博士技能操作考試題目及答案

一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.實(shí)驗(yàn)中常用的移液槍量程不包括以下哪種？A.10μlB.100μlC.500μlD.1000ml2.蛋白質(zhì)電泳常用的凝膠是？A.葡聚糖凝膠B.瓊脂糖凝膠C.聚丙烯酰胺凝膠D.硅膠凝膠3.以下哪種顯微鏡分辨率最高？A.光學(xué)顯微鏡B.電子顯微鏡C.體視顯微鏡D.倒置顯微鏡4.細(xì)胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基是？A.LB培養(yǎng)基B.YPD培養(yǎng)基C.DMEM培養(yǎng)基D.沙氏培養(yǎng)基5.進(jìn)行基因克隆時(shí)，常用的工具酶不包括？A.限制性內(nèi)切酶B.DNA連接酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.淀粉酶6.以下哪種物質(zhì)常用于核酸提取中的蛋白質(zhì)去除？A.乙醇B.氯仿C.異丙醇D.乙酸乙酯7.做Westernblot時(shí)，封閉液的作用是？A.增強(qiáng)抗體結(jié)合B.防止非特異性結(jié)合C.固定蛋白D.溶解蛋白8.微生物培養(yǎng)時(shí)，常用的滅菌方法是？A.煮沸滅菌B.紫外線滅菌C.高壓蒸汽滅菌D.過(guò)濾滅菌9.進(jìn)行PCR反應(yīng)時(shí)，不需要的成分是？A.引物B.dNTPC.模板DNAD.蛋白酶10.測(cè)定酶活性時(shí)，通常需要控制的條件不包括？A.溫度B.pH值C.底物濃度D.酶的顏色二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.以下屬于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的有（）A.基因測(cè)序B.細(xì)胞轉(zhuǎn)染C.組織切片D.蛋白質(zhì)純化2.細(xì)胞培養(yǎng)需要注意的條件有（）A.無(wú)菌環(huán)境B.合適的溫度C.適宜的氣體成分D.定期換液3.常用的核酸定量方法有（）A.紫外分光光度法B.凝膠成像分析C.熒光定量法D.重量法4.蛋白質(zhì)純化的方法包括（）A.離子交換色譜B.親和色譜C.凝膠過(guò)濾色譜D.疏水色譜5.實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖液有（）A.Tris-HCl緩沖液B.PBS緩沖液C.檸檬酸緩沖液D.甘氨酸緩沖液6.以下哪些儀器常用于生化分析（）A.酶標(biāo)儀B.離心機(jī)C.氣相色譜儀D.液相色譜儀7.基因表達(dá)調(diào)控的層面包括（）A.轉(zhuǎn)錄水平B.轉(zhuǎn)錄后水平C.翻譯水平D.翻譯后水平8.微生物鑒定的常用方法有（）A.形態(tài)學(xué)觀察B.生理生化特性分析C.16SrRNA測(cè)序D.血清學(xué)鑒定9.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理常用的軟件有（）A.ExcelB.SPSSC.GraphPadPrismD.Photoshop10.以下屬于細(xì)胞生物學(xué)研究技術(shù)的有（）A.免疫熒光技術(shù)B.流式細(xì)胞術(shù)C.基因編輯技術(shù)D.細(xì)胞融合技術(shù)三、判斷題（每題2分，共10題）1.所有的酶在高溫下都會(huì)失活。（）2.核酸在260nm波長(zhǎng)處有特征吸收峰。（）3.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，CO?的主要作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH。（）4.蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)是其在電場(chǎng)中不移動(dòng)時(shí)的pH值。（）5.高壓蒸汽滅菌可以殺死所有的微生物及其芽孢。（）6.進(jìn)行PCR時(shí)，引物的長(zhǎng)度越長(zhǎng)越好。（）7.電子顯微鏡可以觀察到細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)。（）8.親和色譜是利用蛋白質(zhì)與配體之間的特異性結(jié)合進(jìn)行分離的。（）9.實(shí)驗(yàn)中使用的玻璃器皿都可以用烘箱烘干。（）10.基因敲除是使基因功能增強(qiáng)的技術(shù)。（）四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述SDS電泳的基本原理。答案：SDS即十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳，SDS能使蛋白質(zhì)變性并帶上大量負(fù)電荷，消除蛋白質(zhì)原有電荷差異。在電場(chǎng)作用下，蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中按分子大小不同進(jìn)行分離，小分子遷移快，大分子遷移慢。2.核酸提取過(guò)程中，如何去除雜質(zhì)？答案：通過(guò)多種方法。用氯仿等有機(jī)溶劑抽提可去除蛋白質(zhì)；用乙醇、異丙醇沉淀核酸，離心去除上清中的雜質(zhì)；還可利用核酸與雜質(zhì)在不同吸附柱上的吸附差異，通過(guò)過(guò)柱方式去除雜質(zhì)。3.簡(jiǎn)述細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的要點(diǎn)。答案：凍存要點(diǎn)：細(xì)胞密度合適，加入凍存液（含DMSO等），梯度降溫。復(fù)蘇要點(diǎn)：快速解凍，在37℃水浴中盡快融化細(xì)胞懸液，然后迅速接種到合適培養(yǎng)基中培養(yǎng)，維持細(xì)胞活性。4.列舉三種常用的基因克隆技術(shù)。答案：一是傳統(tǒng)的質(zhì)粒載體克隆技術(shù)，將目的基因插入質(zhì)粒載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞；二是Gateway克隆技術(shù)，利用位點(diǎn)特異性重組實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移；三是In-Fusion克隆技術(shù)，通過(guò)同源重組實(shí)現(xiàn)基因克隆。五、討論題（每題5分，共4題）1.在實(shí)驗(yàn)中遇到實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)期不符的情況，應(yīng)該從哪些方面進(jìn)行分析？答案：可從實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)儀器和環(huán)境等方面分析。如材料是否合格、方法是否準(zhǔn)確規(guī)范、儀器是否正常、環(huán)境條件是否合適等，逐一排查可能導(dǎo)致結(jié)果異常的因素。2.如何保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性？答案：要規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作，嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)流程進(jìn)行。選擇可靠的實(shí)驗(yàn)材料和儀器設(shè)備并定期校準(zhǔn)。進(jìn)行多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，減少偶然誤差。同時(shí)，對(duì)數(shù)據(jù)處理要科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)，正確運(yùn)用統(tǒng)計(jì)分析方法。3.談?wù)劵蚓庉嫾夹g(shù)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用前景與潛在風(fēng)險(xiǎn)。答案：應(yīng)用前景：用于疾病治療，如糾正基因缺陷治療遺傳??；藥物研發(fā)，構(gòu)建疾病模型篩選藥物。潛在風(fēng)險(xiǎn)：可能引發(fā)脫靶效應(yīng)，導(dǎo)致非預(yù)期基因改變；存在倫理問(wèn)題，如對(duì)人類生殖細(xì)胞編輯引發(fā)倫理爭(zhēng)議。4.舉例說(shuō)明蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。答案：如血紅蛋白，其四級(jí)結(jié)構(gòu)決定功能。亞基特定空間結(jié)構(gòu)使它能結(jié)合和運(yùn)輸氧氣。當(dāng)亞基結(jié)構(gòu)改變，如鐮刀型細(xì)胞貧血癥中血紅蛋白亞基突變，結(jié)構(gòu)改變導(dǎo)致運(yùn)輸氧氣功能異常，體現(xiàn)結(jié)構(gòu)是功能基礎(chǔ)，結(jié)構(gòu)改變功能也變。答案一、單項(xiàng)選擇題1.D2.C3.B4.C5.D6.B7.B8.C9.D10.D二、多項(xiàng)選擇題1.ABD2.ABC