病毒學實驗室操作規(guī)范制度一、總則

病毒學實驗室操作規(guī)范制度旨在確保實驗室人員在操作過程中遵循標準流程，降低實驗室感染風險，保障實驗結(jié)果的準確性和可重復性。本制度適用于所有進入病毒學實驗室的人員，包括研究人員、技術(shù)人員及訪客。

二、實驗室入場要求

（一）基本要求

1.所有進入實驗室人員必須穿戴實驗服、手套、口罩等防護用品。

2.禁止在實驗室吸煙、飲食或進行與實驗無關(guān)的活動。

3.保持實驗室環(huán)境整潔，禁止隨意丟棄廢棄物。

（二）健康監(jiān)測

1.進入實驗室前，需每日進行體溫檢測，體溫超過37.3℃者禁止進入。

2.如出現(xiàn)咳嗽、咽痛等呼吸道癥狀，應主動報告并避免進入實驗室。

三、個人防護措施

（一）防護用品佩戴

1.實驗服：需覆蓋軀干和四肢，禁止暴露皮膚。

2.手套：根據(jù)實驗需求選擇一次性或可重復使用手套，操作結(jié)束后立即脫除并消毒。

3.口罩：佩戴醫(yī)用外科口罩或N95口罩，確保完全覆蓋口鼻。

（二）手部消毒

1.進入實驗室前使用70%酒精或含氯消毒液進行手部消毒。

2.實驗過程中如接觸污染物品，需立即使用消毒液清洗雙手。

四、實驗操作規(guī)范

（一）樣本處理

1.樣本采集：使用無菌工具，避免污染。采集后的樣本立即置于生物安全柜中處理。

2.樣本運輸：使用帶鎖的運輸箱，外部進行消毒處理。

3.樣本保存：根據(jù)病毒類型選擇合適的保存條件（如-80℃冷凍），記錄保存時間及溫度。

（二）實驗操作步驟

1.開啟生物安全柜：提前15分鐘開啟，檢查風道是否正常。

2.操作流程：

(1)更換手套，清潔工作臺面。

(2)使用無菌吸管或移液器進行樣本處理，避免氣溶膠產(chǎn)生。

(3)完成操作后，使用75%酒精擦拭實驗區(qū)域。

（三）廢棄物處理

1.醫(yī)療廢棄物：使用雙層黃色垃圾袋密封，標記后交由專業(yè)機構(gòu)處理。

2.污染物品：玻璃器皿需高壓滅菌后清洗，塑料器材直接焚燒。

五、應急處理措施

（一）意外暴露處理

1.皮膚接觸：立即用流動水沖洗污染部位，并使用消毒液擦拭。

2.眼部接觸：用生理鹽水沖洗至少15分鐘，并及時就醫(yī)。

（二）實驗室污染處理

1.發(fā)現(xiàn)污染時，立即疏散人員，封閉實驗室。

2.使用含氯消毒劑對污染區(qū)域進行徹底消毒，記錄處理過程。

六、實驗室消毒與清潔

（一）日常消毒

1.每日實驗結(jié)束后，使用70%酒精擦拭工作臺面、設(shè)備表面。

2.地面每周使用消毒液進行一次徹底清潔。

（二）終末消毒

1.實驗結(jié)束后或發(fā)生污染時，需進行終末消毒，包括紫外線照射和化學消毒。

2.記錄消毒時間、方法及負責人。

七、培訓與記錄

（一）培訓要求

1.新員工需接受實驗室安全培訓，考核合格后方可上崗。

2.每年進行一次復訓，確保人員掌握最新操作規(guī)范。

（二）記錄管理

1.實驗記錄需詳細記錄操作步驟、樣本信息、消毒情況等。

2.記錄保存期限不少于3年，以備查驗。

一、總則

病毒學實驗室操作規(guī)范制度旨在確保實驗室人員在操作過程中遵循標準流程，降低實驗室感染風險，保障實驗結(jié)果的準確性和可重復性。本制度適用于所有進入病毒學實驗室的人員，包括研究人員、技術(shù)人員及訪客。規(guī)范的制定和執(zhí)行是基于對病毒特性、傳播途徑以及實驗室潛在風險的科學認知，通過明確各環(huán)節(jié)的操作要求，最大限度地減少人為錯誤和交叉污染，從而維護實驗室人員的職業(yè)健康與安全，并確保實驗數(shù)據(jù)的可靠性。本制度為實驗室日常工作的基本準則，所有成員必須嚴格遵守。

二、實驗室入場要求

（一）基本要求

1.所有進入實驗室人員必須穿戴實驗服、手套、口罩等防護用品。實驗服應覆蓋軀干和四肢，無破洞，進入實驗室前需確保整潔。禁止穿著寬松衣物或外露皮膚。進入不同生物安全級別（BSL）實驗室前，需根據(jù)要求更換相應級別的實驗服。

2.禁止在實驗室吸煙、飲食或進行與實驗無關(guān)的活動。這些行為不僅違反實驗室規(guī)定，還可能引入污染物或?qū)е乱馔馐橙?吸入有害物質(zhì)。

3.保持實驗室環(huán)境整潔，禁止隨意丟棄廢棄物。所有操作均應在指定區(qū)域進行，實驗結(jié)束后應及時清理工作臺面，并將廢棄物分類投入指定容器。

（二）健康監(jiān)測

1.進入實驗室前，所有人員需每日進行體溫檢測，記錄結(jié)果。體溫超過37.3℃者應立即報告實驗室負責人，并根據(jù)情況決定是否允許進入或需要采取額外防護措施（如居家觀察）。

2.如出現(xiàn)咳嗽、咽痛、腹瀉、皮疹等呼吸道或消化道癥狀，或其他任何可能表明健康異常的跡象，應主動報告給實驗室負責人或指定人員，并根據(jù)評估結(jié)果決定是否暫時避免進入實驗室直接操作，直至癥狀消失或獲得醫(yī)學許可。

3.實驗室應建立訪客和工作人員的健康檔案，以便在必要時進行追溯和風險評估。

三、個人防護措施

（一）防護用品佩戴

1.實驗服：需覆蓋軀干和四肢，禁止暴露皮膚。進入高致病性病毒實驗區(qū)域（如BSL-3）時，可能需要穿戴連體實驗服或防化服。離開實驗室前，需在指定區(qū)域脫掉實驗服，并按規(guī)定處理或清洗。

2.手套：根據(jù)實驗需求選擇一次性或可重復使用手套。普通實驗（如分子生物學操作）建議使用一次性丁腈手套或乳膠手套。處理潛在污染物品或進行細胞培養(yǎng)等操作時，應佩戴更厚實或具有特定功能（如抗化學品）的手套。操作結(jié)束后，應立即脫除手套，并按照規(guī)定進行手部消毒或更換新手套。禁止將手套接觸到臉部、頭發(fā)或其他非操作區(qū)域。

3.口罩：佩戴醫(yī)用外科口罩或N95/KN95口罩，確保完全覆蓋口鼻?？谡謶ㄆ诟鼡Q，當出現(xiàn)潮濕、污染或損壞時立即更換。進入高致病性病毒區(qū)域時，可能需要佩戴更高級別的呼吸防護設(shè)備，如動力送風過濾面罩（PAPR）。

（二）手部消毒

1.進入實驗室前，使用70%-75%酒精手消毒劑或含氯消毒液的濕巾擦拭雙手至少20秒，確保手部所有表面都被覆蓋。

2.實驗過程中如接觸污染物品、觸摸非無菌表面（如門把手、設(shè)備按鈕）、咳嗽或打噴嚏后，或離開操作區(qū)域前，需使用手消毒劑進行再次消毒。

3.如需使用化學消毒劑洗手（例如接觸強效消毒劑后），應使用流動水和肥皂（或洗手液）按標準七步洗手法清洗雙手至少20秒，然后使用一次性紙巾擦干或使用烘手機烘干。

四、實驗操作規(guī)范

（一）樣本處理

1.樣本采集：使用無菌工具（如無菌注射器、采血針、拭子等）進行樣本采集。采集過程中應避免污染樣本來源和采集工具。采集后的樣本應立即裝入符合生物安全等級的、有密封措施的容器中。

2.樣本運輸：使用帶鎖的、密封性良好的運輸箱或容器。外部應使用70%酒精或有效氯消毒液進行噴灑消毒，并貼上標簽，注明樣本類型、來源、采集時間、處理要求等信息。運輸時應盡量減少震動，并使用符合規(guī)定的運輸工具（如專用冰盒、冷藏車）。

3.樣本保存：根據(jù)待測病毒的特性（如對溫度的敏感性）選擇合適的保存條件。大多數(shù)病毒樣本需在-80℃低溫冰箱中保存以保持活性。部分穩(wěn)定性的樣本（如某些核酸）可在-20℃保存。記錄樣本的保存溫度、濕度以及每次取用和溫度變化的時間，確保樣本狀態(tài)可追溯。嚴禁在保存不當?shù)沫h(huán)境下反復凍融樣本。

（二）實驗操作步驟

1.開啟生物安全柜：提前15-20分鐘開啟生物安全柜，啟動風機，使內(nèi)部空氣形成穩(wěn)定的氣流。開啟紫外燈對柜內(nèi)進行至少15分鐘消毒（如需），結(jié)束后關(guān)閉紫外燈。檢查前置玻璃窗密封性、風門關(guān)閉情況以及風速指示燈是否正常。

2.操作流程：

(1)更換手套：在生物安全柜內(nèi)或潔凈區(qū)域，小心地脫掉污染手套，扔入指定的手套回收桶，然后使用消毒液或洗手液清洗雙手并干燥。

(2)準備工作：在生物安全柜內(nèi)鋪開無菌吸水紙或操作墊，將所需試劑、耗材按操作順序排列。打開所需試劑的蓋子，但注意保持蓋子邊緣向下或內(nèi)側(cè)朝向，避免氣溶膠飛濺。使用移液器、pipettetips等無菌工具。

(3)樣本處理：根據(jù)實驗目的（如核酸提取、病毒滴定、細胞培養(yǎng)等），在生物安全柜內(nèi)進行操作。例如，進行核酸提取時，需嚴格遵守試劑盒說明書，避免氣溶膠產(chǎn)生，如使用真空抽吸裝置或酶消解程序。進行細胞培養(yǎng)時，需在超凈工作臺或生物安全柜內(nèi)進行，動作輕柔，避免產(chǎn)生過多氣泡。

(4)操作結(jié)束：完成所有操作后，將使用過的耗材（如pipettetips、離心管、吸水紙等）放入指定的銳器桶或醫(yī)療廢物桶中。用70%酒精擦拭工作臺面、操作區(qū)域內(nèi)的非一次性物品表面。關(guān)閉所有試劑瓶蓋。按規(guī)程關(guān)閉生物安全柜，記錄使用時間。

（三）廢棄物處理

1.醫(yī)療廢棄物：使用符合生物安全等級的黃色雙層垃圾袋密封收集。內(nèi)容包括使用過的手套、口罩、受污染的實驗服、培養(yǎng)皿、試管、移液器廢針頭/pipettetips、受污染的拭子等。垃圾袋應定期封口，并貼上標簽，注明產(chǎn)生日期、內(nèi)容物描述等信息，交由有資質(zhì)的廢物處理公司進行無害化處理（如高壓滅菌、焚燒）。

2.污染物品：玻璃器皿（如試管、培養(yǎng)瓶）需先高壓滅菌（根據(jù)物品材質(zhì)和內(nèi)容物選擇合適的溫度和時間，例如121℃15分鐘），然后交由清洗部門清洗或直接作為一般廢棄物處理（需先確認無殘留有害物質(zhì)）。塑料器材（如燒杯、移液管架）若僅受低風險物質(zhì)污染，可高壓滅菌后清洗；若受高風險物質(zhì)污染或難以滅菌，應直接放入專用容器，根據(jù)其風險等級進行焚燒或化學處理。

3.溢出物處理：一旦發(fā)生液體或固體溢出，應立即采取以下步驟：

(1)小范圍溢出（少量）：立即戴上手套和口罩，小心清理溢出物。對于液體，可撒上吸水材料（如吸水紙），然后收集到含有中和劑的容器中；對于固體，直接收集到容器中。清潔并消毒被污染的區(qū)域。

(2)大范圍溢出（大量）：立即報告實驗室負責人，疏散非必要人員，根據(jù)溢出物性質(zhì)可能需要封閉區(qū)域并采取更高級別的防護措施。由受過專門培訓的人員按照應急預案進行處理。

五、應急處理措施

（一）意外暴露處理

1.皮膚接觸：立即脫掉被污染的手套，用大量流動清水沖洗污染部位至少15分鐘。然后使用合適的消毒劑（如70%酒精或0.5%碘伏）進行擦拭。如有傷口，需特別注意清洗，并及時就醫(yī)，告知醫(yī)生可能接觸的病毒類型。

2.眼部接觸：立即用大量緩慢流動的生理鹽水或清水沖洗眼睛至少15分鐘，沖洗時需轉(zhuǎn)動眼球并開合眼瞼。盡快尋求眼科醫(yī)生的幫助，即使污染看起來已被清除。

3.吸入暴露：迅速將人員轉(zhuǎn)移到空氣新鮮的地方，保持呼吸道通暢。評估癥狀，如有呼吸困難、咳嗽等，應給予氧氣支持，并立即就醫(yī)，告知醫(yī)生可能吸入的病原體信息。

4.消化道暴露：如果意外食入含有病毒的物質(zhì)，應漱口并飲用大量水（除非醫(yī)生指示停止飲水）。根據(jù)情況可能需要就醫(yī)，特別是如果攝入的是高致病性病毒。

（二）實驗室污染處理

1.發(fā)現(xiàn)污染時：立即通知實驗室負責人和所有在場人員。根據(jù)污染的嚴重程度和性質(zhì)，決定是否需要疏散相關(guān)人員，并封閉污染區(qū)域。污染區(qū)域應設(shè)置警示標識。

2.污染處理流程：

(1)確認污染范圍：評估污染的物品、表面和區(qū)域。

(2)采取控制措施：根據(jù)污染類型，可能需要暫停相關(guān)實驗，限制區(qū)域進入。

(3)清理消毒：由受過專門培訓的人員穿戴適當?shù)姆雷o裝備，按照既定的清潔消毒程序進行。通常包括清除可見污染物（如干涸的液體、樣本塊），然后用合適的消毒劑（如70%酒精、含有效氯消毒劑、過氧乙酸等）進行徹底消毒。消毒劑的使用需遵循說明，確保足夠的接觸時間和濃度。對于難以清除或消毒的區(qū)域，可能需要采取更高級別的措施（如封鎖、專業(yè)清潔公司處理）。

(4)確認安全：清潔消毒后，可能需要進行環(huán)境采樣檢測（如空氣沉降物、表面樣本的病毒核酸檢測），確認污染已消除或降至安全水平后方可重新啟用。整個過程需詳細記錄，包括污染發(fā)現(xiàn)時間、處理人員、處理方法、消毒劑種類與濃度、接觸時間、采樣結(jié)果等。

六、實驗室消毒與清潔

（一）日常消毒

1.工作臺面：每日實驗結(jié)束后，使用70%-75%酒精或含氯消毒液擦拭工作臺面、實驗設(shè)備表面（如離心機門把手、移液器支架、冰箱門等）。對于長時間不用的設(shè)備，啟動前也需進行消毒。

2.地面清潔：每日使用中性清潔劑和拖把或自動清潔設(shè)備清潔實驗室地面。每周至少使用一次有效的消毒劑（如含氯消毒劑）對地面進行一次徹底消毒。

3.設(shè)備內(nèi)部：定期（如每月或每季度，根據(jù)使用頻率和設(shè)備類型）清潔和消毒高壓滅菌器門把手、培養(yǎng)箱/冰箱門封條、紫外燈燈管（使用后關(guān)閉，避免頻繁開關(guān)影響壽命）、通風口等容易被忽視的部位。

（二）終末消毒

1.實驗結(jié)束后或發(fā)生污染事件后，需進行終末消毒。包括對所有表面、設(shè)備、空氣（可能使用紫外線照射或熏蒸消毒，如使用化學熏蒸劑，需嚴格遵守操作規(guī)程，確保人員疏散和通風）進行徹底消毒。

2.清潔消毒順序通常為：先清潔表面，去除污物，再進行消毒。對于有多層結(jié)構(gòu)的設(shè)備（如層流柜），需從內(nèi)到外、從上到下進行。

3.記錄消毒過程：詳細記錄每次終末消毒的時間、負責人、使用的消毒劑名稱、濃度、作用時間、消毒范圍、環(huán)境采樣結(jié)果（如有）等信息，形成檔案備查。

七、培訓與記錄

（一）培訓要求

1.新員工入職：必須接受全面的實驗室安全與生物安全培訓，內(nèi)容涵蓋本規(guī)范制度、個人防護、廢棄物處理、應急程序、特定實驗操作的安全要點等。培訓結(jié)束后需進行考核，合格者方可進入實驗室獨立操作。

2.在崗培訓：每年至少進行一次復訓，更新安全知識和技能，特別是針對新購入設(shè)備、新開展實驗項目或修訂后的操作規(guī)范?？刹捎弥v座、案例分析、實際操作演練等多種形式。

3.特殊培訓：針對高風險操作（如處理高致病性病毒、使用特殊設(shè)備如P3/P4級設(shè)施-如果適用的話，但此處不涉及具體國家級別）、進入不同生物安全級別實驗室、應急響應等，需進行專門的、更深入的培訓，并考核合格。

（二）記錄管理

1.實驗記錄：所有實驗操作均需在實驗記錄本或電子系統(tǒng)中詳細記錄。內(nèi)容應包括：實驗日期、時間、操作者、實驗目的、樣本信息、所用試劑/耗材批號、具體操作步驟（關(guān)鍵參數(shù)）、觀察到的現(xiàn)象、結(jié)果、異常情況及處理等。記錄應真實、及時、準確、完整。

2.安全事件記錄：任何安全事件（如意外暴露、污染事件、設(shè)備故障、違反規(guī)程行為等）發(fā)生后，必須立即報告，并按照要求詳細記錄事件經(jīng)過、處理措施、后果評估、預防措施等。

3.培訓記錄：每次培訓的時間、內(nèi)容、參加人員名單、考核結(jié)果等均需存檔。

4.記錄保存：所有記錄（紙質(zhì)或電子）均需按照規(guī)定的時間期限（通常不少于3年，或根據(jù)法規(guī)要求）妥善保存，以備內(nèi)部審核、外部檢查或追溯調(diào)查。記錄應存放在安全、防火、防潮的地方。電子記錄需定期備份。

一、總則

病毒學實驗室操作規(guī)范制度旨在確保實驗室人員在操作過程中遵循標準流程，降低實驗室感染風險，保障實驗結(jié)果的準確性和可重復性。本制度適用于所有進入病毒學實驗室的人員，包括研究人員、技術(shù)人員及訪客。

二、實驗室入場要求

（一）基本要求

1.所有進入實驗室人員必須穿戴實驗服、手套、口罩等防護用品。

2.禁止在實驗室吸煙、飲食或進行與實驗無關(guān)的活動。

3.保持實驗室環(huán)境整潔，禁止隨意丟棄廢棄物。

（二）健康監(jiān)測

1.進入實驗室前，需每日進行體溫檢測，體溫超過37.3℃者禁止進入。

2.如出現(xiàn)咳嗽、咽痛等呼吸道癥狀，應主動報告并避免進入實驗室。

三、個人防護措施

（一）防護用品佩戴

1.實驗服：需覆蓋軀干和四肢，禁止暴露皮膚。

2.手套：根據(jù)實驗需求選擇一次性或可重復使用手套，操作結(jié)束后立即脫除并消毒。

3.口罩：佩戴醫(yī)用外科口罩或N95口罩，確保完全覆蓋口鼻。

（二）手部消毒

1.進入實驗室前使用70%酒精或含氯消毒液進行手部消毒。

2.實驗過程中如接觸污染物品，需立即使用消毒液清洗雙手。

四、實驗操作規(guī)范

（一）樣本處理

1.樣本采集：使用無菌工具，避免污染。采集后的樣本立即置于生物安全柜中處理。

2.樣本運輸：使用帶鎖的運輸箱，外部進行消毒處理。

3.樣本保存：根據(jù)病毒類型選擇合適的保存條件（如-80℃冷凍），記錄保存時間及溫度。

（二）實驗操作步驟

1.開啟生物安全柜：提前15分鐘開啟，檢查風道是否正常。

2.操作流程：

(1)更換手套，清潔工作臺面。

(2)使用無菌吸管或移液器進行樣本處理，避免氣溶膠產(chǎn)生。

(3)完成操作后，使用75%酒精擦拭實驗區(qū)域。

（三）廢棄物處理

1.醫(yī)療廢棄物：使用雙層黃色垃圾袋密封，標記后交由專業(yè)機構(gòu)處理。

2.污染物品：玻璃器皿需高壓滅菌后清洗，塑料器材直接焚燒。

五、應急處理措施

（一）意外暴露處理

1.皮膚接觸：立即用流動水沖洗污染部位，并使用消毒液擦拭。

2.眼部接觸：用生理鹽水沖洗至少15分鐘，并及時就醫(yī)。

（二）實驗室污染處理

1.發(fā)現(xiàn)污染時，立即疏散人員，封閉實驗室。

2.使用含氯消毒劑對污染區(qū)域進行徹底消毒，記錄處理過程。

六、實驗室消毒與清潔

（一）日常消毒

1.每日實驗結(jié)束后，使用70%酒精擦拭工作臺面、設(shè)備表面。

2.地面每周使用消毒液進行一次徹底清潔。

（二）終末消毒

1.實驗結(jié)束后或發(fā)生污染時，需進行終末消毒，包括紫外線照射和化學消毒。

2.記錄消毒時間、方法及負責人。

七、培訓與記錄

（一）培訓要求

1.新員工需接受實驗室安全培訓，考核合格后方可上崗。

2.每年進行一次復訓，確保人員掌握最新操作規(guī)范。

（二）記錄管理

1.實驗記錄需詳細記錄操作步驟、樣本信息、消毒情況等。

2.記錄保存期限不少于3年，以備查驗。

一、總則

病毒學實驗室操作規(guī)范制度旨在確保實驗室人員在操作過程中遵循標準流程，降低實驗室感染風險，保障實驗結(jié)果的準確性和可重復性。本制度適用于所有進入病毒學實驗室的人員，包括研究人員、技術(shù)人員及訪客。規(guī)范的制定和執(zhí)行是基于對病毒特性、傳播途徑以及實驗室潛在風險的科學認知，通過明確各環(huán)節(jié)的操作要求，最大限度地減少人為錯誤和交叉污染，從而維護實驗室人員的職業(yè)健康與安全，并確保實驗數(shù)據(jù)的可靠性。本制度為實驗室日常工作的基本準則，所有成員必須嚴格遵守。

二、實驗室入場要求

（一）基本要求

1.所有進入實驗室人員必須穿戴實驗服、手套、口罩等防護用品。實驗服應覆蓋軀干和四肢，無破洞，進入實驗室前需確保整潔。禁止穿著寬松衣物或外露皮膚。進入不同生物安全級別（BSL）實驗室前，需根據(jù)要求更換相應級別的實驗服。

2.禁止在實驗室吸煙、飲食或進行與實驗無關(guān)的活動。這些行為不僅違反實驗室規(guī)定，還可能引入污染物或?qū)е乱馔馐橙?吸入有害物質(zhì)。

3.保持實驗室環(huán)境整潔，禁止隨意丟棄廢棄物。所有操作均應在指定區(qū)域進行，實驗結(jié)束后應及時清理工作臺面，并將廢棄物分類投入指定容器。

（二）健康監(jiān)測

1.進入實驗室前，所有人員需每日進行體溫檢測，記錄結(jié)果。體溫超過37.3℃者應立即報告實驗室負責人，并根據(jù)情況決定是否允許進入或需要采取額外防護措施（如居家觀察）。

2.如出現(xiàn)咳嗽、咽痛、腹瀉、皮疹等呼吸道或消化道癥狀，或其他任何可能表明健康異常的跡象，應主動報告給實驗室負責人或指定人員，并根據(jù)評估結(jié)果決定是否暫時避免進入實驗室直接操作，直至癥狀消失或獲得醫(yī)學許可。

3.實驗室應建立訪客和工作人員的健康檔案，以便在必要時進行追溯和風險評估。

三、個人防護措施

（一）防護用品佩戴

1.實驗服：需覆蓋軀干和四肢，禁止暴露皮膚。進入高致病性病毒實驗區(qū)域（如BSL-3）時，可能需要穿戴連體實驗服或防化服。離開實驗室前，需在指定區(qū)域脫掉實驗服，并按規(guī)定處理或清洗。

2.手套：根據(jù)實驗需求選擇一次性或可重復使用手套。普通實驗（如分子生物學操作）建議使用一次性丁腈手套或乳膠手套。處理潛在污染物品或進行細胞培養(yǎng)等操作時，應佩戴更厚實或具有特定功能（如抗化學品）的手套。操作結(jié)束后，應立即脫除手套，并按照規(guī)定進行手部消毒或更換新手套。禁止將手套接觸到臉部、頭發(fā)或其他非操作區(qū)域。

3.口罩：佩戴醫(yī)用外科口罩或N95/KN95口罩，確保完全覆蓋口鼻?？谡謶ㄆ诟鼡Q，當出現(xiàn)潮濕、污染或損壞時立即更換。進入高致病性病毒區(qū)域時，可能需要佩戴更高級別的呼吸防護設(shè)備，如動力送風過濾面罩（PAPR）。

（二）手部消毒

1.進入實驗室前，使用70%-75%酒精手消毒劑或含氯消毒液的濕巾擦拭雙手至少20秒，確保手部所有表面都被覆蓋。

2.實驗過程中如接觸污染物品、觸摸非無菌表面（如門把手、設(shè)備按鈕）、咳嗽或打噴嚏后，或離開操作區(qū)域前，需使用手消毒劑進行再次消毒。

3.如需使用化學消毒劑洗手（例如接觸強效消毒劑后），應使用流動水和肥皂（或洗手液）按標準七步洗手法清洗雙手至少20秒，然后使用一次性紙巾擦干或使用烘手機烘干。

四、實驗操作規(guī)范

（一）樣本處理

1.樣本采集：使用無菌工具（如無菌注射器、采血針、拭子等）進行樣本采集。采集過程中應避免污染樣本來源和采集工具。采集后的樣本應立即裝入符合生物安全等級的、有密封措施的容器中。

2.樣本運輸：使用帶鎖的、密封性良好的運輸箱或容器。外部應使用70%酒精或有效氯消毒液進行噴灑消毒，并貼上標簽，注明樣本類型、來源、采集時間、處理要求等信息。運輸時應盡量減少震動，并使用符合規(guī)定的運輸工具（如專用冰盒、冷藏車）。

3.樣本保存：根據(jù)待測病毒的特性（如對溫度的敏感性）選擇合適的保存條件。大多數(shù)病毒樣本需在-80℃低溫冰箱中保存以保持活性。部分穩(wěn)定性的樣本（如某些核酸）可在-20℃保存。記錄樣本的保存溫度、濕度以及每次取用和溫度變化的時間，確保樣本狀態(tài)可追溯。嚴禁在保存不當?shù)沫h(huán)境下反復凍融樣本。

（二）實驗操作步驟

1.開啟生物安全柜：提前15-20分鐘開啟生物安全柜，啟動風機，使內(nèi)部空氣形成穩(wěn)定的氣流。開啟紫外燈對柜內(nèi)進行至少15分鐘消毒（如需），結(jié)束后關(guān)閉紫外燈。檢查前置玻璃窗密封性、風門關(guān)閉情況以及風速指示燈是否正常。

2.操作流程：

(1)更換手套：在生物安全柜內(nèi)或潔凈區(qū)域，小心地脫掉污染手套，扔入指定的手套回收桶，然后使用消毒液或洗手液清洗雙手并干燥。

(2)準備工作：在生物安全柜內(nèi)鋪開無菌吸水紙或操作墊，將所需試劑、耗材按操作順序排列。打開所需試劑的蓋子，但注意保持蓋子邊緣向下或內(nèi)側(cè)朝向，避免氣溶膠飛濺。使用移液器、pipettetips等無菌工具。

(3)樣本處理：根據(jù)實驗目的（如核酸提取、病毒滴定、細胞培養(yǎng)等），在生物安全柜內(nèi)進行操作。例如，進行核酸提取時，需嚴格遵守試劑盒說明書，避免氣溶膠產(chǎn)生，如使用真空抽吸裝置或酶消解程序。進行細胞培養(yǎng)時，需在超凈工作臺或生物安全柜內(nèi)進行，動作輕柔，避免產(chǎn)生過多氣泡。

(4)操作結(jié)束：完成所有操作后，將使用過的耗材（如pipettetips、離心管、吸水紙等）放入指定的銳器桶或醫(yī)療廢物桶中。用70%酒精擦拭工作臺面、操作區(qū)域內(nèi)的非一次性物品表面。關(guān)閉所有試劑瓶蓋。按規(guī)程關(guān)閉生物安全柜，記錄使用時間。

（三）廢棄物處理

1.醫(yī)療廢棄物：使用符合生物安全等級的黃色雙層垃圾袋密封收集。內(nèi)容包括使用過的手套、口罩、受污染的實驗服、培養(yǎng)皿、試管、移液器廢針頭/pipettetips、受污染的拭子等。垃圾袋應定期封口，并貼上標簽，注明產(chǎn)生日期、內(nèi)容物描述等信息，交由有資質(zhì)的廢物處理公司進行無害化處理（如高壓滅菌、焚燒）。

2.污染物品：玻璃器皿（如試管、培養(yǎng)瓶）需先高壓滅菌（根據(jù)物品材質(zhì)和內(nèi)容物選擇合適的溫度和時間，例如121℃15分鐘），然后交由清洗部門清洗或直接作為一般廢棄物處理（需先確認無殘留有害物質(zhì)）。塑料器材（如燒杯、移液管架）若僅受低風險物質(zhì)污染，可高壓滅菌后清洗；若受高風險物質(zhì)污染或難以滅菌，應直接放入專用容器，根據(jù)其風險等級進行焚燒或化學處理。

3.溢出物處理：一旦發(fā)生液體或固體溢出，應立即采取以下步驟：

(1)小范圍溢出（少量）：立即戴上手套和口罩，小心清理溢出物。對于液體，可撒上吸水材料（如吸水紙），然后收集到含有中和劑的容器中；對于固體，直接收集到容器中。清潔并消毒被污染的區(qū)域。

(2)大范圍溢出（大量）：立即報告實驗室負責人，疏散非必要人員，根據(jù)溢出物性質(zhì)可能需要封閉區(qū)域并采取更高級別的防護措施。由受過專門培訓的人員按照應急預案進行處理。

五、應急處理措施

（一）意外暴露處理

1.皮膚接觸：立即脫掉被污染的手套，用大量流動清水沖洗污染部位至少15分鐘。然后使用合適的消毒劑（如70%酒精或0.5%碘伏）進行擦拭。如有傷口，需特別注意清洗，并及時就醫(yī)，告知醫(yī)生可能接觸的病毒類型。

2.眼部接觸：立即用大量緩慢流動的生理鹽水或清水沖洗眼睛至少15分鐘，沖洗時需轉(zhuǎn)動眼球并開合眼瞼。盡快尋求眼科醫(yī)生的幫助，即使污染看起來已被清除。

3.吸入暴露：迅速將人員轉(zhuǎn)移到空氣新鮮的地方，保持呼吸道通暢。評估癥狀，如有呼吸困難、咳嗽等，應給予氧氣支持，并立即就醫(yī)，告知醫(yī)生可能吸入的病原體信息。

4.消化道暴露：如果意外食入含有病毒的物質(zhì)，應漱口并飲用大量水（除非醫(yī)生指示停止飲水）。根據(jù)情況可能需要就醫(yī)，特別是如果攝入的是高致病性病毒。

（二）實驗室污染處理

1.發(fā)現(xiàn)污染時：立即通知實驗室負責人和所有在場人員。根據(jù)污染的嚴重程度和性質(zhì)，決定是否需要疏散相關(guān)人員，并封閉污染區(qū)域。污染區(qū)域應設(shè)置警示標識。

2.污染處理流程：

(1)確認污染范圍：評估污染的物品、表面和區(qū)域。

(2)采取控制措施：根據(jù)污染類型，可能需要暫停相關(guān)實驗，限制區(qū)域進入。

(3)清理消毒：由受過專門培訓的人員穿戴適當?shù)姆雷o裝備，按照既定的清潔消毒程序進行。通常包括清除可見污染物（如干涸的液體、樣本塊），然后用合適的消毒劑（如70%酒精、含有效氯消毒劑、過氧乙酸等）進行徹底消毒。消毒劑的使用需遵循說明，確保足夠的接觸時間和濃度。對于難以清除或消毒的區(qū)域，可能需要采取更高級別的措施（如封鎖、專業(yè)清潔公司處理）。

(4)確認安全：清潔消毒后，可能需要進行環(huán)境采樣檢測（如空氣沉降物、表面樣本的病毒核酸檢測），確認污染已消除或降至安全水平后方可重新啟用。整個過程需詳細記錄，包括污染發(fā)