III

DB42/T1790—2021

水中百草枯和敵草快的測定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

警告：百草枯劇毒，對(duì)人體健康有毒害作用且無特效解毒藥，實(shí)驗(yàn)中溶液配制及樣品前處理過程應(yīng)

在通風(fēng)櫥中進(jìn)行，并按規(guī)定佩戴防護(hù)用具，避免接觸皮膚和衣物。

1范圍

本文件規(guī)定了水中百草枯和敵草快測定的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法的原理、試劑、材料、儀器設(shè)備、試

樣制備和保存、試驗(yàn)步驟、試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理、定量限和回收率等內(nèi)容。

本文件適用于農(nóng)田灌溉水、養(yǎng)殖用水和地表水中百草枯和敵草快的測定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T27417合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南

GB/T32467化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制術(shù)語及定義

HJ/T91地表水和污水監(jiān)測技術(shù)規(guī)范

NY/T396農(nóng)用水源環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語和定義

GB/T27417和GB/T32467界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

定量限limitofquantification;LOQ

樣品中被測組分能被定量測定的最低濃度或最低量，此時(shí)的分析結(jié)果應(yīng)能確保一定的正確度和精

密度。

[來源：GB/T27417-2017，3.14]

回收率recovery

檢測開始前向樣品中加入一定量的目標(biāo)分析物，或使用原有分析物有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，通過特定的程序

檢測所獲得樣品的目標(biāo)組分含量或濃度，與加入樣品中或存在于樣品中的目標(biāo)分析物含量或濃度的百

分比。

[來源：GB/T32467-2015，4.1]

4原理

1

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樣品直接經(jīng)PWCX小柱富集凈化，HILIC親水型液相色譜柱分離，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測，采用外

標(biāo)法定量。

5試劑和材料

除另有說明外，所用試劑均為分析純及以上，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。

乙腈（CH3CN）：色譜純。

甲醇(CH3OH)：色譜純。

甲酸(HCOOH)：色譜純。

乙酸（CH3COOH）：色譜純。

乙酸銨(CH3COONH4)：色譜純。

甲醇-水溶液（5+95，體積比）：分別量取5mL甲醇（見5.3）與95mL水，充分混勻。

甲酸-乙腈溶液（10+90，體積比）：分別量取10mL甲酸（見5.4）與90mL乙腈（見5.2），充

分混勻。

甲酸-水溶液（1+999，體積比）：分別量取1mL甲酸（見5.4）與999mL水，充分混勻。

乙腈-甲酸水溶液（50+50，體積比）：分別量取50mL乙腈（見5.2）與50mL甲酸-水溶液（見

5.9），充分混勻。

50mmol/L乙酸銨水溶液（pH=3.7）：稱取3.8g乙酸銨（見5.6）溶于1000mL水中，加入乙酸

（見5.5）調(diào)節(jié)pH為3.7。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：百草枯二氯酸鹽（C12H14Cl2N2，CAS號(hào)1910-42-5），敵草快二溴酸鹽（C12H12Br2N2，CAS

號(hào)85-00-7）。

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：分別準(zhǔn)確稱取適量百草枯和敵草快標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（見5.12），用甲酸-水溶液（見5.9）

分別配制成1000mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，0℃～4℃冰箱保存，有效期為6個(gè)月。

混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：準(zhǔn)確移取適量百草枯和敵草快的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（見5.13），用乙腈-甲酸水

溶液（見5.10）稀釋成百草枯和敵草快濃度為2.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、50.0μg/L、

100.0μg/L、200.0μg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

PWCX小柱：60mg/3mL或相當(dāng)者。

濾膜：0.22μm，尼龍濾膜。

6儀器和設(shè)備

液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源。

分析天平：感量0.01mg和0.01g。

渦旋混合器。

pH計(jì)。

氮吹儀。

7試樣制備和保存

樣品的采集應(yīng)符合HJ/T91和NY/T396的規(guī)定，使用PP材質(zhì)或PVC材質(zhì)采樣瓶采集樣品，密封避光

0℃～4℃保存，并在7天內(nèi)盡快完成測定。

8試驗(yàn)步驟

2

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樣品處理

分別用1.0mL甲醇（見5.3）和1.0mL水活化固相萃取小柱（見5.15），棄去流出液，保持填料不漏

出液面，準(zhǔn)確移取10.0mL水樣通過固相萃取柱。用1.0mL甲醇-水溶液（見5.7）淋洗，棄去流出液，用

2.0mL甲酸-乙腈溶液（見5.8）溶液洗脫并擠干，流速保持約1mL/min～2mL/min，收集洗脫液于塑料離

心管中，于45℃的水浴氮?dú)獯蹈珊螅?.0mL乙腈-甲酸水溶液（見5.10）振蕩溶解，過0.22μm尼龍濾

膜（見5.16）于PP或PVC進(jìn)樣瓶，待測。

測定

8.2.1液相色譜參考條件

液相色譜條件見表1，梯度洗脫條件見表2。

表1液相色譜條件

序號(hào)條件參數(shù)

1色譜柱型號(hào)HILIC（100mm×2.1mm，1.7μmi.d.）或其他性能相當(dāng)?shù)纳V柱

2流動(dòng)相A為乙酸銨水溶液（見5.11），B為乙腈（見5.2）

3流速500μL/min

4進(jìn)樣量2.00μL

5柱溫35℃

表2梯度洗脫程序

時(shí)間流動(dòng)相A流動(dòng)相B

min%%

0.02080

2.02080

3.58515

4.08515

4.52080

10.02080

8.2.2質(zhì)譜參考條件

質(zhì)譜條件見表3，化合物定性離子定量離子對(duì)及碰撞能信息見表4。

表3質(zhì)譜條件

序號(hào)條件參數(shù)

1離子化模式電噴霧電離（ESI）

2質(zhì)譜掃描方式正離子模式

3檢測方式多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）

4離子源溫度500℃

5霧化氣1壓力氮?dú)?.44Mpa

6霧化氣2壓力氮?dú)?.44Mpa

7氣簾氣壓力氮?dú)?.24Mpa

3

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表4化合物定性定量離子對(duì)及碰撞能

保留時(shí)間母離子子離子碰撞能量去簇電壓

化合物

minm/zm/zeVV

170a2880

百草枯2.59185

1583080

157a3060

敵草快2.62183

1303560

注：a為定量離子

8.2.3定性測定

按照上述試驗(yàn)步驟（見本文件第8章）測定樣品和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，樣品中待測物的色譜峰保留時(shí)間

與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)色譜峰的保留時(shí)間相比，偏差范圍應(yīng)在±2.5%之內(nèi)，并且樣品中待測物離子豐度比與濃度相

當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)溶液離子豐度比相比，允許偏差不超過表5規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在對(duì)應(yīng)的待測物，

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)百草枯和敵草快離子對(duì)相對(duì)豐度圖和離子色譜圖見附錄A。

表5定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差

相對(duì)離子豐度允許的相對(duì)偏差

/%/%

＞50±20

＞20～50（含）±25

＞10～20（含）±30

≤10±50

8.2.4定量測定

在儀器最佳工作條件下，對(duì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣品進(jìn)樣，以定量離子峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫

坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，按外標(biāo)法定量，樣品溶液中待測物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測定的線性范圍內(nèi)。

9試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理

采用儀器數(shù)據(jù)處理軟件外標(biāo)法或按照式（1）計(jì)算水樣中百草枯和敵草快的殘留量：

?×?1000

?=1×········································································(1)

?1000

式中：

X——試樣中百草枯和敵草快的含量，單位為微克每升（μg/L）；

c——試樣處理溶液中百草枯和敵草快的濃度，單位為微克每升（μg/L)；

V1——試樣定容的體積，單位為毫升（mL）；

V——試樣取樣體積，單位為毫升（mL）。

10定量限

本文件地表水中百草枯和敵草快的定量限為2.0μg/L，養(yǎng)殖水和灌溉水中百草枯和敵草快的定量限

為3.0μg/L。

4

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11回收率

本文件在地表水、養(yǎng)殖水和灌溉水3種水樣中添加回收率見附錄B。

5

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A

A

B

B

附錄A

（資料性）

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)離子對(duì)相對(duì)豐度圖和離子色譜圖

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)離子對(duì)相對(duì)豐度圖和離子色譜圖見圖A.1-圖A.6。

響應(yīng)值

時(shí)間（min)

圖A.1百草枯離子對(duì)相對(duì)豐度圖

響應(yīng)值

時(shí)間（min)

圖A.2百草枯離子色譜圖（m/z185>170）

6

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響應(yīng)值

時(shí)間（min)

圖A.3百草枯離子色譜圖（m/z185>158）

C

響應(yīng)值

時(shí)間（min)

圖A.4敵草快離子對(duì)相對(duì)豐度圖

響應(yīng)值

C

時(shí)間（min)

圖A.5敵草快離子色譜圖（m/z183>157）

7

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響應(yīng)值

時(shí)間（min)

圖A.6敵草快離子色譜圖（m/z183>130）

8

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D

附錄B

（資料性）

添加水平、回收率

水樣中添加回收率見表B.1。

表B.1百草枯和敵草快在3種樣品中添加回收范圍

添加濃度回收率

樣品化合物

μg/L%

2.069.8-78.1

百草枯5.082.1-93.4

10.071.4-77.1

地表水

2.0101.5-129.3

敵草快5.071.2-76.7

10.0