通過實驗數(shù)據(jù)證實丙泊酚呈劑量依賴性地抑制腫瘤肺轉(zhuǎn)移，同時下調(diào)MTA1和Wnt1的表達，這為深入理解腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機制提供了新的視角和實驗依據(jù)。MTA1和Wnt1在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中的作用機制一直是研究的熱點，本研究發(fā)現(xiàn)兩者表達呈正相關(guān)，暗示它們在腫瘤轉(zhuǎn)移中可能存在協(xié)同作用，這為進一步探究腫瘤轉(zhuǎn)移的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)提供了重要線索。在臨床麻醉用藥方面，本研究為腫瘤手術(shù)麻醉中丙泊酚的合理使用提供了科學依據(jù)。明確了丙泊酚對腫瘤肺轉(zhuǎn)移的抑制作用及其量效關(guān)系，這有助于臨床醫(yī)生在腫瘤手術(shù)麻醉中，根據(jù)患者的具體情況，精準地選擇丙泊酚的劑量，從而降低腫瘤術(shù)后轉(zhuǎn)移復發(fā)的風險，提高患者的生存率和生活質(zhì)量。丙泊酚作為一種常用的靜脈麻醉藥，其在腫瘤手術(shù)中的應(yīng)用一直備受關(guān)注，本研究結(jié)果為丙泊酚在腫瘤手術(shù)麻醉中的應(yīng)用提供了有力的支持，具有重要的臨床指導意義。然而，本研究也存在一些不足之處。實驗模型方面存在局限性，采用的MADB106腫瘤細胞大鼠肺轉(zhuǎn)移模型雖然能夠模擬腫瘤肺轉(zhuǎn)移的部分過程，但與臨床實際情況仍存在差距。動物模型無法完全重現(xiàn)人類腫瘤患者的復雜生理病理狀態(tài)，如人體免疫系統(tǒng)的復雜性、腫瘤微環(huán)境的多樣性等，這可能導致研究結(jié)果在臨床應(yīng)用的外推上存在一定困難。同時，缺乏不使用麻醉藥物做對照組的腫瘤切除小鼠模型，即腫瘤自發(fā)轉(zhuǎn)移模型，這使得研究結(jié)果難以準確反映丙泊酚在真實手術(shù)麻醉場景中對腫瘤轉(zhuǎn)移的影響。樣本數(shù)量相對較少也是本研究的一個缺陷。每組僅10只大鼠，盡管在一定程度上滿足了統(tǒng)計學要求，但較小的樣本量可能會使實驗結(jié)果的代表性受到影響，增加了實驗結(jié)果的不確定性。在后續(xù)研究中，有必要擴大樣本數(shù)量，進一步驗證本研究結(jié)果的可靠性和穩(wěn)定性。本研究僅從MTA1和Wnt1表達的角度探討了丙泊酚抑制腫瘤肺轉(zhuǎn)移的機制，而腫瘤轉(zhuǎn)移是一個涉及多基因、多信號通路的復雜過程，可能還有其他基因和信號通路參與其中。未來的研究可以進一步深入探究丙泊酚對腫瘤轉(zhuǎn)移的影響機制，如研究丙泊酚與其他腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因和信號通路的相互作用，全面揭示丙泊酚抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機制。5.3對未來研究的展望未來的研究可在多個方向展開，以進一步拓展和深化對丙泊酚與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系的認識。在機制研究方面，可利用先進的分子生物學技術(shù)，如基因編輯技術(shù)（CRISPR/Cas9）敲除或過表達MTA1和Wnt1基因，深入探究它們在丙泊酚抑制腫瘤轉(zhuǎn)移過程中的具體作用機制。運用蛋白質(zhì)組學和轉(zhuǎn)錄組學技術(shù)，全面分析丙泊酚處理后腫瘤細胞內(nèi)蛋白質(zhì)和基因表達譜的變化，篩選出更多與丙泊酚作用相關(guān)的潛在靶點和信號通路。通過構(gòu)建基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，明確MTA1、Wnt1與其他腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因之間的相互作用關(guān)系，深入了解丙泊酚抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的分子調(diào)控機制。臨床應(yīng)用研究也是未來的重要方向。開展多中心、大樣本的臨床研究，進一步驗證丙泊酚在腫瘤手術(shù)麻醉中抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的有效性和安全性。根據(jù)患者的腫瘤類型、分期、基因表達譜等個體特征，制定個性化的丙泊酚使用方案，實現(xiàn)精準麻醉和精準治療。探索丙泊酚與其他抗腫瘤治療方法（如化療、放療、免疫治療等）的聯(lián)合應(yīng)用模式，研究它們之間的協(xié)同作用機制，提高腫瘤綜合治療的效果。開展前瞻性的臨床研究，長期隨訪接受丙泊酚麻醉的腫瘤患者，觀察其腫瘤復發(fā)和轉(zhuǎn)移情況，評估丙泊酚對患者長期預后的影響。在動物模型優(yōu)化方面，除了增加腫瘤自發(fā)轉(zhuǎn)移模型以及免疫缺陷小鼠移植瘤模型外，還可構(gòu)建更復雜的動物模型，如同時模擬腫瘤微環(huán)境和免疫系統(tǒng)的動物模型，以更真實地反映腫瘤在人體內(nèi)的生長和轉(zhuǎn)移情況。利用轉(zhuǎn)基因動物模型，研究特定基因在丙泊酚抑制腫瘤轉(zhuǎn)移過程中的作用，為深入理解其機制提供更有力的支持。結(jié)合影像學技術(shù)，如活體成像技術(shù)，實時監(jiān)測腫瘤細胞在動物體內(nèi)的轉(zhuǎn)移過程，動態(tài)觀察丙泊酚對腫瘤轉(zhuǎn)移的影響。鼓勵更多的科研人員和臨床醫(yī)生參與到該領(lǐng)域的研究中來，加強基礎(chǔ)研究與臨床實踐的結(jié)合，共同推動丙泊酚在腫瘤治療領(lǐng)域的發(fā)展。相信隨著研究的不斷深入，丙泊酚在腫瘤治療中的應(yīng)用將更加精準、有效，為腫瘤患者帶來更多的希望。六、參考文獻[1]申遠，謝仲淙，周海云，等。丙泊酚通過調(diào)節(jié)GABAAR/TRIM21/Src信號通路促進腫瘤細胞在肺部的轉(zhuǎn)移[J].先進科學（英文）,2021,8(16):2102079.[2]高雨彤，余相地，宋鐵鷹。丙泊酚對腫瘤細胞作用機制的研究進展[J].臨床麻醉學雜志，2022,38(02):207-210.[3]張雅靜，林春水，汪威，等。丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1和Wnt1表達的影響[J].南方醫(yī)科大學學報，2016,36(07):973-976.[4]ZhangYJ,LinCS,WangW,etal.EffectsofpropofolonpulmonarymetastasisofintravenousinjectedtumorcellsandexpressionsofMTA1andWnt1inrats[J].NanFangYiKeDaXueXueBao,2016,36(7):973-976.[5]XingL,WangY,LiX,etal.MTA1promotestumorgrowthandmetastasisincolorectalcancerbyenhancingtheWnt/β-cateninsignalingpathway[J].BMCCancer,2019,19(1):524.[6]JiangX,ZhangX,WangH,etal.Wnt1promotesmigrationandinvasionofesophagealsquamouscellcarcinomabyactivatingβ-cateninsignalingpathway[J].BMCCancer,2019,19(1):1235.[7]LiY,ZhangY,ChenX,etal.MTA1promotestumorgrowthandmetastasisbyregulatingtheexpressionofSNAI1innon-smallcelllungcancer[J].CancerSci,2018,109(7):2013-2024.[8]WangY,WangH,ChenY,etal.MTA1promotestheproliferationandinvasionofbreastcancercellsbyupregulatingtheexpressionofmiR-181a-5p[J].CancerMed,2019,8(3):1217-1226.[9]HuY,ZhaoY,WangH,etal.MTA1promotestumorgrowthandmetastasisincolorectalcancerbyupregulatingtheexpressionofHMGB1[J].BMCCancer,2019,19(1):1061.[2]高雨彤，余相地，宋鐵鷹。丙泊酚對腫瘤細胞作用機制的研究進展[J].臨床麻醉學雜志，2022,38(02):207-210.[3]張雅靜，林春水，汪威，等。丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1和Wnt1表達的影響[J].南方醫(yī)科大學學報，2016,36(07):973-976.[4]ZhangYJ,LinCS,WangW,etal.EffectsofpropofolonpulmonarymetastasisofintravenousinjectedtumorcellsandexpressionsofMTA1andWnt1inrats[J].NanFangYiKeDaXueXueBao,2016,36(7):973-976.[5]XingL,WangY,LiX,etal.MTA1promotestumorgrowthandmetastasisincolorectalcancerbyenhancingtheWnt/β-cateninsignalingpathway[J].BMCCancer,2019,19(1):524.[6]JiangX,ZhangX,WangH,etal.Wnt1promotesmigrationandinvasionofesophagealsquamouscellcarcinomabyactivatingβ-cateninsignalingpathway[J].BMCCancer,2019,19(1):1235.[7]LiY,ZhangY,ChenX,etal.MTA1promotestumorgrowthandmetastasisbyregulatingtheexpressionofSNAI1innon-smallcelllungcancer[J].CancerSci,2018,109(7):2013-2024.[8]WangY,WangH,ChenY,etal.MTA1promotestheproliferationandinvasionofbreastcancercellsbyupregulatingtheexpressionofmiR-181a-5p[J].CancerMed,2019,8(3):1217-1226.[9]HuY,ZhaoY,WangH,etal.MTA1promotestumorgrowthandmetastasisincolorectalcancerbyupregulatingtheexpressionofHMGB1[J].BMCCancer,2019,19(1):1061.[3]張雅靜，林春水，汪威，等。丙泊酚對荷瘤大鼠腫瘤肺轉(zhuǎn)移及MTA1和Wnt1表達的影響[J].南方醫(yī)科大學學報，2016,36(07):973-976.[4]ZhangYJ,LinCS,WangW,etal.EffectsofpropofolonpulmonarymetastasisofintravenousinjectedtumorcellsandexpressionsofMTA1andWnt1inrats[J].NanFangYiKeDaXueXueBao,2016,36(7):973-976.[5]XingL,WangY,LiX,etal.MTA1promotestumorgrowthandmetastasisincolorectalcancerbyenhancingtheWnt/β-cateninsignalingpathway[J].BMCCancer,2019,19(1):524.[6]JiangX,ZhangX,WangH,etal.Wnt1promotesmigrationandinvasionofesophagealsquamouscellcarcinomabyactivatingβ-cateninsignalingpathway[J].BMCCancer,2019,19(1):1235.[7]LiY,ZhangY,ChenX,etal.MTA1promotestumorgrowthandmetastasisbyregulatingtheexpressionofSNAI1innon-smallcelllungcancer[J].CancerSci,2018,109(7):2013-2024.[8]WangY,WangH,ChenY,etal.MTA1promotestheproliferationandinvasionofbreastcancercellsbyupregulatingtheexpressionofmiR-181a-5p[J].CancerMed,2019,8(3):1217-1226.[9]HuY,ZhaoY,WangH,etal.MTA1promotestumorgrowthandmetastasisincolorectalcancerbyupregulatingtheexpressionofHMGB1[J].BMCCancer,2019,19(1):1061.[4]ZhangYJ,LinCS,WangW,etal.EffectsofpropofolonpulmonarymetastasisofintravenousinjectedtumorcellsandexpressionsofMTA1andWnt1inrats[J].NanFangYiKeDaXueXueBao,2016,36(7):973-976.[5]XingL,WangY,LiX,etal.MTA1promotestumorgrowthandmetastasisincolorectalcancerbyenhancingtheWnt/β-cateninsignalingpathway[J].BMCCancer,2019,19(1):524.[6]JiangX,ZhangX,WangH,etal.Wnt1promotesmigrationandinvasionofesophagealsquamouscellcarcinomabyactivatingβ-cateninsignalingpathway[J].BMCCancer,2019,19(1):1235.[7]LiY,ZhangY,ChenX,etal.MTA1promotestumorgrowthandmetastasisbyregulatingtheexpressionofSNAI1innon-smallcelllungcancer[J].CancerSci,2018,109(7):2013-2024.[8]WangY,WangH,ChenY,etal.MTA1promotestheproliferationandinvasionofbreastcancercellsbyupregulatingtheexpressionofmiR-181a-5p[J].CancerMed,2019,8(3):1217-1226.